2025年蘇科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年蘇科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下圖為單克隆抗體的制備流程示意圖。下列敘述正確的是（）

A.甲是從已免疫的小鼠脾臟細(xì)胞中獲得的致敏T淋巴細(xì)胞B.①表示將骨髓瘤細(xì)胞去核后進(jìn)行細(xì)胞融合C.乙為融合細(xì)胞，同時(shí)具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性D.②表示篩選能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞2、研究人員利用農(nóng)桿菌侵染水稻葉片；經(jīng)組培；篩選最終獲得了一株水稻突變體。利用不同的限制酶處理突變體的總DNA、電泳；并與野生型的處理結(jié)果對比，得到圖所示放射性檢測結(jié)果。（注：T-DNA上沒有所用限制酶的酶切位點(diǎn)）對該實(shí)驗(yàn)的分析錯(cuò)誤的是（）

A.檢測結(jié)果時(shí)使用了放射性標(biāo)記的T-DNA片段做探針B.該突變體產(chǎn)生的根本原因是由于T-DNA插入到水稻核DNA中C.不同酶切顯示的雜交帶位置不同，說明T-DNA有不同的插入位置D.若野生型也出現(xiàn)雜交帶，則實(shí)驗(yàn)樣本可能被污染，檢測結(jié)果不準(zhǔn)確3、在篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基中加入剛果紅染料；研究者觀察到幾個(gè)有透明圈的菌落。據(jù)圖分析正確的是（）

A.透明圈內(nèi)的剛果紅染料已被分解B.能產(chǎn)生淀粉酶的微生物菌落周圍可形成模糊的透明圈C.菌落②中的菌株降解纖維素能力最強(qiáng)D.圖中培養(yǎng)基可用牛肉膏、蛋白胨配制4、下面有關(guān)微生物培養(yǎng)、分離等的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.檢驗(yàn)自來水中大腸桿菌數(shù)是否超標(biāo)，可用濾膜法來分離并計(jì)數(shù)B.檢測同種水樣中細(xì)菌的數(shù)量時(shí)，設(shè)置空白培養(yǎng)基檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備是否合格C.配制培養(yǎng)基時(shí)要注意各種營養(yǎng)成分，必須含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、水及生長因子D.對于經(jīng)常使用的菌種可采用試管固體斜面臨時(shí)保存，但該方法保存的菌種易變異5、關(guān)于泡菜制作及亞硝酸鹽含量的測定，下列說法正確的是（）A.開發(fā)泡菜新品種可調(diào)節(jié)通氣發(fā)酵和密封發(fā)酵的時(shí)間比例B.泡菜制作時(shí)應(yīng)將蒜瓣、生姜等輔料放在壇的中間C.測定亞硝酸鹽含量的關(guān)鍵在于泡菜的選擇和樣品處理D.測定亞硝酸鹽含量的方法是紙層析法6、分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)操作有誤的是（）A.經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品即可涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上B.選擇培養(yǎng)這一步可省略，但得到的纖維素分解菌會較少C.可通過定時(shí)測定葡萄糖產(chǎn)量的變化來衡量纖維素分解菌培養(yǎng)液中的纖維素酶的產(chǎn)量D.對照組可用等量的纖維素分解菌培養(yǎng)液涂布到完全培養(yǎng)基上7、下圖為釀造糯米甘蔗酒的生產(chǎn)流程，其中使用的酒曲中含有糖化菌和釀酒菌。下列敘述正確的是（）

A.甘蔗汁和糯米能為酒曲中的菌提供碳源和氮源等B.糖化菌分泌的淀粉酶水解淀粉的過程消耗ATPC.恒溫發(fā)酵過程中應(yīng)不斷攪拌以增加溶解氧D.若拌曲時(shí)被醋酸桿菌污染，會將發(fā)酵產(chǎn)物中的乙醇轉(zhuǎn)化為乙酸和CO2評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)8、用XhoI和SalI兩種限制性內(nèi)切核酸酶分別單獨(dú)酶切同一種DNA片段；酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果如圖。以下敘述錯(cuò)誤的是（）

A.XhoI和SalI兩種酶識別的核糖核苷酸序列不同B.泳道①中是用SalI處理得到的酶切產(chǎn)物C.泳道②中的酶切產(chǎn)物可用DNA連接酶拼接成一個(gè)重組DNA分子D.圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA9、下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A.DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水B.洗滌劑能瓦解植物細(xì)胞壁并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度C.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入冷酒精后過濾，都可以去除部分雜質(zhì)D.在酸性條件下，DNA與二苯胺會發(fā)生反應(yīng)，最終產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)10、常乳是母牛泌乳期一周后直到泌乳停止前一周這個(gè)時(shí)間段內(nèi)分泌的乳汁。奶牛自身乳房和乳頭中可能含有的細(xì)菌，加上擠乳過程中產(chǎn)生的少量污染，常乳中會有一定量的細(xì)菌存在。研究小組要檢測一份常乳樣品中細(xì)菌的總量（不考慮菌種），檢測流程如下圖，每個(gè)平板上接種菌液量為0.1mL。下列說法正確的是（）

