GB5009.263-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定.pdf

中 華 人 民 共 和 國 國 家 標(biāo) 準(zhǔn)G B5 0 0 9.2 6 32 0 1 6食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定2 0 1 6 - 1 2 - 2 3發(fā)布2 0 1 7 - 0 6 - 2 3實(shí)施中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會國 家 食 品 藥 品 監(jiān) 督 管 理 總 局發(fā) 布G B5 0 0 9.2 6 32 0 1 6 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)代替G B/T2 2 2 5 32 0 0 8 食品中阿力甜的測定 、G B/T2 2 2 5 42 0 0 8 食品中阿斯巴甜的測定 。本標(biāo)準(zhǔn)與G B/T2 2 2 5 32 0 0 8和G B/T2 2 2 5 42 0 0 8相比, 主要變化如下: 標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為“ 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定” ; 增加了適用范圍。G B5 0 0 9.2 6 32 0 1 61 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中阿斯巴甜和阿力甜的測定。2 原理根據(jù)阿斯巴甜和阿力甜易溶于水、 甲醇和乙醇等極性溶劑而不溶于脂溶性溶劑特點(diǎn), 蔬菜及其制品、 水果及其制品、 食用菌和藻類、 谷物及其制品、 焙烤食品、 膨化食品和果凍試樣用甲醇水溶液在超聲波振蕩下提取; 濃縮果汁、 碳酸飲料、 固體飲料類、 餐桌調(diào)味料和除膠基糖果以外的其他糖果試樣用水提取; 乳制品、 含乳飲料類和冷凍飲品試樣用乙醇沉淀蛋白后用乙醇水溶液提取; 膠基糖果用正己烷溶解膠基并用水提取; 脂肪類乳化制品、 可可制品、 巧克力及巧克力制品、 堅果與籽類、 水產(chǎn)及其制品、 蛋制品用水提取, 然后用正己烷除去脂類成分。各提取液在液相色譜C1 8反相柱上進(jìn)行分離, 在波長2 0 0n m處檢測, 以色譜峰的保留時間定性, 外標(biāo)法定量。3 試劑和材料除非另有說明, 所用試劑均為分析純, 水為G B/T6 6 8 2規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室一級水。3.1 試劑3.1.1 甲醇(CH3OH) : 色譜純。3.1.2 乙醇(CH3CH2OH) : 優(yōu)級純。3.2 標(biāo)準(zhǔn)品3.2.1 阿力甜標(biāo)準(zhǔn)品(C1 4H2 5N3O4S,C A S號:8 0 8 6 3 - 6 2 - 3) : 純度9 9%。3.2.2 阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品(C1 4H1 8N2O5,C A S號:2 2 8 3 9 - 4 7 - 0) : 純度9 9%。3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3.3.1 阿斯巴甜和阿力甜的標(biāo)準(zhǔn)儲備液(0.5m g/m L) : 各稱取0.0 2 5g( 精確至0.0 0 01g) 阿斯巴甜和阿力甜, 用水溶解并轉(zhuǎn)移至5 0m L容量瓶中并定容至刻度, 置于4左右的冰箱保存, 有效期為9 0d。3.3.2 阿斯巴甜和阿力甜混合標(biāo)準(zhǔn)工作液系列的制備: 將阿斯巴甜和阿力甜標(biāo)準(zhǔn)儲備液用水逐級稀釋成混合標(biāo)準(zhǔn)系列, 阿斯巴甜和阿力甜的濃度均分別為1 0 0g/m L、5 0g/m L、2 5g/m L、1 0.0g/m L、5.0g/m L的標(biāo)準(zhǔn)使用溶液系列。置于4左右的冰箱保存, 有效期為3 0d。4 儀器和設(shè)備4.1 液相色譜儀: 配有二極管陣列檢測器或紫外檢測器。G B5 0 0 9.2 6 32 0 1 62 4.2 超聲波震蕩器。4.3 天平: 感量為1m g和0.1m g。4.4 離心機(jī): 轉(zhuǎn)速40 0 0r/m i n。