2025年蘇科版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年蘇科版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、甲烷氧化菌生產(chǎn)的某種蛋白具有較高的經(jīng)濟(jì)效益。某研究小組利用污泥，經(jīng)過濃縮培養(yǎng)，最終分離出以甲烷為碳源和能源的菌株。下列說法不正確的是（）A.在培養(yǎng)過程中，可先用液體培養(yǎng)基進(jìn)行多次選擇培養(yǎng)，以增大該菌濃度B.濃縮培養(yǎng)后，為了得到單菌落，可直接用灼燒后冷卻的接種環(huán)蘸取菌液進(jìn)行平板劃線C.若用稀釋涂布平板法對(duì)菌種純化并計(jì)數(shù)，則各梯度應(yīng)該分別涂布3個(gè)平板D.對(duì)已分離的菌株，可采用斜面保藏法在-20℃的冷凍冰箱中長期保存2、如圖是中國科學(xué)家首次用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆出兩只獼猴的簡單流程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞有利于細(xì)胞核全能性的恢復(fù)B.重構(gòu)胚可以用PEG、滅活的病毒等激活C.克隆猴的遺傳物質(zhì)與供體體細(xì)胞不完全一致D.培養(yǎng)供體體細(xì)胞的培養(yǎng)液中常需添加動(dòng)物血清3、下表為某培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是（）。成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)青霉素瓊脂蒸餾水含量10g10g2g0．4g0．065g1萬單位適量1000ml

A.此培養(yǎng)基屬于天然鑒別培養(yǎng)基，其中的氮源來自于牛肉膏B.能在此培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌，擬核上有抗青霉素的基因C.此培養(yǎng)基可以用來檢測(cè)自來水中細(xì)菌含量是否符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)D.此培養(yǎng)基可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過程中4、人參是一種名貴藥材，具有良好的滋補(bǔ)作用。干擾素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。下圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程。①~④表示相關(guān)的操作，EcoRI、BamHI為限制酶，它們的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如下表所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）

。限制酶識(shí)別序列及切割位點(diǎn)EcoRIG↓AATTCBamHIG↓GATCC

A.過程①所需的兩種引物中分別加上GAATTC和GGATCC序列有利于后續(xù)操作B.構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因必須位于啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行復(fù)制C.過程③利用的是T-DNA的特性將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體DNA中D.過程④需利用液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，可通過PCR技術(shù)檢測(cè)干擾素基因是否表達(dá)5、2022年3月8日，史上首例接受了“豬心臟”移植手術(shù)的患者在術(shù)后2個(gè)月去世。盡管沒能最終救回他，但也延長了患者的壽命。據(jù)悉，手術(shù)使用的“豬心臟”源于被基因改造過的實(shí)驗(yàn)豬。這項(xiàng)技術(shù)有望解決器官移植面臨的器官短缺的難題。下列關(guān)于器官移植的說法，不正確的是（）A.通常器官移植要面臨的難題之一是由T淋巴細(xì)胞引起的免疫排斥B.該實(shí)驗(yàn)豬可能通過基因敲除技術(shù)“敲除”了引起人免疫系統(tǒng)反應(yīng)的抗原基因C.為保證該豬任何內(nèi)臟都能供人體移植，需要在原腸胚時(shí)期對(duì)豬的細(xì)胞進(jìn)行改造D.我國支持的治療性克隆也能解決器官短缺的難題評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT-）；在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述正確的是（）

A.可用滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B.未融合的細(xì)胞和融合的同種核細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細(xì)胞膜的選擇透過性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)7、良種試管牛的繁殖過程是用激素促進(jìn)甲牛多排卵，然后把卵母細(xì)胞在體外與人工采集的乙牛的精子進(jìn)行受精，在特定培養(yǎng)基上培育成胚胎，再把胚胎送入經(jīng)過激素處理的丙牛的子宮內(nèi)，孕育成試管牛。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.“用激素促進(jìn)甲牛多排卵”的激素是孕激素B.產(chǎn)生試管牛的生殖方式屬于有性生殖C.甲牛、乙牛對(duì)試管牛核基因的貢獻(xiàn)相同D.該技術(shù)可應(yīng)用于加速優(yōu)良種畜的繁殖8、為提高一株石油降解菌的凈化能力，將菌涂布于石油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，以致死率為90%的輻照劑量誘變處理，下列敘述不合理的是（）A.將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率B.涂布用的菌濃度應(yīng)控制在30~300個(gè)/mLC.需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)考察輻射時(shí)間對(duì)存活率的影響，以確定最佳誘變時(shí)間D.挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，給純化后進(jìn)行降解效率分析9、下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定、DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定的原理的敘述正確的是（）A.利用DNA不溶于酒精，但蛋白質(zhì)均溶于酒精的原理，可分離DNA與蛋白質(zhì)B.利用在一定溫度下DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色的原理對(duì)粗提取的DNA進(jìn)行鑒定C.PCR技術(shù)利用了DNA的熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合D.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理10、白地霉侵染是導(dǎo)致柑橘酸腐病的主要原因，實(shí)驗(yàn)證明桔梅奇酵母通過分泌普切明酸對(duì)白地霉具有生物防治能力。已知鐵是真菌生長的必需元素，是胞內(nèi)重要酶活性中心的組成部分。普切明酸是桔梅奇酵母產(chǎn)生的一種水溶性鐵螯合劑，能快速在培養(yǎng)基中擴(kuò)散并與其中的Fe3+形成穩(wěn)定紅色復(fù)合物。研究配制的含有不同濃度FeCl3的培養(yǎng)基如下表所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為隨FeCl3濃度增大，抑菌圈紅色加深但變窄，如下圖所示。相關(guān)敘述正確的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水瓊脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素，瓊脂不是營養(yǎng)物質(zhì)B.白地霉采用了平板劃線法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3濃度增大，普切明酸與Fe3+結(jié)合的數(shù)量減少D.結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3能降低桔梅奇酵母對(duì)白地霉的防治效果11、野生型大腸桿菌能夠在基本培養(yǎng)基上生長，營養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌則不能在基本培養(yǎng)基上生長，需要在培養(yǎng)基中添加某些營養(yǎng)物質(zhì)。研究人員用影印培養(yǎng)法對(duì)誘變產(chǎn)生的營養(yǎng)缺陷型突變體進(jìn)行篩選，方法如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.母板培養(yǎng)基與基本培養(yǎng)基的成分相同B.用稀釋涂布平板法將菌液接種在母板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)C.作為接種工具的“印章”需經(jīng)過滅菌后才能印在長有菌落的母板上粘取菌種D.母板培養(yǎng)基上的菌落4、5、6為營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌繁殖而來12、下圖是利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)人體血清白蛋白的操作流程；其中細(xì)胞①已導(dǎo)入人血清白蛋白基因。相關(guān)敘述正確的是（）