A.倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿打開一條細(xì)縫，不要完全打開，防止雜菌污染B.上述方法是稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基要營養(yǎng)全面，適合各種細(xì)菌生長C.也可以通過連續(xù)劃線的方法接種，通過菌落數(shù)計(jì)算樣品中的細(xì)菌總數(shù)D.若三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)為59，則所每毫升樣品中細(xì)菌總數(shù)為5.9×10711、基因敲除技術(shù)針對某個(gè)序列已知但功能未知的序列，通過改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進(jìn)一步對生物體造成影響，進(jìn)而推測出該基因的生物學(xué)功能。研究人員將某實(shí)驗(yàn)動物的第5號染色體上的一段DNA敲除，結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實(shí)驗(yàn)動物血液甘油三酯極高，具有動脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng)B.動脈硬化的產(chǎn)生與遺傳物質(zhì)發(fā)生基因重組有關(guān)C.控制甘油三酯合成的基因就位于第5號染色體上D.利用DNA片段的敲除技術(shù)可以研究相關(guān)基因功能12、下圖是將人的生長激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。下列說法正確的是（）

A.若能在細(xì)菌B中檢測到人的生長激素基因，則說明該基因工程項(xiàng)目獲得成功B.將完成導(dǎo)入過程后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長的就是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌C.將人的生長激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過程共形成了4個(gè)磷酸二酯鍵D.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B之前，可以用Ca2+處理細(xì)菌B13、以純化鑒定后的重組大腸桿菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾細(xì)胞及骨髓瘤細(xì)胞（2n=62-68），篩選雜交瘤細(xì)胞，制備抗RecQ解旋酶單克隆抗體（mAb），相關(guān)檢測結(jié)果如圖A、B所示。有關(guān)說法正確的是（）

圖A雜交瘤細(xì)胞染色體數(shù)目圖B不同濃度mAb對RecQ蛋白結(jié)合DNA活性的影響A.重組大腸桿菌RecQ解旋酶可刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞增殖分化B.單克隆抗體的制備過程中需要進(jìn)行2次篩選和2次抗原檢測C.雜交瘤細(xì)胞在融合的過程中可能會發(fā)生染色體數(shù)目的丟失D.該mAb能特異性與RecQ解旋酶結(jié)合，在稀釋度為1/800時(shí)可顯著抑制RecQ解旋酶與DNA的結(jié)合14、相較于其他模型動物（如小鼠和大鼠），兔的免疫系統(tǒng)可對更廣泛的抗原產(chǎn)生應(yīng)答且其較大的脾臟可產(chǎn)生更多抗體。除此之外，兔的單克隆抗體具有天然多樣性、高親和力和特異性、全新的表位識別、易于人源化（已成為將外源抗體轉(zhuǎn)化為有效安全的治療藥物的重要方式）等優(yōu)勢。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.利用人源化兔單克隆抗體進(jìn)行治療時(shí)，機(jī)體將會發(fā)生細(xì)胞免疫B.給兔子注射抗原后，兔子體內(nèi)的抗體只有很少一部分是單克隆抗體C.利用選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞具有能迅速大量增殖的能力D.體外培養(yǎng)特異性雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需要給予95％的氧氣和5％的CO215、桑葚與草莓營養(yǎng)價(jià)值極高，口味調(diào)和。草莓中含量較高的維生素C有助于延緩桑葚天然色素的氧化；桑葚獨(dú)有的花青素、白藜蘆醇等物質(zhì)能顯著增強(qiáng)復(fù)合果酒的功效。下圖為桑葚草莓復(fù)合果酒的工廠化制備流程，下列說法正確的是（）

桑葚和草莓原料的挑選和清洗→混合攪拌→添加偏重亞硫酸鉀→榨汁→調(diào)糖和調(diào)酸→滅菌→接種發(fā)酵A.在生產(chǎn)復(fù)合果酒的過程中，要防止桑葚天然色素被氧化B.果酒發(fā)酵初期通入氧氣能促進(jìn)酵母菌繁殖，有利于加快果酒發(fā)酵C.復(fù)合果酒的制備過程中對發(fā)酵設(shè)備要進(jìn)行滅菌處理D.變酸的果酒表面會形成一層菌膜，這層菌膜是由乳酸菌形成的16、蛋白質(zhì)工程就是通過對蛋白質(zhì)化學(xué)、蛋白質(zhì)晶體學(xué)和蛋白質(zhì)動力學(xué)的研究，獲得有關(guān)蛋白質(zhì)理化特性和分子特性的信息，在此基礎(chǔ)上對編碼蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行有目的的設(shè)計(jì)和改造，通過基因工程技術(shù)獲得可以表達(dá)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因生物，中華鱘是一種瀕危野生動物。研究者試圖通過蛋白質(zhì)工程改造中華鱘體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)，使其更加適應(yīng)現(xiàn)在的水域環(huán)境。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程可定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)B.改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)C.改造后的中華鱘和現(xiàn)有中華鱘不再是同一物種D.改造后的中華鱘的后代不具有改造的蛋白質(zhì)評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)17、20世紀(jì)70年代以后；以基因工程為代表的一大批生物技術(shù)成果，進(jìn)入人類的生產(chǎn)和生活，特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用，但是與其他高新技術(shù)一樣，生物技術(shù)也同樣具有雙刃劍效應(yīng)。如同其他高新技術(shù)一樣，轉(zhuǎn)基因成果和轉(zhuǎn)基因技術(shù)也需要你的理性看待。在轉(zhuǎn)基因生物安全方面；

