液相色譜串聯(lián)三重四級桿質譜基礎知識.ppt

檢測中心培訓（一）080114,液相色譜串聯(lián)三重四級桿質譜基礎知識,一 液質聯(lián)用,為什么要液質聯(lián)用？ 有很多物質如硝基呋喃類、氨基糖苷類在常規(guī)的檢測器如紫外、熒光檢測器上沒有響應的 液質聯(lián)用的實質 質譜儀作為液相色譜的檢測器,一 液質聯(lián)用,液質聯(lián)用儀 獸藥殘留中應用最廣泛的一種液質聯(lián)用儀-液相色譜串聯(lián)三重四級桿質譜,液相色譜,質譜,數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),一 液質聯(lián)用,液質聯(lián)用儀的組成,一 液質聯(lián)用,離子源 最常用的離子源-電噴霧離子源（ESI),毛細管,四極預桿,干燥氣,一 液質聯(lián)用,質量分離器 獸藥殘留最常用的是三重串聯(lián)四級桿（QqQ）,Q1,q2,Q3,一 液質聯(lián)用,整個質譜儀的模式圖,Q1,q2,Q1,電噴霧離子源,檢測器,二 質譜基本原理,質譜：稱量離子質量的工具,12 units,0 m/e,二 質譜基本原理,質譜：稱量離子質量的工具,12 units,12 m/e,二 質譜基本原理,質譜：稱量離子質量的工具,8 9 10 11 12 13 14 15 16,12 units,12 m/e,二 質譜基本原理,質譜：稱量離子質量的工具,8 9 10 11 12 13 14 15 16,12 units,14 m/e,二 質譜基本原理,質譜：稱量離子質量的工具,12 m/e,8 9 10 11 12 13 14 15 16,質荷比,分子的數(shù)量,三 質譜基本概念,質譜分析法：主要是通過對樣品離子質荷比的分析而實現(xiàn)對樣品進行定性和定量的一種方法 質荷比：指帶電粒子的質量與所帶電荷之比值。以m/e表示。是質譜分析中的一個重要參數(shù)，不同m/e值的粒子在一定電磁場下，所運行的軌跡是不同的。,三 質譜基本概念,只有一定質荷比的離子才能通過質量分離器而被檢測器所感應,三 質譜基本概念,質譜圖 樣品的分子在離子源內電離，產生各種質荷比（m/e）的離子，然后通過質量分析器按其質荷比分離，分離后的離子依次被檢測器檢測并記錄下來，形成一個按質荷比大小排列的圖譜。,三 質譜基本概念,質譜圖 總離子流圖（TIC）：計算機可以把采集到的每個質譜的所有離子相加得到總離子強度,總離子強度隨時間變化的曲線就是總離子色譜圖,三 質譜基本概念,總離子流圖（TIC）,總離子流圖的橫座標是出峰時間,縱座標是峰高?？傠x子色譜圖與一般色譜儀得到的色譜圖基本上是一樣的。,三 質譜基本概念,質譜圖 選擇離子流圖（SIM)：選取其中幾個特征離子掃描，對保留時間作圖，即得到選擇離子色譜圖。,三 質譜基本概念,選擇離子流圖（SIM)：,SIM通過去除本底和其他無關離子的干擾，降低噪聲，提高選擇性、分辨率和靈敏度，可使復雜的TIC簡化，對特定化合物的分析或化合物的分類十分有用。,三 質譜基本概念,質譜圖： 棒狀圖： 對于電噴霧串聯(lián)三重四級桿質譜，Q1中離子還是完整的（母離子），分子在q2中與Ar碰撞，產生子離子，子離子在Q3中分離，并為計算機所記錄，可得到棒狀圖,三 質譜基本概念,棒狀圖：,橫坐標是質荷比(m/z)、縱坐標是離子的相對強度，以基峰為100%、經過計算機處理的質譜棒狀譜圖稱為棒圖。,三 質譜基本概念,棒狀圖：,分子離子峰：進入質譜離子源的物質在電離過程中失去一個電子而形成的單電荷離子，它代表該物質的分子量,分子離子峰,碎片離子峰,三 質譜基本概念,棒狀圖：,基峰：豐度最高的那個峰 離子豐度: 檢測器檢測到的離子信號強度.,分子離子峰,碎片離子峰,基峰,四 質譜進行定性分析,質譜怎么確證物質的？ 色譜的保留時間 母離子的質荷比 子離子的特征,四 質譜進行定性分析,歐盟2002/657/EC指令中規(guī)定在農藥和獸藥殘留分析中以質譜作為確認方法，必須達到4點的要求，才能滿足鑒定 LC/MS/MS，一個母離子為1點，一個子離子為1.5點，那么確認時只需選擇1個母離子和2個子離子即可達到4點的要求二級質譜很容易到達此要求,四 質譜進行定量分析,質譜的定量計算 用LC-MS/MS進行定量分析，其基本方法與普通液相色譜法相同。 即通過色譜峰面積和標樣進行定量。,五 質譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質譜的掃描方式）,質譜的掃描方式 Full Scan（全掃描）,五 質譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質譜的掃描方式）,質譜的掃描方式 Full Scan（全掃描）,殘留分析的樣品基質較為復雜，用全掃描的話，得到的圖可能一個特征的峰都沒有,五 質譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質譜的掃描方式）,質譜的掃描方式 SIM（選擇離子監(jiān)控）,五 質譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質譜的掃描方式）,質譜的掃描方式 SIM（選擇離子監(jiān)控）,與全掃描相比，基質的影響大大降低，得到一個m/z特定的峰。 但這就能定性了嗎？,五 質譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質譜的掃描方式）,質譜的掃描方式 MRM（多級反應監(jiān)測）,五 質譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質譜的掃描方式）,質譜的掃描方式 MRM（多級反應監(jiān)測）,在藥殘分析中，常用的掃描 方式是多反應監(jiān)測,五 質譜是如何得到如此豐富的圖譜的？（質譜的掃描方式）,質譜的掃描方式 MRM（多級反應監(jiān)測） 多組分同時分析 共流出物的分析 母離子-子離子關系明確，定性能力