A.細(xì)胞①的培養(yǎng)液中需要加入胃蛋白酶B.“卵母細(xì)胞”應(yīng)在體外培養(yǎng)成熟C.圖示“細(xì)胞②→早期胚胎”發(fā)生輸卵管中D.該技術(shù)與試管牛培育的主要原理不同13、下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表述錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)環(huán)境中需要O2，不需要CO2B.細(xì)胞要經(jīng)過脫分化形成愈傷組織C.培養(yǎng)液通常含有糖類，氨基酸，無機(jī)鹽，維生素和動(dòng)物血清D.培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)到一定階段后分瓶后才能繼續(xù)增殖14、下圖為科學(xué)家培育克隆猴的基本步驟，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性B.對(duì)A猴卵母細(xì)胞去核是為了保證克隆猴的核遺傳物質(zhì)都來自B猴C.必須將重組細(xì)胞培育到一定程度后才能植入代孕動(dòng)物體內(nèi)D.A猴的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)B猴體細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)15、哺乳動(dòng)物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。16、禁止生物武器公約。

（1）1972年4月10日，蘇聯(lián)、美國、英國分別在其首都簽署了《禁止試制、生產(chǎn)和儲(chǔ)存并銷毀細(xì)菌（生物）和毒劑武器公約》（簡稱_____）；并于1975年3月26日生效。1984年11月15日，我國也加入了這一公約。

（2）我國在任何情況下_____、_____、_____生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。17、本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進(jìn)行________的測(cè)定。18、最常用的載體是______，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有______能力的_____。19、兩種DNA連接酶（E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：

①相同點(diǎn)：都縫合______鍵。

②區(qū)別：E·coliDNA連接酶來源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。20、加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免加劇___________，導(dǎo)致DNA分子不能形成__________。21、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。22、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：

取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。23、生物數(shù)據(jù)庫的知識(shí)與正在迅猛發(fā)展的生物信息學(xué)有關(guān)。什么是生物信息學(xué)________？評(píng)卷人得分四、判斷題(共4題，共24分)24、目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以水稻和小麥最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜（______）A.正確B.錯(cuò)誤25、通過體細(xì)胞核移植技術(shù)已經(jīng)獲得了多種克隆動(dòng)物，該技術(shù)的成功率已經(jīng)很高。（選擇性必修3P54）()A.正確B.錯(cuò)誤26、治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯(cuò)誤27、生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共24分)28、（1）國家生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定細(xì)菌學(xué)指標(biāo)的限值：細(xì)菌總數(shù)為100CFU/mL（說明：CFU為菌落形成單位）。興趣小組同學(xué)通過濾膜法對(duì)某小區(qū)自供水設(shè)備的蓄水池進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)測(cè)定，將10mL的水樣進(jìn)行過濾后，將濾膜放在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)應(yīng)將平板倒置，其原因是___________________。

（2）所用培養(yǎng)基中的牛肉膏除為微生物提供________和_______外，還能提供磷酸鹽和________。在培養(yǎng)過程中，不同時(shí)間所觀察到的平板上菌落特征的差異有___________（至少寫出兩點(diǎn)）。

（3）上述檢測(cè)過程在37℃條件下經(jīng)24h培養(yǎng)后；測(cè)得如下結(jié)果：

。平板l平板2平板3細(xì)菌總數(shù)（CFU/mL）413538據(jù)上表結(jié)果判斷，所取水樣測(cè)定結(jié)果是_________________。29、氧化硫硫桿菌（T．t）通過將單質(zhì)硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進(jìn)行化能合成作用。科學(xué)家欲通過實(shí)驗(yàn)探究硫酸鋅對(duì)T．t產(chǎn)酸量的影響。

實(shí)驗(yàn)材料：氧化硫硫桿菌（T．t）菌液；蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液，配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基(含單質(zhì)硫)，恒溫?fù)u床等。

請(qǐng)分析并回答以下問題：

（1）氧化硫硫桿菌的代謝類型為______________，培養(yǎng)氧化硫硫桿菌（T．t）的液體培養(yǎng)基中的碳源是___________，該培養(yǎng)基從功能上屬于______________培養(yǎng)基。

（2）實(shí)驗(yàn)前，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)氧化硫硫桿菌（T．t）菌液已被雜菌污染，于是在配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基中加入____________，用______________法接種并進(jìn)行純化培養(yǎng)；得到了氧化硫硫桿菌菌落。

（3）實(shí)驗(yàn)步驟：

第一步：對(duì)配制好的培養(yǎng)基再次進(jìn)行______________滅菌處理；以防止雜菌污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