（1）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些優(yōu)點(diǎn)，①____________②___________③__________。

（2）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些缺點(diǎn)，①____________②___________③__________。

（3）你對于轉(zhuǎn)基因生物的態(tài)度是__________。18、本課題對能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基______________來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。19、統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_____________。這是因?yàn)開_____________________。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來表示。除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。20、假設(shè)PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為模板，請計(jì)算在30次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有個(gè)這樣的_______個(gè)DNA片段，一共需要加入______________個(gè)引物。21、基因工程取得了突飛猛進(jìn)的發(fā)展。_____、_____等技術(shù)的應(yīng)用不僅使生命科學(xué)的研究發(fā)生了前所未有的變化，而且在實(shí)際應(yīng)用領(lǐng)域，如____、_____、_____、______等方面也展示出美好的應(yīng)用前景?？瓜x棉中的抗蟲基因來自_____，抗蟲基因作物的使用，不僅減少了_____，降低了____，而且還減少了_____。22、_______mol/L濃度下，DNA溶解度最大。23、在我國市場上究竟有多少種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呢？一位同學(xué)帶著這樣的問題，進(jìn)行了調(diào)查并將結(jié)果歸納成下圖?

對該同學(xué)的調(diào)查和歸納結(jié)果，有人表示認(rèn)同，有人提出質(zhì)疑?質(zhì)疑者認(rèn)為：目前我國市場上根本沒有大豆?玉米或甜菜的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?我們的觀點(diǎn)是什么_____？評卷人得分四、判斷題(共1題，共8分)24、我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。（選擇性必修3P108）()A.正確B.錯(cuò)誤評卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共40分)25、如圖是從土壤中篩選纖維素分解菌的流程圖；回答下列問題：

（1）土壤取樣時(shí)，一般選擇__________________豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是________________________。

（2）若測得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51，通過計(jì)算得知每毫升樣品中有5.1×107個(gè)纖維素分解菌，則該稀釋液的稀釋倍數(shù)為_________。

（3）鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入CR染料，它可以與纖維素形成_________色復(fù)合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落（如圖），則降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌落__________。

26、玉米是重要的糧食作物；其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能?？蒲腥藛T成功培育出超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖所示，請回答下列問題：

(1)強(qiáng)啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被_______識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄，如將強(qiáng)啟動子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是_______。

(2)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細(xì)胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對沒有分化的_______團(tuán)，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。27、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中。2~3周后，這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細(xì)胞。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路______________28、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應(yīng)性強(qiáng)，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶基因（DGAT1）與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻，主要研究過程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因?yàn)橐罁?jù)設(shè)計(jì)的一對引物，1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。請回答下列問題。

(1)過程①中需要的酶有____________，過程②應(yīng)選用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因時(shí)，將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點(diǎn)有____________。

①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達(dá)④方便取用。

(3)過程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌通過____________（方法）接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有____________。

(4)為檢測表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)，研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請完成下表。實(shí)驗(yàn)步驟簡要操作過程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察其生長情況②____________在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號備用PCR驗(yàn)證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，進(jìn)行PCR驗(yàn)證，未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照油脂含量測定利用索氏抽提法分別測定③____________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計(jì)并比較PCR驗(yàn)證結(jié)果及藻體中油脂的含量評卷人得分六、綜合題(共4題，共36分)29、下圖表示利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）所做的一系列研究；過程Ⅰ是將帶有遺傳標(biāo)記的ES細(xì)胞注入早期胚胎的囊胚腔，通過組織化學(xué)染色，用于研究動物體器官形成的時(shí)間；發(fā)育過程以及影響的因素。過程Ⅱ是將Gfp基因（綠色熒光蛋白基因）導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞制備綠色熒光小鼠的過程。回答下列相關(guān)問題：

（1）過程Ⅰ的研究利用了胚胎干細(xì)胞具有_____________________的特點(diǎn)。ES細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)液中添加___________能維持不分化的狀態(tài)。

（2）Gfp基因和質(zhì)粒中都存在SalⅠ；HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)。過程①中應(yīng)選用_____________________兩種限制酶對質(zhì)粒和含Gfp基因的DNA進(jìn)行切割；以保證重組DNA序列的唯一性。

（3）②過程常用的方法是______________________；③過程為___________。

（4）可以使用_____________________方法在蛋白質(zhì)水平上鑒定小鼠是否存在綠色熒光蛋白。30、杜泊羊以其生長速度快；肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)；被稱為“鉆石級”肉用綿羊?？蒲泄ぷ髡咄ㄟ^胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如圖所示，請據(jù)圖回答問題：

(1)獲取得到的卵（母）細(xì)胞，需要體外培養(yǎng)至____________時(shí)期。采集的精子需要經(jīng)過________，才具備受精能力。判斷卵細(xì)胞是否受精的重要標(biāo)志是____________。

(2)在胚胎移植前要對提供胚胎的杜泊羊進(jìn)行______________處理，接受胚胎的當(dāng)?shù)仄胀ňd羊進(jìn)行________處理。代孕母羊?qū)χ萌胱訉m的早期胚胎基本上不發(fā)生______________；這就為早期胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。

