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課時(shí)跟蹤檢測(cè)(四十一) 基因工程一、題點(diǎn)練1下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的敘述,正確的是()A用限制性核酸內(nèi)切酶切割一個(gè)DNA分子中部,獲得一個(gè)目的基因時(shí),被水解的磷酸二酯鍵有2個(gè)B限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大CCATG和GGATCC序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)不同D只有用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒,才能形成重組質(zhì)粒解析:選B用限制酶切割DNA分子中部獲得一個(gè)目的基因時(shí),需剪切2次,水解磷酸二酯鍵4個(gè);限制酶識(shí)別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大;CATG和GGATCC序列被限制酶切出的黏性末端均有4個(gè)堿基;切割目的基因和載體并非只能用同一種限制酶,如果不同的限制酶切割DNA分子所產(chǎn)生的末端也存在互補(bǔ)關(guān)系,則兩末端也可連接。2下列關(guān)于載體的敘述,錯(cuò)誤的是()A載體與目的基因結(jié)合后,實(shí)質(zhì)上就是一個(gè)重組DNA分子B對(duì)某種限制酶而言,載體最好只有一個(gè)切點(diǎn),但還要有其他多種酶的切點(diǎn)C目前常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒D載體具有某些標(biāo)記基因,便于對(duì)其進(jìn)行切割解析:選D標(biāo)記基因的作用是用于受體細(xì)胞的鑒別和篩選。3科學(xué)家采用基因工程技術(shù)將矮牽牛中控制藍(lán)色色素合成的基因a轉(zhuǎn)移到玫瑰中,以培育藍(lán)玫瑰,下列操作正確的是()A利用DNA分子雜交技術(shù)從矮牽牛的基因文庫(kù)中獲取基因aB用氯化鈣溶液處理玫瑰葉肉細(xì)胞,使其處于感受態(tài)C用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因玫瑰細(xì)胞D將基因a導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞的液泡中,防止其經(jīng)花粉進(jìn)入野生玫瑰解析:選A將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞時(shí),用氯化鈣溶液處理受體細(xì)胞,可使其處于感受態(tài),利于目的基因的導(dǎo)入。由于不知道標(biāo)記基因,用含四環(huán)素的培養(yǎng)基不一定能篩選出轉(zhuǎn)基因玫瑰細(xì)胞。將目的基因?qū)朊倒迦~肉細(xì)胞的葉綠體基因組中,可防止其經(jīng)花粉進(jìn)入野生玫瑰,液泡中無(wú)DNA。4(2014重慶高考)下面為利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖。以下相關(guān)敘述,正確的是()A的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與B侵染植物細(xì)胞后,重組Ti質(zhì)粒整合到的染色體上C的染色體上若含抗蟲(chóng)基因,則就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀D只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異解析:選D構(gòu)建重組質(zhì)粒需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶,不需要DNA聚合酶;含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后,重組Ti質(zhì)粒的TDNA整合到受體細(xì)胞的染色體上,而不是重組Ti質(zhì)粒整合到受體細(xì)胞的染色體上;導(dǎo)入受體細(xì)胞的目的基因表達(dá)后,轉(zhuǎn)基因植株方能表現(xiàn)出相應(yīng)性狀,若目的基因在受體細(xì)胞中不表達(dá),轉(zhuǎn)基因植株不能表現(xiàn)出相應(yīng)性狀;表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀則表明該植株細(xì)胞發(fā)生了基因重組,基因重組是可遺傳變異。5基因工程利用某目的基因(圖甲)和Pl噬菌體載體(圖乙)構(gòu)建重組DNA。限制性核酸內(nèi)切酶分別是Bgl、EcoR和Sau3A。下列分析錯(cuò)誤的是()A構(gòu)建重組DNA時(shí),可用Bgl和Sau3A切割目的基因所在片段和Pl噬菌體載體B構(gòu)建重組DNA時(shí),可用EcoR和Sau3A切割目的基因所在片段和Pl噬菌體載體C圖乙中的Pl噬菌體載體只用EcoR切割后,含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)D用EcoR切割目的基因所在片段和Pl噬菌體載體,再用DNA連接酶連接,只能產(chǎn)生一種重組DNA解析:選D由題圖可知,Bgl、Sau3A及EcoR三種酶在目的基因和Pl噬菌體上都有切口,故可用Bgl和Sau3A或EcoR和Sau3A切割目的基因所在片段和Pl噬菌體載體;從圖乙知Pl噬菌體載體為環(huán)狀DNA,只用EcoR切割后產(chǎn)生兩條反向雙螺旋鏈狀DNA,有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán);用EcoR切割目的基因所在片段和Pl噬菌體載體,再用DNA連接酶連接,能產(chǎn)生不止一種重組DNA。