TSLC1與星形細(xì)胞腫瘤生物學(xué)行為及預(yù)后關(guān)系研究.doc

tslc1 與星形細(xì)胞腫瘤生物學(xué)行為及預(yù)后關(guān)系研究胡泉，張建生，李強(qiáng)，楊初蔚 蘭州大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)外科,蘭州（730030） e-mail: 摘要：目的：探討 tslc1 與星形細(xì)胞腫瘤生物學(xué)行為及與患者預(yù)后的關(guān)系，同時(shí)研究其與其它因子（n-鈣粘素和 ki67）的關(guān)系。方法應(yīng)用免疫組化 sp 法檢測(cè) 71 例星形細(xì)胞腫 瘤組織中 tslc1、n-cd 和 ki67 的表達(dá)。結(jié)果：、級(jí)星形細(xì)胞腫瘤較-級(jí)，tslc1 和 n-cd 的平均光密度小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)(p0.01)；而 ki67 平均光密度相反，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué) (p0.01)。在級(jí)與級(jí)之間比較 ki67 的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。tslc1 與 n-cd 二者 之間的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.601,p0.01)，與 ki67 呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.460,p0.05)。在級(jí)、級(jí) 星形細(xì)胞腫瘤中，tslc1 陽(yáng)性表達(dá)較陰性表達(dá)患者中位生存期長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.0093）。結(jié)論：tslc1,n-cd 和 ki67 在星形細(xì)胞腫瘤的進(jìn)展過程中起重要作用，對(duì)評(píng) 估星形細(xì)胞腫瘤的惡性度及預(yù)后有重要意義。關(guān)鍵詞：tslc1; n-鈣粘素; ki67; 星形細(xì)胞腫瘤; 免疫組化星形細(xì)胞腫瘤是顱內(nèi)最常見的腫瘤1，對(duì)于其發(fā)生發(fā)展機(jī)理以及治療的研究仍然是當(dāng)前 研究的一個(gè)熱點(diǎn)。本試驗(yàn)采用免疫組化檢測(cè)不同腫瘤學(xué)分級(jí)星形細(xì)胞腫瘤中肺癌腫瘤阻抑基 因（tumor suppressor in lung cancer-1，tslc1）、n-鈣粘素（neural-cadherin，n-cd）和 ki67 的表達(dá)，探討三者和人腦星形細(xì)胞腫瘤惡性度及預(yù)后的關(guān)系，以期為星形細(xì)胞腫瘤的診斷及 預(yù)后提供理論基礎(chǔ)。1 材料與方法1.1臨床資料收集 2002 年 3 月至 2007 年 2 月 71 例手術(shù)切除標(biāo)本。其中男性 40 例，女性 31 例，年 齡 1868 歲，所有患者術(shù)前均未行放療或化療。根據(jù) 2000 年 who 中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類 和分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)2:級(jí)毛細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤 3 例；級(jí)彌漫型星形細(xì)胞瘤 25 例；級(jí)間變型星 形細(xì)胞瘤 15 例；級(jí)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 28 例。1.2方法標(biāo)本經(jīng)中性福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，采用免疫組化 sp 法，檢測(cè) tslc1、 n-鈣粘素和 ki67 的表達(dá)。tslc1 定位于胞質(zhì)、胞漿或胞膜；n-cd 定位在細(xì)胞膜；ki67 陽(yáng) 性定位在細(xì)胞核，出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性。每張切片在放大 400 倍鏡下隨機(jī)讀取 1000 個(gè)細(xì) 胞，陽(yáng)性細(xì)胞5% 為陽(yáng)性表達(dá)。采用 hpias-1000 多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)對(duì) tslc-1、n-cd 和 ki67 蛋白染色結(jié)果進(jìn)行定量觀察。每張切片隨機(jī)挑選不相重疊的 5 個(gè)視野（400），描繪出目標(biāo)細(xì)胞，獲得平均光密度值，以反映 tslc1、n-cd 和 ki67 表達(dá)相對(duì)含 量。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法選用 spss13.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析、spearman 等級(jí)相關(guān)分析，應(yīng)用 kaplan-meier法進(jìn)行生存分析。2 結(jié)果2.1tslc1、n-cd、ki67 的表達(dá)- 4 -tslc1、n-cd 表達(dá)的平均光密度（mod）值隨病理學(xué)分級(jí)升高而遞減，而 ki67 相反。級(jí)、級(jí)星形細(xì)胞腫瘤與-級(jí)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)(p0.01)；tslc1、n-cd 的表達(dá)在 級(jí)與級(jí)之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而 ki67 的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。tslc1 與 n-cd 二者之間的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.601,p0.01)，與 ki67 呈負(fù)相關(guān)(rs=0.460,p0.05)(見表)。