(3)卵裂期進(jìn)行的分裂方式為___________，胚胎總體積的變化情況為___________。采用胚胎分割技術(shù)能得到“同卵多胞胎”，對囊胚期的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要特別注意將____________均等分割；否則會影響分割后的胚胎恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

(4)在繁育過程中，出現(xiàn)了一只體型特別大的良種奶牛，若要快速地大量繁殖出同樣大體型的個(gè)體，可采用的技術(shù)是___________。31、科學(xué)家將CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)導(dǎo)入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒并進(jìn)行改造；通過同源重組實(shí)現(xiàn)目的基因的精確插入，利用該方法已培育出了耐寒的玉米新品種(轉(zhuǎn)入CXE-20耐寒基因)。下圖1表示構(gòu)建轉(zhuǎn)基因耐寒玉米重組質(zhì)粒的過程，其中Cas9-gRNA是CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)基因，HRA是抗除草劑基因，HR1和HR2是同源重組序列，圖2表示重組質(zhì)粒與受體細(xì)胞核DNA重組的過程。請回答問題：

(1)過程①的原料是_______，需要_______催化。

(2)限制酶BamHⅠ、SacⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ的識別序列分別是GGATCC、GAGC.AAGCTT、GAATTC，過程①所用引物如下，則過程②使用的限制酶是_______和_______。

5′-CGCGAGCTCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3′

5′-CGGAATTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3′

(3)如圖表示Cas9-gRNA復(fù)合體切割DNA的示意圖，其靶序列是5′-CGAAAGCGTATCAGTATGCGTACGT-3′，根據(jù)圖中靶序列設(shè)計(jì)的gRNA中相應(yīng)序列是5′-_______-3′，Cas9-gRNA復(fù)合體切割DNA的_______鍵使其斷裂。

(4)用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化玉米幼胚后，在培養(yǎng)基中加入_______篩選出導(dǎo)入目的基因幼胚。提取培養(yǎng)后的植株DNA，設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR、電泳，基因長度及結(jié)果如下圖。設(shè)計(jì)引物的依據(jù)是_______，其中_______號玉米中成功插入了外源基因，研究人員認(rèn)為這些植株自交后會發(fā)生性狀分離，其判斷依據(jù)是_______。

32、2021年，中國科學(xué)家在預(yù)印本網(wǎng)站bioRxiv發(fā)表了一篇研究報(bào)告。研究人員選擇了Lewis大鼠作為研究對象以降低兩只小鼠組合在一起后的免疫排斥反應(yīng)；通過子宮移植和異種共生手術(shù)將一只被閹割的雄性大鼠和一只雌性大鼠連接在一起，使雄性小鼠能夠通過血液交換獲得一個(gè)雌性微環(huán)境，成功讓得到子宮移植的雄性小鼠孕育胚胎并誕下幼崽。請回答下列問題：

（1）科研人員將選擇______時(shí)期的胚胎移植到兩只共生小鼠的子宮中。

（2）早期胚胎獲取可從供體的______中沖取，完成此操作的生理學(xué)基礎(chǔ)是______。

（3）該項(xiàng)研究中將雄性大鼠和雌性大鼠共生的目的是______。

（4）若通過基因編輯技術(shù)切除所得受精卵中的BMALI基因（生物節(jié)律核心基因）；可培育出BMALI基因敲除的小鼠?；蚓庉嫻ぞ呤墙?jīng)改造的CRISPR/Cas9系統(tǒng)。該系統(tǒng)由向?qū)NA（sgRNA）和Cas9蛋白組成，由sgRNA引導(dǎo)Cas9蛋白在特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割來完成基因的編輯過程，其工作原理如下圖所示。請回答：

①圖中Cas9-sgRNA復(fù)合體通常用______方法注入受體細(xì)胞；基因編輯工具中對基因進(jìn)行剪切的是______。

②sgRNA能與靶DNA分子特異性識別、結(jié)合的原理是______。

③若BMALI基因敲除成功，從個(gè)體水平鑒定，小鼠表現(xiàn)為______。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、D【分析】【分析】

1；單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。

2；題中①表示細(xì)胞融合；②表示篩選過程。

【詳解】

A；甲是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)B細(xì)胞；A錯(cuò)誤；

B；①是完整骨髓瘤細(xì)胞與免疫的B淋巴細(xì)胞融合的過程；B錯(cuò)誤；

C；融合細(xì)胞不一定同時(shí)具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性；也可能是瘤瘤細(xì)胞或B細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D；②是經(jīng)篩選獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；D正確。

故選D。2、C【分析】【分析】

將目的基因插入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA上；通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞，并將其插入到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。它是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法。

放射性標(biāo)記的T-DNA片段做探針的目的是檢測受體細(xì)胞的DNA中有無目的基因。均顯示一條雜交帶；說明在這一突變體中，T-DNA插入位置是唯一的。

