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PAGE6-課題1微生物的試驗(yàn)室一、選擇題1.菌種鑒定的重要依據(jù)是(B)A.細(xì)菌的大小、形態(tài)和顏色 B.菌落的大小、形態(tài)、顏色C.有無(wú)鞭毛 D.培育基的不同[解析]不同種類的細(xì)菌所形成的菌落在大小、形態(tài)、光澤度、顏色、硬度、透亮度等方面具有肯定特征,所以,每種細(xì)菌在肯定條件下所形成的菌落,可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。單個(gè)的細(xì)菌用肉眼是看不見的,故細(xì)菌的個(gè)體特征不能作菌種鑒定的依據(jù)。2.用平板劃線法或稀釋涂布平板法都可以純化大腸桿菌,二者的共同點(diǎn)有幾項(xiàng)(B)①可以用相同的培育基②都要運(yùn)用接種環(huán)進(jìn)行接種③都須要在火焰旁邊進(jìn)行接種④都可以用來(lái)計(jì)數(shù)活菌A.一項(xiàng) B.二項(xiàng)C.三項(xiàng) D.四項(xiàng)[解析]平板劃線法或稀釋涂布平板法都運(yùn)用固體培育基,①正確;平板劃線法采納接種針進(jìn)行操作,而稀釋涂布平板法采納涂布器進(jìn)行操作,②錯(cuò)誤;純化時(shí),要進(jìn)行無(wú)菌操作,須要在火焰旁接種,避開空氣中的微生物混入培育基,③正確;平板劃線法一般用于分別而不能用于計(jì)數(shù),④錯(cuò)誤。故選B。3.下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨培育基的敘述,錯(cuò)誤的是(D)A.培育基應(yīng)先調(diào)pH再進(jìn)行滅菌B.培育基應(yīng)先滅菌再分裝到培育皿C.熔化瓊脂時(shí)要不斷用玻璃棒攪拌D.運(yùn)用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)干脆將滅菌鍋密封加熱[解析]把滅菌鍋內(nèi)的水加熱煮沸,將其中原有的冷空氣徹底排出后,將鍋密閉,接著加熱使鍋內(nèi)氣壓逐步上升。4.下圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的依次為1,2,3,4,5。下列操作方法正確的是(D)A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B.劃線操作必需在火焰上進(jìn)行C.最可能得到所需菌落的區(qū)域是1D.在1,2,3,4,5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌[解析]操作前要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌;劃線操作必需在火焰旁進(jìn)行,而不是火焰上;最可能得到所需菌落的區(qū)域是5。5.制備各種牛肉膏蛋白胨固體培育基,關(guān)于倒平板的詳細(xì)描述正確的是(C)①待培育基冷卻至40℃左右時(shí),在酒精燈火焰旁邊倒平板②將滅過菌的培育皿放在桌面上,左手拔出棉塞③右手拿錐形瓶,使瓶口快速通過火焰④用左手的拇指和食指完全打開皿蓋⑤右手將錐形瓶中培育基倒入培育皿,左手馬上蓋上培育皿的皿蓋⑥等待平板冷卻5~10s,將平板倒過來(lái)放置,使皿蓋在下,皿底在上A.①③④⑤ B.④⑤⑥C.③⑤ D.①②④⑥[解析]瓊脂是一種多糖,在98℃以上可溶解于水,在45℃以下凝固,倒平板時(shí)高于50℃則會(huì)燙手,低于50℃時(shí)若不能剛好操作,瓊脂會(huì)凝固。無(wú)菌操作應(yīng)貫穿于操作的全過程,皿蓋全打開則空氣中的微生物會(huì)進(jìn)入培育基。6.做“微生物的分別與培育”試驗(yàn)時(shí),下列敘述正確的是(D)A.任何培育基都必需含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽B.倒平板時(shí),應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培育基濺到皿蓋上C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D.進(jìn)行系列稀釋操作時(shí),用移液管吸取相應(yīng)的菌液注入試管后,還要用手指輕壓移液管上的橡皮頭,吹吸三次,使菌液與水充分混勻[解析]培育基不肯定都含有碳源、氮源等物質(zhì),如培育自養(yǎng)型微生物的培育基中不須要加入碳源,分別自生固氮菌的培育基中不須要加入氮源,A錯(cuò)誤;倒平板時(shí),用左手將培育皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培育基(約10~20mL)倒入培育皿,左手馬上蓋上培育皿的皿蓋,B錯(cuò)誤;接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后再挑取菌落,以防將菌種燙死,C錯(cuò)誤;進(jìn)行系列稀釋操作時(shí),用移液管吸取相應(yīng)的菌液注入試管后,還要用手指輕壓移液管上的橡皮頭,吹吸三次,使菌液與水充分混勻,D正確。7.稀釋涂布平板法是微生物培育中的一種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(C)A.