2025年北師大版選擇性必修三生物下冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年北師大版選擇性必修三生物下冊月考試卷681考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、2018年《細胞》期刊報道，中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細胞對靈長類動物進行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”。有關(guān)敘述不正確的是（）A.“中中”和“華華”的獲得涉及核移植和胚胎培養(yǎng)的過程B.克隆猴體細胞中的遺傳物質(zhì)與核供體的遺傳物質(zhì)完全相同C.以雌性和雄性個體細胞作為核供體，得到的兩個克隆動物體細胞的常染色體數(shù)目相同D.以雌性和雄性個體細胞作為核供體，得到的兩個克隆動物體細胞的性染色體組合不同2、利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用蛋白是動物基因工程的重要應(yīng)用，目前科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中獲得了抗凝血酶、血清白蛋白、生長激素和α-抗胰蛋白酶等醫(yī)藥產(chǎn)品。下列有關(guān)乳腺生物反應(yīng)器的敘述錯誤的是（）A.受體細胞可選用受精卵或早期胚胎的桑椹胚細胞B.獲得轉(zhuǎn)基因動物需利用胚胎移植技術(shù)C.鑒別藥用蛋白基因是否導(dǎo)入受體細胞一般利用DNA分子雜交法D.轉(zhuǎn)基因動物產(chǎn)生的生殖細胞可能含有藥用蛋白基因3、如圖為胚胎發(fā)育過程中的某一時期示意圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細胞團B.該時期稱為桑椹胚期，已經(jīng)發(fā)生細胞分化C.進行胚胎分割時，可以選擇圖示時期的胚胎進行D.胚胎從①中伸展出來的過程叫做孵化4、下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述，正確的是（）A.隨NaCl溶液濃度增大，DNA的溶解度逐漸增大B.新鮮的豬血中不含DNA，新鮮的雞血中含DNAC.在酒精溶液中，某些蛋白質(zhì)的溶解度大于DNA的溶解度D.在50～60℃水浴中，DNA遇二苯胺試劑后即呈藍色5、高等哺乳動物受精后不久；受精卵開始進行細胞分裂。經(jīng)桑椹胚；囊胚、原腸胚和組織器官的分化，最后發(fā)育成一個完整的幼體，完成胚胎發(fā)育的全過程。下圖為該過程中的某一時期示意圖。下列有關(guān)敘述不正確的是（）

A.圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細胞團B.高等哺乳動物胚胎發(fā)育中的細胞分化開始于圖示時期C.胚胎從①中伸展出來的過程叫做孵化D.②將來發(fā)育成胎兒的各種組織，③將來發(fā)育成胎盤和胎膜6、下圖表示利用葡萄汁進行發(fā)酵時可能發(fā)生的物質(zhì)變化。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.圖中需要O2參與的過程只有③⑤B.當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌可以直接發(fā)生過程⑤C.過程②④所需要的最適溫度相同D.酵母菌發(fā)生過程①②的場所不同評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、下圖表示選用具有同一外源目的基因?qū)δ称贩N奶牛進行遺傳特性改造的三種途徑；下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.獲得奶牛1通常采用顯微注射法導(dǎo)入外源基因B.奶牛2體內(nèi)不同組織細胞的基因組成一定相同C.成功獲得奶牛1、2、3表明三個受體細胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的獲得均需在體外進行早期胚胎培養(yǎng)8、蛋白質(zhì)工程就是通過對蛋白質(zhì)化學(xué)、蛋白質(zhì)晶體學(xué)和蛋白質(zhì)動力學(xué)的研究，獲得有關(guān)蛋白質(zhì)理化特性和分子特性的信息，在此基礎(chǔ)上對編碼蛋白質(zhì)的基因進行有目的的設(shè)計和改造，通過基因工程技術(shù)獲得可以表達蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因生物，中華鱘是一種瀕危野生動物。研究者試圖通過蛋白質(zhì)工程改造中華鱘體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)，使其更加適應(yīng)現(xiàn)在的水域環(huán)境。下列有關(guān)說法錯誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程可定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)B.改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實現(xiàn)C.改造后的中華鱘和現(xiàn)有中華鱘不再是同一物種D.改造后的中華鱘的后代不具有改造的蛋白質(zhì)9、廚余垃圾是指居民日常生活及食品加工、飲食服務(wù)、單位供餐等活動中產(chǎn)生的垃圾。廢液中的淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)，易腐爛變質(zhì)，滋生病原微生物等。若處理不當(dāng)，可能造成嚴重的污染。圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌組合可以將有機廚余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，減輕環(huán)境污染。為制備分解有機廚余垃圾的微生物菌劑，某科研小組對兩菌種進行了最佳接種量比的探究實驗，并得出下圖的實驗結(jié)果。下面敘述錯誤的是（）

