劉寶瑞 循環(huán)腫瘤細(xì)胞 醫(yī)學(xué)專業(yè)課學(xué)習(xí)資料

循環(huán)腫瘤細(xì)胞與臨床

CirculatingTumorCells

劉寶瑞MDPh.D

南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院腫瘤中心

南京大學(xué)臨床腫瘤研究所

循環(huán)腫瘤細(xì)胞簡介P.Paterlini-Brechot,N.L.Benali/CancerLetters253(2007)180–204分離方法密度梯度離心

OncoquickLabonadisk……

濾膜法

ISET系統(tǒng)

尼龍濾膜……免疫磁珠法CellSearch系統(tǒng)負(fù)性分選SET系統(tǒng)……微流控芯片微柱芯片魚骨樣HB芯片……基于物理特性基于免疫學(xué)特性分離方法密度梯度離心傳統(tǒng)密度梯度離心僅作為預(yù)處理，用于去除紅細(xì)胞與血漿分離方法密度梯度離心韓國三星研發(fā)了盤狀裝置和DGM密度離心液Jong-MyeonPark,MinseokSKimetal.AnalyticalChemistryDOI:10.1021/ac403456t分離方法濾膜法最早的ISET系統(tǒng)敏感性可檢出1毫升血中的一個CTC但是回收率僅50-60%殘留大量PBMC,肉眼識別困難GiovannaVonaetal.AmericanJournalofPathology,Vol.156,No.1,January2000分離方法濾膜法HenryK.Linetal.ClinCancerRes.2010October15;16(20):5011–5018濾膜的孔徑和排列進(jìn)行了優(yōu)化，獲得了超過90%的回收率分離方法CellSearch系統(tǒng)優(yōu)點(diǎn)：可重復(fù)性好，自動化程度高FDA批準(zhǔn)用于預(yù)測轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者預(yù)后敏感性高，可檢出0.5ml中的一個CTC缺點(diǎn)：儀器價格昂貴，檢測費(fèi)用很高無法回避EMT帶來的漏檢分離方法負(fù)性分選SET系統(tǒng)去除血液中的其他細(xì)胞成分以獲取CTC，可以有效避免EMT的影響Cytelligen公司研發(fā)了商品化的SET負(fù)性分選系統(tǒng)分離方法微流控芯片最早的CTC微流控芯片：直徑100微米，高度100微米的微柱陣列，表面吸附有抗EpCAM抗體CTC實(shí)驗(yàn)捕獲率約80%分離方法微流控芯片重新設(shè)計(jì)了微流道的結(jié)構(gòu)，加上了魚骨樣橫梁CTC實(shí)驗(yàn)捕獲率約90%分離方法微流控芯片在魚骨樣橫梁的基礎(chǔ)上加上硅納米線襯底，以針對EpCAM的aptamer代替抗體CTC實(shí)驗(yàn)捕獲率進(jìn)一步提高QinglinShenetal.AdvMater.2013Apr24;25(16):2368–2373其他分離方法LabChip.2013,14,63NatProtoc.2014Mar;9(3):694-710.CancerLett.2013Jul10;335(1):225-31.其他分離方法層出不窮，利用了CTC的免疫學(xué)和物理學(xué)特性，大多只有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，缺乏臨床驗(yàn)證其他分離方法IntJOncol.

2012Oct;41(4):1241-50.將針對CTC的抗體連接在導(dǎo)絲前段，后將導(dǎo)絲置入靜脈一段時間以捕獲CTC其他分離方法ACSApplMaterInterfaces.

2014Mar26;6(6):4550-9基于靜脈置入裝置捕捉CTC的思路，我們進(jìn)行的一點(diǎn)嘗試CTC的臨床價值判斷預(yù)后預(yù)測療效指導(dǎo)治療CTC的臨床價值判斷預(yù)后CTC的臨床價值判斷預(yù)后CTC的臨床價值預(yù)測療效CTC的臨床價值指導(dǎo)治療CTC的臨床價值CTC——個體化治療潛在平臺CTC檢測結(jié)果存在與血漿、組織并不完全一致，目前尚未明確原因CTC的臨床價值激光顯微切割后對單個CTC檢測突變，PCR成功率不高，與組織檢測結(jié)果不一致性同樣存在CTC——個體化治療潛在平臺CTC的臨床價值WGA和測序技術(shù)引入CTC分析運(yùn)用全基因組擴(kuò)增（WGA）和測序，作者發(fā)現(xiàn)研究納入的腸癌患者，大部分的突變狀態(tài)在原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶和CTC中是一致的CTC的臨床價值CTC蛋白水平的分析發(fā)現(xiàn)可用來預(yù)測雄激素受體的重新激活和去勢治療抵抗的發(fā)生CTC的臨床價值CTC的RNA表達(dá)分析（熒光原位雜交）免疫熒光直觀反映上皮相關(guān)蛋白RNA（E）和間質(zhì)相關(guān)蛋白RNA（M）的表達(dá)情況發(fā)現(xiàn)E和M表型的CTC數(shù)量比例變化與療效