第二步：取三個(gè)錐形瓶（編號(hào)A、B、C）分別加入等量培養(yǎng)基后，再依次分別加入____________________________；

第三步：往A、B、C三組中接種______________后放入恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天。

第四步：每天測(cè)定并記錄各組的硫酸含量。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：如圖所示；據(jù)圖分析實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

實(shí)驗(yàn)結(jié)論：________________________________________________________。30、黃粉蟲可以吞食；降解塑料；利用黃粉蟲腸道微生物對(duì)白色污染進(jìn)行生物降解，是一種綠色環(huán)保的處理工藝。下圖是從黃粉蟲腸道中分離、純化微生物的過程，回答下列問題：

(1)富集培養(yǎng)基按物理性質(zhì)屬于___________培養(yǎng)基，不含有_____________，但含有酵母膏、蛋白豚。酵母膏能提供所需的__________________。

(2)選擇培養(yǎng)基中需加入_______________作為唯一碳源，稀釋涂布后最后一組可能形成菌落。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法有_______________和利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。

(3)如果對(duì)白色污染進(jìn)行傳統(tǒng)填埋、焚燒容易造成二次污染，黃粉蟲腸道微生物對(duì)白色污染的降解______（填“會(huì)”或“不會(huì)”）造成二次污染。31、柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的；發(fā)生在柑橘的一種病害；植株受害后會(huì)發(fā)生落葉、落果，嚴(yán)重時(shí)葉片落光，整株枯死。利用基因工程將來自水稻的Xa27基因?qū)敫涕倏色@得抗柑橘潰瘍病的植株，利用植物組織離體培養(yǎng)技術(shù)則可培育無病毒植株?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為了獲得脫毒苗，通常可以選取植株______附近的組織進(jìn)行離體培養(yǎng)，選取該部位組織的原因是______。

(2)如圖1表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉(zhuǎn)基因植株的過程：

①基因表達(dá)載體必需的結(jié)構(gòu)除復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、目的基因外，還有______。

②共培養(yǎng)時(shí)，Ti質(zhì)粒的作用是______。

③共培養(yǎng)后，要利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，目的是______。

④再分化過程中，誘導(dǎo)愈傷組織生根、生芽的先后順序?yàn)開_____。

⑤從個(gè)體生物學(xué)水平鑒定柑橘再生植株時(shí)可采用______（填具體操作）的方法。經(jīng)鑒定有幾棵植株沒有抗病的能力，分別提取這幾棵植株的DNA，依據(jù)______的特異性堿基序列設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增后利用______進(jìn)行檢測(cè)；結(jié)果如圖2。

據(jù)圖2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共12分)32、請(qǐng)回答以下基因工程方面的有關(guān)問題：

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因；其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似（如下圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。

①從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為_______________。

②在第___________輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。

（2）設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)的關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物（只標(biāo)注了部分堿基序列）都不合理（如下圖）；請(qǐng)分別說明理由。

①第1組：___________；②第2組：___________。

（3）PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因?yàn)開________________。

33、為增加油菜種子的含油量；研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連，導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種?；卮鹣铝袉栴}：

(1)酶D基因和轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因所含的三種限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切點(diǎn)如圖甲所示，現(xiàn)為獲得融合基因，研究人員采用PCR法擴(kuò)增酶D基因，首先要依據(jù)基因兩端的堿基序列設(shè)計(jì)____________，同時(shí)從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因，再用________和________酶處理兩個(gè)基因后，即可得到________端與_________端（填圖中字母）相連的融合基因。

(2)用PCR法擴(kuò)增酶D基因時(shí)，每次循環(huán)可分為_______、_______、_______三步，其中第三步所使用的酶是___________。

(3)將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建____________并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含____________的培養(yǎng)基上；其目的是得到含融合基因的農(nóng)桿菌，再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。

(4)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過程的目的是_____________________，進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞，該細(xì)胞通過___________技術(shù)，可培育成轉(zhuǎn)基因由此植株。34、研究者擬構(gòu)建高效篩選系統(tǒng)；將改進(jìn)的苯丙氨酸合成關(guān)鍵酶基因P1導(dǎo)入谷氨酸棒桿菌，以提高苯丙氨酸產(chǎn)量。

(1)如圖是該高效篩選系統(tǒng)載體的構(gòu)建過程。載體1中含有KanR（卡那霉素抗性基因）和SacB兩個(gè)標(biāo)記基因，為去除篩選效率較低的SacB，應(yīng)選擇引物________和________，并在引物的________（5＇∕3＇）端引入XhoⅠ酶識(shí)別序列；進(jìn)行PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物經(jīng)酶切；連接后環(huán)化成載體2。

(2)PCR擴(kuò)增載體3中篩選效率較高的標(biāo)記基因RpsL（鏈霉素敏感基因）時(shí)，引物應(yīng)包含___________（EcoRⅠ∕HindⅢ∕XhoⅠ）酶識(shí)別序列；產(chǎn)物經(jīng)單酶切后連接到載體2構(gòu)建高效篩選載體4。

(3)將改進(jìn)的P1基因整合到載體4構(gòu)建載體5。將載體5導(dǎo)入鏈霉素不敏感（由RpsL突變?cè)斐桑?、卡那霉素敏感的受體菌。為獲得成功導(dǎo)入載體5的菌株，應(yīng)采用含有__________的平板進(jìn)行初步篩選。