A.巨大芽孢桿菌生長過程中需要氮源，圓褐固氮菌生長過程中不需要氮源B.要統(tǒng)計活菌數(shù)量可采用平板劃線法和稀釋涂布平板法C.將1mL菌液稀釋100倍，在3個平板上分別接0．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為3．9×105D.處理該類廚余垃圾廢液，兩菌種的最佳接種量比為1：110、苯丙酮尿癥是一種嚴重的單基因遺傳病。圖1是某患者的家族系譜圖，其中部分成員Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1和Ⅱ2的DNA經(jīng)限制酶MspⅠ酶切，產(chǎn)生不同的片段，經(jīng)電泳后與相應(yīng)探針雜交結(jié)果見圖2.下列分析正確的是（）

A.個體Ⅱ1是雜合體的概率為2/3B.個體Ⅱ2與一雜合體婚配生患病孩子的概率為0C.個體Ⅱ3是隱性純合體，有19kb探針雜交條帶D.個體Ⅱ4可能為雜合體，有2個探針雜交條帶11、人群中有部分人體內(nèi)缺乏乳糖分解酶,飲用鮮牛奶后會導(dǎo)致腸胃不適；消化不良。“低乳糖奶?！钡恼Q生,有望給患有“乳糖不耐癥”的人群提供“放心奶”。如圖是“低乳糖奶?！钡呐嘤^程,相關(guān)敘述不正確的是（）

A.犢牛的性狀和黑白花奶牛的性狀完全一致B.卵母細胞需在體外培養(yǎng)到MⅡ期然后用離心法去核C.犢牛的出生體現(xiàn)了動物細胞核的全能性D.體細胞核移植技術(shù)可用于人類組織器官的移植和保護瀕危動物12、利用膠體金檢測技術(shù)檢測抗原最常用的是雙抗夾心法。雙抗夾心法需要準(zhǔn)備待測抗原的配對抗體；一個抗體用膠體金標(biāo)記（即膠體金標(biāo)記抗體）并固定在結(jié)合墊上，另一個抗體固定在NC膜的檢測線（T線）上。另外，還需要準(zhǔn)備能與金標(biāo)抗體特異性結(jié)合的二抗并固定于NC膜的控制線（C線）上，如圖所示。下列說法錯誤的是（）

A.樣品中含有待測抗原時，T線和C線均會顯色B.圖中的抗體都需要與抗原結(jié)合C.結(jié)合墊是為了固定金標(biāo)抗體D.若T線不顯色說明檢測結(jié)果無效13、利用枯草芽孢桿菌的發(fā)酵可以生產(chǎn)亮氨酸脫氫酶。在啟動子和亮氨酸脫氫酶基因之間插入信號肽（SPN）基因并將重組質(zhì)粒導(dǎo)人枯草芽孢桿菌構(gòu)建工程菌，可提高亮氨酸脫氫酶的生產(chǎn)水平。重組質(zhì)粒的構(gòu)建如圖所示，KmR為卡那霉素抗性基因，ApR為氨芐青霉素抗性基因，圖中各限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端不同。下列敘述正確的是（）

