微生物-實(shí)驗(yàn)二-細(xì)菌的生理分布消毒滅菌.ppt

1、細(xì)菌的生理、分布、消毒與滅菌,一、細(xì)菌的人工培養(yǎng) 二、細(xì)菌的分布 空氣中細(xì)菌的檢測(cè) 咽拭培養(yǎng) 三、消毒與滅菌,細(xì)菌的人工培養(yǎng),一、常用培養(yǎng)基的制備原則 1、培養(yǎng)基的制備原則： 適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)成分。 合適的酸堿度。 配制后經(jīng)滅菌后方可使用。 2、培養(yǎng)基配制的基本程序 按一定配方稱(chēng)了各種物質(zhì)溶解測(cè)定及調(diào)整PH濾過(guò)分裝滅菌、備用。,常用培養(yǎng)基的種類(lèi) 1,按用途可分為 （1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基： （2）營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基： （3）鑒別培養(yǎng)基： （4）選擇培養(yǎng)基： （5）厭氧培養(yǎng)基：,常用培養(yǎng)基的種類(lèi) 2,按物理性狀可分為： 1）液體培養(yǎng)基 2）固體培養(yǎng)基，在液體培養(yǎng)基中加入23%瓊脂，固體培養(yǎng)基傾倒平皿上即成“平板”傾入

2、試管內(nèi)即可制成“斜面培養(yǎng)基3）半固體培養(yǎng)基：當(dāng)液體培養(yǎng)基內(nèi)加入0.20.5%瓊脂時(shí)即成之。,二、細(xì)菌人工培養(yǎng)的接種方法：,（一）細(xì)菌分離培養(yǎng)接種法平板劃線(xiàn)分離培養(yǎng)法 目的：使混雜在一起的細(xì)菌分散生長(zhǎng)。,平板區(qū)劃線(xiàn)法 培養(yǎng)后菌落的散布情況,一個(gè)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的生長(zhǎng)繁殖之后，所形成的肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌集團(tuán)，稱(chēng)為菌落。 很多菌落連在一起，融成一片，稱(chēng)為菌苔。,描述菌落： 大小：以直徑（mm）表示之，1mm左右為小菌落，23mm為中等大菌落，3mm以上為大菌落。 形成：圓形、卵圓形及不規(guī)則形。 邊緣：整齊或不整齊、鋸齒狀、毛發(fā)狀等。 表面：光滑、濕潤(rùn)、皺紋、干燥等。 隆起度：扁平、凸起、

3、中心凹陷等。 透明度：透明、半透明、不透明。 顏色：無(wú)色、白色、黃色等。 溶血性：在血平板上產(chǎn)生溶血毒素的細(xì)菌，可以使培養(yǎng)基中的紅細(xì)胞破壞溶解，可分為完全溶血、草綠色溶血及不溶血,（二）細(xì)菌純培養(yǎng)接種法,目的：測(cè)試其生物學(xué)性狀、保種等。 方法： 斜面培養(yǎng)基接種 液體培養(yǎng)基接種 穿刺接種法,斜面培養(yǎng)基接種法,斜面上生長(zhǎng)狀態(tài)觀察：可見(jiàn)有均勻一致的菌苔，如有不同的菌落出現(xiàn)，則表明污染了雜菌。,液體培養(yǎng)基接種法,液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)狀態(tài)觀察：示培養(yǎng)前的液體培養(yǎng)基多為清徹透明的。接種細(xì)菌后，由于細(xì)菌種類(lèi)不同，可有以下三種生長(zhǎng)形式。 混濁：液體變?yōu)榛鞚帷?菌膜：液體澄清，表面有一薄膜。 沉淀：管底有沉淀物。,

4、半固體培養(yǎng)基接種方法,半固體中生長(zhǎng)狀態(tài)觀察：無(wú)鞭毛（無(wú)運(yùn)動(dòng)）的細(xì)菌，經(jīng)培養(yǎng)后僅沿穿刺線(xiàn)生長(zhǎng)，培養(yǎng)基清亮。有運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌，沿穿刺線(xiàn)向外擴(kuò)散，穿刺線(xiàn)摸糊不清，培養(yǎng)基混濁。,空氣中細(xì)菌的檢測(cè),一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理 二、實(shí)驗(yàn)材料 三、實(shí)驗(yàn)方法,咽拭培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理 二、實(shí)驗(yàn)材料 血平板、棉簽 三、實(shí)驗(yàn)方法,紫外線(xiàn)的殺菌作用,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理 了解紫外線(xiàn)對(duì)不同種細(xì)菌的殺菌作用及紫外線(xiàn)的穿透力。 紫外線(xiàn)的殺菌波長(zhǎng)范圍為240280nm，265266nm的作用最強(qiáng)。 其主要是使DNA上相鄰的嘧啶通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合形成二聚體，影響DNA的正常鹼基配對(duì)。 紫外線(xiàn)的穿透力很弱，其殺菌只限于表面的照射。,二、

5、實(shí)驗(yàn)材料 1、菌種： 2、培養(yǎng)基：瓊脂平板 3 、紙片、鑷子及紫外線(xiàn)燈等 三、實(shí)驗(yàn)方法 1、涂平板。 2、打開(kāi)皿蓋，蓋紙片。 3、紫外線(xiàn)照射30分鐘。 4、取掉紙片，蓋好皿蓋，37孵育24小時(shí)，觀察生長(zhǎng)情況。,皮膚消毒前后的細(xì)菌學(xué)檢查,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理 觀察消毒劑的消毒效果 二、實(shí)驗(yàn)材料 1、2%碘酒，75%酒精 2、瓊脂平板 三、實(shí)驗(yàn)方法,細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性測(cè)定,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理 了解藥物敏感性試驗(yàn)方法及實(shí)踐中的重要意義 二、實(shí)驗(yàn)材料 1、菌種：金黃色葡萄球菌68小時(shí)肉湯培養(yǎng)物。 2、培養(yǎng)基：普遍瓊脂平板。 3、抗生素：含各種抗生素干燥濾紙片、小鑷子、 米尺等。 三、實(shí)驗(yàn)方法,細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感試驗(yàn)（紙片法）,四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果,抑菌圈,細(xì)菌對(duì)藥物敏感時(shí)，在該藥紙片周