2025年北師大版選擇性必修3生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年北師大版選擇性必修3生物上冊月考試卷838考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、現(xiàn)代生物技術(shù)造福人類的同時，也可能引起一系列的安全和倫理問題，下列說法不恰當(dāng)?shù)氖牵ǎ〢.我國政府不支持任何生殖性克隆人實驗B.我國主張全面禁止和徹底銷毀生物武器C.只要有證據(jù)表明轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品有害，就應(yīng)禁止該技術(shù)的應(yīng)用D.我國已經(jīng)對轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品實施產(chǎn)品標(biāo)識制度2、下列有關(guān)倒平板的操作，正確的是（）A.接種后的平板需倒置放置于超凈工作臺中培養(yǎng)B.已滅菌的培養(yǎng)基冷卻到大約60℃時可倒平板C.倒平板后，可用劃線法和稀釋涂布法接種，獲得單菌落后進行計數(shù)D.培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后，使培養(yǎng)皿傾斜放置，以使培養(yǎng)基凝固后形成斜面3、我國科學(xué)家利用體細胞誘導(dǎo)產(chǎn)生多能干細胞（iPS細胞）；并將其注射到無法發(fā)育到成體階段的四倍體囊胚中，最終獲得克隆鼠。經(jīng)鑒定證實克隆鼠確實從iPS細胞發(fā)育而來，并可繁殖后代。實驗流程見下圖，下列分析錯誤的是（）

A.已分化的小鼠體細胞在特定條件下可恢復(fù)全能性B.四倍體囊胚由于染色體數(shù)目變異而無法發(fā)育為成體C.四倍體囊胚可以激發(fā)iPS細胞全能性的表達D.克隆鼠是由iPS細胞和四倍體囊胚細胞融合后發(fā)育而來4、下列生物可能被用于生物武器的是（）。A.大腸桿菌B.肉毒桿菌C.放線菌D.藍藻5、“X基因”是DNA分子上一個有遺傳效應(yīng)的片段；若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝“X基因”，需在PCR反應(yīng)中加入兩種引物，兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如圖甲所示。經(jīng)4輪循環(huán)后，產(chǎn)物中有五種不同的DNA分子，如圖乙所示，其中第③和④種DNA分子的個數(shù)有（）

A.8個B.6個C.4個D.2個6、某一質(zhì)粒載體如圖甲所示，Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tett表示四環(huán)素抗性基因。有人將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后，與用BamHI酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化后得到多種大腸桿菌，并利用培養(yǎng)基乙和丙篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌。下列敘述錯誤的是（）

A.圖甲所示的質(zhì)粒中還應(yīng)含有復(fù)制原點和終止子等結(jié)構(gòu)B.將經(jīng)轉(zhuǎn)化處理后的大腸桿菌菌液接種至培養(yǎng)基乙使用的是稀釋涂布平板法C.配制培養(yǎng)基乙時應(yīng)加入青霉素D.培養(yǎng)基丙中生長的菌落即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌7、下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程應(yīng)用的敘述錯誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程可以改造食品添加劑脂肪酶等的結(jié)構(gòu)，提高其熱穩(wěn)定性B.蛋白質(zhì)工程比基因工程難度大，可以對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造或制造一種新的蛋白質(zhì)C.利用蛋白質(zhì)工程不可以在大腸桿菌細胞中得到人的胰島素D.蛋白質(zhì)工程可以對胰島素進行改造和修飾，其合成也通過轉(zhuǎn)錄和翻譯來實現(xiàn)評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)8、中國科學(xué)院動物研究所首席科學(xué)家；動物克隆與受精生物學(xué)學(xué)科帶頭人陳大元；曾主持科研攻關(guān)項目——“攀登”，進行大熊貓的異種克隆。他們將大熊貓的體細胞核放入兔子的去核卵母細胞之中，并使其成功發(fā)育成囊胚，標(biāo)志著異種核質(zhì)相容的問題得到解決，異種克隆大熊貓邁過了第一道“坎”；然后至關(guān)重要的是選擇一種合適的“代孕母體”。下圖是該研究的理論流程圖。下列說法正確的是（）

