自身抗體的應(yīng)用及研究進(jìn)展.ppt

自身抗體的應(yīng)用及研究進(jìn)展,全自動(dòng)自身抗體分析儀,自動(dòng)化檢測(cè) 檢測(cè)定量化 單個(gè)項(xiàng)目隨時(shí)檢測(cè) 多個(gè)項(xiàng)目同時(shí)檢測(cè) 45-90分鐘報(bào)告結(jié)果 原廠質(zhì)控和校正血清 精確溫度調(diào)控系統(tǒng) 五點(diǎn)定標(biāo)、三重檢測(cè),風(fēng)濕病的實(shí)驗(yàn)室診斷,血清學(xué)檢查 自身抗體特異性 非特異的免疫相關(guān)指標(biāo) 滑液分析 一般的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目,常見(jiàn)的自身抗體及其檢測(cè)方法,(1),(2),常見(jiàn)的自身抗體及其檢測(cè)方法,抗ku抗體（ku),抗mi抗體（mi-2）,抗pm-scl抗體,抗jo-1抗體（jo-1）,多發(fā)性肌炎、皮肌炎,抗線粒體抗體m2型（ama-m2）,原發(fā)性膽汁性肝硬化,抗nrnp抗體（u1-snrnp）,混合性結(jié)締組織?。╩ctd）,抗scl-70抗體（scl-70）,抗著絲點(diǎn)b抗體（cenp-b）,系統(tǒng)性硬化,抗ssb/la抗體,抗ssa/r052抗體,抗ss-a/r060抗體,干燥綜合征/系統(tǒng)性紅斑狼瘡,抗核糖體p蛋白（po）,抗增殖細(xì)胞核抗原抗體（pcna),抗sm抗體,抗組蛋白抗體,抗核小體抗體,抗雙鏈dna抗體igg抗體,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,項(xiàng) 目 名 稱,疾 病,ana譜17項(xiàng)（免疫印跡法）,(3),常見(jiàn)的自身抗體及其檢測(cè)方法,(一)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（ra）,類風(fēng)濕因子（rf） 早期診斷的系列指標(biāo) 抗ra33/36抗體 抗核周因子（apf） 抗角蛋白抗體（aka） 抗sa抗體 抗環(huán)瓜氨酸抗體（抗ccp）,抗角蛋白抗體（aka）,抗角蛋白抗體(aka)，1979年young等發(fā)現(xiàn)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)血清中有一種能與鼠食管角質(zhì)層反應(yīng)的抗體，并對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)具有特異性，命名為aka。1989年vincent等提出應(yīng)將aka更名為抗角質(zhì)層抗體更為恰當(dāng)。aka可以在ra發(fā)病以前若干年出現(xiàn)，所以有早期診斷價(jià)值。 aka檢測(cè)方法：取6周齡雄性wistar大鼠食管中下1/3段作為抗原，做冰凍切片，厚4 m5 m-70 保存?zhèn)溆?。?20稀釋血清，濕盒內(nèi)37孵育30分鐘，pbs漂洗，吹干，加120稀釋的熒光素標(biāo)記羊抗人igg，37孵育30分鐘，漂洗，吹干，緩沖甘油封片熒光顯微鏡下觀察。 判定標(biāo)準(zhǔn)：以角質(zhì)層出現(xiàn)典型的規(guī)則的線狀或板層狀熒光為陽(yáng)性。,gene filaggrin,類風(fēng)濕因子（rf）,抗人igg分子fc片段上抗原決定簇的特異性抗體,分為igm、g、a、e型 rf在ra中的陽(yáng)性率為70%，是診斷ra的重要標(biāo)準(zhǔn)之一 rf含量與病情的活動(dòng)性和嚴(yán)重性成正比，持續(xù)高滴度的rf常提示ra病情活動(dòng)，骨侵蝕發(fā)生率高，?？砂橛衅は陆Y(jié)節(jié)或血管炎等關(guān)節(jié)外表現(xiàn)，提示預(yù)后不良。,類風(fēng)濕因子（rf）,rf并非ra獨(dú)有的特異性抗體，對(duì)ra的診斷不具特異性 sle 30% ss 70%90% ssc 20%30% mctd 50%60% 非風(fēng)濕性疾病 5%以下的正常人 rf陽(yáng)性不等于一定就是ra rf陰性也不等于一定就不是ra,rf常用檢測(cè)方法,rf 1：40陽(yáng)性 乳膠凝集法（測(cè)igm-rf） rf 256 iu/ml 雙抗夾心elisa法(測(cè)總rf） rf-igg 110iu/ml -iga 18iu/ml elisa法 -igm 200iu/ml,ra早期診斷的系列指標(biāo),敏感性 特異性 抗ra33/36抗體 35.8% 99.6% apf 40%-80% 70%-90% aka 40%-55% 85%-95% 抗sa抗體 40%-60% 