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文檔簡介
1、. 全自動血細(xì)胞分析sop一,檢驗?zāi)康募霸?1,目的:用bc-3000 plus 全自動血細(xì)胞分析儀,在臨床和實驗室定量分析血液細(xì)胞,對人體的血液中三種有形成分(紅細(xì)胞,白細(xì)胞,血小板)的19項參數(shù)和3個直方圖進(jìn)行分析。是人體血液的基本生理病理指標(biāo)之一。白細(xì)胞計數(shù)wbc淋巴細(xì)胞計數(shù)lymph#中間細(xì)胞計數(shù)mid#中性粒細(xì)胞計數(shù)gran#淋巴細(xì)胞百分比lymph%中間細(xì)胞百分比mid%中性粒細(xì)胞百分比gran%紅細(xì)胞計數(shù)rbc血紅蛋白hgb平均紅細(xì)胞體積mcv平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量mch平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度mchc紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)rdw-cv紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差rdw-sd紅細(xì)胞壓積h
2、ct血小板計數(shù)plt平均血小板體積mpv血小板分布寬度pdw精品.血小板壓積pct白細(xì)胞分布直方圖wbc histogram紅細(xì)胞分布直方圖rbc histogram血小板分布直方圖plt histogram對患者和健康人群來講,觀察有無各種原因引起的貧血,出血和失血,目前機體有無細(xì)菌及病毒感染,可篩查出各種血液病,如白血病,血小板減少性紫癜等。 2,原理:電阻法測量的血樣先用稀釋液進(jìn)行指定比例的稀釋,用以測量wbc、rbc、plt 和hgb等參數(shù)。wbc、rbc 計數(shù)池的稀釋標(biāo)本在負(fù)壓作用下,分別通過各自的計數(shù)微孔,流入管道,通過兩個光電傳感器,在這兩個光電傳感器之間的液量就是儀器分析計數(shù)的
3、標(biāo)本量。 用阻抗法測量wbc、rbc 和plt 的體積分布和數(shù)目。電極插在液體中計數(shù)微孔的兩邊,在計數(shù)微孔的兩邊周圍建立了一個電場環(huán)境,根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì),當(dāng)有細(xì)胞通過計數(shù)微孔時,將引起阻抗的變化,阻抗變化的大小與細(xì)胞體積成正比。wbc根據(jù)體積的大小,它有多種形態(tài),由于稀釋液、溶血劑和溶血時間的不同,wbc的體積大小會發(fā)生變化。在一定的程序控制下,顯示出wbc 的三分類淋巴細(xì)胞、中間細(xì)胞(嗜酸嗜堿單核)和中性粒細(xì)胞。被稀釋的血樣加入溶血劑后,紅細(xì)胞溶解,釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶血劑結(jié)合形成復(fù)合物,用波長525nm 的單色光在wbc計數(shù)池內(nèi)測定此化合物的透過光強,用這個透過光強與空白狀
4、態(tài)的透過光強相比較,得到血紅蛋白濃度(空白狀態(tài)是指wbc計數(shù)池中只有稀釋液的狀態(tài))。二,標(biāo)本1,標(biāo)本種類:末梢血為200-300微升,靜脈血2毫升。2,采集標(biāo)本容器及添加劑:容器:末梢血為一次性朔料試管,靜脈血為真空采血管。添加劑:不同實驗使用不同的抗凝劑,不能互相代替。血常規(guī)用edta-k2抗凝。精品.3,采集方法:毛細(xì)血管采集或靜脈穿刺采集。采集時間:患者隨到隨時采集。4,標(biāo)本運送:標(biāo)本采集后,應(yīng)及時送檢。5,標(biāo)本接受:標(biāo)本的編號與化驗單上的編號要一致,清楚,正確及完整。6,準(zhǔn)備與保存:室溫靜置10-15分鐘,充分混勻后上機檢測。血液常規(guī)標(biāo)本一般保存在室溫24小時。三,設(shè)備與試劑1,設(shè)備:
5、bc-3000 plus 全自動血細(xì)胞分析儀。深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400522號。2,專用試劑: 稀釋液:m-30pd,等滲溶液,具有特定的電導(dǎo)值,為細(xì)胞計數(shù)提供穩(wěn)定的環(huán)境。作為人體血細(xì)胞計數(shù),體積測量以及白細(xì)胞分類計數(shù)時的稀釋液使用。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀,懸浮物和絮狀物。主要成份,nacl,na2so4,緩沖劑,抗菌劑。本品2-30保存期2年。開瓶后,使用溫度15-30,有效期60天。 產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400276號。 沖洗液:m-30pr, 不含蛋白酶和次氯酸鈉(nacio)等強蛋白清除劑的電解質(zhì)
6、溶液,用于儀器的進(jìn)樣孔,閥和管路系統(tǒng)的清潔和沖洗。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀,懸浮物和絮狀物。主要成份,nacl,kcl,na2so4,緩沖劑,抗菌劑和表面活性劑。本品2-30保存期2年。開瓶后,使用溫度15-30,有效期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400303號。 無氰溶血劑:m-30pcfl,能溶解紅細(xì)胞,與血紅蛋白形成復(fù)合物。用于白細(xì)胞計數(shù),白細(xì)胞分群和血紅蛋白測定。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀,懸浮物和絮狀物。主要成份,nacl,kcl,na2so4,緩沖劑,抗菌劑和表面活性劑。本品2-30保存期2年。開瓶后,使用溫度15-30,有效期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥
7、監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400274號。 e-z清洗液(酶清洗液):m-30pe,含有蛋白水解酶的電解質(zhì)溶液,能有效地清除蛋白污漬,用于儀器的進(jìn)樣器,閥和管路系統(tǒng)的清潔和沖洗。本品應(yīng)為透明液體,不得有沉淀,懸浮物和絮狀物。主要成份,nacl,緩沖劑,抗菌劑,表面活性劑,蛋白水解酶。本品2-30保存期2年。開瓶后,使用溫度15-30,有效期60天。精品.產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400303號。 探頭清潔液:m-30pp,本品為含有次氯酸鈉的電解質(zhì)溶液,用于儀器的進(jìn)樣器,的清潔和沖洗。主要成份,naoh,次氯酸鈉(nacio),表面活性劑。本品2-30保存期2年。開瓶后,使用溫度
8、15-30,有效期60天。產(chǎn)品注冊號:粵食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2400303號。四,操作步驟 1, 開機前的準(zhǔn)備: 檢查試劑(稀釋液,沖洗液,溶血劑)是否足量,有無渾濁變質(zhì)。 試劑管路連接正常否,管道有無扭結(jié)。 并倒空廢液瓶。 電源連接是否正常。 2,開機啟動: 打開儀器主機后面的電源開關(guān)。 電源指示燈燃亮,儀器內(nèi)部進(jìn)行初始化,進(jìn)行自檢。 自動沖洗內(nèi)部管路,自動測量本底。 80秒鐘后進(jìn)入計數(shù)界面。 3,本底檢查: 出現(xiàn)計數(shù)界面后,儀器自動測量本底數(shù)值顯示在屏幕上,本底結(jié)果要求: wbc0.3 rbc0.03 hgb1 plt10 如果本底沒有達(dá)到儀器的要求,儀器將會提示“本底異常”,請執(zhí)行