二、題型練6(2017石家莊調(diào)研)請(qǐng)回答以下有關(guān)基因工程的問(wèn)題:(1)基因工程中切割DNA的工具酶是_。DNA連接酶根據(jù)其來(lái)源不同,分為_(kāi)和_。(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成_。(3)_是基因工程的核心步驟。啟動(dòng)子是_識(shí)別和結(jié)合的部位,它能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。(4)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是_。(5)要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因,采用的方法是_技術(shù)。答案:(1)限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)Ecoli DNA連接酶T4DNA連接酶(順序可顛倒)(2)引物(引物對(duì))(3)基因表達(dá)載體的構(gòu)建RNA聚合酶(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(5)DNA分子雜交7(2017唐山一模)如圖為培育轉(zhuǎn)基因山羊生產(chǎn)人酪蛋白的流程圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)過(guò)程為基因工程中的_,人酪蛋白基因?yàn)開(kāi),可從基因文庫(kù)中獲取,基因文庫(kù)包括_。(2)過(guò)程指的是胚胎移植過(guò)程,一般選取_的胚胎進(jìn)行胚胎移植,不選用原腸胚時(shí)期的胚胎。(3)過(guò)程為加速轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的繁育,可以采用_、_等方法。(4)過(guò)程指的是目的基因的表達(dá),包括_兩個(gè)階段,在分子水平上檢測(cè)目的基因是否在轉(zhuǎn)基因山羊體內(nèi)成功表達(dá)的方法是_。解析:(1)由圖可知,為基因表達(dá)載體的構(gòu)建。人酪蛋白基因?yàn)槟康幕颍蛭膸?kù)包括基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)。(2)一般選取桑椹胚或囊胚時(shí)期的胚胎進(jìn)行胚胎移植。(3)為獲得更多的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,可以采用胚胎分割移植和體細(xì)胞核移植(克隆)等方法。(4)基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)階段,在分子水平上檢測(cè)目的基因是否在轉(zhuǎn)基因山羊體內(nèi)成功表達(dá)的方法是抗原抗體雜交。答案:(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體目的基因基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)(2)桑椹胚時(shí)期或者囊胚期(3)胚胎分割移植體細(xì)胞核移植(或克隆技術(shù))(4)轉(zhuǎn)錄與翻譯抗原抗體雜交8(2017貴陽(yáng)一檢)胰島素是治療糖尿病的重要藥物。如圖是利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素的部分過(guò)程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題:(1)過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)。若將某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA經(jīng)過(guò)程產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA片段與載體結(jié)合后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中,這個(gè)受體菌群體稱(chēng)為這種生物的_。(2)_(填“能”或“不能”)用人體皮膚細(xì)胞來(lái)完成過(guò)程,簡(jiǎn)述理由:_。(3)與基因組文庫(kù)的基因相比,由過(guò)程獲得的目的基因中不包含_。(4)在基因工程操作步驟中,獲得A的步驟稱(chēng)為_(kāi),A的名稱(chēng)是_。(5)若目的基因中有a個(gè)堿基對(duì),其中鳥(niǎo)嘌呤b個(gè),則過(guò)程擴(kuò)增循環(huán)3次,至少需要提供胸腺嘧啶_個(gè)。答案:(1)反(逆)轉(zhuǎn)錄cDNA文庫(kù)(2)不能皮膚細(xì)胞中的胰島素基因未表達(dá),不能形成胰島素mRNA(3)啟動(dòng)子、內(nèi)含子(或非編碼DNA片段)(4)基因表達(dá)載體的構(gòu)建重組質(zhì)粒(或基因表達(dá)載體)(5)7(ab)或(231)(ab)9(2017哈爾濱檢測(cè))青蒿素是治療瘧疾的重要藥物。