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PAGE6-動物細(xì)胞融合與單克隆抗體[基礎(chǔ)對點]學(xué)問點一動物細(xì)胞融合1.動物細(xì)胞融合屬于動物細(xì)胞工程的技術(shù)手段之一,下列有關(guān)動物細(xì)胞融合的敘述正確的是()A.動物細(xì)胞融合產(chǎn)生的細(xì)胞稱為重組細(xì)胞B.融合后形成的細(xì)胞為單核或多核細(xì)胞C.常用的誘導(dǎo)融合的生物誘導(dǎo)劑是聚乙二醇、滅活的病毒等D.也稱細(xì)胞雜交,可由兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合成一個細(xì)胞答案D解析動物細(xì)胞融合產(chǎn)生的細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞,核移植產(chǎn)生的細(xì)胞稱為重組細(xì)胞,A錯誤;融合后形成具有兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,B錯誤;誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的生物誘導(dǎo)劑是滅活的病毒,聚乙二醇屬于化學(xué)誘導(dǎo)劑,C錯誤;動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程,D正確。2.有關(guān)動物細(xì)胞融合的敘述不正確的是()A.使遠(yuǎn)緣雜交成為可能B.雜交細(xì)胞具有原來兩個或多個細(xì)胞的遺傳信息C.其基本原理是細(xì)胞膜的選擇透過性D.為制造單克隆抗體開拓了新途徑答案C解析動物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有肯定的流淌性,C錯誤。3.與植物體細(xì)胞雜交相比,動物細(xì)胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)因子分別是()A.細(xì)胞膜的流淌性、離心B.細(xì)胞膜的流淌性、滅活的病毒C.細(xì)胞的全能性、電刺激D.細(xì)胞的全能性、滅活的病毒答案B解析植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流淌性、植物細(xì)胞的全能性,動物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流淌性;動物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等,其中滅活的病毒是其特有的誘導(dǎo)因子,B正確。學(xué)問點二單克隆抗體4.科學(xué)家用滅活的病毒把骨髓瘤細(xì)胞與已免疫的B淋巴細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞,關(guān)于滅活病毒的說法正確的是()A.病毒比較小,可鉆入細(xì)胞內(nèi)B.滅活的病毒已完全死亡,死亡的病毒可以讓細(xì)胞聚集C.滅活的病毒已失去感染活性,對各種動物細(xì)胞不造成破壞,但所保留的融合活性使不同的動物細(xì)胞進行融合D.滅活的病毒帶有目的基因,通過融合可以讓雜交細(xì)胞帶有目的基因答案C解析動物細(xì)胞融合常用滅活的病毒作誘導(dǎo)劑是因為滅活的病毒不再具有感染活性,不會對細(xì)胞造成破壞,但保留融合活性,促使不同的動物細(xì)胞融合,C正確。5.下列關(guān)于利用細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體的敘述,不正確的是()A.給小鼠注射抗原,是為了獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞B.骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞混合培育,是為了獲得融合細(xì)胞C.雜交瘤細(xì)胞進行體外培育,是為了獲得單克隆抗體D.雜交瘤細(xì)胞進行體內(nèi)培育,是為了獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎答案D解析雜交瘤細(xì)胞進行體內(nèi)培育,是為了通過有絲分裂獲得更多的雜交瘤細(xì)胞,從而產(chǎn)生大量單克隆抗體,并不是為了得到胚胎,D錯誤。6.將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”,能夠用于殺死人類某些癌細(xì)胞,其過程如圖所示,下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同B.經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞都能無限增殖并能產(chǎn)生特定抗體C.②過程須要篩選并克隆雜交瘤細(xì)胞D.抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性答案B解析①過程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,都是細(xì)胞膜的流淌性,A正確;經(jīng)①形成的雜交瘤細(xì)胞不肯定都能產(chǎn)生特定抗體,須要經(jīng)過②過程進行克隆化培育和抗體檢測,經(jīng)多次篩選,獲得足夠數(shù)量能分泌所需抗體的細(xì)胞,然后將雜交瘤細(xì)胞進行大規(guī)模培育(包括體內(nèi)培育和體外培育),B錯誤,C正確;抗體的靶向作用使③過程具有高度特異性,D正確。7.如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程,有關(guān)敘述不正確的是()A.圖中試驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌的抗體特異性結(jié)合的抗原B.利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙C.用特定的選擇培育基對乙篩選,融合細(xì)胞均能生長,未融合細(xì)胞均不能生長D.