5 分析步驟5.1 試樣制備及前處理5.1.1 碳酸飲料、 濃縮果汁、 固體飲料、 餐桌調(diào)味料和除膠基糖果以外的其他糖果稱取約5g( 精確到0.0 0 1g) 碳酸飲料試樣于5 0m L燒杯中, 在5 0水浴上除去二氧化碳, 然后將試樣全部轉(zhuǎn)入2 5m L容量瓶中, 備用; 稱取約2g濃縮果汁試樣( 精確到0.0 0 1g) 于2 5m L容量瓶中, 備用; 稱取約1g的固體飲料或餐桌調(diào)味料或絞碎的糖果試樣( 精確到0.0 0 1g) 于5 0 m L燒杯中, 加1 0m L水后超聲波震蕩提取2 0m i n, 將提取液移入2 5m L容量瓶中, 燒杯中再加入1 0m L水超聲波震蕩提取1 0 m i n, 提 取 液 移 入 同 一2 5 m L容 量 瓶, 備 用。將 上 述 容 量 瓶 的 液 體 用 水 定 容, 混 勻,40 0 0r/m i n離心5m i n, 上清液經(jīng)0.4 5m水系濾膜過濾后用于色譜分析。5.1.2 乳制品、 含乳飲料和冷凍飲品對于含有固態(tài)果肉的液態(tài)乳制品需要用食品加工機(jī)進(jìn)行勻漿, 對于干酪等固態(tài)乳制品, 需用食品加工機(jī)按試樣與水的質(zhì)量比1:4進(jìn)行勻漿。分別稱取約5g液態(tài)乳制品、 含乳飲料、 冷凍飲品、 固態(tài)乳制品勻漿試樣( 精確到0.0 0 1g) 于5 0m L離心管, 加入1 0m L乙醇, 蓋上蓋子; 對于含乳飲料和冷凍飲品試樣, 首先輕輕上下顛倒離心管5次( 不能振搖) , 對于乳制品, 先將離心管渦旋混勻1 0s, 然后靜置1m i n,40 0 0r/m i n離心5m i n, 上清液濾入2 5m L容量瓶, 沉淀用8m L乙醇-水(2+1) 洗滌, 離心后上清液轉(zhuǎn)移入同一2 5m L容量瓶, 用乙醇-水(2+1) 定容, 經(jīng)0.4 5m有機(jī)系濾膜過濾后用于色譜分析。5.1.3 果凍對于可吸果凍和透明果凍, 用玻棒攪勻, 含有水果果肉的果凍需要用食品加工機(jī)進(jìn)行勻漿。稱取約5g( 精確到0.0 0 1g) 制備均勻的果凍試樣于5 0m L的比色管中, 加入2 5m L8 0%的甲醇水溶液, 在7 0的水浴上加熱1 0m i n, 取出比色管, 趁熱將提取液轉(zhuǎn)入5 0m L容量瓶, 再用1 5m L8 0%的甲醇水溶液分兩次清洗比色管, 并每次振搖約1 0s, 并轉(zhuǎn)入同一個5 0m L的容量瓶, 冷卻至室溫, 用8 0%的甲醇水溶液定容到刻度, 混勻,40 0 0r/m i n離心5m i n, 將上清液經(jīng)0.4 5m有機(jī)系濾膜過濾后用于色譜分析。5.1.4 蔬菜及其制品、 水果及其制品、 食用菌和藻類水果及其制品試樣如有果核首先需要去掉果核。對于較干較硬的試樣, 用食品加工機(jī)按試樣與水的質(zhì)量比為14進(jìn)行勻漿, 稱取約5g( 精確到0.0 0 1g) 勻漿試 樣 于2 5 m L的 離 心 管 中, 加 入1 0 m L7 0%的 甲 醇 水 溶 液, 搖 勻, 超 聲1 0 m i n,40 0 0r/m i n離心5m i n, 上清液轉(zhuǎn)入2 5m L容量瓶, 再加8m L5 0%的甲醇水溶液重復(fù)操作一次, 上清液轉(zhuǎn)入同一個2 5m L容量瓶, 最后用5 0%的甲醇水溶液定容, 經(jīng)0.4 5m有機(jī)系濾膜過濾后用于色譜分析。對于含糖多的、 較粘的、 較軟的試樣, 用食品加工機(jī)按試樣與水的質(zhì)量比為12進(jìn)行勻漿, 稱取約3g( 精確到0.0 0 1g) 勻漿試樣于2 5m L的離心管中; 對于其他試樣, 用食品加工機(jī)按試樣與水的質(zhì)量比1 1進(jìn)行勻漿, 稱取約2g( 精確到0.0 0 1g) 勻漿試樣于2 5m L的離心管中; 然后向離心管加入1 0m LG B5 0 0 9.2 6 32 0 1 63 6 0%的甲醇水溶液, 搖勻, 超聲1 0m i n,40 0 0r/m i n離心5m i n, 上清液轉(zhuǎn)入2 5m L容量瓶, 再加1 0m L5 0%的甲醇水溶液重復(fù)操作一次, 上清液轉(zhuǎn)入同一個2 5m L容量瓶, 最后用5 0%的甲醇水溶液定容, 經(jīng)0.4 5m有機(jī)系濾膜過濾后用于色譜分析。