MDS病人血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平檢測(cè).doc

MDS病人血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平檢測(cè)作者：趙梅青趙洪國(guó)杜以萍【摘要】目的探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）在骨髓增生異常綜合征（MDS）病人血清中的表達(dá)，及其對(duì)于MDS發(fā)生發(fā)展及預(yù)后的意義。方法用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附方法（ELISA）檢測(cè)43例MDS病人血清VEGF水平，其中RA組16例，RAS組6例，RAEB組14例，RAEBT組7例，分析其與MDS分型及臨床因素的關(guān)系，以正常人和急性髓細(xì)胞白血?。ˋML）病人為對(duì)照組。結(jié)果RA組、RAS組病人VEGF水平與正常對(duì)照相比無明顯差異（P>；0.05），RAEB組、RAEBT組VEGF水平均明顯高于RA、RAS及正常對(duì)照組（F=34.33,q=3.3412.01,P<；0.05）。血清VEGF水平與病人的外周血常規(guī)、骨髓原始細(xì)胞比例有關(guān)(F=2.46、32.58,q=2.8011.54,P<；0.05)。結(jié)論VEGF水平與MDS的發(fā)展轉(zhuǎn)歸有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】骨髓增生異常綜合征；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；血管新生ABSTRACTObjectiveToevaluatetheserumlevelofVEGFinmyelodysplasticsyndrome(MDS)patients,anditsclinicalsignificanceinthedevelopmentandprognosisofthedisease.MethodsTheserumVEGFin43MDSpatientswasdeterminedbyenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA),ofwhom,thecasesoftypeRA,RAS,RAEBandRAEBTwere16,6,14and7,respectively.Theirrelationshipwiththetyping,clinicalfactorsandMDSwasanalyzed.Thirtyhealthyvolunteersandpatientswithacutemyeloidleukemiaservedascontrols.ResultsThedifferencesofserumVEGFlevelbetweenRA,RASandthecontrolswerenotsignificant(P>；0.05)；itwashigherinRAEBandRAEBTthanthatinRA,RASandnormalcontrols(P<；0.05).TheserumVEGFlevelwascorrelatedwithperipheralbloodroutinetestandproportionofblastcellsinbonemarrow(P<；0.05).ConclusionVEGFisrelatedtotheprogressionandprognosisofMDSpatients.KEYWORDSMyelodysplasticsyndrome；Vascularendothelialgrowthfactor；Angiogenesis近年來研究顯示,血管新生及其調(diào)控因子在血液系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是目前所知的最重要的血管新生正調(diào)控因子。本研究檢測(cè)了43例骨髓增生異常綜合征（MDS）病人血清VEGF水平，分析其在不同亞型的差異及其與多種臨床因素的關(guān)系，探討其在MDS發(fā)生發(fā)展及預(yù)后估計(jì)中的意義。1資料與方法1.1研究對(duì)象我院血液內(nèi)科2004年8月2005年8月門診或住院的MDS病人43例，男23例，女20例；年齡2376歲，中位年齡52歲；RA組16例，RAS組6例，RAEB組14例，RAEBT組7例。病人均符合FAB分類標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：并其他腫瘤性疾病者，肝腎功能不良者及近期感染等應(yīng)急因素者。急性髓細(xì)胞白血病(AML)組15例，均為2004年8月2005年8月我院血液內(nèi)科收治的病人，男9例，女6例；年齡2479歲，中位年齡46歲；其中M22例，M34例，M45例，M54例。正常對(duì)照組15例，均為健康體檢者，其中男8例，女7例；年齡2172歲，中位年齡44歲。1.2檢測(cè)方法清晨采集病人空腹肘靜脈血4mL，置于普通玻璃試管中，半小時(shí)內(nèi)以2000r/min離心10min分離血清，分裝后于-70保存。人VEGFELISA試劑盒由武漢博士德生物工程有限公司生產(chǎn)。按照試劑盒提供說明書的操作方法進(jìn)行檢測(cè)。2結(jié)果正常對(duì)照組血清VEGF水平為（77.1121.37）ng/L，AML組為（377.49146.31）ng/L。RA組為（75.6220.53）ng/L，RAS組為（75.7819.73）ng/L，與正常對(duì)照組相比無明顯差異（P>；0.05）。RAEB組為(269.62118.71)ng/L，RAEBT組為(9345.59101.98）ng/L，均明顯高于正常對(duì)照、RA組和RAS組（F=34.33,q=3.3412.01,P<；0.05）。RA與RAS、RAEB與RAEBT組間無顯著性差異（P>；0.05），RAEBT組與AML組差別無顯著性意義（P>；0.05）。外周血1系受累的病人血清VEGF水平為（68.3115.97）ng/L，2系受累者為（171.78137.29）ng/L，3系受累者為(211.34141.82)ng/L。3系受累的病人血清VEGF水平明顯高于1系受累者(F=2.46,q=2.80,P<；0.01)，2系和3系受累的病人VEGF水平無明顯差別（P>；0.05），2系及1系受累者之間無明顯差別（P>；0.05）。