PCT和CRP在感染性疾病中的臨床應(yīng)用.ppt

1、PCT和CRP在感染性疾病中的臨床應(yīng)用,廣東省婦幼保健院檢驗(yàn)科 胡 塔,2,CRP的發(fā)現(xiàn),C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein)簡(jiǎn)稱CRP, 1930年由Tillet和Francis在急性大葉性肺炎患者血清中發(fā)現(xiàn)，因其能與肺炎鏈球菌C莢膜多糖起沉淀反應(yīng)而得名，是人類重要的急性期反應(yīng)蛋白，急性期濃度可升高上千倍。CRP具有多種生物學(xué)活性，被認(rèn)為是最敏感的炎性指標(biāo)之一。,3,CRP的結(jié)構(gòu),CRP是環(huán)狀五球體蛋白，屬于鈣結(jié)合蛋白，相對(duì)分子量約為120000，由五個(gè)相同的亞基依靠非共價(jià)鍵構(gòu)成，在細(xì)胞因子IL-6家族誘導(dǎo)下由肝臟上皮細(xì)胞迅速合成。,4,CRP的表達(dá)與功能,CRP是人體非特異

2、性免疫機(jī)制的一部分。 CRP不能通過(guò)胎盤，在體內(nèi)分布甚廣，除血液外、胸水、腹水、心包液及關(guān)節(jié)液中均可測(cè)出。 CRP作為有免疫防御特性的鈣結(jié)合蛋白, 其最主要生物學(xué)功能是在Ca2+存在下與磷酸膽堿、DNA、組蛋白等結(jié)合。 CRP能夠與體內(nèi)凋亡壞死的細(xì)胞或者外部入侵的細(xì)菌、真菌、寄生蟲等的細(xì)胞壁中的磷酸膽堿結(jié)合,從而激活補(bǔ)體,調(diào)理吞噬,促使內(nèi)源性或外源性配體物質(zhì)的清除。,5,CRP的參考值,正常值10mg/L 新生兒生出生后3d內(nèi)測(cè)CRP無(wú)特異性，因?yàn)榉置涫笴RP應(yīng)激性升高。,6,正常人群CRP值,7,CRP臨床應(yīng)用參考范圍,8,CRP的穩(wěn)定性,9,CRP的檢測(cè),80年代以前作為炎癥和組織損傷的非

3、特異性標(biāo)志物大量應(yīng)用于臨床。 但是由于過(guò)去CRP的檢測(cè)方法較為落后，假陽(yáng)性和假陰性很高，影響了它在臨床上的價(jià)值，而逐漸被臨床所忽視。 近年來(lái)由于檢測(cè)技術(shù)不斷更新，用于檢測(cè)CRP的快速、簡(jiǎn)便、可靠的方法已迅速建立。使CRP的臨床應(yīng)用大大增加。其在醫(yī)學(xué)上的價(jià)值也真正得到了廣泛的承認(rèn)和認(rèn)可。,10,CRP檢測(cè)方法比較,11,單向免疫擴(kuò)散法,1,膠乳凝集試驗(yàn),2,免疫比濁法,3,膠乳增強(qiáng)試驗(yàn),4,免疫標(biāo)記測(cè)定,5,CRP檢測(cè)方法簡(jiǎn)介：,12,CRP檢測(cè)方法（1）單向免疫擴(kuò)散法,優(yōu)點(diǎn)： 特異性高，重復(fù)性好，操作簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，不需要特殊儀器檢測(cè)等。 缺點(diǎn)： 此法最大的缺點(diǎn)是在抗原過(guò)量時(shí)易出現(xiàn)假陰性，因此

