2025年外研版2024選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年外研版2024選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、動物乳腺生物反應(yīng)器是一項(xiàng)利用轉(zhuǎn)基因動物的乳腺代替?zhèn)鹘y(tǒng)的生物發(fā)酵；進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)可供治療人類疾病或用于保健的活性蛋白質(zhì)的現(xiàn)代生物技術(shù)?？茖W(xué)家已在牛和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了抗凝血酶；血清白蛋白、生長激素等重要藥品。大致過程如圖所示。以下敘述錯誤的是（）

A.通過③形成的重組質(zhì)粒具有人的藥用蛋白基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因即可B.④通常采用顯微注射技術(shù)C.在轉(zhuǎn)基因母牛的乳腺細(xì)胞中人的藥用蛋白基因才會得以表達(dá)，因此可以從乳汁中提取藥物D.該技術(shù)生產(chǎn)藥物的優(yōu)點(diǎn)是產(chǎn)量高、質(zhì)量好、易提取2、研究人員將猴的胚胎細(xì)胞（a）中的細(xì)胞核取出，移植人一雌猴的去核卵母細(xì)胞（b）中，得到重組細(xì)胞（c），經(jīng)培養(yǎng)獲得胚胎并移植到另一雌猴（d）體內(nèi)進(jìn)一步發(fā)育，最終產(chǎn)出幼猴（e）。下列敘述正確的是（）A.a、b、c過程都在體外進(jìn)行，屬于細(xì)胞工程范疇B.e的細(xì)胞內(nèi)的全部基因都來自a，而b、d僅提供營養(yǎng)C.該項(xiàng)研究屬于胚胎工程，目的是在短時間內(nèi)能獲得大量優(yōu)質(zhì)猴D.a必須是雄性猴的胚胎細(xì)胞，得到的c相當(dāng)于受精卵，所以e屬于有性生殖的后代3、如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)示意圖。據(jù)圖分析下列敘述正確的是（）

A.3號試管中樣品的稀釋倍數(shù)為103倍B.用4號試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)約為5號試管的10倍C.5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1．7×108個D.該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會比實(shí)際活菌數(shù)目要高4、動物體內(nèi)的細(xì)胞之所以能夠維持正常的生命活動，是因?yàn)闄C(jī)體給這些細(xì)胞提供了適宜的條件，包括充足的營養(yǎng)、穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境。下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)所需條件的敘述，錯誤的是（）A.培養(yǎng)液中通常含有糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等B.培養(yǎng)液需要定期更換，防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害C.培養(yǎng)液需要適宜的溫度、pH和滲透壓，維持細(xì)胞生存D.動物細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境中需要O2，不需要CO25、限制性內(nèi)切酶介導(dǎo)的整合技術(shù)（REMI）是一種研究基因的新方法。用限制酶切得到的線性質(zhì)粒與該酶組成的轉(zhuǎn)化混合物進(jìn)入并轉(zhuǎn)化細(xì)胞時，會切割受體細(xì)胞基因組，產(chǎn)生與線性質(zhì)粒互補(bǔ)的黏性末端，線性質(zhì)粒通過堿基配對插入基因組。如果插入發(fā)生在一個已知基因的內(nèi)部，則該基因的功能可能改變或喪失，即發(fā)生了基因突變。下列相關(guān)敘述，不正確的是（）A.當(dāng)外源質(zhì)粒帶有抗性基因時，可根據(jù)其在受體細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)情況篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞B.REMI技術(shù)使基因突變具有隨機(jī)性，且限制酶識別序列越長，隨機(jī)性越大C.所有的限制酶都具有專一性D.限制酶、DNA連接酶、載體是REMI技術(shù)的三種分子工具6、基因編輯技術(shù)CRISPR/Cas9系統(tǒng)包括兩個組分：一個是人工合成的短鏈RNA（sgRNA）和一個來自細(xì)菌的核酸酶Cas9。sgRNA與目的基因中希望被編輯的DNA序列相結(jié)合，然后Cas9切割該DNA序列，使DNA雙鏈斷裂，此時向細(xì)胞中加入大量可用于修復(fù)的模板DNA，細(xì)胞就會以這些片段為模板合成DNA，從而使特定的堿基序列被引入基因組中、下列說法錯誤的是（）A.Cas9決定了基因編輯的位點(diǎn)和基因編輯的效率B.基因編輯技術(shù)可以破壞某個基因使其失去功能C.基因突變是不定向的而基因編輯能定向改變基因D.Cas9類似限制酶能夠使雙鏈DNA中的磷酸二酯鍵斷裂7、某突變型細(xì)菌能通過合成蛋白N促進(jìn)腺嘌呤吸收，使其增殖速率加快。物質(zhì)X可以促進(jìn)細(xì)菌增殖。為研究X與蛋白N合成、腺嘌呤吸收及細(xì)菌增殖的關(guān)系，取若干培養(yǎng)瓶分成5組，分別編號為甲、乙、丙、丁、戊組，每個培養(yǎng)瓶加入等量培養(yǎng)液和細(xì)菌稀釋液，再分別向乙、丙、丁、戊組每個培養(yǎng)瓶中加入等體積用M溶液配制的1、10、50、100mmol·L-1的X溶液。適宜條件下培養(yǎng)，每隔一段時間采樣測定培養(yǎng)液中的細(xì)胞數(shù)、腺嘌呤濃度和細(xì)胞內(nèi)蛋白N濃度，結(jié)果如圖。下列敘述錯誤的是（）

