大鼠線栓(MCAO)模型圖片.doc

第一部分 線栓模型制作1、實驗器材（從左到右）：第一行：干棉球、酒精棉球、10水合氯醛注射器、碘伏棉簽第二行：三種不同粗細(xì)的魚線（魚線最好在2.0、2.5mm處各用記號筆作好標(biāo)記，便于觀察進(jìn)入距離）、彎盤內(nèi)為手術(shù)器材第三行：記號筆、自制拉鉤（皮筋+曲別針大頭針）2、麻醉：可用飲料瓶自制捕鼠器（適用于不敢手抓大鼠的），用于打麻藥，根據(jù)大鼠的重量選擇不同粗細(xì)的飲料瓶（太粗了大鼠可在瓶中回頭）。效果圖 3、麻倒后綁在手術(shù)臺上。4、剪去頸前的鼠毛，碘伏消毒。5、沿經(jīng)部正中切開皮膚。說明：切開皮膚前最好將結(jié)扎動脈的線事先剪好（后面會用到）。 6、鈍性分離皮下組織。如圖：大鼠腹側(cè)可見事先剪好的結(jié)扎線。7、分離到氣管前肌后，沿右側(cè)胸鎖乳突肌腱向下分離，見到頸動脈鞘后可上拉鉤。8、分離動脈鞘。如圖：分離好后見光滑的頸總動脈。 9、分離出頸總、頸外、頸內(nèi)動脈，結(jié)扎頸總、頸外動脈，注意中間那根線不要系緊，用來插魚線時防止出血的。10、夾閉頸內(nèi)動脈，用眼科剪將頸總動脈剪一小口。 11、插入魚線，魚線進(jìn)入頸內(nèi)動脈后按圖中注釋方法插（成功率在90%以上）。說明：（1）這一步魚線選擇是關(guān)鍵，根據(jù)大鼠重量（作的多了后根據(jù)動脈粗細(xì)就可選擇了）選魚線。我們的經(jīng)驗是：250g以下的選0.26mm的線，250-300g的選0.26mm蘸臘的或0.28的都可以。（2）如果遇到魚線怎么也查不進(jìn)去的情況，可讓大鼠休息一會，換細(xì)點的魚線再試，這種情況不一定都是進(jìn)到翼腭動脈了，我曾解剖過4例這種情況的大鼠，有三例都是在如顱的地方卡住了，可惜我們手里沒有0.24mm的魚線。（3）通過實踐，我們認(rèn)為結(jié)扎或夾閉翼腭動脈沒有必要，按我們的方法，熟練的話，從切開到縫合完畢也就是15分鐘，算上準(zhǔn)備工作（如麻醉、消毒等）半小時也可以搞定了，這樣一上午兩人作10只大鼠不成問題。（4）我們體會最好用蘸臘的魚線作模型，好處是進(jìn)線深度控制的好，不容易出現(xiàn)蛛網(wǎng)膜下腔出血。我們曾試過0.26mm的魚線（不帶臘）在250g以下的大鼠進(jìn)入深度足有2.5cm 12、成功后結(jié)扎中間那根線，可見第一個標(biāo)記距動脈分叉約2mm。13、縫合。14、縫好后用酒精棉球消毒皮膚縫合處。15、縫好后的效果如圖，外面的魚線最后用記號筆涂黑，便于再灌拔線時觀察。16、將大鼠放回籠內(nèi)。 17、2小時再灌。18、醒后看效果，左爪不能伸展（完全醒后可見繞圈或追尾、傾倒），我們的體會，癥狀2-3分的死亡率高，1-2分的死亡率低，有的大鼠第二天或幾天后可無明顯癥狀，但取腦后還是有梗死灶的。附：一般文獻(xiàn)上的MCAO制作方法評分標(biāo)準(zhǔn)局灶性腦缺血再灌注模型的制備根據(jù)longa提出的可逆性大腦中動脈閉塞(MCAo)線栓法并根據(jù)大鼠腦解剖結(jié)構(gòu)圖加以改進(jìn)制作局灶性腦缺血再灌注模型,以10%水合氯醛0.3ml/kg腹腔麻醉,頸正中切口,暴露頸總動脈(CCA)、頸外動脈(ECA)及翼腭動脈,將0.26mm單絲尼龍魚線頭端0.5cm用石蠟包被,并于20mm長處標(biāo)記,全部大鼠均通過右側(cè)CCA切口處插入,翼腭動脈短暫夾閉以防誤插,栓線長度自CCA分叉處約1820mm,根據(jù)動物體重而定,栓塞右側(cè)大腦中動脈,然后縫合皮膚,栓線尾端部分固定于皮膚上。缺血達(dá)到2h后小心抽出栓線,即形成再灌注。假手術(shù)對照只是不插入尼龍魚線,其余步驟同手術(shù)組。在缺血期間及再灌注后2h保持體溫在(370.5)。模型成功的標(biāo)志為以大鼠手術(shù)麻醉清醒后出現(xiàn)左側(cè)肢體癱瘓,站立不穩(wěn),提尾時向一側(cè)轉(zhuǎn)圈為模型成功的判斷標(biāo)準(zhǔn)。神經(jīng)功能缺失體征評分參考Longa及Bederson的5分制法在動物麻醉清醒后24h進(jìn)行