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文檔簡介
微生物培養(yǎng)及藥敏解讀檢驗科一、藥敏結(jié)果的解讀藥敏試驗采用全自動微生物分析儀,為MIC法,有固定的藥敏組合。二、微生物培養(yǎng)目前均為有氧培養(yǎng),可以做的有:普通細菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、支原體培養(yǎng)。培養(yǎng)的目的:使用體外試驗的方法檢測可能導致的病原菌并給以藥敏結(jié)果,為臨床醫(yī)生針對某一特定的臨床感染提供依據(jù)。但培養(yǎng)并不是萬能的。
解讀注意事項1、藥敏試驗是參照美國的CLSI推薦的標準制定的。2、細菌全自動分析儀的藥敏組合是固定的。3、某些細菌對某類抗生素天然耐藥,則不需要做藥敏試驗。4、試驗的藥物代表一類藥,而不是一種藥。細菌耐藥概念多重耐藥(MDR):指細菌同時對三種以上結(jié)構(gòu)不同(作用機制不同)抗菌藥物耐藥,如頭孢菌素、喹諾酮類、氨基糖苷類;泛耐藥(PDR):細菌對本身敏感的所有藥物耐藥;超級細菌:并非科學概念,一般指PDR與部分MDR,沒有確切定義,以下細菌屬于此列:MRSA/VRSA;VRE;MDR-PA,PDR-AB;ESBL(+)+AmpC(+)腸桿菌產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌(產(chǎn)KPC酶、包括產(chǎn)NDM-1細菌)MRSA:耐甲氧西林金黃色葡萄球菌VRSA:耐萬古霉素金黃色葡萄球菌VRE:耐萬古霉素腸球菌ESBLs:超廣譜β-內(nèi)酰胺酶KPC酶:產(chǎn)碳青霉稀酶的一種KPC型NDM-1:Ⅰ型新德里金屬β-內(nèi)酰胺酶
下面就以上幾種情況分別解讀關(guān)于細菌耐藥我們應(yīng)該知道什么?天然耐藥的抗菌藥物(肯定無效)可以選擇的抗菌藥物(可能有效)細菌藥敏試驗可以提供哪些信息?如何解讀細菌藥敏試驗結(jié)果?泛耐藥銅綠假單胞菌/不動桿菌對抗假單胞青霉素(替卡西林、哌拉西林),抗假單胞氨基糖苷(吉他霉素、妥布霉素),抗假單胞三代頭孢(頭孢哌酮、頭孢他啶)和亞胺培南、環(huán)丙沙星、氨曲南等均耐藥可能有效的藥物多粘菌素B(E)米諾環(huán)素,多西環(huán)素替加環(huán)素(銅綠假單胞菌耐藥)大劑量舒巴坦可根據(jù)被檢測菌的MIC,選擇聯(lián)合用藥藥敏試驗結(jié)果的報告選擇性藥敏結(jié)果選擇性報告--A組:首選,常規(guī)試驗和報告
--B組:首選抗生素,在下列情況下選擇使用細菌對A組抗生素耐藥病人對A組抗生素過敏嚴重感染或多部位、多種細菌混合感染控制傳染病流行
--C組:備選抗生素,在下列情況下使用對一個或多個首選藥耐藥的地區(qū)流行株感染對不常見菌感染的治療控制傳染病的流行--U組:包含某些僅用于或首選治療泌尿道感染的抗菌藥物
與臨床溝通中常見問題
1、我們想用的藥物在藥敏試驗中沒有做?可能是天然耐藥可能是藥物的敏感性被其他藥物所預報
與臨床溝通中常見問題
2.為什么有的細菌報告很多種藥物,有的僅報告幾種藥物?報告的藥物種類根據(jù)細菌種類的不同而有所不同,如銅綠假單胞菌報告的藥物較多,而嗜麥芽窄食單胞菌報告的藥敏較少CLSI藥敏建議
與臨床溝通中常見問題
3、是否能將所用的藥都做藥敏試驗?沒有必要:通過耐藥機制和標志性藥物可以預測其他抗菌藥物的敏感性沒有可能:不是所用藥物都可以做藥敏試驗(需要藥物在體外穩(wěn)定,需要有操作標準和解釋標準)
與臨床溝通中常見問題
5、培養(yǎng)陽性的細菌都需要用抗菌藥物治療嗎?不是的培養(yǎng)陽性感染,可能為污染(血培養(yǎng)),可能為定植(痰培養(yǎng))任何結(jié)果必須結(jié)合臨床情況進行評價(很重要)感染部位的清創(chuàng)、引流、換藥比使用抗菌藥物更加重要改善患者全身情況:器官功能支持,糾正酸堿平衡,電解質(zhì)紊亂,低蛋白血癥,高血糖等
與臨床溝通中常見問題
6、選擇藥敏報告敏感的藥物,為什么臨床治療無效?