【詳解】

A；圖示結(jié)果突變體中出現(xiàn)放射性；說明使用了放射性標(biāo)記的T-DNA片段做探針對目的基因進(jìn)行檢測，A正確；

B；該突變體產(chǎn)生的根本原因是T-DNA攜帶目的基因插入到水稻的DNA中；B正確；

C；不同酶切雜交帶位置不同；說明不同酶切后帶有T-DNA的片段長度不同（即：不同的酶切位點(diǎn)距離T-DNA的遠(yuǎn)近不同），C錯(cuò)誤；

D；由圖所示放射性檢測結(jié)果可知；野生型無放射性雜交條帶，若野生型也出現(xiàn)雜交帶，則實(shí)驗(yàn)樣本可能被污染，檢測結(jié)果不準(zhǔn)確，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】

本題通過放射性同位素標(biāo)記方法檢測目的基因的方法，考查對基礎(chǔ)知識的運(yùn)用，以及對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析和判斷能力。3、B【分析】【分析】

分解纖維素的微生物的分離的實(shí)驗(yàn)原理：①土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶．纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；透明圈內(nèi)的纖維素已被分解；而不是剛果紅染料被分解，A錯(cuò)誤；

B；能產(chǎn)生淀粉酶的微生物菌落周圍可形成模糊的透明圈；B正確；

C；菌落①中的菌株降解纖維素能力最強(qiáng)；C錯(cuò)誤；

D；圖中培養(yǎng)基應(yīng)該以纖維素為唯一碳源；因此不可用牛肉膏、蛋白胨配制，D錯(cuò)誤。

故選B。4、C【分析】【分析】

培養(yǎng)基的概念及營養(yǎng)構(gòu)成。

（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。

（2）營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水；碳源、氮源、無機(jī)鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無氧的條件。

【詳解】

A；細(xì)菌的數(shù)目可以用濾膜法來測定；將已知體積的水過濾后，將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基上大腸桿菌的菌落呈黑色，可以根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目，以此來檢驗(yàn)自來水中大腸桿菌數(shù)是否超標(biāo)，A正確；

B；檢測同種水樣中細(xì)菌的數(shù)量時(shí)；設(shè)置空白培養(yǎng)基的目的是檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備是否合格，B正確；

C；培養(yǎng)基不一定都含有碳源；氮源，如培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需加入碳源，分離自生固氮菌的培養(yǎng)基中，不需加入氮源，C錯(cuò)誤；

D；對于經(jīng)常使用的菌種可采用試管固體斜面臨時(shí)保存；該方法保存的菌種易被污染或產(chǎn)生變異，不適宜長期保存，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】5、B【分析】【分析】

泡菜制作：

1；菌種：制作泡菜所用微生物是乳酸菌。

2；實(shí)驗(yàn)原理：（1）乳酸菌在無氧條件下；將糖分解為乳酸；（2）利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化，溫度過高，食鹽用量不足10%、腌制時(shí)間過短，容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加，一般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量開始下降；（3）測定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液目測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。

【詳解】

A；開發(fā)新產(chǎn)品時(shí)；應(yīng)該考慮對泡菜材料進(jìn)行創(chuàng)新拓展，參與泡菜制作的微生物是乳酸菌，屬于厭氧型生物，因此泡菜制作過程中不需要通氣發(fā)酵，A錯(cuò)誤；

B；制作泡菜時(shí)；需將經(jīng)過預(yù)處理的新鮮蔬菜混合均勻，裝入泡菜壇內(nèi)，裝至半壇時(shí)，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，故應(yīng)將蒜瓣、生姜等輔料放在壇的中間，B正確；

C；亞硝酸鹽含量測定的實(shí)驗(yàn)步驟是：配制溶液→制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液→制備泡菜樣品處理液→比色；類似于pH檢測中需要使用比色卡一樣，在檢測需要與標(biāo)準(zhǔn)顯色液對比才知道待測樣液中亞硝酸鹽的含量；因此，為了使測定亞硝酸鹽含量的準(zhǔn)確性提高，關(guān)鍵的操作是標(biāo)準(zhǔn)顯色液的制備，C錯(cuò)誤；

D；測定亞硝酸鹽含量的方法是比色法；D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】6、A【分析】【分析】

分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣→選擇培養(yǎng)（此步是否需要；應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定）→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。

【詳解】

A；經(jīng)選擇培養(yǎng)后；再經(jīng)適度梯度稀釋，才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，A錯(cuò)誤；

B；選擇培養(yǎng)即富集培養(yǎng)可省略；但培養(yǎng)分離的纖維素分解菌可能會少，B正確；

C；纖維素酶的測定方法一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測定；C正確；

D；實(shí)驗(yàn)組和對照組遵循單一變量原則；對照組可用等量的纖維素分解菌培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上，實(shí)驗(yàn)組可用等量的纖維素分解菌培養(yǎng)液涂布到纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上，通過設(shè)置對照能證明經(jīng)“濃縮”培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物，D正確。

故選A。7、A【分析】【分析】

果酒的制作離不開酵母菌；酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精。

【詳解】

A；甘蔗汁和糯米中含有蛋白質(zhì)（元素組成是C、H、O、N等）和糖（元素組成是C、H、O）等物質(zhì)；能為酒曲中的菌提供碳源和氮源等，A正確；

B；酶的作用機(jī)理是降低化學(xué)反應(yīng)的活化能；糖化菌分泌的淀粉酶水解淀粉的過程不需要消耗ATP，B錯(cuò)誤；

C；發(fā)酵過程中有釀酒菌；主要是酵母菌，酵母菌需要在無氧條件下進(jìn)行發(fā)酵，故不能攪拌增加溶解氧，C錯(cuò)誤；

D；若拌曲時(shí)被醋酸桿菌污染；由于缺少糖源，此時(shí)醋酸桿菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)橐宜幔珼錯(cuò)誤。