9、清洗或維護(hù)程序。 4,室內(nèi)質(zhì)控操作: 5,全血測量: 在計數(shù)界面下,按模式鍵,將模式設(shè)置為“全血”。 用k2edta抗凝劑作抗凝血標(biāo)本。 精品. 混勻抗凝血后,送到采樣針下,讓采樣針插入抗凝血。 按開始鍵,開始對樣本計數(shù)。 58秒后測試結(jié)果顯示在屏幕上。 按“打印”鍵,結(jié)果打印出來。 6,末梢血測量: 在計數(shù)界面下,按模式鍵,將模式設(shè)置為“預(yù)稀釋”。 按“稀釋液”,按開始鍵,用試管從采樣針下取0.7ml稀釋液。 將毛細(xì)血管采取的20l末梢血標(biāo)本,迅速注入盛有0.7ml的稀釋液的試管中,制成稀釋血樣(注意針刺得要深,用不起毛的紙巾拭去第一滴血) 制好的稀釋血樣要搖勻(注意不要劇烈震蕩,否則有可能
10、會因產(chǎn)生微小氣泡導(dǎo)致計數(shù)值不準(zhǔn)) 將預(yù)稀釋血樣放置3分鐘后,再次搖勻,放于采樣針下,按開始鍵計數(shù)。 58秒后測試結(jié)果顯示在屏幕上。 按“打印”鍵,結(jié)果打印出來。 7,關(guān)機: 每天測試完畢一定要用e-z清洗液執(zhí)行“關(guān)機”程序,等待屏幕提示“關(guān)閉電源”后關(guān)掉主機電源。wbc、rbc、hgb、hct、mcv、mch、mchc、plt、lymph#、lymph%、gran#、gran%六,結(jié)果分析與報告1,復(fù)查標(biāo)準(zhǔn):hgb凡低于80g/l,高于170g/l者應(yīng)進(jìn)行復(fù)查。wbc凡低于3*109/l或高于20*109/l者應(yīng)復(fù)查。凡直方圖有明顯異常者,必須推片染色油鏡分類。plt低于5109/l或高于35
11、109/l應(yīng)復(fù)查 2,按照儀器模式出血細(xì)胞分析檢驗報告。精品.七,參考值與臨床意義: 1. 血紅蛋白測定(hgb):120-160g/l降低:貧血、白血病、大量失血及鉤蟲病等。增高:慢性缺氧(肺氣腫和先天性心臟病等)、嚴(yán)重脫水、大面積燒傷、慢性一氧化碳中毒及真性紅細(xì)胞增多癥等時。2. 紅細(xì)胞計數(shù)(rbc):4.0-5.51012/l臨床意義同血紅蛋白,巨幼紅細(xì)胞貧血時減少更為明顯。3. 紅細(xì)胞壓積(hct):0.42-0.49增高:失水和大面積燒傷等所致的血液濃縮以及真性紅細(xì)胞增多癥時。降低:貧血及血液稀釋時。4. 紅細(xì)胞平均容積(mcv): 82-92fl用于貧血分類:增大為巨紅細(xì)胞性貧血,
12、減小為小細(xì)胞性貧血(如嚴(yán)重缺鐵性貧血)和遺傳性球型紅細(xì)胞增多癥;正常紅細(xì)胞性貧血時正常。5. 紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量(mch):27-31pg用于貧血分類:增加見于大細(xì)胞性貧血,減少見于單純小細(xì)胞性貧血和小細(xì)胞低色素貧血。6. 紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(mchg):320-360g/l大細(xì)胞性貧血正常,單純小細(xì)胞性貧血時正常,小細(xì)胞低色素性貧血時減小。貧血形態(tài)分類mcvmchmchc病因大細(xì)胞性貧血巨紅細(xì)胞性貧血,惡性貧血正細(xì)胞性貧血急性失血,急性溶血,再障,白血病單純小細(xì)胞性貧血慢性感染,炎癥,肝病,惡性腫瘤,風(fēng)濕疾病小細(xì)胞低色素性血缺鐵性,地中海性,鐵粒幼細(xì)胞性貧血7. 紅細(xì)胞分布寬度(rd
13、w): 11.5-14.5%是反映血液中紅細(xì)胞體積變異的參數(shù),以測得紅細(xì)胞體積大小的變異系數(shù)表示。rdw與mcv結(jié)合可將貧血分為小細(xì)胞均一性貧血(mcvrdw正常,如地中海貧血),小細(xì)胞不均一性貧血(mcvrdw,如缺鐵性貧血),正細(xì)胞均一性貧血(mcv,rdw均正常,常見急性失血和再生障礙性貧血),正細(xì)胞不均一性貧血(mcv正常rdw,如早期缺鐵性貧血和急性溶血性貧血),精品.大細(xì)胞均一性貧血(mcv rdw正常,如慢性再障)。大細(xì)胞不均一性貧血(mcv 和rdw均,如巨幼細(xì)胞性貧血和惡性貧血)。8. 白細(xì)胞計數(shù)(wbc): 4.0-10.0109/l增多:細(xì)菌性感染、尿毒癥、嚴(yán)重?zé)齻?、傳?/p>