A.每組應(yīng)設(shè)置若干個培養(yǎng)瓶，其中甲組為對照組，應(yīng)加入等體積清水B.加入物質(zhì)X前需抽樣測定培養(yǎng)液中的細(xì)胞數(shù)、腺嘌呤濃度和細(xì)胞內(nèi)蛋白N濃度C.蛋白N濃度需在破碎細(xì)胞后測定，細(xì)菌數(shù)量用細(xì)菌計(jì)數(shù)板在高倍鏡下鏡檢統(tǒng)計(jì)D.物質(zhì)X能促進(jìn)突變型細(xì)菌蛋白N的合成，且一定范圍內(nèi)濃度越大，促進(jìn)作用越強(qiáng)8、DNA分子探針能用于檢測（）A.甲亢患者B.乙肝患者C.壞血病D.缺鐵貧血病患者9、某實(shí)驗(yàn)室做了如圖所示的實(shí)驗(yàn)研究；下列與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的敘述正確的是（）

A.過程①導(dǎo)入的誘導(dǎo)基因使成纖維母細(xì)胞發(fā)生基因突變B.丙細(xì)胞既能持續(xù)分裂，又能分泌單一的抗體C.過程②的培養(yǎng)過程中實(shí)現(xiàn)了動物細(xì)胞的全能性D.過程③④所用的培養(yǎng)基中都含有聚乙二醇評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)10、轉(zhuǎn)MT-like基因的衣藻對Pb、Cd等重金屬離子的抗性明顯增強(qiáng)，對Cb2+富集效應(yīng)顯著。某研究小組計(jì)劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)擴(kuò)增MT-like基因，并進(jìn)一步通過基因工程手段構(gòu)建凈化重金屬廢水的工程菌。下列有關(guān)PCR操作的敘述，正確的是（）A.PCR擴(kuò)增需要加入Taq酶和DNA連接酶B.需設(shè)計(jì)一對與MT-like基因兩端序列互補(bǔ)的引物C.設(shè)計(jì)引物時要避免引物之間形成互補(bǔ)堿基對D.長度相同，但GC含量高的引物需要更高的退火溫度11、為探究提高“日照藍(lán)莓”品質(zhì)和產(chǎn)量的新途徑，某生物興趣小組以“日照藍(lán)莓”的主要品種——兔眼藍(lán)莓為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行脫毒處理，其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.取材時可選用兔眼藍(lán)莓的芽尖等分生組織作為外植體B.用70%酒精和5%左右次氯酸鈉對外植體消毒時，要控制好時間以避免造成傷害C.對分化培養(yǎng)基滅菌前需添加生長素類、細(xì)胞分裂素類和赤霉素類等生長調(diào)節(jié)劑D.脫毒后的兔眼藍(lán)莓果實(shí)體積更大，產(chǎn)量更高，后代個體中更不易被病毒感染12、讓羊產(chǎn)牛奶，科學(xué)家對此做了相關(guān)的構(gòu)想，過程如下圖所示。下列說法不正確的是（）

A.圖中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有動物體細(xì)胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和動物細(xì)胞培養(yǎng)等B.進(jìn)行G操作時應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的囊胚或原腸胚C.若研究發(fā)現(xiàn)羊N細(xì)胞中線粒體基因的表達(dá)產(chǎn)物豐富，故它的產(chǎn)奶率高，則小羊a會有這一優(yōu)良性狀D.通過上述技術(shù)得到小羊a和b的過程為有性生殖13、下圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過程，在人-鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會以隨機(jī)方式丟失，通過分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位。現(xiàn)檢測細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（）

A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上D.胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上14、北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白有11個氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述不正確的是（）

A.過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序B.將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C.過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D.應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其表達(dá)15、細(xì)菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在與其他細(xì)菌的競爭中占優(yōu)勢，其中tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白。研究人員利用野生型細(xì)菌X及其不同突變體進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)：在固體培養(yǎng)基表面放置一張能隔離細(xì)菌的濾膜，將一種菌（下層菌）滴加在濾膜上后再放置第二張濾膜，滴加等量的另一種菌（上層菌），共同培養(yǎng)后，對上、下層菌計(jì)數(shù)得到如圖結(jié)果。下列分析正確的是（）

A.實(shí)驗(yàn)中的培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基和濾膜均需要進(jìn)行滅菌處理B.對上、下層菌計(jì)數(shù)時應(yīng)采用稀釋涂布平板法而不能用顯微鏡直接計(jì)數(shù)C.由甲、乙、丙三組結(jié)果可推測tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性D.野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體和tcel突變體的競爭中均占優(yōu)勢16、通過設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。下圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識別位點(diǎn)。下列敘述正確的是（）

A.引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識別位點(diǎn)有利于目的基因定向插入載體B.PCR的過程主要包括變性→延伸→復(fù)性（退火），溫度逐漸降低C.第3輪PCR，引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長的突變基因D.每一輪PCR都消耗引物和原料，需要在操作中及時補(bǔ)充17、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計(jì)品種乙組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。為確定品種乙的II階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計(jì)5個濃度水平的實(shí)驗(yàn)，其中細(xì)胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是II和Ⅲ階段B.實(shí)驗(yàn)中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細(xì)胞分裂素濃度的實(shí)驗(yàn)中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)18、下圖表示哺乳動物精子和卵細(xì)胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細(xì)胞進(jìn)行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。19、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？____________________________20、轉(zhuǎn)化的概念：是______進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持______的過程。21、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中_____，并且可以______，使目的基因能夠______作用。22、獲取目的基因的方法______、______、______23、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