A.整個過程用到的技術(shù)手段有動物細胞培養(yǎng)、動物體細胞核移植和胚胎移植等B.誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細胞C.重構(gòu)胚發(fā)育成囊胚所需營養(yǎng)主要來源于“代孕母體”D.步驟甲和步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理9、下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述，正確的是（）A.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水B.洗滌劑能瓦解植物細胞壁并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度C.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入冷酒精后過濾，都可以去除部分雜質(zhì)D.在酸性條件下，DNA與二苯胺會發(fā)生反應(yīng)，最終產(chǎn)生藍色物質(zhì)10、下圖為科學(xué)家在實驗室中培養(yǎng)“人造牛肉”的簡要過程；下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.用胰蛋白酶處理牛肌肉組織，獲得分裂能力強的肌肉母細胞B.生物反應(yīng)器內(nèi)應(yīng)控制好適宜的溫度，并沖入純氧保證細胞呼吸C.培養(yǎng)液中的支架提供了更多的細胞吸附面積，有利于細胞貼壁生長D.“人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)，減少環(huán)境污染11、科研人員利用甲、乙兩種植物的各自優(yōu)勢，通過植物細胞工程技術(shù)培育高產(chǎn)、耐鹽雜種植物的過程中，相關(guān)操作不合理的是（）A.利用胰蛋白酶分別處理甲、乙植物以獲得原生質(zhì)體B.利用電激或滅活的病毒誘導(dǎo)甲、乙原生質(zhì)體的融合C.利用秋水仙素誘導(dǎo)組織培養(yǎng)中愈傷組織細胞壁再生D.將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選中所需雜種植株將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選出所需雜種植株12、某種病毒的主要表面抗原為S蛋白，用S蛋白制備的單克隆抗體可用于該種病毒的檢測。下列說法正確的是（）

A.B淋巴細胞分離自經(jīng)S蛋白免疫過的小鼠B.稀釋培養(yǎng)后多孔玻璃板中的雜交瘤細胞數(shù)目可能不到細胞總數(shù)的一半C.集落①的細胞既能無限增殖又能產(chǎn)生單克隆抗體D.集落②～④的細胞可用于擴大化培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體13、下列關(guān)于用剛果紅培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌的敘述，正確的有（）A.剛建成的落葉植物公園土壤，可作為獲取菌種的最佳樣本B.剛果紅可抑制其他微生物的生長，篩選出纖維素分解菌C.與細菌產(chǎn)生的胞內(nèi)酶相比，真菌分泌的纖維素酶更易從培養(yǎng)液中獲取D.纖維素酶的開發(fā)和利用，能促進人類對環(huán)境中一些廢棄物的循環(huán)利用14、iPS細胞被稱為誘導(dǎo)多能干細胞，可通過轉(zhuǎn)入相關(guān)因子來制備。iPS細胞最初是由成纖維細胞轉(zhuǎn)化而來，后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細胞、B細胞等也能被誘導(dǎo)成該類細胞。下列說法正確的是（）A.導(dǎo)入的物質(zhì)可以是DN蛋白質(zhì)，還可用小分子物質(zhì)來誘導(dǎo)B.iPS細胞的體外培養(yǎng)需要在無菌的CO2培養(yǎng)箱中進行C.T細胞、B細胞能被誘導(dǎo)為iPS細胞，說明體內(nèi)細胞的分化是可逆的D.與胚胎干細胞相比，iPS細胞的優(yōu)點是分裂能力強，分化程度低15、黑尿癥是一種單基因遺傳??；該病在人群中的發(fā)病率大約為百萬分之一?；颊咭蛉狈δ蚝谒嵫趸?，使得尿黑酸不能被氧化分解而導(dǎo)致尿液呈黑色。下圖是該遺傳病的某家系圖。下列說法正確的是（）