A.重組質(zhì)粒pMA5-SPN-leudh除圖中標(biāo)注外還應(yīng)具有終止子、復(fù)制原點等結(jié)構(gòu)B.構(gòu)建重組質(zhì)粒用NdeI和BamHI兩種酶有助于正確插入目的基因C.圖中KmR和ApR存在于質(zhì)粒中的作用是便于重組DNA分子的篩選D.圖中各限制酶切開的是氫鍵和磷酸二酯鍵，切下的DNA片段拼接需依靠DNA連接酶14、CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯是一種對靶向基因進行特定DNA修飾的技術(shù)；其原理是由一個向?qū)NA(sgRNA)分子引導(dǎo)Cas9蛋白到一個特定的基因位點進行切割。受此機制啟發(fā)，科學(xué)家們通過設(shè)計sgRNA中堿基的識別序列，即可人為選擇DNA上的任一目標(biāo)位點進行切割（如圖所示）。CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)有時存在編輯對象出錯而造成脫靶。下列相關(guān)錯誤的是（）

A.Cas9蛋白通過破壞目標(biāo)DNA的氫鍵實現(xiàn)對DNA的切割，與解旋酶的作用類似B.若脫靶率與sgRNA序列的長度有關(guān)，則sgRNA的序列越短脫靶率越高C.利用此技術(shù)對目標(biāo)基因部分DNA片段進行切除可能導(dǎo)致染色體變異D.sgRNA的雙鏈區(qū)域的堿基互補配對原則與目標(biāo)基因的雙鏈區(qū)域不同15、免疫PCR是對微量抗原的一種檢測方法。下圖是利用該技術(shù)檢測牛乳中微量抗生素的流程圖：首先將抗體1固定在微板上，沖洗后加入待檢的牛乳，再加入DNA標(biāo)記的抗體2，進行PCR擴增，最后進行電泳檢測，相關(guān)敘述正確的是（）

A.圖示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次沖洗不充分則有可能出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象C.電泳檢測結(jié)果只能判斷陽性與否，無法判斷牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗體反應(yīng)通過PCR技術(shù)間接擴增放大，從而達到可檢測的水平評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)16、哺乳動物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。17、20世紀70年代以后；以基因工程為代表的一大批生物技術(shù)成果，進入人類的生產(chǎn)和生活，特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用，但是與其他高新技術(shù)一樣，生物技術(shù)也同樣具有雙刃劍效應(yīng)。如同其他高新技術(shù)一樣，轉(zhuǎn)基因成果和轉(zhuǎn)基因技術(shù)也需要你的理性看待。在轉(zhuǎn)基因生物安全方面；

（1）你認為轉(zhuǎn)基因生物有哪些優(yōu)點，①____________②___________③__________。

（2）你認為轉(zhuǎn)基因生物有哪些缺點，①____________②___________③__________。

（3）你對于轉(zhuǎn)基因生物的態(tài)度是__________。18、兩種DNA連接酶（E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：

①相同點：都縫合______鍵。

②區(qū)別：E·coliDNA連接酶來源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。19、DNA粗提取與鑒定實驗中，二苯胺要___________。20、概念：動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的______，將它分散成______，然后放在適宜的______中，讓這些細胞______。21、隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，有些新的致病微生物被發(fā)現(xiàn)，它們的危害可能更大。通過互聯(lián)網(wǎng)或圖書館搜集近年發(fā)現(xiàn)的致病微生物的相關(guān)資料，分析和歸納這些資料__________。22、應(yīng)用分析與比較的方法，對生殖性克隆與治療性克隆進行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________評卷人得分四、實驗題(共2題，共20分)23、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病?？蒲腥藛T對此病的治療進行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關(guān)研究，實驗結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實驗組將___________基因?qū)胧荏w細胞，并采用___________技術(shù)檢測導(dǎo)入基因的表達情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。24、干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫??；患者血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體特異性最強。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對小鼠進行免疫的過程。回答下列問題：

(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護尾部不被降解。為了針對性獲得cDNA，應(yīng)如何設(shè)計逆轉(zhuǎn)錄第一步時的DNA引物______，設(shè)計引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時，應(yīng)在相應(yīng)引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點。

