血脂檢測方法及臨床意義.ppt

血脂及血漿脂蛋白測定,血脂是血漿中的中性脂肪（TG和TC）和類脂（磷脂、糖脂、固醇、類固醇）的總稱。 TG參與人體內(nèi)能量代謝，而膽固醇主要用于合成細胞膜性物質(zhì)、類固醇激素和膽汁酸,血漿脂蛋白的分類,1、乳糜微粒 2、極低密度脂蛋白 3、低密度脂蛋白 4、高密度脂蛋白 在病理狀態(tài)下，在VLDL和LDL之間出現(xiàn)中間密度脂蛋白（IDL）。,顆粒依次變小,血漿脂蛋白的組成與結(jié)構(gòu),載脂蛋白,脂蛋白的蛋白部分稱為載脂蛋白，具有結(jié)合與轉(zhuǎn)運脂質(zhì)及穩(wěn)定脂蛋白結(jié)構(gòu)的功能,血漿脂蛋白的代謝,甘油三酯的代謝途徑,膽固醇代謝途徑,膽固醇逆轉(zhuǎn)運途徑,高脂蛋白血癥WHO分型,引起繼發(fā)性高脂血癥的病因,1 、糖尿病 常表現(xiàn)為IV型高脂蛋白血癥。（胰島素的缺乏，不僅促使肝臟生成VLDL增加，而且因LPL活性降低，導致VLDL清除減少，主要表現(xiàn)為血清TG、VLDL水平升高，TG嚴重升高者有發(fā)生急性胰腺炎的危險性。） 2、甲減 常表現(xiàn)為IIa或IIb型高脂蛋白血癥患者血TC水平升高可同時血TG水平升高（LPL活力降低，IDL代謝障礙、LDL受體功能下降、血漿LDL清除減慢等） 3、腎臟疾病 腎病綜合征時的高脂蛋白血癥由脂蛋白降解障礙和合成過多雙重機制引起。,高脂蛋白血癥的因素,4、藥物：降壓藥，利尿劑，受體阻滯劑可TG 和HDL 長期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素治療可使TG、TC升高 5、其他：肝膽系統(tǒng)疾病、胰腺炎、長期過量飲酒,低脂蛋白血癥表現(xiàn),1、家族性低-脂蛋白血癥 （肝臟LDL受體上調(diào)，伴膽汁酸過度合成，使血漿中VLDL在轉(zhuǎn)化為LDL前已被肝臟分解代謝。） 2、-脂蛋白缺乏血癥 （ApoB合成分泌缺陷，使含ApoB的脂蛋白如CM、VLDL、LDL合成代謝障礙，伴隨脂肪吸收和代謝紊亂，血漿TC也非常低）,血脂檢測方法及臨床意義,總膽固醇(TC) 甘油三酯(TG) 高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C) 低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C) 載脂蛋白A1(ApoA1) 載脂蛋白B(ApoB),總膽固醇（TC）,化學測定法 L-B（ALBK）和Zak法 ALBK（美國CDC的脂類標準化實驗室協(xié)同有關(guān)學術(shù)組織對Abell法作了評價和實驗條件最適化）采用正己烷抽提，L-B顯色 Abell法（血清加入醇溶性氫氧化鉀，使膽固醇從脂蛋白中分離出來，同時使膽固醇酯加水分解成游離膽固醇，加石油醚振搖、抽提，使膽固醇移入石油醚層，分離并取一定量的石油醚層，蒸發(fā)至干，再進行Liebermann-Burchard 顯色反應(yīng)，620nm比色定量。該法可用于基本功訓練及組織細胞膽固醇的提取定量。 ） 酶法 CEH-COD-PAP法（優(yōu)點：靈敏度，精確度，線性范圍寬。缺點：1.膽固醇酯酶對膽固醇酯水解不完全2.表面活性劑吐溫-40干擾酯酶的作用3.受還原性物質(zhì)影響如尿酸，膽紅素，VC）,CEH-COD-PAP法原理,用膽固醇酯酶水解膽固醇酯生成脂肪酸和膽固醇，膽固醇被膽固醇氧化酶氧化生成4-膽淄烯酮和過氧化氫，然后在過氧化物酶催化下，H2O2與4-氨基安替比林及酚結(jié)合，生成紅色醌亞胺。