A.該實例說明基因通過控制蛋白質(zhì)的合成而直接控制性狀B.控制黑尿癥的基因為隱性基因，且位于X染色體上C.Ⅱ4和Ⅱ5婚配，所生男孩患黑尿癥的概率約為1/3003D.若用該致病基因制作的探針檢測，則Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ3一定會出現(xiàn)雜交帶評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)16、哺乳動物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。17、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？____________________________18、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地說，就是按照_____，把一種生物的_____提取出來，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遺傳性狀。19、載體具備的條件：①_____。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③______。20、應(yīng)用分析與比較的方法，對生殖性克隆與治療性克隆進行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________評卷人得分四、判斷題(共3題，共18分)21、轉(zhuǎn)基因生物可能會破壞生態(tài)平衡（______）A.正確B.錯誤22、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。（選擇性必修3P93）()A.正確B.錯誤23、生物武器包括致病菌類、病毒類和生化毒劑類等。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共1題，共10分)24、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過污染飼料引起畜禽中毒反應(yīng)。CYP3A是豬體內(nèi)降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)CYP3A基因表達水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級”或“次級”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進入豬細胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動子上游的兩個調(diào)控序列，為研究T-2毒素誘導(dǎo)CYP3A基因表達的機理，研究者首先將不同調(diào)控序列分別和CYP3A基因啟動子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構(gòu)建表達載體，再分別導(dǎo)入豬肝細胞，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進行培養(yǎng)；24h后檢測LUC酶活性，計算啟動子活性相對值，結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對CYP3A的誘導(dǎo)；B2是Spl的結(jié)合位點。研究者推測，NF-Y通過與B1結(jié)合，與Sp1共同調(diào)控CYP3A基因的表達。

①為證明Bl是NF-Y的結(jié)合位點，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細胞核蛋白提取物混合，實驗分組及結(jié)果如圖2．據(jù)實驗結(jié)果推測，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進而推測第5組結(jié)果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設(shè)計實驗進一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，實驗設(shè)計思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測CYP3A基因的啟動子活性。據(jù)此分析，實驗假設(shè)是_____。評卷人得分六、綜合題(共4題，共8分)25、下面是一項“利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)人胰島素的方法”的專利摘要；請回答：

本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素。所用的人胰島素基因是依據(jù)植物“偏愛”的密碼子來設(shè)計所含的密碼子；通過人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在胰島素-COOH端加上KDEL內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列，避免胰島素在植物細胞中的降解。將該基因置于CaMV35S啟動子和果實專一性啟動子2A12的驅(qū)動之下通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入番茄中，在番茄的果實中表達人胰島素。

（1）本專利是采用___________方法獲得目的基因的。獲得的人胰島素基因與人體細胞中胰島素基因的堿基序列不同；但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同，原因________________。

（2）要想在體外獲得大量該目的基因的片段；可以采用____________技術(shù)（填中文名稱）。

可以根據(jù)_________________合成引物。該技術(shù)中使用原料是_________________。

（3）根據(jù)上述摘要；轉(zhuǎn)基因操作時所用的載體是____________，載體上的T–DNA可以轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。構(gòu)建的基因表達載體中含有____________。

①目的基因②CaMV35S啟動子③果實專一性啟動子2A12④引物⑤標(biāo)記基因⑥內(nèi)含子滯留序列⑦終止密碼子⑧終止子。

（4）如果要檢測在受體細胞中是否存在目的基因可采用____________技術(shù)。26、苯酚等酚類化合物在農(nóng)藥等方面應(yīng)用廣泛；苯酚對許多生物體有毒害作用，含大量苯酚污染物的污水排放到河流和土壤，嚴重污染環(huán)境和危害人類健康?？蒲腥藛T以黃河三角洲鹽堿地蘆葦為材料，篩選出具有較強降解苯酚污染物能力的菌株，回答下列問題：

(1)為篩選苯酚降解菌，需將經(jīng)處理的蘆葦材料樣品稀釋液接種至以__________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。一段時間后，能夠降解苯酚的細菌比例會__________，原因是__________。

(2)通常制備培養(yǎng)基時需依據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，原因在于__________。用平板培養(yǎng)細菌時一般需將平板__________（填“倒置”或“正置”）。

(3)簡要寫出測定蘆葦內(nèi)生苯酚降解菌活菌數(shù)的實驗思路。__________。27、研究發(fā)現(xiàn)；土壤中某種微生物能降解石油。分離降解石油的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖所示。回答下列問題：

(1)該實驗所用的振蕩培養(yǎng)的培養(yǎng)基只能以石油作為唯一碳源，其原因是_________________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。

(2)振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快，原因是振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________的利用率。

(3)若要測定活菌數(shù)量，可選用______________法進行計數(shù)；若要測定培養(yǎng)液中微生物的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用____________________直接計數(shù)。

(4)為探究石油的降解機制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設(shè)是_____________，該實驗設(shè)計是否合理？_________為什么？______________________________________________________。