表 1 tslc1、n-cd 和 ki67 在星形細(xì)胞腫瘤組織中表達(dá)（ x s ）組別例數(shù)tslc1n-cdki67-280.27060.0130.31820.0160.36070.072150.23160.010*0.26550.007*0.47320.073*280.21850.018*0.23670.006*0.53080.022* 與組-比較，p0.01； 與組比較，p0.052.2 生存分析結(jié)果tslc1 在級(jí)、級(jí)星形細(xì)胞腫瘤中陽(yáng)性表達(dá)患者中位生存期為 20（8.6,21.5）月，陰 性表達(dá)患者中位生存期為 10(3.25,11.75)月，兩者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.0093）。(見 圖)1.0.8生存.率6.4 tslc1(-).2tslc1(+)0.0010 2030 40 50 60生存時(shí)間（月）星形細(xì)胞腫瘤-級(jí)中tslc1陽(yáng)性與陰性表達(dá)的生存率比較圖 1 星形細(xì)胞腫瘤-級(jí)中 tslc1 陽(yáng)性與陰性表達(dá)的生存率比較3 討論星形細(xì)胞腫瘤來源于神經(jīng)上皮的腫瘤，是顱內(nèi)最常見的腫瘤。其多呈浸潤(rùn)或侵襲性生長(zhǎng)， 其侵襲性生長(zhǎng)的特點(diǎn)給臨床治療帶來了很大困難，同時(shí)它也是臨床難以治療的最根本原因之一1。在星形細(xì)胞腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中大多數(shù)含有粘附分子或其培基的變化,粘附分子可以介 導(dǎo)瘤細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞相互識(shí)別和粘附，以促進(jìn)瘤細(xì)胞離散和游走,并在腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用3。tslc1 是新近證實(shí)的一種新腫瘤抑制基因4，屬于免疫球蛋白超家族5，主要存在于腦 組織中。研究認(rèn)為 tslc1 與細(xì)胞粘附有關(guān)5, 6，是一種細(xì)胞粘附分子，參與細(xì)胞與細(xì)胞之間 的相互作用，tslc1 基因的表達(dá)可維持上皮細(xì)胞之間的緊密連接，抑制腫瘤的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移7。 本研究發(fā)現(xiàn)：隨著星形細(xì)胞腫瘤惡性程度增加，tslc1 表達(dá)的平均光密度值降低，這提示 在星形細(xì)胞腫瘤的惡性進(jìn)展過程中，tslc1 發(fā)揮著重要作用，可能與星形細(xì)胞腫瘤的侵襲 浸潤(rùn)行為有關(guān)。在級(jí)、級(jí)星形細(xì)胞腫瘤中，tslc1 陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度比陰性表達(dá)患者中位 生存期長(zhǎng)，兩者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p=0.0093）。因此，在星形細(xì)胞腫瘤組織中檢測(cè) tslc1，對(duì)于分析和判斷其瘤組織生長(zhǎng)及評(píng)估預(yù)后有重要意義。n-cd 是另一種跨膜粘附分子，主要見于成人肌肉和神經(jīng)組織中，其在星形細(xì)胞腫瘤細(xì) 胞間的粘附過程中也起重要作用8。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著腫瘤病理學(xué)分級(jí)的增高 n-cd 表 達(dá)降低，-級(jí)與-級(jí)腫瘤相比差異顯著(p0.01)，而級(jí)與級(jí)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， 且其與 tslc1 之間的表達(dá)呈正相關(guān)(rs=0.601,p0.01)。這提示 tslc1 與 n-cd 在細(xì)胞與細(xì)胞 粘附過程中可能起協(xié)同作用，共同維持細(xì)胞與細(xì)胞之間的緊密連接，抑制腫瘤的浸潤(rùn)。ki-67 抗原是與細(xì)胞增殖相關(guān)的核抗原，與細(xì)胞增殖核抗原(pcna)相比，半衰期短，細(xì) 胞脫離增殖周期后迅速降解，更能反映腫瘤的惡性程度及患者預(yù)后9。本研究結(jié)果顯示， ki-67 在星形細(xì)胞腫瘤組織中的表達(dá)呈現(xiàn)非均一性表現(xiàn)，在同樣條件下，ki-67 的平均光密 度值隨星形細(xì)胞腫瘤病理級(jí)別升高而升高，各組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)，且與 tslc1 表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.460,p0.05)，這說明 tslc1 的缺失與星形細(xì)胞腫瘤細(xì)胞周期調(diào) 節(jié)的異常有關(guān)，從而進(jìn)一步證實(shí)了 tslc1 抑制瘤細(xì)胞增殖之作用。tslc1 作為一種新的抑癌基因參與細(xì)胞間粘附、抑制瘤細(xì)胞增殖。它在星形細(xì)胞腫瘤 中表達(dá)異常，主要表現(xiàn)為抑制瘤細(xì)胞增殖。但其發(fā)揮腫瘤抑制作用的分子機(jī)制尚不清楚，故 而，tslc1 在腦部生長(zhǎng)調(diào)節(jié)機(jī)制是目前研究之重點(diǎn)。tslc1 與 n-cd、ki67 關(guān)系密切，提示 在星形細(xì)胞腫瘤發(fā)展過程中，三者都發(fā)揮著重要作用。隨著臨床和病理研究的進(jìn)一步深入， 對(duì)星形細(xì)胞腫瘤進(jìn)行 tslc1、n-cd、ki67 的聯(lián)合檢測(cè)，在判定其惡性度和預(yù)后可能有更重 要的意義。參考文獻(xiàn)1 趙繼宗 主編.顱腦腫瘤外科學(xué)m.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004：208-237.2 biernat w. 2000 world health organization classification of tumors of the nervous systemj. pol j pathol. 2000,51(3):107-14.3 biederer t, 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ki67didinversely.theirexpressioningrade-andgrade-weresignificantlydifference(p0.05).the expression of tslc1 was positively correlated with the expression ofn-cd(rs=0.601, p0.01)，but it was negative correlated with ki67 expression(rs=0.460,p0.05). themedian of tslc1 positive expression was longer than that of