微生物培養(yǎng)技術（第三課時）課件-高二下學期生物人教版選擇性必修3

三、微生物的純培養(yǎng)【任務三】請同學們自主學習教材P11-13頁，小組合作思考討論完成問題。

1.相關概念：培養(yǎng)物？純培養(yǎng)物？純培養(yǎng)？（P11）2.酵母菌的純培養(yǎng)的基本步驟？3.什么是菌落？（P12）4.獲得單菌落的方法？（P12）三微生物的純培養(yǎng)1.培養(yǎng)物：在微生物學中，將接種于培養(yǎng)基內，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體。分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結構的子細胞群體，這就是菌落。菌落：三、微生物的純培養(yǎng)三微生物的純培養(yǎng)1.培養(yǎng)物：在微生物學中，將接種于培養(yǎng)基內，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體。分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結構的子細胞群體，這就是菌落。菌落：如細菌菌落光滑，易與基質脫離；放線菌菌落質地致密，菌落較小而不致廣泛延伸；酵母菌菌落較細菌菌落大而厚；霉菌形成的菌落較疏松，多呈絨毛狀、絮狀。三、微生物的純培養(yǎng)三微生物的純培養(yǎng)1.培養(yǎng)物：在微生物學中，將接種于培養(yǎng)基內，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體。2.純培養(yǎng)物：由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。三、微生物的純培養(yǎng)三微生物的純培養(yǎng)2.純培養(yǎng)物：由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。3.純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。過程三、微生物的純培養(yǎng)三微生物的純培養(yǎng)4.純培養(yǎng)過程：配制培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)接種分離三、微生物的純培養(yǎng)三微生探究·實踐：酵母菌的純培養(yǎng)物的純培養(yǎng)①制備培養(yǎng)基并倒平板②接種和分離酵母菌

（無菌操作）③培養(yǎng)純化的酵母菌馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基上的酵母菌畫三微生物的純培養(yǎng)方法步驟：①制備培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基稱取去皮的馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000mL，加熱煮沸至馬鈴薯軟爛，用紗布過濾。向濾液中加入20g葡萄糖（也可用蔗糖代替）、15?20g瓊脂，用蒸餾水定容至1000mL。②接種和分離酵母菌③培養(yǎng)酵母菌三、微生物的純培養(yǎng)三微生物的純培養(yǎng)方法步驟：①制備培養(yǎng)基滅菌將配制好的培養(yǎng)基轉移到錐形瓶中，加棉塞，包上牛皮紙，并用皮筋勒緊，再放入高壓蒸汽滅菌鍋中，在壓力為100kPa、溫度為121℃的條件下，滅菌15?30min。將5?8套培養(yǎng)皿包成一包，用幾層牛皮紙包緊，放入干熱滅菌箱內，在160?170℃滅菌2h。三、微生物的純培養(yǎng)三微生物的純培養(yǎng)方法步驟：①制備培養(yǎng)基倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。具體操作步驟如下。1.拔出錐形瓶的棉塞。2.將瓶口迅速通過火焰。3.用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，將培養(yǎng)基（10?20mL）倒入培養(yǎng)皿，立即蓋上皿蓋。4.等待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿倒過來放置?？梢杂檬钟|摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺溫度下降到剛剛不燙手即可。平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高；將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。三、微生物的純培養(yǎng)不要完全打開，以免雜菌污染培養(yǎng)基不要完全打開，以免雜菌污染培養(yǎng)基三微生物的純培養(yǎng)三、微生物的純培養(yǎng)倒平板三、微生物的純培養(yǎng)——（一）配制培養(yǎng)基1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？用手觸摸錐形瓶，剛剛不燙手即可4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？不能，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。5.將所倒平板放入37℃的恒溫箱中培養(yǎng)1～2d，觀察是否有菌落存在，這樣做的目的是？2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，所以將培養(yǎng)皿倒置，為什么？防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，同時避免培養(yǎng)基的水分過快的揮發(fā)。檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格（或培養(yǎng)基是否被雜菌污染）三微生物的純培養(yǎng)方法步驟：②接種和分離酵母菌通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落。平板劃線的具體操作如圖的流程圖。玻璃涂布器（涂布平板用）接種針（穿刺接種用）接種環(huán)（劃線接種用）三、微生物的純培養(yǎng)三微生物的純培養(yǎng)②接種和分離酵母菌玻璃涂布器（涂布平板用）接種針（穿刺接種用）接種環(huán)（劃線接種用）①灼燒接種環(huán)，直至接種環(huán)金屬絲燒紅②在火焰旁冷卻接種環(huán)，拔出酵母菌培養(yǎng)液試管的棉塞③試管口通過火焰④在火焰附近用接種環(huán)蘸取一環(huán)菌液⑤試管口通過火焰，并塞上棉塞⑥將皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復以上操作，作第三、四、五次劃線三、微生物的純培養(yǎng)三微生物的純培養(yǎng)平板劃線法：通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。經(jīng)過數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落。連續(xù)劃線法分區(qū)劃線法三、微生物的純培養(yǎng)②接種和分離酵母菌微生物的純培養(yǎng)平板劃線法：通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。經(jīng)過數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落。連續(xù)劃線法分區(qū)劃線法12345②接種和分離酵母菌三微生物的純培養(yǎng)分區(qū)劃線法12345第1次劃線灼燒接種環(huán)滅菌第2次劃線灼燒接種環(huán)滅菌第3次劃線灼燒接種環(huán)滅菌灼燒接種環(huán)滅菌①接種環(huán)只蘸一次菌液，但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次；②劃線首尾不能相接；③每次劃線前灼燒接種環(huán)進行滅菌；④劃線操作結束后，仍需灼燒接種環(huán)，培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)?！酒桨鍎澗€法注意事項】②接種和分離酵母菌4.為什么劃線時要注意不能劃破培養(yǎng)基？一旦劃破，會造成劃線不均勻，難以達到分離單菌落的目的；二是存留在劃破處的單個細胞無法形成規(guī)矩的菌落，菌落會沿著劃破處生長，會形成一個條狀的菌落。三、微生物的純培養(yǎng)12345劃線軌跡生長情況注意事項:①接種環(huán)只沾