體外藥敏試驗只能預測體內(nèi)治療效果,并不等同;一般來說,耐藥=治療無效;敏感≠治療有效??赡懿皇钦嬲闹虏【ㄎ廴净蚨ㄖ簿┘毦旧硪蛩兀ㄈ缯T導耐藥,生物被膜)感染部位與藥代動力學因素細菌的MIC,給藥劑量和用藥方式藥敏試驗藥物中有些藥物單獨使用無效,但可以與其他藥物聯(lián)合用藥藥物劑型及生物利用度(純品、商品)
與臨床溝通中常見問題7、涂片鏡檢結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果不吻合?涂片鏡檢是報告所有檢見的細菌,而培養(yǎng)的目的是檢出致病菌。一些苛氧菌需在特殊的環(huán)境或培養(yǎng)基上才能生長。
與臨床溝通中常見問題
8、取的明顯就是膿液標本,為何鑒定報告為無菌生長?我們做的是有氧培養(yǎng),膿液可能為厭氧菌感染??赡芗毦淮罅康闹行粤<毎淌?。
與臨床溝通中常見問題
9、鑒定結(jié)果明明寫著四聯(lián)球菌、革蘭氏陽性桿菌,為何沒有藥敏結(jié)果?四聯(lián)球菌為微球菌,一般不引起人體致病,為非致病菌,故考慮污染可能。藥敏結(jié)果參照CLSI標準,目前革蘭氏陽性菌沒有參照標準,故暫不能做藥敏試驗,若需治療可參照陽性球菌用藥。
與臨床溝通中常見問題
10、一般培養(yǎng)不是三天出結(jié)果嗎,今天第四天了怎么還沒出來?一般培養(yǎng)經(jīng)48小時后,即第三天出報告,若需分離致病菌的則第四天出報告。
與臨床溝通中常見問題11、今天的培養(yǎng)結(jié)果怎么與前天的不一樣?取材是否規(guī)范。痰標本,有時選優(yōu)勢菌做,就可能導致兩次不一樣。
與臨床溝通中常見問題12.明顯稀便,培養(yǎng)結(jié)果為何正常?大便普通培養(yǎng),通常只能鑒定志賀菌、沙門菌感染,致病性大腸桿菌我們沒有鑒定血清。懷疑霍亂時,需開霍亂弧菌培養(yǎng)??赡懿《靖腥?輪狀病毒)。微生物培養(yǎng)
微生物檢驗標本的正確采集、運送及處理,與細菌的培養(yǎng)、鑒定結(jié)果有十分密切的關(guān)系,醫(yī)生、護士、檢驗人員均應(yīng)重視微生物標本的正確采集的有關(guān)問題,并有責任向患者及家屬進行正確采集標本的宣傳和指導。(一)微生物檢驗標本采集、運送、驗收和處理注意事項1、標本采集(1)申請單必須標記清楚姓名、性別、年齡、病原號、標本來源(具體寫明)、檢查項目(目的要明確)等,以便試驗室能夠合理選擇培養(yǎng)環(huán)境和培養(yǎng)基。(2)盡量在抗生素應(yīng)用前采集標本、以提高陽性檢出率和避免漏檢。(3)標本采集應(yīng)嚴格執(zhí)行無菌操作。(4)采集標本的容器必須經(jīng)滅菌處理,不可用消毒劑。4、注意事項(1)微生物檢驗樣本必須按要求采集轉(zhuǎn)運,否則將影響檢查結(jié)果,并給評價其意義帶來麻煩甚至誤導。(2)微生物樣本極易被污染,污染的樣本雜菌大量繁殖抑制病原菌生長,條件致病菌也是致病菌,如污染條件致病菌將誤導臨床,造成對患者的損害以及經(jīng)濟和時間的浪費。(3)某些標本離體極易死亡,應(yīng)在床邊采取和接種或立即保溫送至實驗室檢驗。室溫放置或延遲送檢,可使檢出的陽性率降低;不能使用冷藏的樣本檢驗。(4)厭氧菌樣本采取必須隔絕空氣,混入空氣的樣本影響檢驗結(jié)果,不能使用。2、痰及下呼吸道標本采集和處理