組織培養(yǎng)技術(shù)除了在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用外，還廣泛應(yīng)用于另一個重要的領(lǐng)域，即______。24、我國是一個愛好和平的國家，也是曾經(jīng)遭受生物武器傷害的國家。我國政府對生物武器的態(tài)度是什么？我們?yōu)槭裁凑J(rèn)同這種態(tài)度？__________評卷人得分四、判斷題(共1題，共4分)25、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，就是聽之任之，不管不問（______）A.正確B.錯誤評卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共32分)26、《本草綱目》記載；“蟬花可治療驚癇，夜啼心悸，功同蟬蛻”。蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體，內(nèi)含蟲草多糖；甘露醇和必需氨基酸等活性成分。研究人員從天然蟬花中分離純化蟬擬青霉菌株進(jìn)行人工培養(yǎng)。

(1)制備培養(yǎng)基：

①該實(shí)驗(yàn)選擇馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基，配方如下：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，KH2PO42g，MgSO40.5g，瓊脂20g，用蒸餾水定容至1000mL，自然pH，培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供_____等營養(yǎng)成分（至少寫出2種），該培養(yǎng)基的自然pH為______性范圍。

②為了便于篩選蟬擬青霉菌株，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制_____的生長。該培養(yǎng)基從功能上分類屬于______培養(yǎng)基。

③配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理，目的是_______。檢測固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是_____。

(2)蟬擬青霉的分離純化：取新鮮蟬花，挑取蟲體胸腔中的少量菌絲采用_______法接種至PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。

(3)發(fā)酵生產(chǎn)：發(fā)酵生產(chǎn)中常用液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)。下表為發(fā)酵菌絲體和天然蟬花的主要成分及含量的測定結(jié)果，據(jù)表判斷_______（填“能”或“不能”）用發(fā)酵菌絲體替代天然蟬花，判斷的理由是_______。粗蛋白（%）粗纖維（%）灰份（%）水分（%）蟲草多糖（mg/g）甘露醇（mg/g）發(fā)酵菌絲體25．388．327．878．9233．278．9天然蟬花19．653．127．849．8128．553．627、科研人員進(jìn)行了土壤中某種固氮菌的分離和純化培養(yǎng)；實(shí)驗(yàn)流程如圖1所示。農(nóng)藥；除草劑的長期使用，會使土壤受到嚴(yán)重污染。某科研小組為篩選能分解除草劑草甘膦的微生物，其流程示意圖如圖2所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)圖1中，“？”處是__________，純化培養(yǎng)時采用的接種方法是_______________，該方法可用于菌落數(shù)的統(tǒng)計(jì)，原因是_________________________。

(2)圖1中純化培養(yǎng)所利用的培養(yǎng)基在營養(yǎng)成分和物理性質(zhì)上的特點(diǎn)分別是____________________，圖1和圖2中的兩個培養(yǎng)基在用途方面的共同點(diǎn)是____________________。

(3)圖2中的接種方法需要連續(xù)劃線，且除第一次劃線外，后面的每一次劃線都要從上一次劃線的末端開始，目的是_________________。結(jié)果有的菌落周圍有透明圈而有的沒有，原因是________________。28、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病?？蒲腥藛T對此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實(shí)驗(yàn)組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并采用___________技術(shù)檢測導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，檢測肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。29、三氯生是一種抑菌物質(zhì)，具有優(yōu)異的貯存穩(wěn)定性，可以替代抗生素用于基因工程中篩選含目的基因的受體細(xì)胞。已知fabV（從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生。

(1)通過PCR方法擴(kuò)增fabV基因時，先要根據(jù)_____設(shè)計(jì)兩種特異性引物序列，以確保Taq酶從引物的3′端延伸DNA鏈，至少需要經(jīng)過_____次擴(kuò)增才能獲得8個雙鏈等長的目的基因。

(2)基因工程的核心步驟是_____；某科研團(tuán)隊(duì)將可以受溫度調(diào)控的基因插入上述選出的重組質(zhì)粒中，構(gòu)建了溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒（如圖2）。其中C基因在低溫下會抑制P2，R基因在高溫下會抑制P1，如果將lacZ基因和GFP（綠色熒蛋白）基因插入圖2質(zhì)粒中，使得最后表現(xiàn)為低溫下只表達(dá)GFP蛋白，而高溫下只表達(dá)lacZ蛋白。則lacZ基因插在_____之間，GFP基因的插入位置及注意點(diǎn)是_____。

(3)若以大腸桿菌為受體細(xì)胞，篩選上述插入了GFP基因的受體細(xì)胞的依據(jù)是：大腸桿菌能在含_____的培養(yǎng)基上生長，且_____。評卷人得分六、綜合題(共2題，共10分)30、近年來；《舌尖上的中國》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中不乏利用微生物發(fā)酵制作的美食，如素有“東方奶酪”之稱的“石寶寨牌”忠州豆腐乳；中國泡菜領(lǐng)導(dǎo)品牌“吉香居”等。請回答下列有關(guān)問題。

