影響酶活力的因素

酶作用的動(dòng)力學(xué)觀察一、目的和要求1了解溫度，PH值對(duì)酶活性的影響。2了解酶促反應(yīng)的激活與抑制二、實(shí)驗(yàn)原理酶，有的是單純蛋白質(zhì)，有的是結(jié)合蛋白質(zhì)，因此，凡是能夠引起蛋白質(zhì)變性的因素，都可以使酶喪失活性，溫度，PH值，激活劑和抑制劑對(duì)酶的活性都有顯著的影響。酶活性通常是通過(guò)測(cè)定酶促反應(yīng)的底物或產(chǎn)物量的變化來(lái)進(jìn)行觀察。本實(shí)驗(yàn)用唾液淀粉酶為材料來(lái)觀察酶活性受理化因素影響的情況。淀粉在該酶的催化作用下會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而出現(xiàn)不同程度的水解，從而得到各種糊精乃至麥芽糖、少量葡萄糖等水解產(chǎn)物。碘液能指示淀粉的水解程度：淀粉 糊精 麥芽糖 + 少量葡萄糖加碘后： 藍(lán)色 紫紅色、暗褐色或紅色等 棕黃色（碘本身顏色）淀粉遇碘可呈紫色、暗褐色與紅色，而麥芽糖與葡萄糖遇碘則不呈顏色反應(yīng)，僅顯示碘液的原色。1溫度對(duì)酶活性的影響酶的催化作用受溫度的影響很大，一方面與一般化學(xué)反應(yīng)一樣，酶促反應(yīng)速度隨著溫度的升高而增大。當(dāng)溫度升高到一定程度時(shí)，酶促反應(yīng)的速度達(dá)到最大值。此時(shí)的溫度稱為該酶的最適溫度。另一方面酶是一種蛋白質(zhì)，溫度過(guò)高會(huì)引起蛋白質(zhì)變性，導(dǎo)致酶的失活，因此，反應(yīng)速度達(dá)到最大值以后，隨著溫度的升高，反應(yīng)速度反而逐漸下降，以至完全停止反應(yīng)。2PH值對(duì)酶活性的影響酶的活性受環(huán)境PH的影響極為顯著。通常酶只有在一定的PH范圍內(nèi)才表現(xiàn)活性，一種酶表現(xiàn)活性最強(qiáng)時(shí)的PH值，稱為該酶的最適PH，偏離最適PH時(shí)酶的活性逐漸降低，偏離越遠(yuǎn)，其活性越低，不同的酶最適PH不同，例如，胃蛋白酶的最適PH為1。252。5，淀粉酶的最適PH為6。8，但是酶的最適PH還受底物性質(zhì)和緩沖液性質(zhì)的影響，在磷酸緩沖液中，淀粉酶的最適PH為6。46。6。3酶的激活劑和抑制劑酶的活性受某些物質(zhì)的影響，有些物質(zhì)能使酶的活性增加，稱為酶的激活劑；有些物質(zhì)能使酶的活性降低，稱為酶的抑制劑，例如，氯化鈉為唾液淀粉酶的激活劑，硫酸銅為抑制劑，激活劑和抑制劑通常是具有特異性的。三、試劑和器材1試劑（1）1淀粉溶液（2）PH5。0、5。8、6。6、7。4、8。0的磷酸氫二鈉一檸檬酸緩沖液。（3）自制唾液淀粉酶（見(jiàn)實(shí)驗(yàn)一）（4）碘化鉀碘液：將碘化鉀20克及碘10克溶于100毫升蒸餾水中，用時(shí)稀釋10倍。（5）1氯化鈉溶液（6）2硫酸銅溶液2器材（同實(shí)驗(yàn)一）。四操作方法1溫度對(duì)唾液淀粉酶活性的影響 取三支試管，編號(hào)，按下表操作 試管號(hào)試劑1231淀粉溶液（滴）555PH6.6緩沖液（滴）101010自制唾液淀粉酶溶液（滴）55煮沸過(guò)的唾液淀粉酶溶液（滴）5混勻，1號(hào)管放入冰水中，2，3號(hào)管放置37恒溫水浴中保溫，10分鐘后三管同時(shí)取出各加碘試劑1滴，搖勻；觀察各管顏色有何不同，解釋之。2PH值對(duì)唾液淀粉酶活性的影響取5支試管，編號(hào)，按下表操作。 試管試劑123451淀粉溶液（滴）55555緩沖液（滴）PH5.010PH5.810PH6.610PH7.410PH8.010自制唾液淀粉酶溶液（滴）55555混勻，置37水浴箱中保溫，10分鐘后取出碘試劑（滴）11111搖勻，觀察各管顏色有何不同，解釋這種現(xiàn)象。3抑制劑和激活劑對(duì)唾液淀粉酶活性的影響取三支試管，編號(hào)，按下表操作。 試管試劑1231淀粉溶液（滴） 5 55PH6.6緩沖液（滴） 10 10101氯化鈉溶液（滴） 4 /2硫酸銅溶液（滴） /