研究人員已經(jīng)弄清了青蒿細(xì)胞中青蒿素的合成途徑(如圖中實(shí)線方框內(nèi)所示),并且發(fā)現(xiàn)酵母細(xì)胞也能夠產(chǎn)生合成青蒿素的中間產(chǎn)物FPP(如圖中虛線方框內(nèi)所示)。結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題:(1)瘧疾俗稱(chēng)“打擺子”,是由瘧原蟲(chóng)引起的寒熱往來(lái)癥狀的疾病。當(dāng)瘧原蟲(chóng)寄生在人體中時(shí),會(huì)引起人的免疫反應(yīng),使_細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子。同時(shí)B細(xì)胞在受到刺激后,在淋巴因子的作用下增殖分化成_細(xì)胞,產(chǎn)生抗體。(2)根據(jù)圖示代謝過(guò)程,科學(xué)家在培育能產(chǎn)生青蒿素的酵母細(xì)胞過(guò)程中,要向_中導(dǎo)入的基因是_,具體操作中可利用_技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入目的基因。(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),用不同類(lèi)型的_切割DNA后,可能產(chǎn)生_末端,也可能產(chǎn)生_末端。(4)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),酵母細(xì)胞導(dǎo)入相關(guān)基因后,相關(guān)基因能正常表達(dá),但酵母菌合成的青蒿素仍很少,根據(jù)圖解分析原因可能是_。解析:(1)當(dāng)瘧原蟲(chóng)寄生在人體中時(shí),會(huì)引起人的免疫反應(yīng),使T細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子,同時(shí)B細(xì)胞在受到刺激后,在淋巴因子的作用下增殖分化成記憶細(xì)胞和漿細(xì)胞,漿細(xì)胞能產(chǎn)生抗體。(2)由于酵母細(xì)胞中也能合成FPP,F(xiàn)PP形成青蒿素過(guò)程還需要ADS酶和CYP7AV1酶參與,所以酵母細(xì)胞需要導(dǎo)入ADS酶基因、CYP7AV1酶基因。(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),用不同類(lèi)型的限制酶切割DNA后,可能產(chǎn)生黏性末端,也可能產(chǎn)生平末端。(4)由圖可知,酵母細(xì)胞中部分FPP用于合成固醇,使合成的青蒿素量較少。答案:(1)T漿(2)酵母細(xì)胞ADS酶基因、CYP7AV1酶基因DNA分子雜交(3)限制酶黏性平(4)酵母細(xì)胞中部分FPP用于合成固醇10(2017廣西三市聯(lián)考)小鼠基因靶向敲除技術(shù)是采用工程技術(shù)手段使小鼠體內(nèi)的某一基因失去功能,以研究基因在生物個(gè)體發(fā)育和病理過(guò)程中的作用。例如現(xiàn)有基因型為BB的小鼠,要敲除基因B,可先用體外合成的突變基因b取代正?;駼,使BB細(xì)胞改變?yōu)锽b細(xì)胞,最終培育成為基因敲除小鼠bb。分析回答下列問(wèn)題:(1)“基因靶向敲除”技術(shù)采用了基因工程的技術(shù)手段?;蚬こ淌侵赴凑杖藗兊脑竿M(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),并通過(guò)_和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性。(2)基因表達(dá)載體應(yīng)包括啟動(dòng)子、_、_、標(biāo)記基因。目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物_,這是目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。(3)為獲得“基因靶向敲除”的小鼠個(gè)體,則應(yīng)將同源目的基因?qū)胄∈蟮腳。此外還必須經(jīng)過(guò)_和胚胎移植等胚胎工程的技術(shù)手段,最終由受體母鼠生下來(lái)。(4)按上述“基因靶向敲除”操作獲得的多只雌雄小鼠都是雜合子,人們想在此基礎(chǔ)上獲得一個(gè)含純合目的基因的個(gè)體。簡(jiǎn)要的方案是:_。答案:(1)體外DNA重組(2)目的基因終止子DNA上是否插入了目的基因(3)受精卵早期胚胎培養(yǎng)(4)讓獲得的雜合子雌雄小鼠交配,從后代中篩選出含目的基因的純合小鼠11(2016廣州二模)蟲(chóng)草中的超氧化物歧化酶(SOD)具有抗衰老作用。研究人員培育了能合成SOD的轉(zhuǎn)基因酵母菌。請(qǐng)結(jié)合圖回答問(wèn)題:注:Hind和ApaL是兩種限制酶,箭頭表示酶的切割位置。(1)將圖中的重組DNA分子用Hind和ApaL完全酶切后,可得到_種DNA片段。圖示的表達(dá)載體存在氨芐青霉素抗性基因,不能導(dǎo)入用于食品生產(chǎn)的酵母菌中,據(jù)圖分析,可用_切除該抗性基因的部分片段使其失效,再用DNA連接酶使表達(dá)載體重新連接起來(lái)。(2)作為受體細(xì)胞的酵母菌缺失URA3基因,必須在含有尿嘧啶的培養(yǎng)基中才能存活,因此,圖示表達(dá)載體上的URA3基因可作為_(kāi)供鑒定和選擇;為了篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的酵母菌,所使用的培養(yǎng)
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