(3)③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實驗內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。評卷人得分五、綜合題(共3題，共6分)25、α1一抗胰蛋白酶（α1-AT）是下呼吸道中最主要的蛋白酶抑制劑，其在血清中含量越低，肺氣腫越易發(fā)生。α1-AT補充治療不僅是先天性α1-AT缺乏癥的主要治療方法，而且也為其他炎癥性肺疾病的治療開辟了新的途徑。我國科研人員通過基因工程的方法生產(chǎn)α1-AT并用于臨床，下圖是科研人員選用的載體（圖中bp表示堿基對，α1-AT基因為1182bp）?；卮鹣铝袉栴}。

注：質(zhì)粒除圖示部位外以及目的基因內(nèi)部和外部均無XbaI；SacI、HindIII三種限制酶的識別位點。

(1)基因表達載體的作用是____________（答出2點即可）。質(zhì)粒中與該作用相關(guān)的結(jié)構(gòu)除圖中所示外，還有_____。

(2)科研人員在構(gòu)建基因表達載體時選用的限制酶是XbaI和HindIII，操作成功后的基因表達載體長_____bp。沒有選擇限制酶XbaI和SacI的理由是_____。

(3)從人體獲得α1-AT基因后，通過PCR技術(shù)快速擴增。PCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中才能進行，理由是_____。在引物設(shè)計上，科研人員在兩種引物上分別添加了限制XbaI、HindIII的序列，理由是_____，添加位置應(yīng)位于引物的_____（填“5'”或“3'”）端。26、非人靈長類與人類具有較高的相似性；是用來開展人類發(fā)育生理學(xué)和疾病治療研究的理想生物醫(yī)學(xué)模型。非人靈長類，如恒河猴胚胎工程技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用對拓展非人靈長類動物模型的應(yīng)用前景具有重要價值。回答下列相關(guān)問題：

(1)從雌性恒河猴體內(nèi)采集卵母細胞前，需要連續(xù)6d對母體注射__________，其目的是___________。一般將收集到的卵母細胞置于含10%胎牛血清的成熟培養(yǎng)基中，該培養(yǎng)基中的CO2/NaHCO3可以起到__________作用。

(2)收集到的運動性能良好的恒河猴精子__________（填“能”或“不能”）與采集到的卵母細胞直接完成體外受精，原因是__________。

(3)目前獲得恒河猴胚胎的途徑有三種。一是體外受精，將精子與卵子共培養(yǎng)后，4~24h后如果觀察到__________則判斷受精成功；二是利用顯微操作儀輔助精子進入成熟的卵母細胞中完成精卵結(jié)合，該操作方法叫作__________；三是通過腹部切口沖洗輸卵管或子宮來收集胚胎，該步驟叫作____________。以上方法獲得的胚胎均要移植進受體子宮內(nèi)才能繼續(xù)發(fā)育，胚胎移植后其能存活的生理基礎(chǔ)是__________。

(4)科研人員通過將攜帶綠色熒光蛋白（ECFP）基因的人免疫缺陷病毒載體注入恒河猴胚胎囊胚腔，從而實現(xiàn)了對非人靈長類動物的基因修飾。上述操作程序中最關(guān)鍵的步驟是__________（寫具體）。27、米酒；舊時叫“醴”，其釀制工藝簡單，口味香甜醇美。下圖表示發(fā)酵過程中的代謝途徑?；卮鹣铝袉栴}：

(1)制作時用糯米釀制，需要等煮熟的糯米溫度降低后再拌上酒曲（酵母菌）進行發(fā)酵，這是為了防止________________________________。在家中用陶土罐釀制米酒時，不需要進行嚴格的滅菌處理，這是因為_________________________________。

(2)陶土罐中要預(yù)留部分空間，一方面通過①②過程可以___________________________，另一方面是為了避免_____________________________。

(3)制作成功的米酒若暴露在空氣中，酒味會逐漸消失而出現(xiàn)醋酸味，此時發(fā)揮作用的微生物是________。此現(xiàn)象在_________（填“冬季”或“夏季”）更易發(fā)生，其原因是_________________________________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、B【分析】【分析】