次菌液,但要在培養(yǎng)基

位置連續(xù)劃線多次；

②第一次劃線區(qū)和最后一次劃線區(qū)

（能/不能）相接；

③每次劃線前和劃線操作結束時，接種環(huán)需要

；④最后,培養(yǎng)皿需

培養(yǎng)。一不同不能灼燒滅菌倒置三微生物的純培養(yǎng)1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結束時，

仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？灼燒時期目的取菌種前每次劃線前接種結束后殺死接種環(huán)上原有微生物。殺死上次劃線時殘留菌種，使下一次劃線的菌種直接來源上次劃線的末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進行劃線的原因？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的原因？

使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，以便獲得單個菌落。三、微生物的純培養(yǎng)——（二）接種和分離酵母菌三、微生物的純培養(yǎng)警示：在實驗中，不可吃東西、喝水，離開實驗室時一定要洗手，以防止被微生物感染。使用后的培養(yǎng)基在丟棄前一定要進行滅菌處理，以免污染環(huán)境。思考1：為什么要將平板倒置？思考2：為什么要同時放入未接種的平板？可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染作對照，該培養(yǎng)基無菌落說明培養(yǎng)基沒有污染完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個未接種的平板倒置，放入28℃左右(培養(yǎng)溫度因酵母菌種類的不同而稍有差異)的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48h。③培養(yǎng)純化的酵母菌三、微生物的純培養(yǎng)——（三）培養(yǎng)純化的酵母菌2.在未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長?

如果有,說明了什么?

在未接種的培養(yǎng)基表面應該沒有菌落生長，如果有，說明培養(yǎng)基滅菌不徹底或被雜菌污染?？梢栽谂囵B(yǎng)12h和24h后，觀察菌落的大小、形狀、顏色。培養(yǎng)24h后，菌落的大小、形狀是否發(fā)生變化，菌落顏色是否加深，光澤度是否增加，等等3.在接種酵母菌的培養(yǎng)基上,你是否觀察到了單菌落?這些菌落的顏色、形狀和大小是否一致?如果你觀察到了不同形態(tài)的菌落,你能分析出可能是由哪些原因引起的嗎?

