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ICS65.020.01CCSB30DB36江西省地方標準DB36/T1699—2022辣椒抗灰霉病苗期人工接種鑒定技術(shù)規(guī)程Technicalregulationsforidentificationofartificialinoculationofpepperagainstgraymoldatseedlingstage2023-05-01實施江西省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB36/T1699—2022目次前言................................................................................II1范圍..............................................................................12規(guī)范性引用文件....................................................................13術(shù)語和定義........................................................................14育苗..............................................................................15人工接種..........................................................................26抗性鑒定..........................................................................2附錄A(資料性)辣椒灰霉病癥狀........................................................4IDB36/T1699—2022前言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分:標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由江西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位:江西省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所、高安市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、永豐縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、彭澤縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、萬安縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、玉山縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、湖口縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局。本文件主要起草人:胡建坤、黃蓉、黃瑞榮、華菊玲、黃國東、張文志、張會國、曾招圣、曾欽華、賈志新、肖慧、姜仙美、倪永輝。IIDB36/T1699—2022辣椒抗灰霉病苗期人工接種鑒定技術(shù)規(guī)程1范圍本文件規(guī)定了辣椒抗灰霉病苗期人工接種鑒定的術(shù)語和定義、育苗、人工接種及抗病性鑒定與評價。本文件適用于辣椒品種對灰霉病抗性的鑒定和評價。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。NY/T2118蔬菜育苗基質(zhì)3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1病原菌是灰葡萄孢(Botrytiscinerea)的一種辣椒真菌性病害。主要發(fā)病癥狀詳見附錄A。4育苗以質(zhì)優(yōu)泥炭(粒徑0mm~6mm)為育苗基質(zhì)。搗碎后加入適量蔬菜復(fù)合肥(20gN、P、K三元復(fù)合肥,N:P:K15-15-15)與適量的清水混配均勻,調(diào)節(jié)基質(zhì)含水率至60%。育苗基質(zhì)選用標準參照NY/T2118蔬菜育苗基質(zhì)。1DB36/T1699—2022將制備好的基質(zhì)置入底部有孔的塑料育秧盤(規(guī)格:54cm×28cm×5cm,孔徑:6cm×6cm-3cm×3cm,32孔)中,基質(zhì)量以裝平秧盤為準。秧盤中每孔穴播辣椒種子4?!?粒,每個品種播種1盤,即32孔穴。4.3接種前管理將育苗盤置于20℃~25℃溫室大棚內(nèi)土層上,種子發(fā)芽出苗后,保持秧盤基質(zhì)濕潤。出苗7d~10d定苗,每穴保留健壯辣椒苗3株,常規(guī)管理。苗齡20d~25d,每盤追施尿素2g(兌水配成溶液)。辣椒苗可使用殺蟲劑防蟲,但不使用殺菌劑防病。待幼苗長至4葉期進行接種鑒定。5人工接種5.1接種溫度以春、秋季為宜。露地接種,氣溫宜在18℃~25℃進行;溫室(棚)接種,氣溫可調(diào)節(jié)至20℃左右。5.2接種體制備采用灰霉病菌強致病力菌株接種。由保存試管中挑取菌核或菌絲塊移至裝有PDA培養(yǎng)基的無菌培養(yǎng)皿中央進行活化(20℃,3d~5d),于菌落邊緣用打孔器取新鮮菌絲塊接入新PDA培養(yǎng)基上,20℃下黑暗培養(yǎng)14d后用少量無菌水將灰霉菌孢子洗下,在光學顯微鏡下使用血球計數(shù)板對菌懸液中的孢子進行計數(shù),用無菌水將洗下的孢子液配成10/mL的孢子懸浮液待用。PDA培養(yǎng)基的制方為:200g土豆、20g6蔗糖和15g瓊脂粉,蒸餾水1L。保存于4℃條件下的辣椒灰霉病菌(Botrytiscinerea)菌株接種在平板PDA培養(yǎng)基上活化,取新鮮菌絲塊接入新的平板PDA培養(yǎng)基上,20℃下黑暗培養(yǎng)14d,收集灰霉菌孢子并配成106用移液槍定量吸取孢子懸浮液,將孢子液滴加在辣椒苗心生長點上,接種菌液量30μL/株。接種前將培育辣椒苗的基質(zhì)用清水澆透,接種后在育苗盤上支起小棚并用塑料膜覆蓋棚架密閉,每日于小棚四周澆水保濕。接種病菌后的辣椒苗可置溫室(棚)進行管理,溫度20℃左右;平均溫度在18-25℃時也可在露地進行管理。辣椒苗接菌后保濕24h,之后噴清水保持盤中基質(zhì)濕潤。露地管理雨天需做避雨處理,晴天氣溫偏高需做遮陽處理。保濕與避雨處理均可用竹條與塑料薄膜制成拱棚覆蓋辣椒苗。6抗性鑒定記錄接種日期、病害癥狀始現(xiàn)期。接種后20d~25d,調(diào)查參鑒材料的病株數(shù),計算病株率,感病對照品種病株率達50%以上時進行最終病情調(diào)查。病株率計算方法參照公式(1)。病株率(%)=發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100..................................(1)人工接種鑒定結(jié)果依據(jù)抗病性分級標準劃分辣椒品種的抗感水平。2DB36/T1699—2022根據(jù)調(diào)查統(tǒng)計的各品種苗期病株率,按照表1評定各參鑒品種對灰霉病的抗性。表1辣椒品種苗期抗灰霉病評價標準抗性類型高抗(HR)抗(R)病株率(%)≤1.01.1~10.010.1~30.030.1~50.050.1~70.0>70.0中抗(MR)中感(MS)感?。⊿)高感(HS)3DB36/T1699—2022AA附錄A(資料性)辣椒灰霉病癥狀該病從辣椒苗期至成株期均可發(fā)生,可危害辣椒的整個生育期。主要危害葉片、莖稈、花、果實。苗期發(fā)病,初子葉頂端褪綠變黃,濕度大時呈水浸狀軟腐;后擴展至幼莖,幼莖變細縊縮呈棕褐色,使幼苗病莖折斷或萎蔫枯死。成株期發(fā)病,初始葉外沿褪綠形成水浸狀淺褐色病斑,擴展后呈圓形或橢圓形、褐色并帶有淺褐色輪紋的大型病斑,濕度大時病斑上密布灰色霉層,發(fā)病末期可使
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