分離土壤中分解尿酸的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、分離土壤中分解尿酸的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)報(bào)告分離土壤中分解尿素的細(xì)菌和計(jì)數(shù)制作：鄒霖1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簭耐寥乐蟹蛛x出能夠分解尿素的細(xì)菌，計(jì)數(shù)2.實(shí)驗(yàn)原理： a. 培養(yǎng)基中加入唯一氮源 - 尿素，能分解尿素的細(xì)菌自身能夠合成脲酶，能夠分解利用尿素中的氮元素， 從而能夠生存繁殖；不能分解尿素的細(xì)菌的繁殖受到抑制， 從而達(dá)到分離出土壤中能分解尿素的細(xì)菌的作用。 b.使用酚紅鑒定尿素是否被分解 .co(nh2)2 分解產(chǎn)生 nh3 使溶液顯堿性 .如果尿素被分解，則酚紅會(huì)顯紅色， c. 分解原理 .co(nh2)2+h2o=脲酶 =co2+nh3d.稀釋涂布平板法. 將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋， 然后將不同稀釋濃度的

2、菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成單個(gè)細(xì)胞， 從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。e.計(jì)數(shù)菌落，一個(gè)或幾個(gè)細(xì)菌可以繁殖為一個(gè)肉眼可見的菌落 （計(jì)數(shù)結(jié)果低于實(shí)際細(xì)菌數(shù)）3.提出問題：尿素分解后nh3 的產(chǎn)生是否會(huì)影響實(shí)驗(yàn)？4.做出假設(shè)：尿素分解后nh3 的產(chǎn)生會(huì)影響實(shí)驗(yàn)。5.實(shí)驗(yàn)材料用具： 超凈工作臺(tái)、 取樣鏟、試管、錐形瓶、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、高壓蒸汽滅菌鍋、 酒精燈、酒精、無菌水、地面以下 3-8cm處的土壤、培養(yǎng)基 a（磷酸二氫化鉀 1.4g 磷酸氫化二鈉 2.1g 水合硫酸鎂 0.2g 葡萄糖 10g 尿素 1g 瓊脂 15g

3、）培養(yǎng)基七b（牛分離土壤中分解尿酸的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)報(bào)告肉膏蛋白胨培養(yǎng)基）涂布器、干熱滅菌箱、燒杯、膠頭滴管6.實(shí)驗(yàn)步驟：1.對(duì)實(shí)驗(yàn)用具消毒滅菌；按配方稱取上述物質(zhì)，將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000ml 。2.配置好培養(yǎng)基后， 將培養(yǎng)基 a.b 倒置都放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 1d ，取出后觀察是否產(chǎn)生了菌落，若無，則繼續(xù)下一步實(shí)驗(yàn)。若有，重做 (_)3.系列稀釋：將分別盛有 9ml 水的 5 只試管和 90ml 水的1 個(gè)錐形瓶滅菌，并按1010的順序編號(hào)錐形瓶編號(hào)10。將 10g符合條件的土壤放入錐形瓶中，震蕩錐形瓶，用移液管吸取1ml菌液，注入標(biāo)有 10 的試管中，用手輕壓移液管上的橡皮頭，

4、吹吸三次，使菌液與水充分混勻。 以此類推，直到完成最后一只試管的稀釋。 （注意：移液管需要經(jīng)過滅菌，操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰12cm處）4.涂布平板：將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中， 分別取 10.10 .10 中的少量菌液，分別各滴加到3 個(gè)培養(yǎng)基 a（總計(jì) 9 個(gè)）的表面，注明培養(yǎng)基種類，培養(yǎng)日期以及平板上培養(yǎng)樣品的稀釋程度，取少量無菌水滴加到1 個(gè)培養(yǎng)基中作為空白對(duì)照組， 取少量菌液滴加到培養(yǎng)基 b 中（判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用），將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8-10s 。用涂布器將菌液均勻的涂布在每個(gè)培養(yǎng)基表面（每次涂布前都必須用酒精燈灼燒）涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。分離土壤中分解尿酸的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)報(bào)告5.將培養(yǎng)基倒置并放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-2d6.相同稀釋程度的 3 個(gè)培養(yǎng)基統(tǒng)計(jì)其菌落數(shù)（30-300 ）取平均值。7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1. 空白對(duì)照組無菌落。2.培養(yǎng)