（1）我國釀醋的歷史悠久；其主要生產(chǎn)工藝流程如圖。

在果酒制作時，酒精發(fā)酵階段，參與反應(yīng)的酵母菌菌種來自于葡萄皮上的野生型酵母菌，在___________________的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。當(dāng)氧氣和糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將__________________________________。

（2）制作吉香居泡菜時，起主要作用的微生物是____________．泡菜制作中鹽和水的比例是_____。泡菜中的亞硝酸鹽過多會對人體產(chǎn)生危害，通常用________法檢測亞硝酸鹽含量。

（3）“石寶寨牌”忠州豆腐乳前期發(fā)酵是在嚴(yán)格的無菌條件下溫度應(yīng)控制在___________，并保持一定的濕度，然后向長滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用_______________，同時，鹽還能____________，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。之后要加入配置好的鹵湯，其中鹵湯中加酒的含量應(yīng)控制在12%左右。酒精含量過高，_____________；酒精含量過低，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)。31、瘦素是一種由脂肪組織分泌的蛋白質(zhì)類激素；能夠調(diào)節(jié)機(jī)體代謝，促進(jìn)能量消耗和減輕體重。

(1)下丘腦特定腦區(qū)細(xì)胞中酪氨酸激酶JAK2的激活是瘦素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)所必需的，而S蛋白作為信號分子依賴其特定的____________與JAK2結(jié)合；增強(qiáng)JAK2激酶的活性，研究人員對S在瘦素信號通路中的調(diào)控作用開展研究。

(2)研究人員計(jì)劃利用Cre酶（可以特異性識別并切割loxp序列）獲得在所有表達(dá)瘦素受體（LepR）的神經(jīng)元中特異性敲除S基因的小鼠.為實(shí)現(xiàn)此目的，一方面需要將____________與Cre酶基因連接獲得第一種轉(zhuǎn)基因小鼠，另一方面需要得到在____________基因兩端分別插入loxp序列的第二種轉(zhuǎn)基因小鼠.再將兩種小鼠雜交后子一代相互交配，再從子二代篩選得到S基因敲除小鼠（LepR-S-ko小鼠），以下結(jié)果能說明LepR-S-ko小鼠構(gòu)建成功的有：____________。

A.小鼠腦組織提取DNA經(jīng)PCR檢測到cre基因。

B.小鼠腦組織中LepR的mRNA含量顯著下降。

C.小鼠腦中應(yīng)用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測到S蛋白含量顯著降低。

D.小鼠的體重顯著增加。

E.小鼠皮下脂肪細(xì)胞體積顯著增大。

(3)科研人員檢測了LepR-S-ko小鼠和對照小鼠的體溫變化情況，圖1結(jié)果表明LepR神經(jīng)元中的S蛋白____________。

研究人員據(jù)此推測S是下丘腦-交感神經(jīng)-棕色脂肪組織細(xì)胞產(chǎn)熱軸的關(guān)鍵組分并進(jìn)行了相關(guān)檢測，檢測部位及實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表，請據(jù)此補(bǔ)充完成瘦素的體溫調(diào)節(jié)機(jī)制：。檢測部位實(shí)驗(yàn)結(jié)果下丘腦特定腦區(qū)注：pStat3代表被磷酸化的Stat3，其含量與神經(jīng)元的興奮性正相關(guān)交感神經(jīng)

______

(4)請根據(jù)以上研究，提出一個關(guān)于S蛋白的值得進(jìn)一步研究的問題：____________。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、A【分析】【分析】

1；基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因。

啟動子在基因的首段；它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選。

2；若用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物；通常將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，通過顯微注射法等方法，導(dǎo)入哺乳動物的受精卵中，最終培育的轉(zhuǎn)基因動物進(jìn)入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁生產(chǎn)所需要的藥物，因而稱為乳腺生物反應(yīng)器。

【詳解】

A；若用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物；通常將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，A錯誤；

B；受體細(xì)胞為動物細(xì)胞時；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法為顯微注射技術(shù)，B正確；

C；構(gòu)建基因表達(dá)載體時；將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在了一起，人的藥用蛋白基因在轉(zhuǎn)基因母牛的乳腺細(xì)胞中才會得以表達(dá)，因此可以從乳汁中提取藥物，C正確；

D；相對于傳統(tǒng)方法；利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物的優(yōu)點(diǎn)是產(chǎn)量高、質(zhì)量好、易提取，D正確。

故選A。2、A【分析】【分析】

根據(jù)試題分析，該克隆猴e的細(xì)胞質(zhì)基因來自b，細(xì)胞核基因來自a，故該克隆猴的大部分性狀和e相同，小部分性狀和b相同；據(jù)此答題。

