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文檔簡介

實驗7 用生長譜法測定微生物的營養(yǎng)要求,一、實驗?zāi)康?學(xué)習(xí)并掌握用生長譜法測定微生物營養(yǎng)的基本原理和方法。,二、實驗內(nèi)容 用生長譜測定大腸桿菌和枯草桿菌所需要的碳源。 三、實驗原理 為了使微生物生長繁殖，必須供給所需碳源、氮源、無機鹽、微量元素、生長因子等，如果缺少其中一種該微生物便不能生長。根據(jù)這一特性，可將微生物接種在一種只缺少其中某些營養(yǎng)物的完全適合的瓊脂培養(yǎng)基中，倒成平板，再將所缺的這種營養(yǎng)物（如各種碳源）點植于平板上，經(jīng)適溫培養(yǎng)該營養(yǎng)物便逐漸擴散于植點周圍。該微生物若可利用或需要此種營養(yǎng)物，便在這種營養(yǎng)物擴散處生長繁殖，微生物繁殖之處便出現(xiàn)圓形菌落圈，即生長圖形，故此法為生長譜法。這種方法可以定性，定量地測定微生物對各種營,養(yǎng)物質(zhì)（如碳源、氮源維生素）的需要，字微生物育種和營養(yǎng)缺陷型的鑒定中也用此法。,四、實驗儀器、材料和用具 一)實驗儀器 37恒溫培養(yǎng)箱、1000ul取液器 二)微生物材料 大腸桿菌及枯草桿菌斜面。 三)培養(yǎng)基 合成培養(yǎng)基（詳細(xì)配方見附錄4.16） 加12ml 0.04%的溴甲酚紫（PH5.2-PH6.8，顏色由黃色變紫色，作為指示劑）0.1Mpa滅菌20min。 四)試劑 分別放有小濾紙片的10%木糖，葡萄糖，半乳糖，麥芽糖，蔗糖，乳糖無菌溶液，無菌生理鹽水。,五)實驗用具 無菌平板，無菌鑷子，無菌試管，無菌1000ul吸頭，酒精燈。,五、實驗步驟 將大腸桿菌斜面和枯草桿菌斜面用無菌生理鹽水洗下，制成菌懸液。 將合成培養(yǎng)基約20ml,熔化后冷卻到50 左右加入1000 ul大腸桿菌懸液，搖勻，立即傾注于直徑為90mm的無菌培養(yǎng)皿中，待冷卻凝固后，在平板背面用記號筆劃分六個區(qū)，并標(biāo)明要點植的各種糖類， 用無菌鑷子，分別夾取6種糖中的濾紙片對號點植。（注意防止交叉糖份污染） 倒置于37溫箱培養(yǎng)18-24h，觀察各種濾紙片周圍有無菌落圈。,六結(jié)果與

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