14、性單核細(xì)胞增多癥、白血病和應(yīng)激狀態(tài)(急性出血和大手術(shù))等增多(妊娠后期、月經(jīng)期、飯后、劇烈運動后可有生理性增加)。 減少:病毒感染、傷害及副傷寒、瘧疾、再生障礙性貧血、極嚴(yán)重感染、放射性輻照、腫瘤化療后和非白血性白血病等。9. 白細(xì)胞分類(dc):正常參考值見下表檢測項目英文縮寫參考值中性粒細(xì)胞百分比neut %0.5-0.7淋巴細(xì)胞百分比lymph %0.2-0.4單核細(xì)胞百分比mono %0.03-0.08嗜酸性粒細(xì)胞百分比eo %0.005-0.05嗜堿性粒細(xì)胞百分比baso %0.000-0.005中性粒細(xì)胞絕對值2, neut #3.0-5.0109/l淋巴細(xì)胞絕對值lymph #1
15、.0-3.0109/l單核細(xì)胞絕對值mono #0.067-0.325109/l嗜酸性粒細(xì)胞絕對值eo #0.02-0.05109/l嗜堿性粒細(xì)胞絕對值baso #0.005-0.05109/l中性粒細(xì)胞:增多見于急性化膿性細(xì)菌感染、粒細(xì)胞白血病、急性出血、溶血、手術(shù)后和尿毒癥等;其減少見于傷寒和副傷寒、瘧疾、粒細(xì)胞缺乏癥、放射性輻照和腫瘤化療。 嗜酸性粒細(xì)胞增多見于過敏性疾病、寄生蟲病等;其減少見于傷寒和副傷寒等。嗜堿性粒細(xì)胞增多見于慢性粒細(xì)胞白血病、何杰金氏病和鉛中毒等。淋巴細(xì)胞增多見于病毒感染,其減少見于免疫缺陷病。單核細(xì)胞增多見于某些細(xì)菌感染及單核細(xì)胞白血病等。10. 血小板計數(shù)(pl
16、t):100-350109/l減少:造血功能障礙(如急生白血病和再生障礙性貧血等)、血小板破壞過多(如原發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進(jìn)和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等)及消耗增加(如dic、血栓性血小板減少性紫癜等)時。增多:急性大出血、急性溶血、真性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥和慢性粒細(xì)胞性白血病等時精品.11. 血小板平均容積(mpv):9-17fl (1)血小板數(shù)低而 mpv增高:骨髓自身正常,但外周血血小板破壞增多造成血小板降低的刺激后反應(yīng)性增生時,巨核細(xì)胞 dna倍體數(shù)及細(xì)胞大小都增加, mpv也增高。由于骨髓受抑制而造成血小板減少的病人在恢復(fù)初期 mpv也升高,這主要因外周血血小板數(shù)減低應(yīng)
17、激性地致使巨核細(xì)胞倍體數(shù)增加所致。(2)血小板數(shù)高、mpv正常:骨髓增生性疾病如血小板增多,紅細(xì)胞增多但mpv正常。(3)血小板數(shù)與mpv均下降:aids (艾滋?。┎《局苯佑绊懢藓思?xì)胞并導(dǎo)致血小板減少。大約2/3的病人血小板數(shù)降低,92%的病人mpv值下降,與骨髓受抑時的血小板狀態(tài)相似?;及l(fā)育不良性貧血的病人積壓小板數(shù)通常都降低,其 mpv值也低,但 pdw升高。當(dāng)骨髓纖維化或被脈沖瘤細(xì)胞浸潤危及正常造血時,血小板數(shù)減少,隨即 mpv值也降低。再生障礙性貧血,骨髓瘤或白血病化療后,敗血癥所致血小板沽少等骨髓受抑性疾病中,雖然仍可能有一些大血小板,但血小板的平均體積減小。(4)mpv值與血小板數(shù)都升高:反應(yīng)性血小板增多癥病人中,其 mpv值升高,因血液的流失和本內(nèi)損傷造成的急性大失血都可使血小板值上升。(5)mpv值升高而血小板正常:慢性髓細(xì)胞性白血病、骨髓纖維化、脾切除均可周到mpv升高,慢性髓細(xì)胞性白血病和骨髓纖維化主要使骨髓增生異常,兩種疾病中,血小板體積經(jīng)常增大并大小不均。外周血涂片中可出現(xiàn)大血小板。半數(shù) -型和-型珠蛋白生成障礙性貧血的患者有4種明顯的血液學(xué)改變;血小板大小改變、紅細(xì)胞大小改變、肝珠蛋白改變和對瘧原蟲抵抗力改變。其mpv值增高而血小板數(shù)正常。 12. 血小板壓積(pct):0.9-5.1%
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