【詳解】

A、a、b；c過程都在體外進(jìn)行；屬于細(xì)胞工程范疇，A正確；

B、克隆猴e的細(xì)胞質(zhì)基因來自b，細(xì)胞核基因來自a，b；d還能提供營養(yǎng)；B錯誤；

C；項(xiàng)研究屬于細(xì)胞工程；目的是在短時間內(nèi)能獲得大量優(yōu)質(zhì)猴，C錯誤；

D；a可是雌性或雄性猴的胚胎細(xì)胞；得到的c是重組細(xì)胞，e屬于無性生殖的后代，D錯誤。

故選A。

【點(diǎn)睛】3、B【分析】【分析】

從土壤中分離尿素分解菌的一般步驟是：土壤取樣；選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。圖中5支試管為梯度稀釋；最后經(jīng)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)在30~300的平板，取其平均值，進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)公式為（C÷V）×M。（C為平均菌落數(shù)，V為涂布液體積，M為稀釋倍數(shù)）

【詳解】

A、將10g土樣加入到90mL無菌水中后，土樣稀釋10倍，再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號試管中的樣品，故3號試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍；A錯誤；

B；4號試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)；其稀釋倍數(shù)為5號試管的10倍，如果稀釋倍數(shù)適當(dāng)，操作等正確，其得到的菌落平均數(shù)可能是5號的10倍，B正確；

C、5號試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3÷0.1×106=1.7×109個；C錯誤；

D；稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個或多個細(xì)菌細(xì)胞長成一個菌落；使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會比實(shí)際活菌數(shù)目要低，D錯誤。

故選B。4、D【分析】【分析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無菌；無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物。（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。

【詳解】

A；培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)通常含有糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動物血清等；A正確；

B；培養(yǎng)液需要定期更換；以清除代謝廢物，防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害，B正確；

C；培養(yǎng)液需要適宜的溫度、pH和滲透壓；維持細(xì)胞生存，C正確；

D、動物細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境中需要95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）；D錯誤。

故選D。5、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因；標(biāo)記基因可將含有目的基因的重組質(zhì)粒篩選出來，故當(dāng)外源質(zhì)粒帶有抗性基因時，可根據(jù)其在受體細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)情況篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞，A正確；

B；分析題意可知；REMI技術(shù)是一種切割基因的方法，其本質(zhì)是基因工程，該技術(shù)可引發(fā)基因突變；由于限制酶能夠識別特點(diǎn)序列，并在特定位點(diǎn)進(jìn)行切割，故限制酶識別序列越長，隨機(jī)性越小，B錯誤；

C；限制酶能識別特定的核苷酸序列；并在特定位點(diǎn)進(jìn)行切割，即所有的限制酶都具有專一性，C正確；

D；結(jié)合題意可知；REMI技術(shù)需要用限制酶切割質(zhì)粒，且需要進(jìn)入受體細(xì)胞發(fā)揮作用，則其本質(zhì)是基因工程技術(shù)，基因工程中需要用到限制酶、DNA連接酶、載體三種工具，D正確。

故選B。6、A【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；測與表達(dá)。

2；從分子水平上檢測目的基因的方法：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因－－DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA－－分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)－－抗原－抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

A；由題干可知；Cas9只能切割與sgRNA結(jié)合的DNA序列，所以決定基因編輯位點(diǎn)的是sgRNA，而不是Cas9，A錯誤；

B；基因編輯技術(shù)可以修改特定基因的堿基排列順序；因此可以通過去除啟動子等方式使得某個基因無法進(jìn)行表達(dá)，B正確；

C；基因突變具有不定向性；而基因編輯技術(shù)可以對特定基因進(jìn)行特定的修改，是定向改變，C正確；

D；Cas9和限制酶一樣；都可以切割DNA，使得DNA雙鏈斷裂，說明二者都能使得DNA中的磷酸二酯鍵斷裂，D正確。

故選A。7、A【分析】【分析】

1；該實(shí)驗(yàn)的目的是為了研究不同濃度物質(zhì)X與細(xì)菌增殖、蛋白N合成及腺嘌呤吸收量的關(guān)系；因此自變量是物質(zhì)X的濃度，因變量是細(xì)胞數(shù)、培養(yǎng)液中腺嘌呤剩余濃度，其余均為無關(guān)變量，無關(guān)變量應(yīng)該保持相同且適宜。

2；探究實(shí)驗(yàn)應(yīng)該遵循的原則：對照原則和單一變量原則。

【詳解】

A；為減少實(shí)驗(yàn)誤差；每組應(yīng)設(shè)置若干個培養(yǎng)瓶，其中甲組作為對照組，應(yīng)加入等體積M溶液，A錯誤；

B；加入物質(zhì)X前需測定每組培養(yǎng)瓶的細(xì)胞數(shù)、培養(yǎng)液中腺嘌呤濃度和蛋白N濃度作為前測數(shù)據(jù)測定并記錄；B正確；

C；蛋白N濃度需在破碎取樣細(xì)胞后測定；細(xì)菌細(xì)胞數(shù)可使用細(xì)菌計(jì)數(shù)板在高倍鏡下鏡檢計(jì)數(shù)，C正確；

D；根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析；物質(zhì)X能促進(jìn)突變型細(xì)菌對蛋白N的合成，且一定范圍內(nèi)濃度越大，促進(jìn)作用越強(qiáng)，D正確。

故選A。8、B【分析】【分析】

基因診斷技術(shù)它的基本原理是：互補(bǔ)的DNA單鏈能夠在一定條件下結(jié)合成雙鏈；即能夠進(jìn)行雜交，這種結(jié)合是特異的，即嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)的原則進(jìn)行，它不僅能在DNA和DNA之間進(jìn)行，也能在DNA和RNA之間進(jìn)行，因此，當(dāng)用一段已知基因的核酸序列作出探針，與變性后的單鏈基因組DNA接觸時，如果兩者的堿基完全配對，它們即互補(bǔ)地結(jié)合成雙鏈，從而表明被測基因組DNA中含有已知的基因序列。