故選A。二、多選題(共9題，共18分)8、A:D【分析】【分析】

1；DNA一般是雙螺旋結(jié)構(gòu)；限制酶可以識別特定的脫氧核苷酸序列；并在每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割。

2；圖1中SaLl有3個(gè)識別位點(diǎn)；能將DNA片段切成4段，Xhol有2個(gè)識別位點(diǎn)，能將DNA片段切成3段。

【詳解】

A；限制酶識別特定的脫氧核苷酸序列；不同的限制酶能識別不同的脫氧核苷酸序列，A錯(cuò)誤；

B；Sall將DNA片段切成4段；Xhol將DNA片段切成3段，根據(jù)電泳結(jié)果可知泳道①為Sall，泳道②為XhoⅠ，B正確；

C；同種限制酶切割出的DNA片段；具有相同的粘性末端，再用DNA連接酶進(jìn)行連接，可以構(gòu)成重組DNA，C正確；

D；限制酶切割雙鏈DNA；酶切后的DNA片段仍然是雙鏈DNA，D錯(cuò)誤。

故選AD。9、A:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。

2；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

3；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但DNA既溶于2mol/L的NaCl溶液，也溶于蒸餾水，A正確；

B；洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜；但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，B錯(cuò)誤；

C；DNA在濃度為0.14mol/LNaCl溶液中的溶解度最低；因此用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L或加入冷酒精后過濾，都可以去除部分雜質(zhì)，C正確；

D；在酸性條件下；DNA與二苯胺試劑反應(yīng)，最終產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，因此常用二苯胺試劑鑒定DNA，D正確。

故選ACD。10、A:B:D【分析】【分析】

分析題文描述和題圖：圖示為采用稀釋涂布平板法分離常乳樣品中細(xì)菌總量的流程圖。首先將常乳樣品進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后取1×105倍稀釋的稀釋液0.1mL分別涂布到3個(gè)平板上進(jìn)行培養(yǎng)。為了防止雜菌污染；稀釋涂布平板的所有操作都應(yīng)控制無菌條件。

【詳解】

A；為了防止雜菌污染；倒平板時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)皿打開一條細(xì)縫，不要完全打開，A正確；

B；為了檢測一份常乳樣品中細(xì)菌的總量；圖示對常乳樣品進(jìn)行了一系列梯度稀釋，由此可見，上述方法是稀釋涂布平板法，培養(yǎng)基要營養(yǎng)全面，適合各種細(xì)菌生長，B正確；

C；通過連續(xù)劃線的方法接種；不易分離出單個(gè)菌落，不能用于微生物的計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；

D、取1×105倍稀釋的稀釋液0.1mL分別涂布到3個(gè)平板上進(jìn)行培養(yǎng)，若三個(gè)平板上的菌落平均數(shù)為59，則所每毫升樣品中細(xì)菌總數(shù)為59÷0.1×105＝5.9×107；D正確。

故選ABD。11、B:C【分析】【分析】

根據(jù)題意；將某實(shí)驗(yàn)動物的第5號染色體上的一段DNA敲除，結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實(shí)驗(yàn)動物血液甘油三酯極高，具有動脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代，說明該變異是一種可遺傳的變異。

【詳解】

A；DNA敲除后結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實(shí)驗(yàn)動物血液甘油三酯極高；具有動脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代，說明敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng)，A正確；

B；動脈硬化的產(chǎn)生與遺傳物質(zhì)發(fā)生可遺傳的變異有關(guān)；不能說明是基因重組，B錯(cuò)誤；

C；上述信息只能表明敲除的DNA片段與甘油三酯代謝有關(guān)；不能表明控制甘油三酯合成的基因就位于第5號染色體上，C錯(cuò)誤；

D；由題干信息可知；利用DNA片段的敲除技術(shù)可以研究相關(guān)基因功能，D正確。

故選BC。12、C:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；檢測到細(xì)菌B合成人的生長激素才能說明獲得成功；A錯(cuò)誤；

B；根據(jù)題意；細(xì)菌B不含有質(zhì)粒A及其上的基因，即沒有抗氨芐青霉素基因；質(zhì)粒含抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，基因發(fā)生重組時(shí)抗四環(huán)素基因被破壞，抗氨芐青霉素基因被保留，故在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長的是導(dǎo)入了普通質(zhì)粒或者重組質(zhì)粒的細(xì)菌，B錯(cuò)誤；

C；將人的生長激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過程連接兩個(gè)切口；該過程共形成4個(gè)磷酸二酯鍵，C正確；

D、將目的基因?qū)爰?xì)菌時(shí)，需要用Ca2+處理細(xì)菌；使其處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，D正確。

故選CD。

【點(diǎn)睛】13、A:C:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞(體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng))，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；重組大腸桿菌RecQ解旋酶相當(dāng)于抗原；能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的體液免疫應(yīng)答，則在人體內(nèi)可刺激B細(xì)胞增殖分化為漿細(xì)胞和記憶B細(xì)胞，A正確；