98.6% 抗ccp 46%-70% 96%,抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗ccp）,瓜氨酸是ra血清抗聚角蛋白微絲蛋白相關(guān) 抗體的主要抗原決定簇 對(duì)ra診斷具有高度特異性（98%） 可在ra早期出現(xiàn) 預(yù)測(cè)早期關(guān)節(jié)炎發(fā)展為ra ra關(guān)節(jié)侵蝕破壞的早期識(shí)別及預(yù)測(cè),(二)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（sle）,是一種臨床表現(xiàn)有多系統(tǒng)損害癥狀的慢性系統(tǒng)性自身免疫性疾病，其血清有以抗核抗體為主的大量不同的自身抗體 自身抗體 （1）抗核抗體譜ana、抗ds-dna、抗ena抗體 （2）抗磷脂抗體 （3）抗組織細(xì)胞抗體抗rbc抗體 抗血小板相關(guān)抗體 抗神經(jīng)元抗體 （4）其它rf、p-anca,抗核抗體（ana）,定義以細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)為抗原的抗體 臨床意義 sle的篩查抗體: 95%陽(yáng)性，但滴度與sle活動(dòng)性無(wú)相關(guān) 陰性基本可排除sle 陽(yáng)性并非sle特異 陽(yáng)性并非風(fēng)濕病特異: 風(fēng)濕?。╯le、ssc、ss、ra) 非風(fēng)濕性疾?。ǜ腥?、慢肝、肺纖維化、腫瘤） 服用某些藥物（inh、苯妥英鈉、肼苯達(dá)嗪、普魯卡因酰胺）,抗核抗體（ana）,方法間接免疫熒光法 結(jié)果判斷: 滴度1：100為陽(yáng)性 常見(jiàn)核型5種 不同核型的臨床意義不同,核膜型 與抗ds-dna有關(guān)， 多見(jiàn)于sle，特別是有腎炎者,均質(zhì)型 與aha（抗組蛋白抗體）、抗dna有關(guān)，引起le形成主要見(jiàn)于sle、藥物性狼瘡,斑點(diǎn)型 與抗ena有關(guān)，應(yīng)進(jìn)一步查特異性抗體,核仁型 多見(jiàn)于硬皮病,著絲點(diǎn)型 多見(jiàn)于crest綜合征,ana常見(jiàn)五種核型及臨床意義,核膜型與抗ds-dna有關(guān)， 多見(jiàn)于sle，特別是有腎炎者 均質(zhì)型與aha、抗dna有關(guān)，引起le形成 主要見(jiàn)于sle、藥物性狼瘡 斑點(diǎn)型與抗ena有關(guān)，應(yīng)進(jìn)一步查特異性抗體 核仁型多見(jiàn)于硬皮病 著絲點(diǎn)型多見(jiàn)于crest綜合征,ana檢測(cè)方法,間接免疫熒光法 印跡法 elisa法,抗核抗體譜（anas）,定義：以細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)為抗原的抗體 抗dna抗體抗ss-dna 抗ds-dna 抗組蛋白抗體h1，h2a，h2b，h3，h4 抗非組蛋白抗體抗ena抗體 抗著絲點(diǎn)抗體 抗核仁抗體 其它線粒體、溶酶體、高爾基體等,抗ds-dna抗體,臨床意義 對(duì)sle的診斷有較高特異性 滴度與sle活動(dòng)相關(guān)，可作為病情監(jiān)測(cè)及療效觀察指標(biāo) 與sle腎損害有關(guān) 檢測(cè)方法 放免法（farr)敏感，有利于早期預(yù)測(cè) 檢測(cè)高親合力的抗ds-dna 間接免疫熒光法(if)特異 elisa可檢測(cè)低親合力的抗ds-dna 有助于中樞狼瘡的病情監(jiān)測(cè) 金標(biāo)免疫斑點(diǎn)法,抗ena抗體,抗rnp mctd100%陽(yáng)性，且滴度高 雙手腫脹，雷諾現(xiàn)象，肌炎，指（趾）端硬化 腎臟保護(hù)性抗體？ 抗sm sle的標(biāo)記性抗體，陽(yáng)性率30% 有助于早期、不典型及治療緩解后sle的回顧性診斷 抗sm陽(yáng)性一定伴抗rnp陽(yáng)性，但抗rnp陽(yáng)性可單獨(dú)存在 抗ssa 原發(fā)性ss：60-75% sle: 40-50% 與皮損、光過(guò)敏、白細(xì)胞減少、淋巴結(jié)腫大、 血管炎、紫癜相關(guān) 可造成新生兒狼瘡、嬰兒心臟傳導(dǎo)阻滯 抗ssb 原發(fā)性ss：40%，較抗ssa更特異 其它c(diǎn)td伴抗ssb者常伴繼發(fā)性ss,抗ena抗體,抗scl-70 硬皮病標(biāo)記性抗體 抗jo-1 多肌炎/皮肌炎標(biāo)記性抗體 抗rib 胞漿抗原核糖體位于胞漿內(nèi) 臨床意義 是sle的又一特異性抗體，陽(yáng)性率10-20% 多見(jiàn)于sle活動(dòng)期 與抗ds-dna抗體的消長(zhǎng)相平行 