發(fā)酵工藝流程

1、發(fā)酵工藝流程發(fā)酵工藝標(biāo)準(zhǔn)操作流程(SOP)一生產(chǎn)前準(zhǔn)備每次生產(chǎn)前按品種配方將所需原料稱(chēng)重準(zhǔn)備齊全,并確認(rèn)生產(chǎn)原料庫(kù)存量,保證原料庫(kù)存量足夠下次生產(chǎn)所需、二生產(chǎn)前檢查1 檢查蒸汽、壓縮空氣、冷卻水進(jìn)出的管路就是否暢通 ,所有閥門(mén)就是否良好 ,并關(guān)閉所有閥門(mén)、2檢查電路、控制柜、開(kāi)關(guān)的狀態(tài),確?？刂乒襁\(yùn)行正常、3檢查空壓機(jī)油表油表及軸承、三角帶、氣缸等就是否正常,確?？諌簷C(jī)運(yùn)行正常、4 檢查發(fā)酵罐攪拌減速機(jī)的油量及密封軸降溫水就是否正常、三總過(guò)濾器滅菌當(dāng)蒸汽總管路上的壓力為 0、2-0、25MPa 時(shí) ,打開(kāi)總過(guò)濾器進(jìn)氣閥輸入蒸汽 ,同時(shí)打開(kāi)出氣閥的跑分閥、排氣閥、排污閥 ,當(dāng)三個(gè)閥均排出蒸汽時(shí)

2、,調(diào)整進(jìn)氣閥、排污閥 ,穩(wěn)定總過(guò)濾器壓力 0、 15-0、 2MPa, 此時(shí)打開(kāi)壓力表下跑分 ,計(jì)時(shí)滅菌 2-2、 5 小時(shí)、滅菌結(jié)束后啟動(dòng)空壓機(jī) , 當(dāng)空氣輸入管道壓力大于總過(guò)濾器壓力時(shí) ,關(guān)閉蒸汽閥 ,打開(kāi)空氣閥 ,將空氣出入總過(guò)濾器 ,然后調(diào)整進(jìn)氣閥與排污閥 ,穩(wěn)定總過(guò)濾器壓力在 0、15-0、 2MPa,保持通氣在 15-20 小時(shí) ,當(dāng)出氣閥跑分與排污閥放出的空氣為干燥空氣時(shí) ,完成滅菌、四分過(guò)濾器滅菌1 當(dāng)蒸汽管路壓力為0、 2-0、25MPa 時(shí) ,打開(kāi)蒸汽過(guò)濾器的進(jìn)氣閥與排污閥,當(dāng)蒸汽管路中無(wú)蒸汽凝結(jié)液后,再將蒸汽輸入空氣管路,然后打開(kāi)分過(guò)濾器的進(jìn)氣閥、排污閥及出氣閥上的跑分

3、,當(dāng)所有閥門(mén)均有蒸汽排出后,調(diào)整進(jìn)氣與排污閥,就是壓力穩(wěn)定在0、 11-0、 15MPa,計(jì)時(shí)滅菌 30-35 分鐘、滅菌結(jié)束后,關(guān)閉蒸汽過(guò)濾器進(jìn)出氣閥、排污閥,并立即將空氣輸入預(yù)過(guò)濾器 ,使空氣通過(guò)預(yù)過(guò)濾器進(jìn)入到分過(guò)濾器,再調(diào)整分過(guò)濾器排污閥使壓力穩(wěn)定在0、 11-0 、15MPa,備用、發(fā)酵工藝流程五發(fā)酵罐空消( 可與分過(guò)濾器滅菌同時(shí)進(jìn)行)空消前先將發(fā)酵罐去垢洗凈 ,添加少量清水 ,然后密封進(jìn)料口 ,將排氣閥打開(kāi)少許 ,同事將蒸汽引入盤(pán)管 (或夾套 )進(jìn)行預(yù)熱 ,待罐溫升到 80時(shí) (種子罐 40即可 ),關(guān)閉盤(pán)管 (或夾套 )進(jìn)氣閥,再?gòu)某隽峡?、進(jìn)氣口、取樣口三路輸入蒸汽,(蒸汽管路壓力

4、不低于0、 2-0、25MPa), 當(dāng)罐內(nèi)溫度達(dá)到 125-130 時(shí) ,通過(guò)三路蒸氣浴出氣閥調(diào)整罐內(nèi)壓力 ,使其穩(wěn)定在 0、11-0、15MPa,計(jì)時(shí)滅菌 30-35 分鐘、空消結(jié)束后 ,關(guān)閉所有進(jìn)氣閥并將排氣閥開(kāi)大,當(dāng)罐內(nèi)壓力下降至0MPa 后,打開(kāi)進(jìn)料口與排污閥 ,再將發(fā)酵罐進(jìn)行一次沖洗、六發(fā)酵罐實(shí)消打開(kāi)進(jìn)水閥 ,按照生產(chǎn)要求放入所需水量,再根據(jù)生產(chǎn)品種按配方依次投入培養(yǎng)基原料,并同時(shí)打開(kāi)攪拌 ,攪拌 5-10 分鐘后取樣 ,用氫氧化鈉與濃鹽酸調(diào)PH 值 7、2-7、5 之間 ,然后密封進(jìn)料口將排氣閥打開(kāi)少許,同時(shí)打開(kāi)盤(pán)管 (或夾套 )的進(jìn)出氣閥門(mén)輸入蒸汽進(jìn)行預(yù)熱,等到罐內(nèi)溫度到達(dá) 80