B；單克隆抗體的制備過程中需要進(jìn)行2次篩選和1次抗原檢測；第一次是用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；第二次是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，進(jìn)一步篩選出能產(chǎn)生人們所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；據(jù)圖1分析；染色體數(shù)目有為80-93的細(xì)胞，免疫小鼠中B淋巴細(xì)胞染色體數(shù)目為40，骨髓瘤細(xì)胞染色體數(shù)目為62-68，兩者之和大于80-93，故雜交瘤細(xì)胞在融合的過程中可能會發(fā)生染色體數(shù)目的丟失，C正確；

D、據(jù)圖2分析，單抗稀釋度為1/800時(shí)RecQ解旋酶結(jié)合DNA活性最低，可知mAb能特異性與RecQ解旋酶結(jié)合可顯著抑制RecQ解旋酶與DNA的結(jié)合；D正確。

故選ACD。14、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備（1）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫原理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體。②細(xì)胞融合原理：利用病毒對宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。③動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。（2）單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗體參與的是體液免疫；A錯(cuò)誤；

B；單克隆抗體是由特異性雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的；B錯(cuò)誤；

C；雜交瘤細(xì)胞具有能迅速大量增殖的能力；C正確；

D、體外培養(yǎng)特異性雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需要給予95％的空氣和5％的CO2，D錯(cuò)誤。

故選ABD。15、A:B:C【分析】【分析】

在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖；再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～30℃，pH最好是弱酸性。

【詳解】

A；桑葚獨(dú)有的花青素等能顯著增強(qiáng)復(fù)合果酒的功效；所以在生產(chǎn)復(fù)合果酒的過程中，要防止桑葚天然色素被氧化，增強(qiáng)功效，A正確；

B；酵母菌在有氧條件下進(jìn)行快速的增殖；所以果酒發(fā)酵初期通入氧氣能促進(jìn)酵母菌繁殖，有利于加快果酒發(fā)酵，B正確；

C；為了防止雜菌污染；復(fù)合果酒的制備過程中對發(fā)酵設(shè)備要進(jìn)行滅菌處理，C正確；

D；變酸的果酒表面會形成一層菌膜；這層菌膜是由醋酸菌形成的，D錯(cuò)誤。

故選ABC。16、C:D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。也就是說，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。

基本流程：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程可以通過改造基因來定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)；A正確；

B；因?yàn)榛蛑笇?dǎo)蛋白質(zhì)的合成；所以改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實(shí)現(xiàn)，B正確；

C；改造后的中華鱘具有新的性狀；但其和現(xiàn)有中華鱘之間沒有生殖隔離，仍是同一物種，C錯(cuò)誤；

D；蛋白質(zhì)工程改造的是基因；可以遺傳給子代，因此改造后的中華鱘的后代也具有改造的蛋白質(zhì)，D錯(cuò)誤。

故選CD。三、填空題(共7題，共14分)17、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的愿望；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦子生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。

基因工程的原理是基因重組；其優(yōu)點(diǎn)是打破了生殖隔離。但由于科學(xué)發(fā)展水平的限制，目前科學(xué)家對基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機(jī)制等都了解得相當(dāng)有限；再加上轉(zhuǎn)移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因；同時(shí)，由于外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機(jī)的，因此在轉(zhuǎn)基因生物中，有時(shí)候會出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因生物具有以下優(yōu)點(diǎn)：

作物產(chǎn)量高；能解決糧食短缺問題；利用基因工程生產(chǎn)的抗蟲作物能夠減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染；利用基因工程培育的生長迅速；營養(yǎng)品豐富的生物，能增加食物營養(yǎng)，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能夠生產(chǎn)稀缺的生化藥物。

（2）轉(zhuǎn)基因生物受限于科學(xué)發(fā)展水平；可能會產(chǎn)生以下問題：

轉(zhuǎn)基因生物與同種生物雜交；可能產(chǎn)生重組病菌；重組病毒或超級雜草；導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因生物的外源基因有可能與感染轉(zhuǎn)基因生物的某些細(xì)菌或病毒雜交，從而重組出對人類或其他生物有害的病原體，可能使疾病的傳播跨越物種障礙。

（3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)取得了巨大的成果；但科學(xué)技術(shù)是把雙刃劍，面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，而不能因噎廢食。

【點(diǎn)睛】

本題考查轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，意在考查學(xué)生對轉(zhuǎn)基因生物安全性問題的識記與理解?！窘馕觥拷鉀Q糧食短缺問題減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染增加食物營養(yǎng)，提高附加值能產(chǎn)生有毒蛋白或新過敏原可能產(chǎn)生重組病菌、重組病毒或超級雜草可能使疾病的傳播跨越物種障礙趨利避害不能因噎廢食18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強(qiáng)升高pH的變化酚紅指示劑紅19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落菌落數(shù)20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－221、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因轉(zhuǎn)移基因擴(kuò)增醫(yī)藥衛(wèi)生農(nóng)牧業(yè)、食品工業(yè)環(huán)境保護(hù)蘇云金桿菌農(nóng)藥的用量生產(chǎn)成本農(nóng)藥對環(huán)境的污染。22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】0．1423、略

