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第二節(jié) 植物種苗脫毒技術(shù)一、種苗脫毒的含義1外植體的來源:從感染病毒的植株上所剝離的莖尖分生組織。2培養(yǎng)方法:在離體條件下將外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)。3幼苗特點(diǎn):不含病毒。二、利用分生組織作為外植體的原因1農(nóng)作物在種植過程中,經(jīng)常會(huì)受到病毒、細(xì)菌和真菌等病原體的感染。2侵入植物體內(nèi)的病毒可以通過維管束和細(xì)胞壁間的胞間連絲擴(kuò)散到所有的組織器官。3植物的莖尖等分生組織處于分化的初級(jí)階段,其組織內(nèi)的維管束還未形成,此時(shí)植物體內(nèi)的病毒只能通過胞間連絲移動(dòng)到分生區(qū),而這一移動(dòng)過程遠(yuǎn)不及細(xì)胞分裂的速度,所以分生區(qū)一般不會(huì)受到病毒侵染。三、馬鈴薯脫毒苗的培養(yǎng)程序取材和消毒:剪芽并剝?nèi)ネ馊~,自來水下沖洗 10 min,再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的漂白粉溶液消毒后,用無菌水沖洗23次。剝離和接種:在解剖鏡下,用解剖刀小心地除去莖尖周圍的葉片組織,露出分生區(qū),用解剖針細(xì)心剝?nèi)∷璧那o尖,并將其接種于MS培養(yǎng)基上,切面接觸培養(yǎng)基。培養(yǎng):將接種的莖尖置于25 、1 500 lx3 000 lx光照條件下培養(yǎng)。預(yù)習(xí)完成后,請(qǐng)把你認(rèn)為難以解決的問題記錄在下面的表格中問題1問題2問題3問題4植物種苗脫毒的保障與方法1保障脫毒苗無毒的方法(1)選取的外植體為分生組織。(2)對(duì)材料消毒。(3)所用培養(yǎng)基經(jīng)過嚴(yán)格滅菌。(4)操作過程為無菌操作。(5)培養(yǎng)室為無菌室。2幾種脫毒方法脫毒法名稱原理莖尖微體嫁接脫毒法多數(shù)病毒不經(jīng)種子傳播,所以用種子繁殖的實(shí)生苗不帶病毒;莖尖培養(yǎng)能夠脫毒。因此,將微莖尖嫁接在幼嫩的無菌砧木上培養(yǎng),能夠得到脫毒苗愈傷組織培養(yǎng)脫毒法愈傷組織增殖速度比病毒復(fù)制速度快或產(chǎn)生抗病毒變異珠心胚培養(yǎng)脫毒法珠心組織與維管系統(tǒng)無直接聯(lián)系,又保持著母體植株的遺傳特性,由它形成的珠心胚可作為外植體培育脫毒苗花藥培養(yǎng)脫毒法花藥培養(yǎng)經(jīng)愈傷組織培養(yǎng)途徑產(chǎn)生的花粉植株不帶病毒材料一微繁殖技術(shù)又稱快速繁殖技術(shù),就是將植物體的一部分組織小塊進(jìn)行培養(yǎng),并誘導(dǎo)分化成大量的小植株,從而達(dá)到快速無性繁殖的目的。在20 m2的培養(yǎng)室內(nèi)最多可容納100萬株試管苗。這一技術(shù)已有幾十年的歷史,現(xiàn)已基本成熟,并形成諸如工廠化生產(chǎn)蘭花這樣產(chǎn)值巨大的工業(yè)生產(chǎn)體系。材料二植物的脫病毒技術(shù)是微繁殖的一個(gè)分支,植物病毒嚴(yán)重地影響著農(nóng)業(yè)生產(chǎn),對(duì)于無性繁殖的植株來說,一旦感染上病毒就會(huì)代代相傳,日趨嚴(yán)重。但在莖尖分生組織中,細(xì)胞繁殖十分迅速,病毒還未侵入,因此就成了植物體相對(duì)無病毒的特殊區(qū)域。閱讀上述材料請(qǐng)回答:(1)利用微繁殖技術(shù)繁殖植物的方法稱為_。(2)利用微繁殖技術(shù)繁殖植物的優(yōu)點(diǎn)是_。(3)若要進(jìn)行蘭花無病毒植株的培育,首先要選擇外植體,選擇對(duì)象為蘭花的_。(4)對(duì)外植體進(jìn)行消毒用_、_??朔庵搀w培養(yǎng)過程中的_是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。(5)探索愈傷組織誘導(dǎo)和分化的條件需要做大量的工作。實(shí)踐表明在MS培養(yǎng)基上添加激素的_、_、_、_等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。另外不同的植物對(duì)各種環(huán)境條件的要求往往不同,除上述因素外,_、_、_等也影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。【審題導(dǎo)析】【精講精析】植物組織培養(yǎng)是人工快速繁殖植物個(gè)體的方法,不受自然環(huán)境條件的影響,可進(jìn)行大規(guī)模的工廠化生產(chǎn)。利用植物的莖尖等無毒區(qū)域作為外植體,經(jīng)過無菌操作,可獲得無病毒植株。培養(yǎng)過程中根據(jù)需要配制不同的培養(yǎng)基來滿足外植體的需求,除培養(yǎng)基外,溫度、酸堿度、光照等也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。【答案】(1)植物的組織培養(yǎng)(2)繁殖速度快、周期短、不受季節(jié)氣候、自然災(zāi)害等因素的影響,并可實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)(3)莖尖分生組織(4)體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的次氯酸鈉溶液污染問題(5)種類濃度使用的先后順序用量比例酸堿度溫度光照影響脫毒的因素(1)母體材料病毒侵染的程度。(2)起始培養(yǎng)的莖尖大小。(3)離體莖尖大小對(duì)馬鈴薯脫毒效果的影響。(4)外植體的生理狀態(tài)。植物種苗脫毒成敗的關(guān)鍵是()A培養(yǎng)基營養(yǎng)是否全面B培養(yǎng)條件是否適宜C接種操作是否正確D無菌操作及是否取得沒有侵入病毒的分生區(qū)細(xì)胞【解析】要使種苗脫毒成功,首先外植體不能帶毒,其次要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作,防止病毒感染?!敬鸢浮緿1關(guān)于病毒在植物體內(nèi)擴(kuò)散途徑最準(zhǔn)確的描述是()A導(dǎo)管B篩管C導(dǎo)管和篩管 D維管束和胞間連絲【解析】病毒在植物體內(nèi)的擴(kuò)散途徑是維管束和細(xì)胞壁間的胞間連絲。導(dǎo)管和篩管只是維管束的組成部分?!敬鸢浮緿2植物種苗脫毒中的“脫毒”是指()A脫去病毒B脫去真菌、細(xì)菌C脫去所有病原微生物D以上說法都不對(duì)【解析】病毒、細(xì)菌、真菌等病原體都能導(dǎo)致農(nóng)作物產(chǎn)量降低、品種退化。種苗脫毒是指清除所有有害的病原體?!敬鸢浮緾3“種子銀行”獲得一批珍貴的種子,后來發(fā)現(xiàn)它們已經(jīng)感染病毒。若要進(jìn)行脫毒,應(yīng)選擇_作為外植體,利用_技術(shù)獲得試管苗即可。
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