操作中須要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋B.需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培育基表面C.不同濃度的菌液均可在培育基表面形成單個(gè)菌落D.操作過程中對(duì)培育基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理[解析]若菌液濃度過大,形成的菌落連在一起,得不到單個(gè)的菌落,C錯(cuò)誤。8.如圖表示培育和純化X細(xì)菌的部分操作步驟,下列相關(guān)敘述正確的是(C)A.對(duì)試驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行滅菌處理B.步驟①倒平板操作時(shí)倒好后應(yīng)馬上將其倒過來(lái)放置,防止水蒸氣落在培育基上造成污染C.步驟③應(yīng)多個(gè)方向劃線,使接種物漸漸稀釋,培育后出現(xiàn)單個(gè)菌落D.步驟④劃線結(jié)束后在皿蓋上做好標(biāo)注[解析]對(duì)試驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒處理,A錯(cuò)誤;步驟①倒平板操作后應(yīng)等待平板冷卻至凝固(大約需5至10分鐘)后,再將其倒過來(lái)放置,防止水蒸氣落在培育基上造成污染,B錯(cuò)誤;步驟③應(yīng)多個(gè)方向劃線,使接種物漸漸稀釋,最終培育后出現(xiàn)單個(gè)菌落,C正確;步驟④劃線結(jié)束后應(yīng)在皿底上做好標(biāo)注,D錯(cuò)誤。故選C。9.培育基、培育皿、接種環(huán)、試驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶采納的滅菌、消毒方法依次是(A)①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤10.獲得純凈培育物的關(guān)鍵是(D)A.將用于微生物培育的器皿、接種用具和培育基等器具進(jìn)行滅菌B.接種純種細(xì)菌C.相宜環(huán)境條件下培育D.防止外來(lái)雜菌的入侵[解析]要獲得純凈的培育物,必需防止外來(lái)雜菌的污染。11.將接種后的培育基和一個(gè)未接種的培育基都放入37℃恒溫箱的目的是(B)A.對(duì)比視察培育基有沒有被微生物利用B.對(duì)比分析培育基是否被雜菌污染C.沒必要放入未接種的培育基D.為了下次接種時(shí)再運(yùn)用[解析]對(duì)未接種的培育基進(jìn)行培育,起到比照作用,可確定培育基是否被雜菌污染,B正確。12.(2024·康杰中學(xué)高二期中)分別純化大腸桿菌最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。下列有關(guān)這兩種方法的敘述正確的是(D)A.兩種方法都可以用來(lái)計(jì)數(shù)活菌B.單菌落均是由一個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的C.都須要運(yùn)用接種環(huán)進(jìn)行接種D.兩種方法的目的都是得到單菌落[解析]平板劃線法只能用來(lái)分別大腸桿菌,不能用來(lái)計(jì)數(shù),A項(xiàng)錯(cuò)誤;單菌落可能是由一個(gè)或幾個(gè)聚在一起的細(xì)菌繁殖而來(lái)的,B項(xiàng)錯(cuò)誤;稀釋涂布平板法須要運(yùn)用涂布器,C項(xiàng)錯(cuò)誤;兩種方法的目的都是得到單菌落,前者用于分別,后者可用于分別、計(jì)數(shù),D項(xiàng)正確。二、非選擇題13.炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀。對(duì)炭疽病疑似患者,可依據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過試驗(yàn)確診。(1)細(xì)菌培育:采集疑似患者的樣本,分別培育,獲得可疑菌落。(2)細(xì)菌鑒定:試驗(yàn)流程如圖所示:①對(duì)配制的液體培育基等需實(shí)行__高壓蒸汽__滅菌法;試驗(yàn)所用液體培育基的碳源為__有機(jī)碳__(填“無(wú)機(jī)碳”或“有機(jī)碳”)。②選擇可疑菌落制片后,用__顯微鏡__視察,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。③接種可疑菌后,35℃培育24h,液體培育基變渾濁,緣由是__細(xì)菌大量繁殖__。比照組試管中應(yīng)加入__等量生理鹽水__,與試驗(yàn)組同時(shí)培育6h時(shí),若試驗(yàn)組液體培育基的渾濁度比比照組__低__(填“高”或“低”),則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染;反之則解除。④對(duì)解除的疑似患者及易感人群,可接種炭疽桿菌疫苗,刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體,與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細(xì)胞除T細(xì)胞、B細(xì)胞外,還有__吞噬細(xì)胞__效應(yīng)B(漿)細(xì)胞__。