(5)丙圖中3號試管中樣品液的稀釋倍數(shù)為_______倍，5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的活菌數(shù)為___________。該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要________，因為_______________________________________。28、小鼠癌癥模型是目前最為常用；先進和公認的臨床前抗腫瘤藥物效應(yīng)評價體系；該模型隨著腫瘤治療策略的革新而不斷發(fā)展，并為癌癥的治療手段提供重要的理論及實踐指導(dǎo)。下圖表示利用小鼠胚胎干細胞（ES細胞）做的小鼠癌癥模型，據(jù)圖分析回答下列問題：

（1）a過程表示基因工程，則其核心步驟是_____，該過程的目的_______________。

（2）b過程可增加ES細胞的數(shù)量，若想從早期胚胎中獲得更多的ES細胞，可將早期胚胎培養(yǎng)至_______（時）期。d過程移入的胚胎能夠存活，從免疫學(xué)上來說，是因為代孕子宮不會對其發(fā)生____________反應(yīng)。d過程進行前，要對代孕小鼠進行_______________處理。用肝癌細胞作抗原刺激B淋巴細胞，再將此淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后獲得細胞代謝產(chǎn)物______________；該產(chǎn)物與抗癌藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”，從而定向殺死小鼠體內(nèi)的肝癌細胞。

（3）早期胚胎發(fā)育過程中，細胞逐漸開始分化，形成將來發(fā)育成各種組織的_______和滋養(yǎng)層細胞進一步擴大，會導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來，這一過程稱為_______。

（4）圖示研究過程中使用的技術(shù)有_____________________________（至少答出2個）。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

我國政府：禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成；不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆人。

【詳解】

A；我國政府禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），但不反對治療性克隆人，A正確；

B；我國主張全面禁止和徹底銷毀生物武器；B正確；

C；對于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品；我們應(yīng)該客觀公正的看待它，有益的推廣，有害的禁止，但不能禁止該技術(shù)的應(yīng)用，C錯誤；

D；我國已經(jīng)對轉(zhuǎn)基因食品和轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品實施產(chǎn)品標(biāo)識制度；以尊重人們的知情權(quán)，D正確。

故選C。2、B【分析】【分析】

倒平板操作的步驟：將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上；右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞；右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰；用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋；等待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下；皿底在上，這樣可以防止皿蓋上的水分滴到培養(yǎng)基上造成培養(yǎng)基的污染。

【詳解】

A；接種后的平板需倒置放置于恒溫箱中；A錯誤；

B；已滅菌的培養(yǎng)基冷卻到大約50℃～60℃時可倒平板；B正確；

C；倒平板后；可用劃線法和稀釋涂布法接種，但只有稀釋涂布平板法可用于微生物的計數(shù)，C錯誤；

D；培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后；將培養(yǎng)皿平放在水平位置上，并輕輕晃動，待凝固后形成平板，D錯誤。

故選B。

【點睛】3、D【分析】【分析】

多能干細胞是一類具有自我更新；自我復(fù)制能力的多潛能細胞；多能干細胞具有分化出多種細胞組織的潛能，但失去了發(fā)育成完整個體的能力，發(fā)育潛能受到一定的限制。人或者動物都是二倍體，在胚胎發(fā)育到2-細胞階段的時候，可用電融合的方法使兩個細胞融合為一個細胞，這樣就獲得了四倍體胚胎，四倍體胚胎是不能正常發(fā)育的，但是可以形成胎盤，如果將一種多能干細胞注入四倍體囊胚，可以獲得一個完整的動物個體，那證明移進去的干細胞是全能的干細胞。

【詳解】

A；小鼠體細胞在誘導(dǎo)因子的作用下產(chǎn)生多能干細胞；多能干細胞（iPS細胞）已被證明可以發(fā)育成個體，表明其可恢復(fù)全能性，A正確；