(4)用一定的方法篩選出如下菌株：P1基因脫離載體5并整合到受體菌擬核DNA，且載體5上其他DNA片段全部丟失。該菌的表型為__________。A．卡那霉素不敏感、鏈霉素敏感B．卡那霉素敏感、鏈霉素不敏感C．卡那霉素和鏈霉素都敏感D．卡那霉素和鏈霉素都不敏感(5)可采用__________技術(shù)鑒定成功整合P1基因的菌株。之后以發(fā)酵法檢測(cè)苯丙氨酸產(chǎn)量。35、中國女科學(xué)家屠呦呦因從中藥中分離出青蒿素并應(yīng)用于瘧疾治療，獲得了2015年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)青蒿素還具有抗腫瘤的功效，能殺傷人的肝癌和卵巢癌細(xì)胞系。2015年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)?lì)C給了研究DNA修復(fù)細(xì)胞機(jī)制的三位科學(xué)家。人的P53基因能夠控制人的P53蛋白的合成。人的P53蛋白可對(duì)癌變前的DNA損傷進(jìn)行修復(fù)；使其恢復(fù)正常，或誘導(dǎo)其進(jìn)入休眠狀態(tài)，阻止細(xì)胞癌變。請(qǐng)回答下列問題：

（1）可利用____________________技術(shù)在短期內(nèi)獲得大量的青蒿植株。該技術(shù)利用的原理是____________________。

（2）某生物科研小組做了探究青蒿素對(duì)肝癌細(xì)胞生長影響的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。將患肝癌的小鼠肝臟取出，剪碎，用____________________酶處理一段時(shí)間，使組織分散成單個(gè)細(xì)胞。然后，用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液，再將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶內(nèi)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)。正常動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)具有________________和________________的特點(diǎn)，一般傳至________代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型。

（3）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清、血漿等一些天然成分，其原因是__________________________________________________________________________。

（4）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體環(huán)境中，CO2的主要作用是____________________。為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的____________。

（5）P53基因的大量擴(kuò)增可以采用PCR技術(shù)，該技術(shù)中需使用的一種特殊的酶是__________。

（6）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最常用的的方法是________________，若要檢測(cè)P53基因是否插入到受體細(xì)胞的DNA上，可以采用________________技術(shù)。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

1；微生物常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

2；培養(yǎng)基按照物理狀態(tài)可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基；其中固體培養(yǎng)基多用來進(jìn)行分離、鑒定和計(jì)數(shù)。臨時(shí)保藏法主要適用于短期保存菌種，要求溫度一般為4℃。

【詳解】

A；在培養(yǎng)過程中；可先用液體培養(yǎng)基進(jìn)行多次選擇培養(yǎng)（濃縮培養(yǎng)），以增大該菌濃度，A正確；

B；濃縮培養(yǎng)后；可直接用灼燒后冷卻的接種環(huán)蘸取菌液進(jìn)行平板劃線，經(jīng)過多次劃線，可以得到單菌落，B正確；

C；若用稀釋涂布平板法純化菌種；各梯度應(yīng)該分別涂布3個(gè)平板，對(duì)菌落數(shù)在30-300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，C正確；

D；對(duì)分離的菌株；可采用斜面保藏法在4℃的冰箱中短期保存，也可采取甘油管藏法在-20℃的冷凍冰箱中長期保存，D錯(cuò)誤。

故選D。2、B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中；使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。

【詳解】

A；MⅡ期的卵母細(xì)胞含有激發(fā)細(xì)胞核全能性的物質(zhì)；有利于細(xì)胞核全能性的恢復(fù)，A正確；

B、用物理或化學(xué)方法（如電刺激、Ca2+載體；乙醇、蛋白酶合成抑制劑等）激活重構(gòu)胚；使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，PEG、滅活的病毒可以誘導(dǎo)細(xì)胞融合，B錯(cuò)誤；

C；克隆猴的遺傳物質(zhì)大部分來自供體體細(xì)胞；少部分來自去核卵母細(xì)胞，所以克隆猴的遺傳物質(zhì)與供體體細(xì)胞不完全一致，C正確；

D；培養(yǎng)供體體細(xì)胞的培養(yǎng)液中常需添加動(dòng)物血清以補(bǔ)充其發(fā)育所需物質(zhì)；D正確。

故選B。3、D【分析】【分析】

據(jù)表分析：該培養(yǎng)基中加有伊紅美藍(lán)；可用于鑒別大腸桿菌，同時(shí)加的青霉素還使該培養(yǎng)基具有選擇作用。培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分主要有碳源；氮源、水和無機(jī)鹽，有的還會(huì)有生長因子等。

【詳解】

A；牛肉膏可為培養(yǎng)的微生物提供氮源；根據(jù)分析可知，此培養(yǎng)基可用于鑒定大腸桿菌，由于牛肉膏中的具體成分不確定，所以屬于天然培養(yǎng)基，另外其中的青霉素還使該培養(yǎng)基具有選擇作用，A錯(cuò)誤；

B；抗青霉素的抗性基因一般位于大腸桿菌的質(zhì)粒上；B錯(cuò)誤；

C；此培養(yǎng)基只能用來檢測(cè)自來水中大腸桿菌含量是否符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)；不能檢測(cè)其它細(xì)菌含量，C錯(cuò)誤；

D；大腸桿菌常作為基因工程的工程菌；此培養(yǎng)基含有青霉素，能篩選含有青霉素抗性基因的生物，可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過程中，D正確。

故選D。4、A【分析】【分析】

Ti質(zhì)粒是在根瘤土壤桿菌細(xì)胞中存在的一種核區(qū)DNA外的自主復(fù)制的環(huán)形雙鏈DNA分子。是一種存在于根癌土壤桿菌中可引起雙子葉植物根部致癌的質(zhì)粒。細(xì)菌從雙子葉植物的受傷根部侵入根部細(xì)胞后；最后在其中裂解，釋放出Ti質(zhì)粒，其上的T-DNA片段會(huì)與植物細(xì)胞的核基因組整合。