【詳解】

A；甲亢是由于甲狀腺激素分泌過多導(dǎo)致的；不能用DNA分子探針來檢測，A錯誤；

B；乙肝是由于乙肝病毒引起的；而乙肝病毒可以用DNA分子探針來檢測，B正確；

C；壞血病主要是由于缺維生素C引起的；不能用DNA分子探針來檢測，C錯誤；

D；缺鐵貧血病是由于缺鐵引起的；不能用DNA分子探針來檢測，D錯誤。

故選B。9、B【分析】【分析】

分析題圖可知：①是將目的基因?qū)胧荏w動物細(xì)胞；②是干細(xì)胞培養(yǎng)過程中的增殖分化，③是誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合，④是培養(yǎng)雜交細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體。

【詳解】

A；分析題圖可知；圖中過程①導(dǎo)入的誘導(dǎo)基因使成纖維母細(xì)胞發(fā)生基因重組，A錯誤；

B；丙細(xì)胞由能無限增殖的甲細(xì)胞和能分泌特定抗體的乙細(xì)胞融合而成；因此丙細(xì)胞既能持續(xù)分裂，又能分泌單一的抗體，B正確；

C；細(xì)胞全能性是指已高度分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能；過程②為干細(xì)胞的增殖分化過程，沒有實(shí)現(xiàn)動物細(xì)胞的全能性，C錯誤；

D；過程③所用的培養(yǎng)基中含有聚乙二醇；過程④所用的培養(yǎng)基中不需要聚乙二醇，D錯誤。

故選B。二、多選題(共8題，共16分)10、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。

【詳解】

A；DNA連接酶催化DNA片段連接；Taq酶催化脫氧核苷酸連接，故PCR擴(kuò)增不需要DNA連接酶，A錯誤；

B；PCR技術(shù)的原理是堿基互補(bǔ)配對和DNA半保留復(fù)制；其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物，因此需設(shè)計(jì)一對與MT-like基因兩端序列互補(bǔ)的引物，B正確；

C；為避免引物自連；設(shè)計(jì)引物時要避免引物之間形成互補(bǔ)堿基對，C正確；

D；因G-C堿基對之間的氫鍵多于A-T堿基對之間的氫鍵；GC堿基對含量高的雙鏈的穩(wěn)定性更高，故GC堿基對含量高的引物需要更高的退火溫度，D正確。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】11、A:B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)技術(shù)：

1；過程：離體的植物組織；器官或細(xì)胞(外植體)→愈傷組織→胚狀體→植株(新植體)。

2；原理：植物細(xì)胞的全能性。

3；條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等)；②一定的營養(yǎng)(無機(jī)、有機(jī)成分)和植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)。

【詳解】

A；取材時可選用兔眼藍(lán)莓的芽尖等分生組織作為外植體；這是因?yàn)檠考夥至淹?，且很少帶有病毒，甚至不含毒，A正確；

B；用70%酒精和5%左右次氯酸鈉對外植體消毒時；要控制好時間以避免造成傷害，否則外植體會受到損失，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，B正確；

C；生長調(diào)節(jié)劑應(yīng)該在培養(yǎng)基滅菌后添加；否則高溫可能使其失去效果，C錯誤；

D；脫毒后的兔眼藍(lán)莓果實(shí)體積更大；產(chǎn)量更高，后代個體中含病毒較少，但并不是不易被病毒感染，D錯誤。

故選AB。12、B:C:D【分析】【分析】

分析圖解：圖中A表示目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，B表示受精卵通過早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因羊N，C表示羊N的體細(xì)胞中取核，D表示羊O的卵母細(xì)胞取核，E表示細(xì)胞核移植，F(xiàn)表示早期胚胎培養(yǎng)，再進(jìn)行G胚胎分割再通過胚胎移植獲得小羊ab。

【詳解】

A、圖中A表示目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，B表示受精卵通過早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因羊N，C表示羊N的體細(xì)胞中取核，D表示羊O的卵母細(xì)胞取核，E表示細(xì)胞核移植，F(xiàn)表示早期胚胎培養(yǎng)，再進(jìn)行G胚胎分割再通過胚胎移植獲得小羊ab；故圖中涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有動物體細(xì)胞核移植；胚胎移植、胚胎分割和動物細(xì)胞培養(yǎng)等，A正確；

B；進(jìn)行G操作時應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的囊胚；因囊胚期細(xì)胞未分化，而原腸胚已經(jīng)分化，不能進(jìn)行胚胎分割，B錯誤；

C；通過圖解分析可知；小羊只獲得了羊N的細(xì)胞核，其細(xì)胞質(zhì)中的基因不會遺傳給小羊，C錯誤；

D；上述核移植技術(shù)得到克隆動物；屬于無性生殖，D錯誤。

故選BCD。13、A:C:D【分析】【分析】

分析題干信息：Ⅰ保留X；11號染色體；Ⅱ保留2、11號染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17號染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號染色體上。