5、以上后 ,關(guān)閉盤(pán)管 (或夾套 )進(jìn)氣閥門(mén) ,并將排氣閥關(guān)小 ,然后將蒸汽從進(jìn)氣口、出料口、取樣口三路直接通入罐內(nèi),當(dāng)罐內(nèi)溫度上升到121-125后 ,打開(kāi)發(fā)酵罐體上與空氣進(jìn)氣閥上的所有跑分,再通過(guò)調(diào)整三路進(jìn)氣與排氣閥將罐內(nèi)壓力穩(wěn)定在0、11-0、15MPa,此時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)滅菌 30-35分鐘 ,滅菌期間將攪拌停止、滅菌結(jié)束后,關(guān)閉所有進(jìn)蒸汽閥門(mén),將排氣閥開(kāi)大,同時(shí)開(kāi)啟攪拌 ,并立即打開(kāi)進(jìn)氣閥 ,輸入無(wú)菌空氣 ,保證罐壓不低于0、05-0 、06MPa(當(dāng)發(fā)酵罐通入無(wú)菌空氣后,一定注意分過(guò)濾器與空氣總管路壓力一定要大于發(fā)酵罐內(nèi)壓力), 打開(kāi)盤(pán)管 (或夾套 ) 冷卻水進(jìn)出閥門(mén) (確定蒸汽出閥門(mén)關(guān)閉

6、),開(kāi)始降溫 ,按照不同菌種接種溫度要求控制降溫結(jié)束時(shí)間 (一般在 34左右 ),降溫結(jié)束后即可接種、七接種1 種子罐接種先將進(jìn)氣閥逐漸關(guān)閉,同時(shí)將排氣閥開(kāi)大,當(dāng)罐體壓力表與空氣流量計(jì)降到0 刻度時(shí) ,關(guān)閉排氣閥 ,用酒精棉圍在接種口四周并點(diǎn)燃,然后打開(kāi)接種口,將制備好的菌種孢子懸浮液在火焰中直接從接種口倒入罐內(nèi),馬上關(guān)閉接種口,同時(shí)迅速打開(kāi)進(jìn)氣閥使罐內(nèi)壓力上升到0、05MPa以上 ,打開(kāi)排氣閥 ,調(diào)整進(jìn)氣與排氣閥使罐內(nèi)壓力穩(wěn)定在0、05-0、 06MPa2 培養(yǎng)罐接種接種前應(yīng)先將蒸汽輸入接種管道,再把接種管道兩端的跑分打開(kāi),當(dāng)跑分都有蒸汽排出時(shí),計(jì)時(shí)滅菌 15-30 分鐘 ,滅菌結(jié)束后關(guān)閉跑

7、分與進(jìn)蒸汽閥,將種子罐排氣閥關(guān)小,當(dāng)種子罐內(nèi)壓力大于培養(yǎng)罐壓力后,先將接種管道進(jìn)口閥門(mén)打開(kāi),再打開(kāi)培養(yǎng)罐端出口閥開(kāi)始接種,接種量按不同菌種生產(chǎn)需求控制、接種完畢后,先將培養(yǎng)罐端出口閥關(guān)閉,再將接種管道進(jìn)口閥關(guān)閉,完成接種 ,最后把種子罐所有進(jìn)出氣閥門(mén)關(guān)閉,停止攪拌、發(fā)酵工藝流程八發(fā)酵罐培養(yǎng)控制接種后調(diào)整進(jìn)氣閥與排氣閥 ,將罐內(nèi)壓力穩(wěn)定在 0、05-0 、06MPa, 同時(shí)按照不同菌種的需求調(diào)整好罐內(nèi)的溫度與通氣量當(dāng)罐內(nèi)溫度超出或者低于標(biāo)準(zhǔn)溫度時(shí),打開(kāi)盤(pán)管或夾套進(jìn)出閥門(mén),出入冷卻水或者蒸汽,等溫度達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)溫度后關(guān)閉進(jìn)出閥門(mén) ,停止冷卻水或者蒸汽的輸入 ,這就完成了一次溫度的控制調(diào)整、通氣量的控制

8、 ,按照不同菌種的要求 ,在確保管內(nèi)壓力穩(wěn)定的前提下 ,根據(jù)空氣流量計(jì)的顯示,通過(guò)進(jìn)氣閥與排氣閥的調(diào)整進(jìn)行通氣量的調(diào)整、冬季結(jié)冰期到來(lái)以后 ,每次生產(chǎn)停止后 ,應(yīng)把蒸汽與空氣管路及發(fā)酵罐盤(pán)管或者夾套的冷凝水與冷卻水排盡 ,排不盡的可用空氣把水吹出來(lái) ,以防止凍裂管路與設(shè)備 ,給生產(chǎn)造成不便、九取樣與放罐取樣檢測(cè)時(shí)間,按照生產(chǎn)菌種的種類(lèi)來(lái)制定12-16 小時(shí)不等 ,開(kāi)始取樣檢測(cè)后,前期每 2 小時(shí)一次 ,后期取樣時(shí)間縮短為0、5-1 小時(shí) ,每次取樣前后都要對(duì)取樣口進(jìn)行10-15 分鐘滅菌處理,、當(dāng)取樣檢測(cè) , 發(fā)現(xiàn)符合芽孢大量形成 ,芽孢含量 70%,雜菌量 3%, 含菌量 30*108CFU