丙需進行克隆化培育和抗體檢測,經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁答案C解析圖中試驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌的抗體特異性結(jié)合的抗原,A正確;滅活的病毒、聚乙二醇和電激等常用于誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合,B正確;用特定的選擇性培育基進行篩選,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞會死亡,只有融合的雜種細(xì)胞才能生長,C錯誤;雜交瘤細(xì)胞經(jīng)選擇培育基的篩選并經(jīng)專一抗體檢測后,培育能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞即可制備單克隆抗體,D正確。8.單克隆抗體與血清抗體相比,最主要的優(yōu)點在于()A.單克隆抗體能夠制成“生物導(dǎo)彈”B.單克隆抗體可以在體外制備C.單克隆抗體特異性強、靈敏度高,并能大量制備D.單克隆抗體的制備過程簡潔答案C解析單克隆抗體最主要的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高,并能大量制備,C正確。9.生產(chǎn)單克隆抗體時,在培育液中加入某種試劑能夠篩選出雜交瘤細(xì)胞,因為該試劑()A.能抑制淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制B.能阻擋淋巴細(xì)胞的原癌基因被激活C.選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制D.能阻擋雜交瘤細(xì)胞核糖體上全部蛋白質(zhì)合成答案C解析由于骨髓瘤細(xì)胞與雜交瘤細(xì)胞都能無限增殖,而生產(chǎn)單克隆抗體須要只選擇出雜交瘤細(xì)胞,因此須要用試劑抑制骨髓瘤細(xì)胞DNA的復(fù)制,因此該試劑的作用為選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制,C正確;這里不存在原癌基因被激活的問題,B錯誤。10.單克隆抗體技術(shù)在生物工程中占有重要的地位,下列有關(guān)單克隆抗體應(yīng)用的敘述錯誤的是()A.作為診斷試劑,具有精確、高效、快速、簡易的優(yōu)點B.作為診斷試劑,可定位診斷腫瘤、心血管畸形、白化病等疾病C.從臨床試驗來看,單克隆抗體主要用于癌癥治療D.在“生物導(dǎo)彈”中,單克隆抗體的作用是定位而不是殺傷答案B解析單克隆抗體在診斷的應(yīng)用上,具有精確、高效、簡易、快速的優(yōu)點,A正確;白化病的表現(xiàn)型特別直觀,不須要單克隆抗體定位診斷,B錯誤;臨床試驗中,單克隆抗體主要用于癌癥治療,也有少量用于其他疾病的治療,C正確;在“生物導(dǎo)彈”中,單克隆抗體作為“瞄準(zhǔn)裝置”,作用是定位,起殺傷作用的是與其相連接的藥物,D正確。[實力提升]11.植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞工程中所用到的技術(shù)與原理不相符的是()A.纖維素酶、果膠酶處理和胰蛋白酶處理——酶的專一性B.植物組織培育和動物細(xì)胞培育——細(xì)胞的全能性C.原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合——細(xì)胞膜的流淌性D.紫草細(xì)胞培育和雜交瘤細(xì)胞的培育——細(xì)胞分裂答案B解析植物細(xì)胞培育和動物細(xì)胞培育的實質(zhì)是利用了細(xì)胞的有絲分裂,B錯誤,D正確;在植物體細(xì)胞雜交中用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁,動物細(xì)胞工程中用胰蛋白酶分別細(xì)胞利用了酶的專一性,A正確;原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流淌性,C正確。12.“篩選”是生物工程中常用的技術(shù)手段,下列關(guān)于篩選的敘述中錯誤的是()A.單克隆抗體制備過程中,在完成細(xì)胞融合后,第一次篩選的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞B.單克隆抗體制備過程中,在完成細(xì)胞融合后,其次次篩選的目的是篩選出針對目標(biāo)抗原的抗體為陽性的雜交瘤細(xì)胞C.基因工程中用不同種限制酶切割載體和含目的基因的DNA片段,酶切產(chǎn)物用DNA連接酶連接,獲得的產(chǎn)物可干脆導(dǎo)入受體細(xì)胞,不須要篩選D.重組質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來答案C解析制備單克隆抗體的過程中有兩次篩選,第一次篩選的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞,其次次篩選的目的是篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,A、B正確;基因工程中一般用同種限制酶切割載體和含目的基因的DNA片段,酶切產(chǎn)物用DNA連接酶連接,獲得的產(chǎn)物干脆導(dǎo)入受體細(xì)胞,不須要篩選,C錯誤;重組質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來,D正確。13.如圖為某同學(xué)依據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的試驗方案。請據(jù)圖回答:(1)該方案能達到預(yù)期效果嗎?____________。緣由是__________________________________。(2)圖中②為________________過程,與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合相比,特有的誘導(dǎo)因素為____________。該細(xì)胞繼承了__________________,因此,不僅能__________________,還有________________的本事。(3)圖中③進行細(xì)胞培育,目的是________________________________。