【詳解】

A；結(jié)合圖示可知；PCR的產(chǎn)物用EcoRI和BamHI來酶切，因此在基因的引物兩側(cè)加上識(shí)別序列GAATTC和GGATCC，A正確；

B；啟動(dòng)子負(fù)責(zé)與RNA聚合酶結(jié)合啟動(dòng)表達(dá)；終止子負(fù)責(zé)終止表達(dá)，因此構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因必須位于啟動(dòng)子和終止子之間才能進(jìn)行表達(dá)，B錯(cuò)誤；

C；過程③是利用T-DNA的特性將目的基因?qū)氲睫r(nóng)桿菌中；農(nóng)桿根瘤菌是原核生物，無染色體，C錯(cuò)誤；

D；過程④需利用固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；可通過分子雜交技術(shù)檢測(cè)干擾素基因是否表達(dá)，D錯(cuò)誤。

故選A。5、C【分析】【分析】

人體器官移植面臨的主要問題有供體器官短缺和免疫排斥；目前臨床通過免疫抑制劑的應(yīng)用，通過抑制T淋巴細(xì)胞的增殖來提高器官移植的成活率。

【詳解】

A；人體免疫系統(tǒng)中T淋巴細(xì)胞分裂分化形成細(xì)胞毒性T細(xì)胞會(huì)攻擊移植的器官；所以通常器官移植要面臨的難題之一是由T淋巴細(xì)胞引起的免疫排斥，A正確；

B；由于移植的器官會(huì)引發(fā)人體免疫反應(yīng)；所以通過基因敲除技術(shù)“敲除”了引起人免疫系統(tǒng)反應(yīng)的抗原基因，就會(huì)避免這個(gè)現(xiàn)象的發(fā)生，B正確；

C；由于在原腸胚已經(jīng)發(fā)生了分化；所以應(yīng)該應(yīng)該對(duì)豬的卵原細(xì)胞或者受精卵進(jìn)行改造，才能夠保證該豬任何內(nèi)臟都能供人體移植，C錯(cuò)誤；

D；治療性克隆指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植；可以也能解決器官短缺的難題，D正確。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)6、A:C【分析】【分析】

（1）動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；細(xì)胞的增殖；誘導(dǎo)手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等，結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞，主要用于制備單克隆抗體。

（2）單克隆抗體制備的原理包括：①免疫理：B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體；②細(xì)胞融合原理：利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)：對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)；體外培養(yǎng)。

（3）制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞：①免疫B細(xì)胞（漿細(xì)胞）：能產(chǎn)生單一抗體；但不能無限增殖；②骨髓瘤細(xì)胞：能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體；③雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。

【詳解】

A；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒（如滅活的仙臺(tái)病毒）等；A正確；

B；兩兩融合的細(xì)胞包括免疫B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞；骨髓瘤細(xì)胞雖然能無限增殖，但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但不具有無限增殖的本領(lǐng)，所以在HAT篩選培養(yǎng)液中，兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞都無法生長，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長，B錯(cuò)誤；

C；因每個(gè)免疫B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體；因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體，不一定都是人類所需要的，還需要進(jìn)一步通過專一抗體陽性檢測(cè)，把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來，C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流動(dòng)性為基礎(chǔ)的；D錯(cuò)誤。

故選AC。

【點(diǎn)睛】7、B:C:D【分析】【分析】

良種試管牛的繁殖過程：對(duì)供體和受體的選擇和處理（同期發(fā)情處理；超數(shù)排卵處理）；配種或進(jìn)行人工授精、對(duì)胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進(jìn)行胚胎移植。

【詳解】

A；處理供體甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超數(shù)排卵，A錯(cuò)誤；

B；產(chǎn)生試管牛的過程中經(jīng)過了兩性生殖細(xì)胞的融合過程；因此試管牛產(chǎn)生的生殖方式屬于有性生殖，B正確；

C；母本甲牛提供卵細(xì)胞、父本乙牛提供精子；試管牛細(xì)胞核中基因一半來源于父方，一半來源于母方，C正確；

D；體外受精和早期胚胎發(fā)育、胚胎移植等技術(shù)可以縮短繁殖周期；增加一生繁殖的后代數(shù)量，即該技術(shù)可充分發(fā)揮優(yōu)良雌性個(gè)體的繁殖潛力，D正確。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】8、A:B【分析】【分析】

培養(yǎng)基的配制：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。微生物的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。預(yù)實(shí)驗(yàn)可以為正式實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步的摸索條件；可以檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的科學(xué)性和可行性，避免人力；物力和財(cái)力的浪費(fèi)。

【詳解】

A；培養(yǎng)基應(yīng)先滅菌再分裝于培養(yǎng)皿中；A符合題意；

B、涂布用的菌濃度應(yīng)控制在106倍；以避免菌種重疊而不能得到單菌落，B符合題意；

C；輻射劑量和誘變時(shí)間都是正式實(shí)驗(yàn)的無關(guān)變量；可通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定，C不符合題意；

D；石油降解菌能分解石油獲得碳源；形成菌落，挑取培養(yǎng)基上長出的較大單菌落，給純化后進(jìn)行降解效率分析，以獲得能高效降解石油的菌種，D不符合題意。

故選AB。9、B:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶；高溫和洗滌劑的耐受性。

（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

【詳解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可將DNA與蛋白質(zhì)分離，A錯(cuò)誤；

B；在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，B正確；

C；PCR是一種體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)；利用了DNA熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合，包括：高溫變性（解鏈）→低溫復(fù)性→中溫延伸三個(gè)步驟，C正確；

D；由于同性相斥、異性相吸；帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)，電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理，D正確。