1；動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體?？寺游锏募毎藖碜怨w，其染色體和供體的一致。

2；獲取克隆猴過程：將供體細胞核移入去除核的卵母細胞中；誘導(dǎo)融合成重組細胞，誘導(dǎo)發(fā)育形成早期胚胎，將早期胚胎移入代孕母猴子宮中繼續(xù)發(fā)育，獲得克隆猴。

【詳解】

A；動物克隆過程涉及到核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)以及胚胎移植技術(shù)；A正確；

B；克隆猴的核遺傳物質(zhì)由核供體細胞提供；但細胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)由去核卵母細胞提供，故克隆猴體細胞中的遺傳物質(zhì)與核供體的遺傳物質(zhì)大部分相同，B錯誤；

C；哺乳動物雌雄個體的體細胞中；細胞核內(nèi)常染色體的數(shù)目是相同的，性染色體組合是不同的，若分別以雌性個體和雄性個體的體細胞作為核供體，則得到的克隆動物的體細胞中常染色體的數(shù)目相同，C正確；

D；哺乳動物雌雄個體的體細胞中；細胞核內(nèi)常染色體的數(shù)目是相同的，性染色體組合是不同的，若分別以雌性個體和雄性個體的體細胞作為核供體，則得到的兩個克隆動物體細胞的性染色體組合不同，D正確。

故選B。

【點睛】

本題考查動物細胞的核移植技術(shù)等相關(guān)內(nèi)容，意在考查學(xué)生識記和理解能力，難度不大。2、A【分析】【分析】

利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用蛋白；是使目的基因在乳腺細胞中特異性表達，從乳汁中分離；提純，獲得所需要的藥物蛋白。

【詳解】

A；受精卵全能性易于表達；培育轉(zhuǎn)基因動物，應(yīng)選擇受精卵作為受體細胞，A錯誤；

B；目的基因?qū)胧芫?；受精卵發(fā)育為早期胚胎，要移植入子宮繼續(xù)發(fā)育，B正確；

C；檢測目的基因是否成功插入受體細胞染色體DNA；可利用堿基互補配對的原理，用DNA分子雜交法，C正確；

D；轉(zhuǎn)基因動物體細胞含有目的基因；故形成配子可能含目的基因，故D正確。

故選A。

【點睛】

本題考查基因工程相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能力。3、B【分析】【分析】

分析題圖：圖示為胚胎發(fā)育過程某一時期示意圖；該時期為囊胚期，其中①為透明帶；②為滋養(yǎng)層，將來發(fā)育成胎盤或胎膜；③為內(nèi)細胞團，將來發(fā)育成胎兒的各種組織。

【詳解】

A；由以上分析可知；圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細胞團，A正確；

B；據(jù)圖分析；圖示時期為囊胚時期，該時期細胞已經(jīng)發(fā)生分化，B錯誤；

C；圖示為囊胚期；進行胚胎分割時，應(yīng)選擇圖示時期的胚胎或之前的桑椹胚進行，C正確；

D；①為透明帶；囊胚的擴大會導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化，D正確。

故選B。4、C【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性；

2；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色。

【詳解】

A；DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時，DNA的溶解度最低，高于或低于該濃度，DNA的溶解度都會升高，A錯誤；

B；哺乳動物成熟的紅細胞不含細胞核和細胞器；沒有DNA，但新鮮的豬血中含有血細胞和未成熟的紅細胞，所以也含有DNA，B錯誤；

C；在酒精溶液中；某些蛋白質(zhì)的溶解度大于DNA的溶解度，所以可以用酒精溶液對提取的DNA進行提純，C正確；

D；二苯胺鑒定DNA分子時需要沸水浴加熱；待試管冷卻后才能觀察到現(xiàn)象，D錯誤。

故選C。

【點睛】5、D【分析】【分析】

題圖分析：圖示表示囊胚期胚胎示意圖；其中①為透明帶，在囊胚期后期會破裂；②為滋養(yǎng)層，將來分化成胎盤和胎膜；③為內(nèi)細胞團，將來分化形成各種組織。