[解析](2)①培育基應(yīng)用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。炭疽桿菌同化類型為異養(yǎng)型,應(yīng)選有機(jī)碳作為其碳源。②微生物個(gè)體小,肉眼視察不到,必需借助顯微鏡才能視察到菌體特征。③在液體培育基中,細(xì)菌大量繁殖會(huì)導(dǎo)致培育液變渾濁;該試驗(yàn)中試驗(yàn)變量為是否加入噬菌體,所以比照組除不加噬菌體外,其他處理都應(yīng)當(dāng)和試驗(yàn)組保持一樣(即應(yīng)加入不含噬菌體的等量生理鹽水)。噬菌體可破壞細(xì)菌細(xì)胞,從而使培育液變清。④在特異性免疫的感應(yīng)階段,吞噬細(xì)胞參加了對(duì)抗原的攝取、處理和呈遞,效應(yīng)B(漿)細(xì)胞是干脆產(chǎn)生抗體的細(xì)胞。14.某航空公司宣布,啟用以生物柴油(俗稱“地溝油”)為燃料的客機(jī)執(zhí)行飛行任務(wù),以削減碳排放。科學(xué)家發(fā)覺,在微生物M(單細(xì)胞)產(chǎn)生的脂肪酶作用下,從地溝油中提取的植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油。(1)用培育基培育微生物時(shí),培育基中應(yīng)有__碳源__、__氮源__、__水__和__無(wú)機(jī)鹽__等養(yǎng)分,同時(shí)還必需滿意微生物生長(zhǎng)對(duì)__特別養(yǎng)分物質(zhì)__、__pH__、__氧氣__的要求。在篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí),應(yīng)用__選擇__培育基,可以在培育基中添加__植物油__作為唯一碳源。(2)培育基滅菌采納的最適方法是__高壓蒸汽滅菌__法。(3)圖示是采納純化微生物M培育的兩種接種方法接種后培育的效果圖,過程一的接種方法是__平板劃線法__,過程二的接種方法是__稀釋涂布平板法__,接種后應(yīng)留意培育皿要__倒置__放置。[解析](1)微生物的培育基的基本成分包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源及特別生長(zhǎng)因子等。同時(shí)還必需滿意微生物生長(zhǎng)對(duì)特別養(yǎng)分物質(zhì)、pH、氧氣的要求。已知脂肪酶能夠催化脂肪水解為脂肪酸和甘油,篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物時(shí),宜用植物油作為培育基中的唯一碳源,從功能上講,這種培育基屬于選擇培育基。(2)培育基一般有高壓蒸汽滅菌法滅菌。(3)接種微生物常用的方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法,獲得圖過程一的接種方法是平板劃線法,過程二的接種方法是稀涂布平板法。15.下表是培育某微生物的培育基的配方,請(qǐng)回答下列問題:試劑牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂加水定容至用量5g10g5g20g1000mL(1)培育基的類型許多,但培育基中一般都含有水、碳源、__氮源__和無(wú)機(jī)鹽。上述培育基配方中能充當(dāng)碳源的成分是__蛋白胨和牛肉膏__。培育基配制完成以后,一般還要調(diào)整pH并對(duì)培育基進(jìn)行__滅菌__處理。(2)微生物在生長(zhǎng)過程中對(duì)各種成分的須要量不同,配制培育基時(shí)各成分要有合適的__比例__。在燒杯中加入瓊脂加熱時(shí)要不停地__攪拌__,防止__瓊脂糊底引起燒杯裂開__。(3)將配制好的培育基分裝到試管中,加棉塞后,若干個(gè)試管一捆,包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入__高壓蒸汽滅菌鍋__中滅菌,壓力為__100__kPa,溫度為__121_℃__,時(shí)間為__15~30_min__。滅菌完畢拔掉電源,待鍋內(nèi)壓力自然降到0時(shí),將試管取出。假如棉塞上沾有培育基,此試管應(yīng)__廢棄__。(4)運(yùn)用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)應(yīng)留意,先向鍋內(nèi)倒入__適量水__。把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后,將鍋密閉。(5)從一支試管向另一支試管接種時(shí)應(yīng)留意,接種環(huán)要在酒精燈__外__(填“內(nèi)”或“外”)焰滅菌,并且待接種環(huán)__冷卻__后沾取菌種,試管口不能離開酒精燈火焰旁邊。將接種的試管在適溫下培育,長(zhǎng)成菌落后放入__4__℃冰箱中保藏。[解析](1)培育基中一般都含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源。培育基配制完成后要調(diào)pH和滅菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素,可作為有機(jī)碳源。(2)在配制培育基時(shí)養(yǎng)
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