(4)在制備破傷風(fēng)桿菌抗體的過程中,進行了兩次篩選,其目的不同,②是通過篩選獲得______________,④是通過篩選獲得______________________________________。(5)圖中⑤的培育能獲得______________細(xì)胞,便于大規(guī)模培育。(6)破傷風(fēng)桿菌的抗體最終可從____________和____________中提取。(7)該方案的目的是_____________________。答案(1)不能沒有將抗原注入小鼠體內(nèi),無法獲得產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞(2)細(xì)胞融合和篩選滅活的病毒雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)大量繁殖產(chǎn)生特異性抗體(3)在體外條件下大量增殖(4)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞(5)足夠量的雜交瘤(6)細(xì)胞培育液小鼠腹水(7)制備單克隆抗體解析單克隆抗體制備過程首先須要注射與制備的單克隆抗體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)的抗原,否則小鼠體內(nèi)不會發(fā)生特異性免疫反應(yīng),不會產(chǎn)生合成所需抗體的B淋巴細(xì)胞。動物細(xì)胞融合必需在誘導(dǎo)劑的誘導(dǎo)下才能發(fā)生,滅活病毒是動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素。兩種細(xì)胞融合是隨機的,有三種狀況:B淋巴細(xì)胞—B淋巴細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞—骨髓瘤細(xì)胞,B淋巴細(xì)胞—骨髓瘤細(xì)胞,我們須要的是雜交瘤細(xì)胞,它結(jié)合了雙親的遺傳物質(zhì),具備大量增殖和產(chǎn)生抗體的實力,所以需經(jīng)篩選培育。第一次篩選是選擇須要的雜交瘤細(xì)胞,其次次篩選是在雜交瘤細(xì)胞中選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。然后通過擴大培育后就可轉(zhuǎn)移到體外培育液中或小鼠腹腔中生產(chǎn)大量的單克隆抗體。14.肺癌在全國的發(fā)病率居腫瘤之首,小細(xì)胞肺癌是惡性程度最高的一種,上海腫瘤探討所細(xì)胞與分子免疫探討室在國內(nèi)領(lǐng)先研制出一種名叫“2F7”(1)制備單克隆抗體時選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的緣由是__________________________________________。(2)雜交瘤細(xì)胞體內(nèi)培育的優(yōu)點是__________________________________________。(3)靜脈注入而不是口服單克隆抗體的緣由是__________________________________________。(4)單克隆抗體與腫瘤細(xì)胞結(jié)合并發(fā)揮作用的過程屬于________免疫。答案(1)每種B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種特異性抗體,但在體外培育下,不能無限增殖,骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體(2)不須要配制培育液,不須要限制培育液的無菌、無毒、溫度、pH、氣體等條件(3)抗體是蛋白質(zhì),若口服則被消化,使抗體失去其功能(4)體液解析(1)每種B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種特異性抗體,但是不能無限增殖,骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖,但是不能產(chǎn)生抗體。(2)雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培育,不須要配制培育液,不須要限制培育液的無菌、無毒、溫度、pH、氣體等條件。(3)單克隆抗體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),口服后會被消化。(4)在體液免疫中,抗體與抗原結(jié)合,發(fā)揮作用。15.請回答以下與抗X單克隆抗體的制備相關(guān)的問題:(1)首先將________注入小鼠體內(nèi),從小鼠脾臟中獲得免疫細(xì)胞,其中至少有一種________(填細(xì)胞名稱)能分泌抗該抗原的抗體。(2)動物細(xì)胞融合除了采納植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外,還可以采納_____________________。(3)動物細(xì)胞培育液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素等,與植物細(xì)胞培育基相比,二者的主要區(qū)分是__________________________________________。(4)在動物細(xì)胞融合過程中,須要將所選取的組織細(xì)胞離散開,以利于細(xì)胞融合,可用________或____________處理離體組織細(xì)胞使之分散開。(5)______________技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。(6)雜交瘤細(xì)胞從培育基中汲取葡萄糖、氨基酸的主要方式是__________________。答案(1)抗原XB淋巴細(xì)胞(2)滅活的病毒(3)動物細(xì)胞培育基要加入促生長因子、動物血清,植物組織培育基要加入植物激素等(4)胰蛋白酶膠原蛋白酶(5)動物細(xì)胞培育(6)主動運輸解析(1)抗X單克隆抗體,指的是針對特定抗原X制備的單克隆抗體。將抗原X注入小鼠體內(nèi)后,刺激B淋巴細(xì)胞增殖分化為特定細(xì)胞,此細(xì)胞產(chǎn)生和分泌針對抗原X
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