注意事項:痰經(jīng)過口腔,所以患者應(yīng)用清水漱口數(shù)次,盡量排除口腔內(nèi)大量雜菌。(1)自然咳痰法:以晨痰為佳,用冷開水漱口后用力深咳出肺部的痰,吐至無菌容器中送檢,痰量不得少于1ML。(2)小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,將拭子深入咽部,小兒因壓舌板刺激引起咳嗽,噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上即可送檢。(3)支氣管、支氣管穿刺、支氣管肺泡灌洗等采集法,均由醫(yī)生操作。其中氣管導管法:氣管插管吸取下呼吸道痰液。(4)呼吸道標本采集方法:鼻咽拭子法,清水漱口后,用壓舌板壓舌根,用棉拭子在病人咽后部涂抹數(shù)次,放入無菌管中立即送檢。
3、尿液標本采集和處理
通常留取晨尿,尿液采集后要及時送檢,并保證2小時內(nèi)接種;不能及時送檢和接種時,尿液應(yīng)置2-6℃冰箱保存并于8小時內(nèi)接種。(1)中段尿采集法:成年男性和女性分別用肥皂水或1:1000高錳酸鉀水溶液清洗尿道口和外陰部,再用冷涼白開水沖洗,排尿時棄去前段尿,收集中段尿10-20ML置于帶蓋的無菌容器內(nèi)立即送檢。(2)導尿法:用導尿管留取10-20ML尿液置無菌容器中;長期留置導尿管者應(yīng)更換新導尿管留尿,留置導尿時,用無菌消毒法消毒導尿管外部及導尿管口,用無菌注射器抽取尿液送檢(不可采集尿液收集袋中的尿液送檢)。3、尿液標本采集和處理
通常留取晨尿,尿液采集后要及時送檢,并保證2小時內(nèi)接種;不能及時送檢和接種時,尿液應(yīng)置2-6℃冰箱保存并于8小時內(nèi)接種。
(1)中段尿采集法:成年男性和女性分別用肥皂水或1:1000高錳酸鉀水溶液清洗尿道口和外陰部,再用冷涼白開水沖洗,排尿時棄去前段尿,收集中段尿10-20ML置于帶蓋的無菌容器內(nèi)立即送檢。(2)導尿法:用導尿管留取10-20ML尿液置無菌容器中;長期留置導尿管者應(yīng)更換新導尿管留尿,留置導尿時,用無菌消毒法消毒導尿管外部及導尿管口,用無菌注射器抽取尿液送檢(不可采集尿液收集袋中的尿液送檢)。2、痰及下呼吸道標本采集和處理
(1)自然咳痰法:以晨痰為佳,用冷開水漱口后用力深咳出肺部的痰,吐至無菌容器中送檢,痰量不得少于1ML。(2)小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,將拭子深入咽部,小兒因壓舌板刺激引起咳嗽,噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上即可送檢。(3)支氣管、支氣管穿刺、支氣管肺泡灌洗等采集法,均由醫(yī)生操作。其中氣管導管法:氣管插管吸取下呼吸道痰液。(4)呼吸道保本采集方法:鼻咽拭子法,清水漱口后,用壓舌板壓舌根,用棉拭子在病人咽后部涂抹數(shù)次,放入無菌管中立即送檢。注意事項:痰經(jīng)過口腔,所以患者應(yīng)用清水漱口數(shù)次,盡量排除口腔內(nèi)大量雜菌。4、糞便采集和處理(1)采集時間:1、腹瀉患者于急性期,盡量在用藥前采集糞便。2、傷寒患者于發(fā)病2周后采集糞便。3、懷疑霍亂時立即采集糞便送檢。(2)采集方法:1、自然排便法:取新鮮糞便的黏液、膿血等有意義成份2-3克或1-2ML,置于無菌容器中送檢。2、直腸拭子法:難以獲得糞便或排便困難者及幼兒采用此法。5、腦脊液標本(1)采集時間:懷疑腦膜炎時應(yīng)立即采集腦脊液,最好是在應(yīng)用抗生素之前采集腦脊液。(2)采集方法:無菌腰穿采集腦脊液1-3ML注入血培養(yǎng)瓶中。6、穿
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