【詳解】

A；動物細(xì)胞融合過程中；可以利用滅活的仙臺病毒或聚乙二醇作誘導(dǎo)劑促進(jìn)細(xì)胞融合，A正確；

B；細(xì)胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號染色體；故不會是鼠-鼠融合細(xì)胞，B錯誤；

CD；根據(jù)分析可知；芳烴羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上，胸苷激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，CD正確。

故選ACD。14、A:C:D【分析】【分析】

分析題圖：①表示反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過程；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；之后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將目的基因?qū)敕呀M織塊；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，將導(dǎo)入目的基因的番茄組織細(xì)胞培養(yǎng)成抗凍番茄植株?；虮磉_(dá)載體通常由啟動子；目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能將質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞。

【詳解】

A；過程①是通過人工合成法獲取的目的基因；由于真核生物體內(nèi)的基因含有不能編碼蛋白質(zhì)的序列（內(nèi)含子），導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄合成的目的基因與原基因有較大的差異，因此人工合成的目的基因不能用于比目魚基因組測序，A錯誤；

B；抗凍蛋白的11個氨基酸的重復(fù)序列重復(fù)次數(shù)越多；抗凍能力越強(qiáng)，并不是抗凍基因的編碼區(qū)重復(fù)次數(shù)越多抗凍能力越強(qiáng)，抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因已不是原來的抗凍基因，因此不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白，B正確；

C；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；基因表達(dá)載體通常由啟動子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，可以通過DNA分子雜交或PCR技術(shù)檢測受體細(xì)胞是否含有目的基因，C錯誤；

D；利用DNA探針技術(shù)檢測目的基因是否導(dǎo)入到受體細(xì)胞；但表達(dá)的產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)，可利用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否表達(dá)出來，D錯誤。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】15、A:B:C【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；為避免雜菌的污染；實(shí)驗(yàn)中的濾膜、培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基等均需滅菌處理，A正確；

B；對活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法是稀釋涂布平板法；具體方法是：先將菌體進(jìn)行梯度稀釋，再涂布到濾膜的表面，待菌落數(shù)穩(wěn)定時進(jìn)行計(jì)數(shù)，不能用顯微鏡直接計(jì)數(shù)的原因是顯微鏡直接計(jì)數(shù)不能區(qū)分死菌和活菌，B正確；

C；tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白；乙組中野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel-tcil雙突變體，后者無法產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在競爭中占據(jù)優(yōu)勢；而在丙組中，野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel突變體，后者可以產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生長受到抑制，由此推測，tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性，C正確；

D；由甲組、乙組可知；野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體的競爭中均占優(yōu)勢，由甲組、丙組可知，野生型細(xì)菌X在與tcel突變體的競爭中不占優(yōu)勢，D錯誤。

故選ABC。16、A:C【分析】【分析】

PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制；步驟包括高溫變性；復(fù)性、延伸。該過程需要耐高溫的DNA聚合酶催化，需要四種游離的脫氧核苷酸做原料。根據(jù)圖中可得，由于引物的一個堿基在不影響與模板鏈整體配對的前提下不與目的基因配對，再利用PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)了目的基因的定點(diǎn)誘變。其技術(shù)原理是堿基互補(bǔ)配對原則。

【詳解】

A；引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識別位點(diǎn)；可以配合載體的限制酶識別位點(diǎn)，幫助目的基因定向定點(diǎn)插入運(yùn)載體，避免發(fā)生自身環(huán)化，A正確；

B；在PCR反應(yīng)過程中變性大約94℃→復(fù)性大約55℃→延伸大約72℃；B錯誤；

C；第3輪PCR中；物質(zhì)②是引物2以引物1拓展得到的DNA鏈為模板進(jìn)行復(fù)制得到的，故引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長的突變基因，C正確；

D；PCR一次大概有30個循環(huán)；每一輪PCR都消耗引物和原料，是在最初加入，不是后期補(bǔ)充，D錯誤。

故選AC。17、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細(xì)胞分裂素；同時使用生長素和細(xì)胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發(fā)生基因的選擇性表達(dá)，A錯誤；

B；實(shí)驗(yàn)至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個濃度水平的實(shí)驗(yàn)，則細(xì)胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細(xì)胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。三、填空題(共7題，共14分)18、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細(xì)胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點(diǎn)：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機(jī)能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細(xì)胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點(diǎn)睛】

本題考查卵細(xì)胞的形成過程和受精作用等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生識記相關(guān)細(xì)節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用19、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因穩(wěn)定和表達(dá)21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】穩(wěn)定存在遺傳至下一代表達(dá)和發(fā)揮22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因文庫人工合成PCR技術(shù)23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。24、略

【分析】【詳解】

我國是一個愛好和平的國家，也是曾經(jīng)遭受生物武器傷害的國家，如在抗日戰(zhàn)爭中就遭受到了日軍發(fā)動的細(xì)菌戰(zhàn)的傷害，由于生物武器致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣，因而我們深知生物武器不僅能對我國、甚至?xí)φ麄€人類造成毀滅性的災(zāi)難，因此我國政府在1998年6月重申了我國對生物武器的態(tài)度，即為不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散?！窘馕觥课覈且粋€愛好和平的國家，由于生物武器致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣，生物武器不僅能對我國、甚至?xí)φ麄€人類造成毀滅性的災(zāi)難，因此我國政府在1998年6月重申了我國對生物武器的態(tài)度，即為：