B；四倍體囊胚是由兩個二倍體細胞融合發(fā)育而來；發(fā)生染色體數(shù)目變異，無法正常發(fā)育成個體，B正確；

C；將iPS細胞注射到無法發(fā)育到成體階段的四倍體囊胚中；最終獲得克隆鼠，說明四倍體囊胚可以激發(fā)iPS細胞全能性的表達，C正確；

D；克隆鼠是由iPS細胞注射到無法發(fā)育到成體階段的四倍體囊胚中；從iPS細胞發(fā)育而來獲得，D錯誤。

故選D4、B【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

【詳解】

A；大腸桿菌的致病性不強；不適合用于生物武器，A錯誤；

B；肉毒桿菌傳染性和致病性很強；可用于生物武器，B正確；

C；放線菌是土壤中常見的微生物；不適合用于生物武器，C錯誤；

D；藍藻是能進行光合作用的原核生物；對人體沒有致病性，不適合用作生物武器，D錯誤。

故選B。5、B【分析】PCR：

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；

（2）原理：DNA雙鏈復(fù)制；

（3）條件：模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；

（4）過程：高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸。

（5）結(jié)果：經(jīng)過n次擴增，形成的DNA分子數(shù)是2n個；其中只有2條單鏈不含有引物。

【詳解】

通過圖中信息可知；“X基因”第1次復(fù)制得到兩個DNA：①和②各1個；“X基因”第2次復(fù)制得到4個DNA：①復(fù)制得①和③；②復(fù)制得②和④；“X基因”第3次復(fù)制得到8個DNA：①復(fù)制得①和③、③復(fù)制得③和⑤、②復(fù)制得②和④、④復(fù)制得④和⑤；“X基因”第4次復(fù)制得到16個DNA：①復(fù)制得①和③、②復(fù)制得②和④、2個③復(fù)制得2個③和2個⑤、2個④復(fù)制得2個④和2個⑤、兩個⑤復(fù)制得到4個⑤。

從上面的推測可知，經(jīng)4輪循環(huán)產(chǎn)物后，產(chǎn)物中有8個⑤、3個④、3個③、1個②、1個①。因此，經(jīng)4輪循環(huán)后，第③和④種DNA分子的個數(shù)有：3+3=6個，故選B。6、D【分析】【分析】

1；根據(jù)題意四環(huán)素抗性基因中有BamHI酶切位點；將此質(zhì)粒載體用BamHI酶切后，四環(huán)素抗性基因被破壞。

2；用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌；結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是：含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。大腸桿菌中含有質(zhì)粒載體的，有兩種抗性；含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌，有氨芐青霉素抗性，但沒有四環(huán)素抗性；含有環(huán)狀目的基因的大腸桿菌，沒有抗性。

【詳解】

A；質(zhì)粒載體作為基因工程的工具；應(yīng)具備的基本條件有具有標(biāo)記基因、具有一個或多個限制酶切點、能在受體細胞中復(fù)制（復(fù)制原點），若是同時作為表達載體，還需要具有啟動子和終止子等結(jié)構(gòu)，A正確；

B；稀釋涂布平板法可以用于微生物的分離計數(shù)；題中培養(yǎng)基乙后需要影印接種，可以使用稀釋涂布平板法接種轉(zhuǎn)化處理后的大腸桿菌的菌液，B正確；

C；配制培養(yǎng)基乙時應(yīng)加入青霉素；使轉(zhuǎn)化環(huán)狀目的基因的大腸桿菌篩選掉，C正確；

D；培養(yǎng)基乙中生長的菌落為轉(zhuǎn)化質(zhì)粒載體或者含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌；培養(yǎng)基丙中生長的菌落為導(dǎo)入質(zhì)粒載體的大腸桿菌；故不能在培養(yǎng)基丙中生長的菌落即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，D錯誤。

故選D。7、A【分析】【分析】

1；蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）；

2；蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。

3；蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)；又稱為第二代的基因工程。

4；蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)；設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程在分子水平上應(yīng)用基因工程手段對脂肪酶基因進行有針對的設(shè)計或定向加工；以提高脂肪酶的活性和穩(wěn)定性，而不是直接改造脂肪酶，A錯誤；

B；蛋白質(zhì)工程比基因工程難度大；可以對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造或制造一種新的蛋白質(zhì)，B正確；

C；大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等；其不能對胰島素進行加工，即使利用蛋白質(zhì)工程也無法實現(xiàn)，C正確；

D；胰島素的本質(zhì)是蛋白質(zhì)；蛋白質(zhì)工程可以對胰島素基因進行改造和修飾，通過轉(zhuǎn)錄和翻譯來實現(xiàn)合成改造的胰島素，D正確。

