植物總多酚常用的含量測定方法有Folin

1、植物總多酚常用的含量測定方法有Folin- Ciocalteu 法, 酒石酸亞鐵法, 普魯士藍法和高錳酸鉀法等。1.福林試液的配制： 取鎢酸鈉10g與鉬酸鈉2.5g，加水70ml、85磷酸5ml與鹽酸10ml,置200ml燒瓶中,緩緩加熱回流10小時，放冷，再加硫酸鋰15g、水5ml與溴滴定液1滴煮沸約15分鐘，至溴除盡，放冷至室溫，加水使成100ml。 濾過,濾液作為貯備液。置棕色瓶中,于冰箱中保存。臨用前，取貯備液2.5ml，加水稀釋至10ml，搖勻，即得。 用10mL乙醇溶液溶解0.5000g沒食子酸，定容至100mL，分別移取3.0mL到100mL容量瓶中，用蒸餾水定容。加入福林薛卡多

2、（Folin-Ciocalteu）試劑顯色，在765nm波長下測定吸光度。每個濃度做三個平行試驗，取平均值，根據(jù)標準曲線。 取樣品溶液1mL，按照上述的制作方法，測定其吸光度，每個樣品做三個平行試驗，取平均值，計算樣品中的多酚含量。反應原理為酚類化合物在堿性條件下可以將鎢鉬酸還原，生成藍色的化合物，顏色的深淺與酚類化合物含量呈正相關(guān)，在波長760 nm左右有最大吸收。2. 酒石酸亞鐵比色法。其測定原理是茶多酚類物質(zhì)能與亞鐵離子形成紫藍色絡(luò)合物。用分光光度法測定其含量。 茶多酚標準溶液的配制稱取提取純品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混勻,即為每毫升含1mg提取純品的標準溶液(mg/m

3、L) 。 茶多酚的含量。茶多酚標準曲線的繪制。分別吸取茶多酚標準溶液1. 0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL 于4 個50mL 容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亞鐵溶液10mL,加入pH為7. 5的磷酸緩沖液至刻度,混勻后用1比色皿,以空白試劑作參比,于波長540nm處測定吸光度(A) ,繪制出標準曲線。實驗十七 食品中多酚類物質(zhì)的提取與含量測定一、實驗原理 多酚類物質(zhì)包括花青苷、黃酮苷、單寧等，具體又可分為若干種。多酚類物質(zhì) 含有酚羥基，有的還含有羧基，屬于極性有機化合物，常用極性溶劑提取，如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、水以及由這些溶劑按比例組成的復合溶劑。由以上溶劑直接

4、提取的多酚物質(zhì)，實質(zhì)為各種多酚的混合物（總多酚提取液），不同的原料中所含酚類物質(zhì)的種類不同，需要進一步的分離鑒定。常用的植物多酚總量的測定方法中較為普遍使用的方法有: 酒石酸亞鐵比色法、FD 法、FC 法、普魯士藍法等。其中酒石酸亞鐵分光光度比色法應用較多。 酒石酸亞鐵分光光度比色法的原理：過量的酒石酸亞鐵與提取液中多酚反應生成穩(wěn)定的紫褐色絡(luò)合物，溶液顏色的深淺與溶液中多酚含量成正比。測定總多酚時所用的標準物則需根據(jù)樣品中所含多酚的種類而定，比如測定茶葉中茶多酚含量時，兒茶酚能較好地代表茶多酚，則以兒茶酚作標準物；而測定藤茶多酚時，則以沒食子酸作標準物較合適。二、實驗材料、試劑與儀器材料：茶葉

5、；儀器：水浴鍋，分光光度計，三角瓶，容量瓶，吸管等；試劑：（1）酒石酸亞鐵溶液：稱取1.00g硫酸亞鐵（FeSO47H2O）和5.00g酒石酸鉀鈉(C4H4O6NaK4H2O）,混合后加蒸餾水溶解,定容到1000mL；（2）pH 7.5磷酸鹽緩沖液：稱取60.20g Na2HPO412H2O和5.00g NaH2PO412H2O， 混合后加蒸餾水溶解,定容到1000mL。三、操作步驟（一）標準曲線的制作或茶多酚含量經(jīng)驗值的應用 標準曲線的制作參照GB-8313-87茶茶多酚測定方法。為簡化操作，可用在一定操作條件下“吸光度值為1.00時，供試液中茶多酚的濃度為7.826 mg/mL”這一經(jīng)驗值，直接由待測液的吸光度值計算樣品中茶多酚的含量。（二）樣品總多酚的提取準確稱取1.0g磨碎并混勻的茶葉樣品于200mL三角瓶中，加入80mL沸水，并在沸水浴中保溫浸提30min，然后過濾、洗滌濾渣，將濾液合并、冷卻、加蒸餾水定容至100mL。（二）樣品多酚提取液的多酚總量測定 吸取1mL樣品多酚提取液于25mL容量瓶中，加入4mL蒸餾水和5mL酒石酸亞鐵溶液，搖勻，再用pH 7.5磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，混勻。同是以蒸餾水代替樣品提取液，加入與樣品測定同樣的試劑作空白，用0.5cm比色皿在540nm波長處測定吸光度。 四、計算式中：A5