【詳解】

A；由分析可知；圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細胞團，A正確；

B；圖示為囊胚期；高等哺乳動物胚胎發(fā)育中的細胞分化開始于該時期，終止于生命結(jié)束，B正確；

C；孵化是指胚胎（囊胚）從①透明帶中伸展出來的過程；C正確；

D；圖示為囊胚期；其中②滋養(yǎng)層將來發(fā)育成胎盤和胎膜，③內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織，D錯誤。

故選D。

【點睛】6、B【分析】【分析】

1.果酒制作菌種是酵母菌；代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型真菌，屬于真核細胞，條件是18～25℃，前期需氧，后期不需氧。

2.參與果醋制作的微生物是醋酸菌；屬于原核細胞，適宜溫度為30～35℃，需要持續(xù)通入氧氣。其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。

果醋制作的原理：當(dāng)氧氣；糖源都充足時；醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

題圖分析：圖中過程①表示細胞呼吸的第一階段；過程②表示無氧呼吸的第二階段，過程③表示有氧呼吸的第二；三兩個階段，過程④表示果酒制作果醋的過程，過程⑤表示糖類和氧氣充足的情況下產(chǎn)生醋酸的過程。

【詳解】

A、過程③表示有氧呼吸的第二、三兩個階段，有氧呼吸第三階段需要氧氣參與，過程④⑤表示果醋產(chǎn)生的兩個途徑，醋酸菌進行的是有氧呼吸，因此③④⑤都需要O2參與；A錯誤；

B；當(dāng)氧氣、糖源都充足時；醋酸菌可以直接發(fā)生過程⑤，當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔催^程④，B正確；

C；過程②為酵母菌發(fā)生的無氧呼吸過程；所需要的最適溫度為18℃～25℃，過程④為醋酸菌發(fā)生的過程，所需要的最適溫度為30℃～35℃，顯然二者所需溫度不同，C錯誤；

D；酵母菌是真核生物；圖中過程①表示細胞呼吸的第一階段，場所是細胞質(zhì)基質(zhì)，過程②表示無氧呼吸的第二階段，場所是細胞質(zhì)基質(zhì)，因此酵母菌發(fā)生過程①②的場所相同，D錯誤。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)7、A:D【分析】【分析】

分析題圖：奶牛1的培育采用了基因工程技術(shù)；早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；奶牛2的培育采用可基因工程技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。

【詳解】

A；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；A正確；

B；奶牛2的培育過程中；在囊胚階段注入了含有外源基因的受體細胞，因此其體內(nèi)不同組織細胞的基因型可能不同，B錯誤；

C；奶牛3表明受體細胞的細胞核具有全能性；C錯誤；

D；結(jié)合分析可知；奶牛1、2、3的獲得均需在體外進行早期胚胎培養(yǎng)，D正確。

故選AD。8、C:D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。也就是說，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。

基本流程：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程可以通過改造基因來定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)；A正確；

B；因為基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成；所以改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實現(xiàn)，B正確；

C；改造后的中華鱘具有新的性狀；但其和現(xiàn)有中華鱘之間沒有生殖隔離，仍是同一物種，C錯誤；

D；蛋白質(zhì)工程改造的是基因；可以遺傳給子代，因此改造后的中華鱘的后代也具有改造的蛋白質(zhì)，D錯誤。

故選CD。9、A:B:C:D【分析】【分析】

微生物接種的方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。若要對微生物進行取樣計數(shù)，接種方法只能是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法則是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。

【詳解】

A；微生物的生長需要碳源、氮源、無機鹽等物質(zhì)；只是有些固氮菌由于能利用氮氣作為氮源，不需要在培養(yǎng)基中添加氮源，A錯誤；

B；平板劃線法不能用于計數(shù)；B錯誤；

C、將1mL菌液稀釋100倍，在3個平板上分別接0．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為（42+39+36）÷3÷0．1×100×1000=3．9×107；C錯誤；

D；根據(jù)圖示可知；兩菌種的接種量比為1:1時比兩菌種的接種量比為2:1時效果好，但由于該實驗設(shè)置的兩菌種的接種量比例的組數(shù)過少，所以無法判斷處理該類廚余垃圾廢液的兩菌種的最佳接種量比，D錯誤。