4、用該方法檢測(cè)CRP，若未出現(xiàn)沉淀環(huán)時(shí)，必須稀釋標(biāo)本后復(fù)檢，以避免漏診。此外，由于該法的敏感性較差，制約了其臨床上的廣泛應(yīng)用。,13,CRP檢測(cè)方法（2）膠乳凝集試驗(yàn),優(yōu)點(diǎn)： 簡(jiǎn)單快速，敏感性、特異性較高 缺點(diǎn)： 易受補(bǔ)體、類風(fēng)濕因子（RF） 等因素的干擾，產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。因此，為了提高結(jié)果的準(zhǔn)確性，檢測(cè)時(shí)應(yīng)對(duì)待測(cè)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，以去除干擾因素。,14,CRP檢測(cè)方法（3）免疫比濁法,此法是一種抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的動(dòng)態(tài)測(cè)定法，可快速、準(zhǔn)確地測(cè)量樣品中抗原的含量，并且可在多種自動(dòng)化檢測(cè)儀上應(yīng)用。 目前應(yīng)用較廣泛的Quik-Read 快速CRP定量檢測(cè)，就是以免疫比濁法為基本原理。 研究顯示：免疫比濁

5、法在檢測(cè)時(shí)間、操作方法、結(jié)果精確度、重復(fù)性、靈敏度方面均優(yōu)于單擴(kuò)法與膠乳凝集法。,15,CRP檢測(cè)方法（4）膠乳增強(qiáng)試驗(yàn),在上述的比濁法中，檢測(cè)CRP的敏感性方面仍不夠理想。這就需要建立更敏感、更精確、在血清CRP濃度較低的情況下（0.110mg/L）仍具有較高準(zhǔn)確度的檢測(cè)方法 。 膠乳增強(qiáng)免疫透射比濁法測(cè)定超敏CRP(Hs-CRP)是一種新型的檢測(cè)方法，具有快速、方便、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn) 。 利用該方法檢測(cè)Hs-CRP在預(yù)測(cè)和預(yù)防冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病中起重要作用。,16,CRP檢測(cè)方法（5）免疫標(biāo)記測(cè)定,ELISA、免疫發(fā)光法和化學(xué)發(fā)光法等都可用于CRP的測(cè)定。 化學(xué)發(fā)光法的靈敏度和定量

6、精確度可與RIA媲美,而無(wú)同位素污染,試劑穩(wěn)定,分析速度快。 CRP-POCT(床邊試驗(yàn))法 ELISA干片法。 把磷脂酰膽堿(PC)化學(xué)交聯(lián)固定于載體。 樣品中待檢測(cè)的CRP與載體的PC結(jié)合。 被酶標(biāo)記的抗CRP單抗結(jié)合。 可靈敏、特異性檢測(cè)CRP,約5分鐘可得結(jié)果。,17,CRP的臨床應(yīng)用,18,CRP在細(xì)菌與病毒感染的患者之間存在明顯差異，細(xì)菌感染時(shí)快速升高。 CRP的持續(xù)升高也可發(fā)生在慢性炎癥，包括自身免疫性疾病以及腫瘤中。 CRP在絕大多數(shù)病毒感染的血清濃度變化不大或不變,這是由于大多數(shù)病毒感染是在細(xì)胞內(nèi)增殖進(jìn)行,而完整的細(xì)胞膜上缺乏暴露的磷脂蛋白質(zhì),故不能觸發(fā)CRP的產(chǎn)生和結(jié)合。,

7、（1）CRP用于感染的鑒別,19,血清CRP在感染發(fā)生后58h即開始升高, 48h達(dá)到峰值，血漿半衰期19h，高峰值可達(dá)正常的數(shù)百倍。 隨著感染控制它可在2448h迅速下降, 1w 內(nèi)恢復(fù)正常。 CRP的水平和持續(xù)時(shí)間與感染程度呈正相關(guān)。 CRP持續(xù)升高或再度升高提示臨床應(yīng)重視病情的變化。,（1）CRP用于感染的鑒別,20,CRP的臨床應(yīng)用,21,CRP應(yīng)用（2）評(píng)估病情,CRP為1050mg/L表示輕度炎癥。 CRP升至100mg/L表示較嚴(yán)重的疾病，它的嚴(yán)重程度在必要時(shí)需靜脈注射。 CRP 100mg/L表示嚴(yán)重的疾病過(guò)程并常表示細(xì)菌感染的存在。,22,CRP應(yīng)用（3）抗生素的治療監(jiān)測(cè),C