醌亞胺的最大吸收峰在500nm左右，吸光度與標本中的膽固醇含量成正比。反應(yīng)方程式如下： 膽固醇酯+H2O 膽固醇+游離脂肪酸 膽固醇+O24-膽甾烯酮+H2O2 2H2O2+4-氨基安替比林+酚醌亞胺,CEH,COD,POD,血清膽固醇參考范圍,TC5.20mmol/L 邊緣升高：5.235.69mmol/L 升高：5.72mmol/L,臨床意義,TC除了作為高膽固醇血癥的診斷指標之外，不能作為其他任何疾病的診斷指標，對于動脈粥樣硬化和冠心病而言，TC是一個明確的危險因子，與冠心病的發(fā)病率呈正相關(guān)。 影響TC水平的因素：1、年齡與性別，(上升)2、長期高膽固醇、高飽和脂肪酸、高熱量的飲食3、遺傳4、缺少運動，精神緊張等,相關(guān)疾病,高TC血癥有原發(fā)和繼發(fā)兩類，原發(fā)的如家族性高膽固醇血癥，家族性apoB缺陷癥，多源性高TC，混合性高脂蛋白血癥等，繼發(fā)的見于腎病綜合征，甲減，糖尿病，妊娠等。 低TC血癥原發(fā)和繼發(fā)，原發(fā)如家族性無或低脂蛋白血癥，繼發(fā)如甲亢，營養(yǎng)不良，慢性消耗性疾病等。,血清甘油三酯測定,酶法測定 磷酸甘油氧化酶法（靈敏度高，試劑穩(wěn)定，線性范圍比較寬） 乳酸脫氫酶法（結(jié)果準確，靈敏度低，試劑不穩(wěn)定） 甘油氧化酶法（直接測定甘油的方法）,磷酸甘油氧化酶法原理,用脂蛋白酯酶（LPL）使血清中TG水解成脂肪酸和甘油，甘油激酶（GK）及三磷酸腺苷（ATP）將甘油磷酸化，以磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化3-磷酸甘油（G-3-P）產(chǎn)生H2O2，最后以Trinder反應(yīng)顯色，A500nm的值與TG濃度成正比。 TG+H2O甘油+脂肪酸 甘油+ATPG-3-P+ADP G-3-P+O2磷酸二羥丙酮+H2O2 H202+4-AAP+4-氯酚苯醌亞胺非那腙+H2O2,甘油三酯臨床意義,原發(fā)性高TG血癥多有遺傳因素，包括家族性高TG血癥與家族性型高脂蛋白血癥等。繼發(fā)性高TG血癥見于糖尿病，糖原累積病，甲減，腎病綜合征，妊娠，口服避孕藥，酗酒等。富含TG的脂蛋白是冠心病的獨立的危險因子，TG增加表明患者存在代謝綜合征，需進行治療。甘油三酯降低很少見，甲亢，腎上腺皮質(zhì)功能減退和肝功能嚴重損傷時可以見到甘油三酯降低。,甘油三酯的參考范圍,TG1.70mmol/L 升高：1.70mmol/L,血清脂蛋白測定,HDL-C測定 LDL-C測定,HDL-C測定方法及原理,HDL直接測定法分三類 1、聚乙二醇/抗體包裹法 2、酶修飾法 3、選擇性抑制法（國內(nèi)應(yīng)用最多）,選擇性抑制法原理,分兩步：第一試劑用聚陰離子及分散型表面活性劑（反應(yīng)抑制劑），后者與LDL、VLDL、CM表面的疏水基團有高度親和力，吸附在這些脂蛋白表面形成掩蔽層，但不發(fā)生沉淀，能抑制這類脂蛋白中的膽固醇與酶試劑反應(yīng)。第二試劑含膽固醇測定酶及具有對HDL表面的親水基團有親和力的表面活性劑（反應(yīng)促進劑），使酶與HDL中的膽固醇起反應(yīng),HDL臨床意義,HDL-C與冠心病發(fā)病呈負相關(guān)，HDL-C低于0.9mmol/L是冠心病危險因素。HDL-C大于1.55mmol/L被認為是冠心病的“負”危險因素。 HDL-C降低多見于腦血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。高TG血癥往往伴以低HDL-C，肥胖者的HDL-C也多偏低。