【分析】【詳解】

目前我國市場上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜，故我國市場上有大豆等的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?！窘馕觥磕壳拔覈袌錾系霓D(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜。四、判斷題(共1題，共8分)24、A【分析】【詳解】

生殖性克隆存在倫理道德等方面的問題，我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。本說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共40分)25、略

【分析】【分析】

1；選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物；僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。

2；分解纖維素的微生物的分離的實(shí)驗(yàn)原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖能被微生物利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

3；統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：

（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：

①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板；在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；

②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；

③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。

（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）：

①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)；培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。

②操作：

a；設(shè)置重復(fù)組；增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。

b；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確；一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M；其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】

（1）土壤取樣時(shí)；一般選擇纖維素豐富的環(huán)境。選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的數(shù)量。

（2）若測得稀釋一定倍數(shù)的0.1mL稀釋液中纖維素分解菌的菌落數(shù)平均值為51，通過計(jì)算得知每毫升樣品中有5.1×107個(gè)纖維素分解菌，則由每mL樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M可得，該稀釋液的稀釋倍數(shù)＝5.1×107÷51×0.1=105。

（3）鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)加入CR染料；它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物。若在鑒別培養(yǎng)基上得到部分有透明圈的菌落，透明圈越大說明降解纖維素能力越強(qiáng)，所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌落1。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合流程圖，考查微生物的分離和培養(yǎng)，解題關(guān)鍵是識記土壤微生物分離的原理及方法；識記培養(yǎng)基的種類及作用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥坷w維素增加纖維素分解菌的數(shù)量105紅①26、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點(diǎn)；能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄；如將強(qiáng)啟動子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，則會破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，則需要強(qiáng)啟動子和P基因不被破壞，因此應(yīng)優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質(zhì)粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上，因此將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入G418進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場所，線粒體是細(xì)胞有氧呼吸的主要場所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細(xì)胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對沒有分化的薄壁細(xì)胞團(tuán)；經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以分散成胚性單細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成胚狀體，再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及玉米的基因型等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染?！窘馕觥?1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細(xì)胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染27、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)通過體外控制溫度擴(kuò)增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴(kuò)增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，該過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞；分析題意，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖莍PS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實(shí)驗(yàn)的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細(xì)胞的產(chǎn)生情況，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對照與單一變量原則，故可設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用。【解析】(1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用28、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性內(nèi)切核酸酶；識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。DNA連接酶，將兩個(gè)DNA片段連接起來，恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵。載體，將外源基因送入受體細(xì)胞。

2；基因工程的基本過程：目的基因的篩選與獲??；基因表達(dá)載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

（1）過程①包括逆轉(zhuǎn)錄和PCR，逆轉(zhuǎn)錄需要反轉(zhuǎn)錄酶的參與，PCR過程需要耐高溫的DNA聚合酶。限制酶的作用是識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，對比幾種限制酶的結(jié)合位點(diǎn)和DGAT1-F、DGAT1-R的堿基序列，可知過程②應(yīng)選用的限制酶是BamHI和XbaI。

（2）將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌；可以與外界環(huán)境隔離，能夠穩(wěn)定保存，準(zhǔn)確復(fù)制，大腸桿菌比基因方便取用，故選①②④。

（3）根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的分布可知所用接種方法是稀釋涂布平板法?？寺≥d體中含有氨芐青霉素抗性基因；1acZ基因；1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色，所以為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有氨芐青霉素、X-gal、IPTG。

（4）pBI121質(zhì)粒中含有卡那霉素抗性基因，所以經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含卡那霉素的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察其生長情況。在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基可以用于擴(kuò)大培養(yǎng)，增加四尾柵藻種群密度。上一步驟中用未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照，所以利用索氏抽提法分別測定（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻的油脂含量，從而檢測表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)。【解析】(1)反轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶BamHIXbaI

(2)①②④

(3)稀釋涂布平板法氨芐青霉素；X-gal、IPTG

(4)卡那霉素?cái)U(kuò)大培養(yǎng)（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻六、綜合題(共4題，共36分)29、略

【分析】【分析】

過程Ⅰ中胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）是由早期胚胎或原始性腺中分離出的一類細(xì)胞；在功能上具有發(fā)育的全能性。過程Ⅱ?qū)@得的目的基因?qū)肱咛ジ杉?xì)胞之前需構(gòu)建基因表達(dá)載體，目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。

【詳解】

（1）過程Ⅰ是胚胎干細(xì)胞發(fā)育為胚胎；利用了胚胎干細(xì)胞的全能性；體外培養(yǎng)時(shí)在培養(yǎng)液中添加抑制因子能夠使胚胎干細(xì)胞維持不分化。

（2）由圖可知；BamHⅠ的識別序列在Gfp基因中，因而在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用HindⅢ和SalⅠ兩種限制酶對含Gfp基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。

（3）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入動物細(xì)胞常用顯微注射法；③過程為將早期胚胎移植入受體的胚胎移植過程。

（4）基因工程中在蛋白質(zhì)水平的鑒定方法主要是抗原——抗體雜交法。

【點(diǎn)睛】

答題關(guān)鍵在于掌握基因工程和