故選A。

【點睛】二、多選題(共8題，共16分)8、A:B【分析】【分析】

1；析題圖：步驟甲為細胞核移植；步驟乙為胚胎移植，其中誘導(dǎo)超數(shù)排卵用的是促性腺激素。

2；動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個胚胎最終發(fā)育為動物。

3；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物體內(nèi)；使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體叫“受體”。

【詳解】

A；步驟甲和步驟乙分別是指細胞核移植和胚胎移植作用；所以整個過程用到的技術(shù)手段有動物細胞培養(yǎng)（重組胚胎培養(yǎng)）、動物體細胞核移植和胚胎移植等，A正確；

B；誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正確；

C；重組細胞發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來源于去核的卵母細胞；C錯誤；

D；步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理；甲不需要，D錯誤。

故選AB。

【點睛】

分本題結(jié)合圖解，考查胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記體外受精的過程及條件；識記早期胚胎培養(yǎng)的過程及條件，能結(jié)合圖中信息準確判斷各選項。9、A:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。

2；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

3；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但DNA既溶于2mol/L的NaCl溶液，也溶于蒸餾水，A正確；

B；洗滌劑能瓦解細胞膜；但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，B錯誤；

C；DNA在濃度為0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低；因此用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L或加入冷酒精后過濾，都可以去除部分雜質(zhì)，C正確；

D；在酸性條件下；DNA與二苯胺試劑反應(yīng)，最終產(chǎn)生藍色物質(zhì)，因此常用二苯胺試劑鑒定DNA，D正確。

故選ACD。10、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。動物細胞培養(yǎng)過程中懸液中的細胞會很快貼附在瓶壁上。動物細胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%CO2?！叭嗽炫Ｈ狻钡呐囵B(yǎng)不僅產(chǎn)量高；并可以減少成本和降低環(huán)境污染。

【詳解】

A；胰蛋白酶處理動物組織；可以使組織分散成單個細胞，利于動物細胞培養(yǎng)，A正確。

B、動物細胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%CO2；B錯誤。

C；動物細胞培養(yǎng)過程中懸液中的細胞會很快貼附在瓶壁上。所以細胞貼附瓶壁的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑；無毒，易于貼附，如果想得到大量的產(chǎn)物，可以增大細胞吸附面積，有利于細胞貼壁生長，C正確。

D；人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)；同時也可減少對土地、飲用水和飼料的需求，且溫室氣體等其他環(huán)境污染物也會減少，D正確。

故選ACD。11、A:B:C【分析】【分析】

植物體細胞雜交的過程：在融合前需要使用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除植物的細胞壁；再用化學(xué)法（聚乙二醇）或物理法（振動；離心、電刺激）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，需要注意的是誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合時不用生物方法（滅活的病毒）；細胞融合完成的標(biāo)志是融合細胞再生出新的細胞壁；獲得融合細胞后需利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)將細胞培育成植株，故植物體細胞雜交技術(shù)的最終目的是培育具有優(yōu)良性狀的植物新品種。

【詳解】

A；由于植物細胞壁的成分主要是纖維素和果膠；根據(jù)酶的專一性特點，應(yīng)利用纖維素酶和果膠酶處理甲乙植物以獲得原生質(zhì)體，A錯誤；

B；滅活的病毒是誘導(dǎo)動物細胞融合的特有方法；不能用于誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體的融合，B錯誤；

C；秋水仙素可以抑制紡錘體的形成從而誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目加倍；不能用于誘導(dǎo)愈傷組織細胞壁的再生，C錯誤；

D；因本操作的目的是培育高產(chǎn)、耐鹽雜種植物；故將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選中所需雜種植株將組培苗種在高鹽環(huán)境中以便篩選出所需雜種植株，屬于個體生物學(xué)水平的檢測，D正確。

故選ABC。12、A:B:C【分析】【分析】

13、C:D【分析】【分析】

在篩選纖維素分解菌的過程中；剛果紅可與培養(yǎng)基中纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；剛建成公園落葉少；土壤中的纖維素分解菌少，不利于獲得菌種，A錯誤；