8、RP可作為抗生素療效觀察的參考指標(biāo)。 CRP下降至正常時(shí)，建議中斷抗生素治療。 當(dāng)高危人群缺少微生物學(xué)診斷時(shí)，CRP檢測(cè)結(jié)果可為抗生素治療的指引。,23,CRP應(yīng)用（4）外科術(shù)后,患者施行手術(shù)后2472h,血中CRP水平明顯升高,約在第57天恢復(fù)正常。 凡驟升后持續(xù)高水平多預(yù)示合并感染。對(duì)中、大手術(shù)患者,建議在術(shù)前和術(shù)后37天各做常規(guī)檢測(cè)一次。 凡術(shù)后57天CRP仍持續(xù)高水平者,理應(yīng)懷疑合并感染,并配合治療作隨訪監(jiān)測(cè)。,24,CRP應(yīng)用（5）癌癥,對(duì)于癌癥患者，已升高或正在升高的CRP預(yù)示著預(yù)后不良及常提示轉(zhuǎn)移。 結(jié)腸癌是導(dǎo)致死亡人數(shù)第二多的癌癥。研究顯示，血液CRP含量最高的那些人患結(jié)直腸癌

9、的危險(xiǎn)，是CRP含量最低者的兩倍。,25,CRP應(yīng)用（6）心血管疾病,CRP水平可預(yù)測(cè)將來(lái)心肌梗塞及中風(fēng)的危險(xiǎn)性。 在痛疼開始后數(shù)小時(shí)內(nèi)CRP升高，3-4d達(dá)高峰，在CK-MB回到正常后7-10d也降至正常。 CRP含量2.1mg/L的人與1mg/L者比較 將來(lái)發(fā)生心肌梗塞的危險(xiǎn)性為后者的2.9倍 發(fā)生缺血性中風(fēng)的危險(xiǎn)性為后者的1.9倍； 發(fā)生外周動(dòng)脈血管性疾病的危險(xiǎn)性為后者的4.1倍。,26,快速CRP的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用,27,CRP樣品前處理存在問(wèn)題,28,最新CRP檢測(cè)流程,減少9個(gè)步驟 改善2個(gè)步驟 消除人為誤差 減少1800步驟(每天200個(gè)標(biāo)本),29,CRP是一種五球體結(jié)構(gòu)的高度保守的

10、急時(shí)相蛋白，它作為模式識(shí)別分子，與特殊的分子結(jié)構(gòu)結(jié)合而發(fā)揮作用。 CRP作為宿主先天性免疫應(yīng)答的一部分，在機(jī)體平衡和自身保護(hù)中起著重要貢獻(xiàn)。 CRP的檢測(cè)：對(duì)于普通的炎癥用常敏CRP檢測(cè)即可，而對(duì)于心血管疾病、代謝綜合征、自身免疫性疾病、新生兒疾病檢測(cè)等則需用超敏CRP檢測(cè)方法。 CRP對(duì)機(jī)體許多疾病的早期診斷、鑒別診斷、療效觀察、預(yù)后評(píng)估以及指導(dǎo)臨床抗生素的合理應(yīng)用等有重要的意義。速度快、簡(jiǎn)便實(shí)用、可靠性強(qiáng)的CRP檢測(cè)手段，值得在臨床臨床上推廣應(yīng)用。,小結(jié),30,Thanks!,31,練習(xí)題：,1.CRP作為急性期反應(yīng)蛋白，與WBC、ESR等指標(biāo)相比在臨床疾病的診療方面有何優(yōu)勢(shì)？ 2.請(qǐng)簡(jiǎn)要說(shuō)明CPR的臨床應(yīng)用主要體現(xiàn)在哪些方面？,32,降鈣素原,PCT（降鈣素原，procalcitonin）也是一種炎癥標(biāo)志物質(zhì)，當(dāng)嚴(yán)重細(xì)菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭時(shí)它在血漿中的水平升高。 自身免疫、過(guò)敏和病毒感染時(shí)P