在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。四、判斷題(共1題，共4分)25、B【分析】【詳解】

理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，正確的做法是趨利避害，而不能因噎廢食，所以本題錯誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共32分)26、略

【分析】【分析】

為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物；實(shí)驗(yàn)所配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理；可將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間，以檢測培養(yǎng)基的滅菌效果，若培養(yǎng)基中無菌落長出，說明培養(yǎng)基的滅菌是合格的；在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）①馬鈴薯中含有淀粉；蛋白質(zhì)和無機(jī)鹽等物質(zhì)；故培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為蟬擬青霉生長提供碳源、氮源、無機(jī)鹽等營養(yǎng)成分；

培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性；培養(yǎng)細(xì)菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，即培養(yǎng)蟬擬青霉的培養(yǎng)基的自然pH為酸性范圍。

②氯霉素等抗生素可以通過抑制肽聚糖（細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分）的合成來抑制細(xì)菌的生長；而對真菌的生長無影響。為了便于篩選蟬擬青霉（真菌）菌株，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入氯霉素等抗生素以抑制細(xì)菌的生長，該培養(yǎng)基從功能上分類屬于選擇培養(yǎng)基。

③為了殺滅培養(yǎng)基中的微生物；配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理；將滅菌后的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間，若培養(yǎng)基中無菌落長出，說明固體培養(yǎng)基的滅菌是合格的。

（2）蟬擬青霉的分離純化：由（1）的題干信息可知；PDA為固體培養(yǎng)基，在固體培養(yǎng)基上接種微生物的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）根據(jù)題意“蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體，內(nèi)含蟲草多糖、甘露醇和必需氨基酸等活性成分”，并結(jié)合表格信息可知，發(fā)酵菌絲體中各種活性成分的含量明顯高于天然蟬花，故能用發(fā)酵菌絲體來替代天然蟬花。【解析】(1)碳源；氮源、無機(jī)鹽酸細(xì)菌選擇殺滅培養(yǎng)基中的微生物將滅菌的固體培養(yǎng)基放置在適宜的溫度下培養(yǎng)一段時間；觀察是否長出菌落。

(2)平板劃線（稀釋涂布平板）

(3)能發(fā)酵菌絲體活性成分的含量明顯高于天然蟬花27、略

【分析】【分析】

將微生物接種到固體培養(yǎng)基常用稀釋涂布平板法；接種前先要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在一定的稀釋度的菌液里，聚集在一起的微生物能分散成單個細(xì)胞，在適宜的條件下培養(yǎng)讓菌體進(jìn)行繁殖，能夠在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。稀釋涂布平板操作：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取出時，要讓多余的酒精在燒杯中滴盡。②取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡冷卻8-10s。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基上，涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻。

【詳解】

（1）圖1中是將土壤懸浮液取1mL；加入9mL無菌水進(jìn)行稀釋10倍。圖1中微生物接種方式為稀釋涂布平板法。該方法可以用于對菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，因?yàn)楫?dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面可以獲得由單個細(xì)菌繁殖而成的單菌落，通過統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)量可以推測所涂菌液中細(xì)菌的數(shù)量。

（2）土壤中某種固氮菌的分離和純化培養(yǎng)；培養(yǎng)基需要采用固體培養(yǎng)基，才可用于稀釋涂布平板法，且因?yàn)槭欠蛛x固氮菌，所以培養(yǎng)基中不加氮源。圖1和圖2中的兩個培養(yǎng)基都是用于從多種微生物中分離目的菌種。

（3）圖2中接種方法為平板劃線法，且除第一次劃線外，后面的每一次劃線都要從上一次劃線的末端開始，目的是將聚集的菌種逐步稀釋，分散到培養(yǎng)基表面，最終達(dá)到分離的效果。圖2中培養(yǎng)基時為了篩選出能分解除草劑草甘膦的微生物，所以有的菌落中的細(xì)菌能分解草甘膦，菌落周圍因?yàn)椴莞熟⒈环纸舛霈F(xiàn)透明圈，有的菌落中的細(xì)菌不能分解草甘膦，菌落周圍不能形成透明圈。【解析】(1)無菌水稀釋涂布平板法當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時；培養(yǎng)基表面可以獲得由單個細(xì)菌繁殖而成的單菌落，通過統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)量可以推測所涂菌液中細(xì)菌的數(shù)量。

(2)沒有氮源；屬于固體培養(yǎng)基從多種微生物中分離出目的菌。

(3)將聚集的菌種逐步稀釋，分散到培養(yǎng)基表面，最終達(dá)到分離的效果有的菌落中的細(xì)菌能分解草甘膦，菌落周圍因?yàn)椴莞熟⒈环纸舛霈F(xiàn)透明圈，有的菌落中的細(xì)菌不能分解草甘膦，菌落周圍不能形成透明圈28、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運(yùn)轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因?yàn)檫@兩者改變會導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時保證在不同的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實(shí)驗(yàn)組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進(jìn)行檢測，即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長IDUA蛋白量比其他實(shí)驗(yàn)組都多，說明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實(shí)驗(yàn)可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀，進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細(xì)胞內(nèi)都沒有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異。【解析】(1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細(xì)胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異29、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：

①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；

③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原一抗體雜交技術(shù)。

④個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；圖1中①-④依次為目的基因的獲取、表達(dá)載