B；剛果紅不能抑制其它微生物的生長；剛果紅可鑒別出纖維素分解菌，B錯誤；

C；與細菌產(chǎn)生的胞內(nèi)酶相比；真菌分泌的纖維素酶更易從培養(yǎng)液中獲取，因為纖維素酶可以分泌出來，C正確；

D；纖維素酶的開發(fā)和利用；可用于分解秸稈、棉質(zhì)衣物等，能促進人類對環(huán)境中一些廢棄物的循環(huán)利用，D正確。

故選CD。14、A:B【分析】【分析】

iPS細胞被稱為誘導(dǎo)多能干細胞；具有分裂和分化的能力。

【詳解】

A；目前已采用多種方法來制備iPS細胞；包括借助載體將特定的基因?qū)爰毎?，直接將特定的蛋白?dǎo)入細胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)形成iPS細胞，A正確；

B、iPS細胞的體外培養(yǎng)是利用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)，需要在無菌的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；B正確；

C；T細胞、B細胞能被誘導(dǎo)為iPS細胞；說明離體的已分化的細胞經(jīng)過誘導(dǎo)可轉(zhuǎn)化為能分化的狀態(tài)，C錯誤；

D；胚胎干細胞和iPS細胞均具有分裂能力強；分化程度低的特點，D錯誤。

故選AB。15、C:D【分析】【分析】

單基因遺傳病指的是受一對等位基因控制的遺傳病；可用DNA分子雜交技術(shù)進行基因檢測進而鑒定某胚胎是否攜帶有某致病基因；DNA分子雜交技術(shù)利用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的致病基因片段作為基因探針，通過堿基互補配對原則與待測分子進行配對，能配對的說明某胚胎攜帶某致病基因存在。

【詳解】

A；該實例中；患者因缺乏尿黑酸氧化酶，使得尿黑酸不能被氧化分解而導(dǎo)致尿液呈黑色，即基因通過控制酶的合成，進而控制代謝過程，從而間接控制生物的性狀，A錯誤；

B、遺傳家系譜圖中，不患黑尿癥的Ⅰ1與Ⅰ2生下了患黑尿癥的女兒Ⅱ3；確定黑尿癥屬于常染色體隱性遺傳，B錯誤；

C、假設(shè)控制該病的基因為Aa，該病在人群中的發(fā)病率約為1/1000000，即aa概率為1/1000000，則a占1/1000，A占999/1000，Aa的概率為2×1/1000×999/1000=1998/1000000，因此人群中正常人為雜合子Aa的概率為（2×1/1000×999/1000）÷（2×1/1000×999/1000+999/1000×999/1000）=2/1001，Ⅱ4的基因型為1/3AA或2/3Aa，Ⅱ5為正常人，為雜合子的概率為2/1001，Ⅱ4和Ⅱ5婚配；所生男孩患黑尿癥的概率約為2/3×2/1001×1/4=1/3003，C正確；

D、由前面的分析可知，Ⅰ1和Ⅰ2為雜合子，Ⅱ3為患者，均含有該致病基因，若用該致病基因制作的探針檢測，則Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ3一定會出現(xiàn)雜交帶；D正確。

故選CD。

【點睛】三、填空題(共5題，共10分)16、略

【解析】①.胚胎細胞②.體細胞17、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因重組基因拼接技術(shù)DNA重組技術(shù)人們意愿某種基因修飾改造另一種生物細胞里定向19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】能在受體細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇20、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術(shù)，其目的是用于生育，獲得人的復(fù)制品；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)，其目的是用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會用到的技術(shù)有體細胞核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；治療性克隆在獲取胚胎干細胞后，根據(jù)治療目的誘導(dǎo)干細胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會應(yīng)用到的技術(shù)為干細胞培養(yǎng)技術(shù)?！窘馕觥可承钥寺≈咐每寺〖夹g(shù)獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細胞核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細胞核移植技術(shù)，早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育，獲得人的復(fù)制品用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療四、判斷題(共3題，共18分)21、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物可能會破壞生態(tài)平衡，特別是對生物多樣性的影響。大自然經(jīng)過億萬年的演化，各種生物相對處于一種和諧的生態(tài)平衡狀態(tài)。但是，如果我們用轉(zhuǎn)基因技術(shù)把某種生物人為地變得更加“強悍”，那其他物種就會衰敗以至滅絕，故本題正確。22、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過基因修飾或基因合成來完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。故該說法正確。23、A【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器種類包括致病菌、病毒、生化毒劑以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，故正確。五、實驗題(共1題，共10分)24、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)其表達水平升高，當(dāng)用兩種調(diào)控序列同時連接啟動子，啟動子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結(jié)合；突變型探針不能與NF-Y結(jié)合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結(jié)合。