吸煙減低，適量飲酒、長期體力勞動和運動會使HDL-C升高。,HDL-C參考范圍,HDL-C1.04mmol/L 減低：0.91mmol/L,LDL測定方法及原理,直接勻相法 一類是以-環(huán)糊精、硫酸葡聚糖、聚氧乙烯-聚氧丙烯封閉共聚多醚（POE-POP），抑制非LDL脂蛋白以膽固醇酯酶和膽固醇氧化酶的反應(yīng)（選擇性抑制），從而使LDL-C被酶水解并測定。 另一類是以不同的表面活性劑的雙試劑使非LDL-C與LDL-C分兩步水解，因先消除非LDL-C而被稱為消除法，（目前應(yīng)用較廣的）,LDL臨床意義,LDL-C增高是動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的主要脂類危險因素。由于TC水平同時也受HDL-C水平影響，所以最好以LDL-C代替TC作為冠心病危險因素指標。,LDL-C的參考范圍,LDL-C3.12mmol/L 邊緣升高：3.153.61mmol/L 升高：3.64mmol/L,血清載脂蛋白測定,免疫散射比濁法 免疫透射比濁法,臨床意義,ApoA1是HDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白，ApoB是LDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白，因此，可以反映HDL/LDL的含量。在某些病理情況下，ApoA1與HDL和ApoB與LDL并非成正相關(guān)，同時測定載脂蛋白和脂蛋白對病理發(fā)生狀態(tài)的分析很有幫助。冠心病、腎病綜合征、糖尿病等都有ApoA1下降和ApoB升高。臨床上常將ApoA1和ApoB比值作為冠心病的危險指標。,載脂蛋白參考值,ApoA1：1.001.5g/L ApoB ：0.81.00g/L,糖的來源與去路,葡萄糖的測定,葡萄糖氧化酶法（首選方法） 己糖激酶法 葡萄糖脫氫酶法,葡萄糖氧化酶法原理,葡萄糖氧化酶（GOD）將葡萄糖水解為葡萄糖酸和過氧化氫，后者在過氧化物酶（POD）和色素原性氧受體存在下，將過氧化氫分解為水和氧，同時使色素原性氧受體4-氨基安替比林和酚去氫縮合為紅色醌類化合物，即Trider反應(yīng)。其色澤深淺在一定范圍內(nèi)與葡萄糖濃度成正比。 葡萄糖+O2+H2O葡萄糖酸內(nèi)酯+H2O2 2H2O2+4-氨基安替比林+酚紅色醌類化合物,血糖的臨床意義,生理性或暫時性增高：餐后，攝入高糖飲食，情緒激動等 病理性高血糖：糖尿病甲亢，腎上腺皮質(zhì)功能亢進等應(yīng)激性高血糖，如顱腦損傷，顱內(nèi)壓增高等脫水引起的血液濃縮，如嘔吐、腹瀉、高熱等嚴重的肝硬化不能使糖轉(zhuǎn)化為肝糖原儲存胰腺病變,血糖的臨床意義,生理性或暫時性低血糖 饑餓和劇烈運動等 病理性低血糖 可見于胰島細胞增生或腫瘤引起的胰島素分泌過多、嚴重肝病不能調(diào)節(jié)血糖。 藥物的影響血糖升高的藥物：口服避孕藥，兒茶酚胺，咖啡因，甲狀腺素，腎上腺素等血糖降低的藥物：降糖藥，酒精，普萘洛爾等,血糖參考值,成人：3.95.9mmol/L,糖耐量實驗,口服葡萄糖耐量試驗 適應(yīng)癥： 空腹血糖水平在臨界值（67mmol/L）而又疑為糖尿病患者 空腹或餐后血糖正常，但有發(fā)展為糖尿病可能的人群 以前耐量試驗異常的人群 妊娠性糖尿病的診斷 臨床上出現(xiàn)腎病，神經(jīng)病變，視網(wǎng)膜病無法給出解釋的,WHO標準化的OGTT,1.實驗前三天，受試者每日食物中糖含量應(yīng)不低于150g，且維持正?；顒?。 2.影響藥物應(yīng)在三天前停用，空腹10-16小時。 3