設計性實驗丹參注射液對垂體后葉素致心肌缺血的保護作用.ppt

1、設計性實驗,丹參對垂體后葉素致兔心肌缺血的保護作用,【實驗目的】,9/6/2020,free teamplate from ,2,學習用垂體后葉素造成急性心肌缺血的實驗方法，觀察藥物抗心肌缺血的作用。,【實驗原理】,9/6/2020,free teamplate from ,3,垂體后葉素可使全身血管（包括冠狀血管）收縮，靜脈注射后使動物產(chǎn)生急性心肌缺血狀態(tài)，出現(xiàn)心室肌靜息張力的增加和發(fā)展張力的下降，以及心電圖ST段及T波的變化，可作為冠狀動脈痙攣，急性發(fā)作的心絞痛模型。 垂體后葉素的注射劑量不同可引起不同程度的障礙，劑量不大時，可迅速恢復，因此可反復在同一動物身上進行多次實驗。,【材料與方法

2、】,9/6/2020,free teamplate from ,4,一、實驗動物：家兔1只 二、器材與藥品：10ml注射器， 1ml注射器，手術臺，嬰兒秤， MedLab生物信號采集分析系統(tǒng)。垂體后葉素注射液，20氨基甲酸乙酯，丹參注射液，生理鹽水。,三、方法與步驟：,9/6/2020,free teamplate from ,5,取家兔一只，稱重，用25%烏拉坦溶液，按1g/kg（4ml/kg）靜脈注射麻醉，麻醉后將兔背位固定于手術臺上。 正中切口頸部皮膚，分離右側(cè)頸總動脈,遠心端結(jié)扎，并在近心端夾上動脈夾，以阻斷血流，用虹膜剪作“V”形切口，將連于壓力換能器的已充滿肝素生理鹽水的心導管向心

3、臟方向插入頸總動脈內(nèi)，移去動脈夾，觀察屏幕顯示先出現(xiàn)血壓波形，繼續(xù)將導管插向左室腔。,當波形由血壓波變成下沿達0mmHg附近具有明顯舒張期而峰頂平坦的波形時，即表明導管口已通過主動脈瓣進入左室腔內(nèi)，再送入導管約0.20.4cm，若還保持同樣波形則可把心導管結(jié)扎固定。,將心電輸入線的三個針形電報分別插入右前肢及右、左后肢皮下，記錄II導聯(lián)心電（或采用頭胸導聯(lián)） 。 MedLab生物信號采集處理儀參數(shù)設置： 記錄方式：連續(xù)記錄； 存盤方式：連續(xù)存盤； 第1通道： AC輸入，放大倍數(shù)1000； 第2通道： DC輸入，放大倍數(shù)200； 采樣速率：1ms。,9/6/2020,free teamplate

4、 from ,8,將頭皮針連接在已注滿生理鹽水的10ml注射器上，然后用頭皮針頭刺入耳緣靜脈中，并用木夾或膠布固定。連續(xù)記錄正常心室內(nèi)壓、心電。 （左室內(nèi)壓峰值：LVSP,mmHg。由心室壓基線到曲線頂峰高度；左室舒張末壓：LVEDP,mmHg。心室舒張末或收縮初室內(nèi)壓轉(zhuǎn)折點到基線高度；左室內(nèi)壓正負變化速率最大值：dp/dtmax,mmHg/s。）,LVSP,LVEDP,制作心肌缺血 由耳緣靜脈注射垂體后葉素1.5U/kg（用生理鹽水稀釋到3ml），30秒注射完畢。并立即于注射后20s、40s、1min、2min、5min、10min、20min、30min，分別記錄心功能參數(shù)及心電圖的變化，

5、特別注意觀察心率、ST段、T波的變化。,待心功能參數(shù)及心電圖恢復正常后，由耳緣靜脈注射解救藥物丹參注射液2.5ml/kg，15min后再給同量的垂體后葉素，觀察上述同樣時間內(nèi)心功能參數(shù)及心電圖的變化。,【實驗結(jié)果】,9/6/2020,11,實驗結(jié)果以曲線表示，對已記錄的實驗結(jié)果進行回放重顯、剪輯，對給藥前后的波形進行測量 以表格形式記錄實驗原始數(shù)據(jù) 綜合全實驗室的實驗數(shù)據(jù)結(jié)果進行統(tǒng)計處理,藥物對垂體后葉素所致兔心肌缺血的對抗作用,【注意事項】,9/6/2020,free teamplate from ,13,ST段上移多發(fā)生在注射垂體后葉素后，立即至1.5min內(nèi)，5min內(nèi)恢復；T波升高常在