5.1.5 谷物及其制品、 焙烤食品和膨化食品試樣需要用食品加工機(jī)進(jìn)行均勻粉碎, 稱取1g( 精確到0.0 0 1g) 粉碎試樣于5 0m L離心管中, 加入1 2m L5 0%甲醇水溶液, 渦旋混勻, 超聲振蕩提取1 0m i n,40 0 0r/m i n離心5m i n, 上清液轉(zhuǎn)移入2 5m L容量瓶中, 再加1 0m L5 0%甲醇水溶液, 渦旋混勻, 超聲振蕩提取5m i n,40 0 0r/m i n離心5m i n, 上清液轉(zhuǎn)入同一2 5m L容量瓶中, 用蒸餾水定容, 經(jīng)0.4 5m有機(jī)系濾膜過濾后用于色譜分析。5.1.6 膠基糖果、 脂肪類乳化制品、 可可制品、 巧克力及巧克力制品、 堅果與籽類、 水產(chǎn)及其制品和蛋制品 膠基糖果: 用剪刀將膠基糖果剪成細(xì)條狀, 稱取約3g( 精確到0.0 0 1g) 剪細(xì)的膠基糖果試樣, 轉(zhuǎn)入1 0 0m L的分液漏斗中, 加入2 5m L水劇烈振搖約1m i n, 再加入3 0m L正己烷, 繼續(xù)振搖直至口香糖全部溶解( 約5m i n) , 靜置分層約5m i n, 將下層水相放入5 0m L容量瓶, 然后加入1 0m L水到分液漏斗, 輕輕振搖約1 0s, 靜置分層約1m i n, 再將下層水相放入同一容量瓶中, 再加入1 0m L水重復(fù)1次操作, 最后用水定容至刻度, 搖勻后過0.4 5m水系濾膜后用于色譜分析。脂肪類乳化制品、 可可制品、 巧克力及巧克力制品、 堅果與籽類、 水產(chǎn)及其制品、 蛋制品: 用食品加工機(jī)按試樣與水的質(zhì)量比為14進(jìn)行勻漿, 稱取約5g( 精確到0.0 0 1g) 勻漿試樣于2 5m L離心管中, 加入1 0m L水超聲振蕩提取2 0m i n, 靜置1m i n,40 0 0r/m i n離心5m i n, 上清液轉(zhuǎn)入1 0 0m L的分液漏斗中, 離心管中再加入8m L水超聲振蕩提取1 0m i n, 靜置和離心后將上清液再次轉(zhuǎn)入分液漏斗中, 向分液漏斗加入1 5m L正己烷, 振搖3 0s, 靜置分層約5m i n, 將下層水相放入2 5m L容量瓶, 用水定容至刻度, 搖勻后過0.4 5m水系濾膜后用于色譜分析。5.2 儀器參考條件a) 色譜柱:C1 8, 柱長2 5 0mm, 內(nèi)徑4.6mm, 粒徑5m。b) 柱溫:3 0。c) 流動相: 甲醇-水(4 0+6 0) 或乙腈-水(2 0+8 0) 。d) 流速:0.8m L/m i n。e) 進(jìn)樣量:2 0L。f) 檢測器: 二極管陣列檢測器或紫外檢測器。g) 檢測波長:2 0 0n m。5.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將標(biāo)準(zhǔn)系列工作液分別在上述色譜條件下測定相應(yīng)的峰面積( 峰高) , 以標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo), 以峰面積( 峰高) 為縱坐標(biāo), 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)色譜圖見附錄A。5.4 試樣溶液的測定在相同的液相色譜條件下, 將試樣溶液注入液相色譜儀中, 以保留時間定性, 以試樣峰高或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。G B5 0 0 9.2 6 32 0 1 64 6 分析結(jié)果的表述試樣中阿斯巴甜或阿力甜的含量按式(1) 計算:X=Vm10 0 0(1) 式中:X 試樣中阿斯巴甜或阿力甜的含量, 單位為克每千克(g/k g) ; 由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出進(jìn)樣液中阿斯巴甜或阿力甜的濃度, 單位為微克每毫升(g/m L) ;V 試樣的最后定容體積, 單位為毫升(m L) ;m 試樣質(zhì)量, 單位為克(g) ;10 0 0 由g/g換算成g/k g的換算因子。結(jié)果保留3位有效數(shù)字。7 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的1 0%。8 其他各類食品的阿斯巴甜和阿力甜的檢出限和定量限見表1。表1 各類食品中阿斯巴甜和阿力甜的檢出限和定量限食品類別稱樣量g定容體積m L進(jìn)樣量L定量限m g/k g檢出限m g/k g碳酸飲料、 含乳飲料、 冷凍飲品、 液態(tài)乳制品5.02 5.02 03.01.0果凍5.05 0.02 06.02.0濃縮果汁2.02 5.02 07.52.5膠基糖果3.05 0.02 0