故選BCD。10、A:D【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。

2；微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素；瓊脂是凝固劑的一種，并不是營養(yǎng)物質(zhì)，在培養(yǎng)液中加入瓊脂可以使液體培養(yǎng)基成為瓊脂固體培養(yǎng)基，A正確；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接種都采用了涂布平板法；B錯(cuò)誤；

C、隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，普切明酸與Fe3+的結(jié)合增強(qiáng)；抑菌圈的紅色加深，C錯(cuò)誤；

D、普切明酸與Fe3+形成紅色復(fù)合物，但隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，抑菌圈變窄，說明FeCl3能降低桔梅奇酵母對(duì)白地霉的防治效果；D正確。

故選AD。11、B:C:D【分析】【分析】

影印培養(yǎng)法；是指確保在一系列平板培養(yǎng)基的相同位置上接種并培養(yǎng)出相同菌落的一種微生物培養(yǎng)方法。主要操作方法是:用滅菌的絲絨覆蓋在一塊與培養(yǎng)皿同樣大小(或略小)的木制圓柱體上，輕輕地在母種培養(yǎng)皿的菌苔上印一下，把細(xì)菌菌落全部轉(zhuǎn)移到絲絨面上，然后將這一絲絨面再印在另外的選擇性培養(yǎng)基平板上，獲得與原始平板完全相同的接種平板。待培養(yǎng)后，比對(duì)各培養(yǎng)皿在相同位置出現(xiàn)相同的菌落，從而篩選出適當(dāng)?shù)木辍?/p>

【詳解】

A；母板培養(yǎng)基上有發(fā)生突變的營養(yǎng)缺陷型和野生型大腸桿菌的菌落；而基本培養(yǎng)基上只有野生型大腸桿菌的菌落，由此可知母板培養(yǎng)基與基本培養(yǎng)基的成分不同，A錯(cuò)誤；

B；分析題圖可知；用了稀釋涂布平板法將菌液接種在母板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，B正確；

C；作為接種工具的“印章"需經(jīng)過滅菌處理才能印在長有菌落的母板上；以防止雜菌污染，C正確；

D；根據(jù)基本培養(yǎng)基上的菌落分布和添加不同營養(yǎng)物質(zhì)的補(bǔ)充培養(yǎng)基上的菌落分布對(duì)應(yīng)位置可知；4、5、6為營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，理由是這三個(gè)菌落在基本培養(yǎng)基上都沒有，而分別在添加了不同營養(yǎng)物質(zhì)的補(bǔ)充培養(yǎng)基上形成，D正確。

故選BCD。12、B:D【分析】【分析】

題圖分析：圖示操作流程為“利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)人體血清白蛋白”；因此首先需要將人體血清白蛋白基因?qū)氪菩阅膛Ｈ橄偌?xì)胞，形成細(xì)胞①；取出細(xì)胞①的細(xì)胞核，注入去核牛卵母細(xì)胞中，形成細(xì)胞②，該過程采用了核移植技術(shù)，其原理是動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；要形成轉(zhuǎn)基因克隆奶牛還需要采用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。

【詳解】

A；為了得到單個(gè)細(xì)胞；在細(xì)胞①的培養(yǎng)液中需要加入胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，A錯(cuò)誤；

B；圖中卵母細(xì)胞應(yīng)該在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期；此時(shí)的次級(jí)卵母細(xì)胞具有受精能力，B正確；

C；圖示“細(xì)胞②→早期胚胎”為體外培養(yǎng)胚胎的過程；該過程在體外完成，C錯(cuò)誤；

D；圖示克隆牛的培育主要采用了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；屬于無性生殖；試管牛的培育主要采用了體外受精和胚胎移植技術(shù)，屬于有性生殖，因此兩者產(chǎn)生犢牛的生殖方式不相同，D正確。

故選BD。13、A:B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度：適宜溫度。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，培養(yǎng)環(huán)境中需要O2，也需要CO2（用來維持培養(yǎng)液的pH）；A錯(cuò)誤；

B；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要脫分化；植物細(xì)胞要經(jīng)過脫分化才形成愈傷組織，B錯(cuò)誤；

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中常用含糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清的液體培養(yǎng)基；C正確；

D；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象而停止分裂增殖；故培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)到一定階段后要用胰蛋白酶處理，分瓶后才能繼續(xù)增殖，D正確。

故選AB。14、B:C:D【分析】【分析】

動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎。這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物，克隆動(dòng)物的核基因完全來自供體動(dòng)物，而細(xì)胞質(zhì)基因來自受體細(xì)胞。核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植，其中體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，因?yàn)轶w細(xì)胞的全能性低于胚胎細(xì)胞。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)；不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，而是體現(xiàn)動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，A錯(cuò)誤；

B；去除A猴卵母細(xì)胞的細(xì)胞核；目的是排除A猴核遺傳物質(zhì)的干擾，保證克隆猴的核遺傳物質(zhì)都來自B猴，B正確；

C；必須將重組細(xì)胞培育到桑椹胚或囊胚階段后才能植入代孕動(dòng)物體內(nèi)；才可正常繼續(xù)發(fā)育，C正確；

D；卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)；故體細(xì)胞的細(xì)胞核需移植到去核卵母細(xì)胞后才能表現(xiàn)出全能性，D正確。

故選BCD。三、填空題(共9題，共18分)15、略

【解析】①.胚胎細(xì)胞②.體細(xì)胞16、略

【分析】【詳解】

為最大程度的保障人類權(quán)益；簽署了禁止生物武器公約：

（1）《禁止試制；生產(chǎn)和儲(chǔ)存并銷毀細(xì)菌（生物）和毒劑武器公約》；簡稱《禁止生物武器公約》。

（2）我國對(duì)于生物武器的態(tài)度是在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散?！窘馕觥竣?《禁止生物武器公約》②.不發(fā)展③.不生產(chǎn)④.不儲(chǔ)存17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】質(zhì)粒自我復(fù)制雙鏈環(huán)狀DNA分子19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】磷酸二酯20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA斷裂絮狀沉淀21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液原代傳代23、略