在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到單菌落。如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合酵母菌菌落的特點，則說明純化酵母菌的操作成功；如果觀察到了不同形態(tài)的菌落，可能是接種的菌種不純或者無菌操作不規(guī)范等原因引起的。4.你是如何記錄實驗結果的?請與其他同學交流、互評。課堂小結酵母菌的純培養(yǎng)2.接種和分離酵母菌1.制備培養(yǎng)基3.培養(yǎng)酵母菌①配制培養(yǎng)基（馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、水）②滅菌③倒平板（在酒精燈火焰附近操作）培養(yǎng)基：濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌鍋）培養(yǎng)皿：干熱滅菌（干熱滅菌鍋）用接種環(huán)在固體培養(yǎng)基上用平板劃線法接種平板倒置，放入28℃左右的恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)課堂練習打開一條稍大于瓶口的縫隙1.下列關于倒平板的敘述，錯誤的是A.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時倒平板B.倒平板整個過程應在酒精燈火焰旁進行C.完全打開培養(yǎng)皿皿蓋，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋D.為避免水滴滴入培養(yǎng)基，平板應倒過來放置√課堂練習√a區(qū)域應該為劃線的最終區(qū)域，d區(qū)域為劃線的起始區(qū)域2.在分離、純化細菌的實驗中，劃線接種(甲)、培養(yǎng)結果(乙)如下圖，a、b、c、d是劃線的四個區(qū)域。下列敘述錯誤的是A.每次劃線前后都要對接種環(huán)灼燒滅菌B.連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落C.甲圖中的a區(qū)域為劃線的起始區(qū)域D.蘸取菌液和劃線要在酒精燈火焰旁進行思維訓練：評估“水果酵素”的功效是否真實？

“酵素”制作就是利用微生物進行無氧呼吸的原理，進行像制作泡菜一樣的發(fā)酵。這樣制作的“酵素”中可能含有一些簡單的糖和膳食纖維等、蛋白質(包括多種酶)、有機酸等成分，不存在獨有的、特殊的營養(yǎng)物質，其中甚至可能含有微生物發(fā)酵產生的有毒物質,食用后可能會危害人體健康。

因此,“吃水果‘酵素’可以美容、減肥、促進消化和提高免疫力”的論點值得懷疑。所謂“酵素”，就是“酶”的另一種說法。練習與應用一、概念檢測1.判斷下列相關表述是否正確。（1）培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質濃度越高，對微生物的生長越有利。（

）（2）消毒和滅菌的殺菌程度存在差異。（）（3）微生物的純培養(yǎng)物就是不含有代謝廢物的微生物培養(yǎng)物。（）×√×①干制：降低食品的含水量；②腌制：食鹽、糖等制造高滲環(huán)境，抑制微生物的生長和繁殖；③低溫儲存：降低微生物的代謝速率從而抑制微生物的生長和繁殖。

2.日常生活中保存食品的方法有哪些？這些方法是如何阻止或抑制微生物生長的？練習與應用1.某同學將5個手指尖在貼有“洗手前”標簽的培養(yǎng)基上輕輕按一下。然后用肥皂將該手洗干凈，再將5個指尖在貼有“洗手后”標簽的同種培養(yǎng)基上輕輕按一下。將這兩個培養(yǎng)皿放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，發(fā)現(xiàn)貼有“洗手后”標簽的培養(yǎng)皿中菌落較少。請回答：（1）這個實驗中需要進行滅菌處理的材料用具有________________。（2）“將指尖在培養(yǎng)基上輕輕按一下”相當于哪一步操作？（3）洗手后我們就能進行無菌操作了嗎？

操作時，我們可以采用什么方法來避免手上微生物的污染？培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基接種洗手后手上還有一些微生物

通過用酒精棉球擦拭雙手，或戴消過毒的手套等方法來避免手上微