骨髓原始細(xì)胞比例<；5組的血清VEGF水平為(75.6619.84)ng/L，5%10%組為(311.64144.36)ng/L，11%20%組為(227.6074.66)ng/L，21%30%組為(345.59101.98)ng/L。<；5組的VEGF水平明顯低于其他各組（F=32.58,q=2.9111.54,P<；0.05），>；5的各組之間沒有明顯差別（P>；0.05）。3討論血管新生是指在原有血管的基礎(chǔ)上形成新的血管的過程，這一過程受正、負(fù)調(diào)控因子的嚴(yán)密調(diào)節(jié)。VEGF是高度特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的強(qiáng)有力的絲裂原，是最重要的血管新生正調(diào)控因子，也是目前研究最多的因子，在腫瘤組織的血管形成過程中起重要作用，可以作為血管新生的標(biāo)志物，反映血管新生的程度。眾多研究表明，VEGF與多種實(shí)體瘤，如肺癌、胃癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌及視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤等的發(fā)生發(fā)展有關(guān)15。近年來的研究表明，血液系統(tǒng)的惡性腫瘤也與VEGF的異常表達(dá)有關(guān)6。MDS是一組異質(zhì)性造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病，以骨髓無效造血、外周血細(xì)胞減少及病態(tài)造血為特征。其發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，包括干細(xì)胞損傷、增殖分化異常、過度凋亡、造血微環(huán)境改變及免疫缺陷等。MDS病人VEGF的表達(dá)是否異于正常已經(jīng)引起了國(guó)外學(xué)者的注意，報(bào)道結(jié)果并不一致7,8。本研究顯示，RA和RAS病人血清VEGF與正常對(duì)照比較無明顯差別，RAEB、RAEBT病人的血清VEGF水平均明顯高于正常對(duì)照、RA和RAS病人，RAEBT病人血清VEGF水平與AML病人無明顯差異，這與PRUNERI等9的研究結(jié)果相符。表明隨著病情的發(fā)展，VEGF的分泌逐漸增多，骨髓微血管密度逐漸增高，符合MDS的演變過程，提示VEGF引起的血管新生可能在MDS的發(fā)展轉(zhuǎn)化過程中起重要作用。MDS的預(yù)后因素包括外周血常規(guī)、骨髓原始細(xì)胞比例及染色體分型等。本研究顯示，MDS病人血清VEGF水平與外周血常規(guī)、骨髓原始細(xì)胞比例有關(guān)，外周血23系受累者明顯高于1系受累者，骨髓原始細(xì)胞比例5的各組明顯高于5組，因此血清VEGF水平對(duì)于MDS的預(yù)后判斷可能也有一定的意義。研究顯示，VEGF、血管生成和腫瘤細(xì)胞的相互關(guān)系是建立在骨髓基質(zhì)細(xì)胞與造血細(xì)胞之間的自分泌和旁分泌作用的基礎(chǔ)上。VEGF既能和腫瘤細(xì)胞（內(nèi)皮細(xì)胞）自身表面的受體結(jié)合形成自分泌作用，也能和內(nèi)皮細(xì)胞（腫瘤細(xì)胞）表面的受體結(jié)合，產(chǎn)生旁分泌作用，刺激內(nèi)皮細(xì)胞分泌其他生長(zhǎng)因子，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。BELLAMY等10應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)MDS病人骨髓切片細(xì)胞膜的VEGF受體，顯示多數(shù)MDS表達(dá)1型VEGF受體，少數(shù)表達(dá)2型VEGF受體，少數(shù)兩種受體同時(shí)表達(dá)。骨髓內(nèi)異常分布的未成熟前體細(xì)胞同時(shí)表達(dá)VEGF及VEGFR，提示MDS可能也存在VEGF的病理性自分泌。MDS病人血清VEGF升高的原因尚不十分清楚。各種腫瘤細(xì)胞及正常細(xì)胞，如血細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及間質(zhì)浸潤(rùn)細(xì)胞等均可表達(dá)VEGF，因此MDS病人的VEGF可能由惡性細(xì)胞和正常細(xì)胞共同分泌。本研究顯示，MDS病人血清VEGF濃度與骨髓原始細(xì)胞比例有關(guān)，原始細(xì)胞比例高的病人其血清VEGF水平較高，提示VEGF升高可能與腫瘤細(xì)胞的關(guān)系更為密切。目前，針對(duì)VEGF的抗血管新生治療方法大部分尚不成熟，處于試驗(yàn)階段。沙利度胺是目前為止發(fā)現(xiàn)的最重要的抗血管新生的藥物，最近的研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)MDS也有一定的治療作用5,11。BERTOLINI等12還報(bào)道，治療有效者血清VEGF水平明顯下降。因此，研究MDS病人VEGF的表達(dá)對(duì)于指導(dǎo)臨床治療，尋求新的治療方法具有重要的意義?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1朱衛(wèi)群,崔言剛,王英年,等.肺癌病人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)與臨床預(yù)后的關(guān)系J.青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2001,37(2):101102.2陳啟,張建立,李占武.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義J.齊魯醫(yī)學(xué)雜志,2001,16(3):176178.3孫菊香,劉靜.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在宮頸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義J.齊魯醫(yī)學(xué)雜志,2003,18(4):379380.4耿蕾,崔竹梅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