【分析】【詳解】

生物信息學(xué)是研究生物信息的采集、處理、存儲(chǔ)、傳播,分析和解釋等各方面的學(xué)科，也是隨著生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的迅猛發(fā)展，生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)相結(jié)合形成的一門新學(xué)科，生物信息學(xué)主要是核酸和蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)處理和分析?！窘馕觥可镄畔W(xué)是研究生物信息的采集、處理、存儲(chǔ)、傳播,分析和解釋等各方面的學(xué)科，也是隨著生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的迅猛發(fā)展，生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)相結(jié)合形成的一門新學(xué)科四、判斷題(共4題，共24分)24、B【分析】【詳解】

目前，種植的轉(zhuǎn)基因作物中以大豆和玉米最多，其次是轉(zhuǎn)基因棉花和油菜，所以錯(cuò)誤。25、B【分析】【詳解】

目前；用體細(xì)胞核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物的成功率還很低。

故錯(cuò)誤。26、A【分析】【詳解】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。本說法正確。27、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)區(qū)別；最重要的體現(xiàn)在目的不同。

【詳解】

治療性克?。菏侵赴芽寺〕鰜淼慕M織和器官用于治療疾病，這種用于醫(yī)療目的的使用克隆技術(shù)制造胚胎稱為治療性克隆。生殖性克?。禾幱谏车哪康氖褂每寺〖夹g(shù)在實(shí)驗(yàn)室制造人類胚胎。治療性克隆和生殖性克隆最重要的差別是目的不同。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共24分)28、略

【分析】【分析】

1；微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽；此外還要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。對(duì)異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用。

2；統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目使用的方法有顯微鏡直接計(jì)數(shù)法和活菌計(jì)數(shù)法；其中活菌計(jì)數(shù)法即稀釋涂布平板法，一般選擇菌落數(shù)目在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

【詳解】

（1）平板倒置后既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)；又可防止冷凝水滴落培養(yǎng)基，造成污染，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

（2）所用培養(yǎng)基中的牛肉膏除為微生物提供碳源和氮源外；還能提供磷酸鹽和維生素。區(qū)分菌落種類的依據(jù)是菌落的形狀；大小、隆起程度和顏色等特征。

（3）統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次；直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，以防因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的種類和數(shù)目。表格中3個(gè)平板的平均菌落數(shù)為（41+35+38）÷3=38個(gè)，低于國家標(biāo)準(zhǔn)，因此所取水樣符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物分離和培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分，掌握微生物分離和計(jì)數(shù)的方法，屬于考綱理解層次的考查。【解析】防止冷凝水滴落污染培養(yǎng)基碳源氮源維生素菌落大小、形狀、隆起程度和顏色等符合飲用水的標(biāo)準(zhǔn)29、略

【分析】【分析】

微生物接種常用的兩種方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）

結(jié)合題意“氧化硫硫桿菌通過將單質(zhì)硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進(jìn)行化能合成作用”可知，氧化硫硫桿菌的代謝類型為自養(yǎng)需氧型；由于該菌可以進(jìn)行化能合成作用，可以利用液體培養(yǎng)基中的無機(jī)碳或CO2；可以其作為液體培養(yǎng)基中的碳源；該培養(yǎng)基中含有單質(zhì)硫，對(duì)生長的菌類具有選擇作用，在功能上屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）

培養(yǎng)微生物應(yīng)用固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；故應(yīng)在配置好的液體培養(yǎng)基中加入瓊脂；對(duì)微生物進(jìn)行純化培養(yǎng)的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）

第一步；對(duì)培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌；

第二步；由于本實(shí)驗(yàn)的目的是通過實(shí)驗(yàn)探究硫酸鋅對(duì)T．t產(chǎn)酸量的影響，則實(shí)驗(yàn)的自變量為硫酸鋅的有無及其含量，實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循對(duì)照與單一變量原則，故本步驟應(yīng)在三個(gè)錐形瓶中分別加入等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液；

第三步；遵循無關(guān)變量一致原則，故往A；B、C三組中接種等量的氧化硫硫桿菌（T．t）后放入恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天。

（4）

據(jù)圖分析；與對(duì)照（蒸餾水組）相比，低濃度硫酸鋅對(duì)氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無明顯作用，高濃度硫酸鋅對(duì)氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查培養(yǎng)基的制作和微生物的接種方法，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)室的微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)的理解與掌握。熟記相關(guān)知識(shí)并能結(jié)合術(shù)語分析作答是解題關(guān)鍵?！窘馕觥浚?）自養(yǎng)需氧型無機(jī)碳或CO2選擇培養(yǎng)基。

（2）瓊脂平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）高壓蒸汽等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液等量的氧化硫硫桿菌（T．t）

（4）低濃度硫酸鋅對(duì)氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無明顯作用，高濃度硫酸鋅對(duì)氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用30、略

【分析】【分析】

分離菌株的思路：

（1）自然界中目的菌株的篩選：①依據(jù)：根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。②實(shí)例：PCR技術(shù)過程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶，就是從熱泉中篩選出來的Taq細(xì)菌中提取出來的。

（2）實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)溫度.pH等）；同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長。

(1)

富集培養(yǎng)基不含有瓊脂；按物理性質(zhì)屬于液體培養(yǎng)基，其中酵母膏能提供所需的碳源和氮源，可獲得數(shù)目較多的塑料降解菌。

(2)

篩選能降解塑料的微生物；需要使用以塑料為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，稀釋涂布后最后一組可能形成菌落。微生物的接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可以用來進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)。

(3)