但不會(huì)隨病情緩解立即消失 可持續(xù)1-2年后才轉(zhuǎn)陰,抗核小體抗體（anua）,核小體是細(xì)胞染色質(zhì)中的一種成分，它是由dna和組蛋白以特殊的方式相連而組成，在sle的誘導(dǎo)和致病中起重要作用 對(duì)sle的早期診斷有重要意義 比抗ds-dna、抗組蛋白抗體更早出現(xiàn) 陽(yáng)性率：50%90% 特異性98%,(三)皮肌炎/多發(fā)性肌炎（pm/dm）,免疫學(xué)檢查 ana ena抗jo-1陽(yáng)性 其它檢查肌酶譜 肌酸磷酸激酶（cpk）: mm-心肌和骨骼肌 mb-心肌 bb-平滑肌和腦內(nèi) 乳酸脫氫酶（ldh） 谷草轉(zhuǎn)氨酶（ast） 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alt） 堿性磷酸酶（alp）,(四)干燥綜合征（ss）,ana陽(yáng)性率40%70% ena抗ssa抗體陽(yáng)性率70%96% 抗ssb抗體陽(yáng)性率50%87% 抗-fordrin對(duì)于pss或sss的診斷有一 定意義，但特異性和敏感性并不理想。 rf陽(yáng)性率75%100% 高球蛋白血癥 wbc下降,(五)系統(tǒng)性硬化病（pss）,ana陽(yáng)性率50%55% ena抗scl-70陽(yáng)性率15%40% 抗著絲點(diǎn)抗體(aca)陽(yáng)性,(六)混合性結(jié)締組織?。╩ctd）,ana陽(yáng)性 ena抗rnp高滴度陽(yáng)性,（七）血管炎,抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（anca）,anca的臨床意義,c-anca和pr3-anca 對(duì)韋格納肉芽腫有高度特異性（95%），敏感性80% 與病情活動(dòng)性相關(guān) 常作為判斷藥物療效和病情復(fù)發(fā)的指標(biāo) p-anca和mpo-anca 不如c-anca具有診斷特異性 陽(yáng)性者血管炎程度較高，其滴度也與病情活動(dòng)相關(guān) 主要與顯微鏡下多血管炎 壞死性新月體腎小球腎炎 變應(yīng)性肉芽腫性血管炎 相關(guān),（八）抗磷脂抗體綜合征（aps）,是一種非炎癥性自身免疫病，臨床上以動(dòng)/靜脈血栓形成、習(xí)慣性流產(chǎn)和血小板減少等癥狀為表現(xiàn)，血清中存在抗磷脂抗體 血清學(xué)檢查 抗心磷脂抗體（ aca ）igg、igm、iga（elisa） 抗2糖蛋白1抗體（抗2-gp1) 狼瘡抗凝物（la）凝血酶原時(shí)間（pt） 激活的部分凝血活酶時(shí)間（aptt） 白陶土凝集時(shí)間（kct） 蛇毒試驗(yàn)（rvvt）,抗磷脂抗體,抗2-gp1抗體比la和aca在aps患者中更具有特異性，是導(dǎo)致aps的主要抗體 抗2gp1抗體只出現(xiàn)于自身免疫性疾病, 而aca也可出現(xiàn)于一些感染性疾病, 如梅毒、aids、肝炎、結(jié)核等,（九）自身免疫性肝病,抗核抗體（ana） 抗肝細(xì)胞膜抗體(抗lma) 抗平滑肌抗體（asma） 抗肝腎微粒體抗體（抗lkm抗體） 抗肝-胰抗體(抗lp抗體) 抗可溶性肝細(xì)胞抗體（抗sla） 抗線粒體抗體（ama）,自身免疫性肝炎（aih） ana 抗平滑肌抗體（sma） 抗肝腎微粒體抗體 原發(fā)性膽汁性肝硬化（pbc） 抗線粒體抗體（ama）m2 原發(fā)性硬化性膽管炎 anca陽(yáng)性,自身免疫性肝病,風(fēng)濕病的實(shí)驗(yàn)室診斷,自身抗體特異性 非特異的免疫相關(guān)指標(biāo) 一般的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目 血常規(guī) 尿常規(guī) 肝功能 腎功能等,注意事項(xiàng),選擇做哪些檢查項(xiàng)目時(shí)要重點(diǎn)突出 避免“大撒網(wǎng)” 解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)考慮以下幾個(gè)問(wèn)題 實(shí)驗(yàn)方法本身的敏感性、特異性、 可靠性及實(shí)驗(yàn)室之間的差異性 結(jié)合臨床 應(yīng)把與之相關(guān)的一組實(shí)驗(yàn)結(jié)果放在一起考慮,全國(guó)自身抗體檢測(cè)質(zhì)量控制總結(jié),由中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病分會(huì)計(jì)劃 參與質(zhì)控的醫(yī)院和檢測(cè)的項(xiàng)目逐年增多，多為三甲醫(yī)院,自身抗體的檢測(cè)對(duì)于風(fēng)濕