【詳解】

（1）初級代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動所必需的，大多存在于細胞內(nèi)。次級代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴散的方式進入細胞。

（2）實驗的自變量是有無調(diào)控序列；根據(jù)單一變量原則，對照組的目的是為了排除無光變量的影響，除了沒有調(diào)控序列，其他處理和實驗組相同，所以對照組和實驗組豬肝細胞均導(dǎo)入含CYP3A基因啟動子及LUC基因的表達載體，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個調(diào)控序列和對照組活性一致，缺失一個比對照組活性略強，兩個都存在活性最高，說明這兩個調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件。故缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個，T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動子活性明顯增強。

（3）①實驗的目的是要驗證NF-Y能與B1結(jié)合；根據(jù)第2組和第3組結(jié)果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結(jié)合位點野生型探針能與NF-Y結(jié)合，根據(jù)第4組結(jié)果，突變型探針不能與NF-Y結(jié)合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結(jié)合。故可以解釋為：結(jié)合位點突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設(shè)NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會降低CYP3A基因的啟動子的活性。【解析】(1)次級自由擴散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個；T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動子活性增強。

(3)結(jié)合位點突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。六、綜合題(共4題，共8分)25、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

1；目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

2；基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

3；將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

4；目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原—抗體雜交技術(shù)。（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）根據(jù)題干信息“所用的人胰島素基因是依據(jù)植物偏愛的密碼子來設(shè)計所含的密碼子；通過某方法合成若干DNA片段，拼接而成”可知，本專利是采用人工合成方法獲得目的基因。由于密碼子具有簡并性，即使基因序列不同，但其控制合成的蛋白質(zhì)可以相同，因此獲得的人胰島素基因與人體細胞中胰島素基因的堿基序列不同，但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同。

（2）PCR技術(shù)可以在體外大量擴增目的基因片段；因此要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以采用PCR技術(shù)技術(shù)，文名稱為多聚酶鏈式反應(yīng)。該技術(shù)中使用的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（或Taq酶），原料是四種游離的脫氧核苷酸。

（3）根據(jù)題干信息“通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法”可知；轉(zhuǎn)基因操作時所用的載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒，載體上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。基因表達載體包括啟動子（CaMV35S啟動子和果實專一性啟動子2A12）；目的基因、標(biāo)記基因和終止子。故選①②③⑤⑧。

（4）要檢測在受體細胞中是否存在目的基因；可采用DNA分子雜交技術(shù)。

【點睛】

本題以“利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)人胰島素的方法”的專利摘要為題材，考查基因工程和植物細胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，識記植物組織培養(yǎng)的原理及應(yīng)用，能結(jié)合題中信息準確答題?！窘馕觥咳斯ず铣擅艽a子具有簡并性，基因序列不同，蛋白質(zhì)可以相同多聚酶鏈式反應(yīng)一段已知的胰島素基因（目的基因）的核苷酸序列dNTP（四種游離的脫氧核苷酸）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒①②③⑤⑧DNA分子雜交26、略

【分析】【分析】

選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)；物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌；從而提高該菌的篩選率。

(1)

本實驗的目的是要篩選降解苯酚的細菌；因此，制備培養(yǎng)基時，培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為唯一碳源。只有能降解苯酚的細菌能生長，不能降解苯酚的細菌的生長受抑制，所以一段時間后，能夠降解苯酚的細菌比例會升高。

(2)

不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同；所以制備培養(yǎng)基時需依據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH；為防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基或避免培養(yǎng)基中水分的過快揮發(fā)，所以采用固體平板培養(yǎng)細菌時要倒置培養(yǎng)。

(3)

測定蘆葦內(nèi)生苯酚降解菌活菌數(shù)可采用間接計數(shù)法：首先要將待測樣品配制成均勻的梯度稀釋液；盡量使微生物細胞分散開，再把稀釋液接種到平板上，進行培養(yǎng)觀察，最后根據(jù)公式計算。因此實驗思路為：將經(jīng)處理的蘆葦材料樣品液稀釋適當(dāng)倍數(shù)后，取0.1ml涂布若干平板（每個稀釋度至少3個平板），對菌落數(shù)在30-300的平板進行計數(shù)，依據(jù)公式推測蘆葦內(nèi)生苯酚降解菌活菌數(shù)。