如果對(duì)白色污染進(jìn)行傳統(tǒng)填埋焚燒容易造成二次污染；黃粉蟲腸道微生物對(duì)白色污染的降解不會(huì)造成二次污染。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的種類及功能，掌握接種微生物的方法及菌種保藏方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。【解析】(1)液體瓊脂碳源和氮源。

(2)塑料稀釋涂布平板法。

(3)不會(huì)31、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟：①目的基因的獲取和篩選；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定；

2；植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少；甚至無病毒，切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。

【詳解】

（1）為了獲得脫毒苗；通常選取植株莖尖（或頂端分生區(qū)附近的組織）進(jìn)行離體培養(yǎng)，選取該組織的原因是此處病毒極少甚至無病毒。

（2）①基因表達(dá)載體上除有復(fù)制原點(diǎn)；啟動(dòng)子、終止子、目的基因外；還有標(biāo)記基因（便于篩選目的基因）；

②農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA片段可以攜帶目的基因并整合至植物細(xì)胞的染色體DNA上；

③選擇培養(yǎng)的目的是篩選出含有目的基因的柑橘細(xì)胞；

④先誘導(dǎo)生芽有利于生根；故再分化階段，需要先誘導(dǎo)愈傷組織生芽，待長出芽后，再將其轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基上，進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗；

⑤在個(gè)體生物學(xué)水平可用接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）的方法，觀察植株是否患有柑橘潰瘍病來直接鑒定再生植株；分析再生植株沒有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依據(jù)Xa27基因（目的基因）的特異性堿基序列設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增后用（凝膠）電泳分離PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)；植株B、C沒有出現(xiàn)條帶，則可能是因?yàn)闆]有導(dǎo)入目的基因；植株A、E、F出現(xiàn)條帶但不具有抗病能力，則可能是因?yàn)閷?dǎo)入植物細(xì)胞的目的基因不能轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后未翻譯或翻譯出的蛋白質(zhì)沒有活性等?！窘馕觥?1)莖尖（或頂端分生區(qū)）此處病毒極少甚至無病毒。

(2)標(biāo)記基因攜帶目的基因并整合至植物細(xì)胞的染色體DNA上篩選出含有目的基因的植物細(xì)胞先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）Xa27基因（凝膠）電泳導(dǎo)入植物細(xì)胞的目的基因不能表達(dá)（或不能轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄后不能翻譯，翻譯出的蛋白質(zhì)沒有活性等，合理即可）沒有導(dǎo)入目的基因六、綜合題(共4題，共12分)32、略

【分析】【分析】

采用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA的過程為：變性、退火、延伸，能根據(jù)PCR過程的特點(diǎn)，繪制PCR過程示意圖是解決本題的關(guān)鍵。

【詳解】

（1）①由圖可知，以原來的每條母鏈為模板合成的兩個(gè)新DNA分子中，只含有引物A或引物B，而以新合成的子鏈為模板合成新DNA分子時(shí)，兩種引物都含有，故第四輪循環(huán)共產(chǎn)生16個(gè)DNA分子，其中含有引物A的分子是15個(gè)，占15/16。②第一、二輪循環(huán)合成的子鏈長度均不同，根據(jù)半保留復(fù)制特點(diǎn)，前兩輪循環(huán)產(chǎn)生的4個(gè)DNA分子的兩條鏈均不等長，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子存在等長的兩條核苷酸鏈。

（2）引物是單鏈DNA時(shí)才能與DNA結(jié)合，而單鏈DNA的堿基互補(bǔ)配對(duì)部分容易形成雙鏈結(jié)構(gòu)而失去其功能。從圖示可以看出，第1組引物Ⅰ和引物Ⅱ局部堿基互補(bǔ)配對(duì)，易形成雙鏈結(jié)構(gòu)而失效。第2組引物相互間不能發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，但引物Ⅰ′自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效。

（3）DNA聚合酶的作用是將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上，而不能直接將兩個(gè)脫氧核苷酸連在一起。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合PCR過程示意圖，考查PCR技術(shù)、DNA分子復(fù)制、基因工程等知識(shí)，要求考生識(shí)記PCR技術(shù)的過程及原理，能分析題圖提取有效信息答題；掌握DNA分子半保留復(fù)制特點(diǎn)，能進(jìn)行簡單的計(jì)算?！窘馕觥?5/16三引物Ⅰ和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效引物自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上33、略

【分析】【分析】

PCR循環(huán)可分為高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸三步。

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲??；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定。

（1）

采用PCR法擴(kuò)增酶D基因；首先要依據(jù)基因兩端的堿基序列設(shè)計(jì)引物，同時(shí)從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因，由圖可知，需用ClaⅠ限制酶（兩個(gè)基因都含有該酶切位點(diǎn)）和DNA連接酶處理兩個(gè)基因，得到A；D端相連的融合基因。

（2）

用PCR法擴(kuò)增酶D基因時(shí)；PCR循環(huán)可分為高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸三步，第三步使用的是耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）。

（3）

將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中；構(gòu)建表達(dá)載體即重組質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素（由圖可知，表達(dá)載體含四環(huán)素抗性基因，能產(chǎn)生抗四環(huán)素物質(zhì)，以此達(dá)到篩選的目的）的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落。

（4）

剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞，經(jīng)篩選后再經(jīng)過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因油菜?！窘馕觥?1)引物ClaIDNA連接AD

(2)變性復(fù)性延伸#耐高溫的DNA聚合酶##Taq酶#

(3)#基因表達(dá)載體##重組質(zhì)粒#四環(huán)素。

(4)利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞植物組織培養(yǎng)34、略

【分析】【分析】

PCR反應(yīng)過程:變性→復(fù)性→延伸。變性：當(dāng)溫度上升