6、注射后立即至45s之間，25min至1小時，恢復正常。,參考文獻：,1.苗戎, 陳靜, 韓力軍, 張莉. 復方丹參注射液對急性實驗性心肌缺血左室舒張功能的影響J. 天津中醫(yī) , 1998,(03) 2. 苗戎,陳靜,高嵐. 復方丹參注射液對心肌缺血左室dp/dTmin的影響J. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志 , 1998,(07) 3. 魏硯明, 歐陽五慶, 張黎, 王俊, 申進寶. 玉米幼芽提取物對垂體后葉素致家兔心肌缺血的保護作用J. 安徽農(nóng)業(yè)科學 , 2007,(07),附：配對樣本均數(shù)的t檢驗,所謂配對樣本（paired sample）是指兩個樣本中的觀察對象由于存在某種聯(lián)系或具有某些相近的重要

7、特征而結(jié)成對子（matching），每對中的兩個個體隨機分配接受兩種不同的處理。,主要有三種情況,醫(yī)學研究中常見的配對樣本： 配成對子的兩個個體分別給予兩種不同的處理（如把同窩、同性別和體重相近的動物配成一對；把同性別、同病情和年齡相近的病人配成一對等）； 同一個體同時分別接受兩種不同處理（如同一動物的左右兩側(cè)神經(jīng)、同一份標本分成兩部分）； 同一個體自身前后的比較（如高血壓患者治療前后的舒張壓比較、肝炎患者治療前后的轉(zhuǎn)氨酶比較等）。,對于配對樣本數(shù)據(jù)，應該首先計算出各對差值的均數(shù)。當兩種處理結(jié)果無差別或某種處理不起作用時，理論上差值的總體均數(shù)應該為0，故可將配對樣本資料的假設檢驗視為樣本均數(shù)與

8、總體均數(shù)=0的比較，所用方法為配對t檢驗（paired t-test）,公式：,9/6/2020,18,其中，Sd為差值d的標準差,例：用簡便法和常規(guī)法分別對12份人尿進行尿鉛含量測定，所得結(jié)果如表10-1。問根據(jù)現(xiàn)有資料能否說明兩種方法檢測結(jié)果不同？,利用Excel進行醫(yī)學統(tǒng)計t檢驗分析,單擊“工具”菜單中的“數(shù)據(jù)分析”命令可以瀏覽已有的分析工具。如果在“工具”菜單上沒有“數(shù)據(jù)分析”命令，應在“工具”菜單上運行“加載宏”命令，在“加載宏”對話框中選擇“分析工具庫”。 在進行兩個樣本均值相等假設分析時，可使用t-檢驗分析，根據(jù)情況選擇：成對雙樣本均值分析、雙樣本等方差假設分析和雙樣本異方差假設

9、分析。,9/6/2020,22,成對雙樣本均值的t-檢驗分析：,當樣本中的觀察值存在配對關系時，可以使用“成對雙樣本t-檢驗”。例如對一個樣本組在實驗前后進行了兩次檢測，為確定實驗前后樣本均值是否相等，應使用成對t檢驗。,9/6/2020,23,9/6/2020,24,9/6/2020,25,數(shù)據(jù)錄入：,數(shù)據(jù)分析,分析時，在“工具”菜單中，單擊“數(shù)據(jù)分析”命令。在數(shù)據(jù)分析對話框中，選擇t-檢驗：成對雙樣本均值分析，拉出成對雙樣本均值分析對話框,9/6/2020,26,選擇輸入項：,9/6/2020,27,其中有如下輸入項：,變量1的區(qū)域：輸入需要分析的第一個數(shù)據(jù)區(qū)域的單元格引用。該區(qū)域必須由單

10、列或單行數(shù)據(jù)組成?？蓡螕糨斎肟蛴颐娴陌粹o，回到電子表格上自數(shù)據(jù)開始的單元格向結(jié)尾的單元格拖動。此時變量1的區(qū)域(A1.K1)自動進入輸入域中。然后單擊輸入域右面的按鈕，回到原對話框。,9/6/2020,28,其中有如下輸入項：,變量2的區(qū)域：輸入需要分析的第二個數(shù)據(jù)區(qū)域的單元格引用。該區(qū)域必須由單列或單行的數(shù)據(jù)組成。輸入方法同前。變量2的區(qū)域為(A2.K2)。,9/6/2020,29,假設平均差：在此輸入期望中的樣本均值的差值。缺省為0值，即假設樣本均值相同。 標志：如果輸入?yún)^(qū)域的第一行或第一列中包含有標志項，應選中此項：如果輸入?yún)^(qū)域沒有標志項，Excel將在輸出表中生成適宜的數(shù)據(jù)標志。這里選中此項。 Alpha()：在此輸入檢驗的統(tǒng)計意義水平。該值范圍為01之間。缺省為005。,9/6/2020,30,輸出區(qū)域信息可選擇如下單選項：,輸出區(qū)域：在此輸入對輸出表左上角單元格的引用。Excel會自動確定輸出區(qū)域的大小并顯示信息。可單擊輸入框右面的按鈕，回到電子表格上，單擊輸出開始的單元格(如A3)