故選ABCD。10、B:C:D【分析】苯丙酮尿癥是一種嚴重的單基因遺傳病，假設(shè)該病受一對等位基因A、a控制，分析圖1，Ⅰ1、Ⅰ2都無病，但其女兒Ⅱ3卻有病，所以該病為常染色體隱性遺傳病，Ⅱ3基因型為aa，Ⅰ1和Ⅰ2的基因型都為Aa，再結(jié)合圖2的酶切結(jié)果可知，Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1的基因型相同，因此Ⅱ1的基因型為Aa，Ⅱ2表現(xiàn)正常，且從酶切結(jié)果看，Ⅱ2與Ⅱ1基因型（Aa）不同，所以Ⅱ2的基因型為AA，由此可以推知，23kb探針雜交條帶對應(yīng)正常顯性基因A，19kb探針雜交條帶對應(yīng)隱性基因a。

【詳解】

A、由分析可知，個體Ⅱ1的基因型為Aa；雜合體的概率為1，A錯誤；

B、由分析可知，個體Ⅱ2的基因型為AA；與雜合體Aa婚配，生患病孩子aa的概率為0，B正確；

C、個體Ⅱ3是患者，是隱性純合體，故有19kb探針雜交條帶；C正確；

D、個體Ⅱ4是Ⅰ1（Aa）和Ⅰ2（Aa）所生的表現(xiàn)正常的后代；基因型可能是AA或Aa，若為雜合體就有2個探針雜交條帶，D正確。

故選BCD。11、A:B【分析】分析題圖：圖示為“低乳糖奶牛”的培育過程；首先采用基因工程技術(shù)將“乳糖分解酶基因”導(dǎo)入受體細胞，再采用核移植技術(shù)；早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因克隆動物。

【詳解】

A；犢牛的細胞核基因來自黑白花奶牛；但其細胞質(zhì)基因來自卵母細胞，因此其性狀與黑白花奶牛的性狀不完全一致，A錯誤；

B；核移植的受體細胞一般選用MⅡ期卵母細胞；進行去核時，通過顯微操作去除卵母細胞中的核，用微型吸管可一并吸出細胞核與第一極體，B錯誤；

C；犢牛的出生屬于細胞核移植技術(shù)的應(yīng)用；體現(xiàn)了動物細胞的細胞核具有全能性，C正確；

D；體細胞核移植技術(shù)可用于人類組織器官的移植和保護瀕危動物；D正確。

故選AB。

【點睛】12、B:D【分析】【分析】

T線和C線處同時顯示橫杠；即陽性，若樣品中不含病毒，樣品經(jīng)過結(jié)合墊時由于不存在病毒抗原，則不存在抗原抗體特異性結(jié)合，顯色組分仍會隨樣品繼續(xù)向前運動，由于不存在病毒抗原，抗體不能與待測抗原結(jié)合，故在T線不會顯色。

【詳解】

A；分析題圖可知；若有抗原存在，T線上的抗體能夠結(jié)合抗原（該抗體經(jīng)過結(jié)合墊時已經(jīng)與膠體金抗體結(jié)合），則T線顯色，過量的膠體金抗體會移動到C線處與二抗結(jié)合，C線也會顯色，故樣品中含有待測抗原時，兩條線均會顯色，A正確；

B；題圖中過量的膠體金抗體沒有結(jié)合抗原；而是與二抗結(jié)合，B錯誤；

C；據(jù)題意可知；樣本中含有某種抗原，就會首先被結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合，形成“抗原—金標(biāo)抗體”復(fù)合物，所以結(jié)合墊中固定了金標(biāo)抗體，C正確；

D；若T線不顯色；說明樣品中沒有抗原，D錯誤。

故選BD。13、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。

【詳解】

A；重組質(zhì)粒pM5-SPN-leudh中除圖中標(biāo)注外；還應(yīng)該具有終止子，復(fù)制原點等結(jié)構(gòu)，A正確；

B；NdeI和BamHI兩種酶切割形成的黏性末端不同；構(gòu)建重組質(zhì)粒用NdeI和BamHI兩種酶切有助于目的基因正確插入，B正確；

C；KmR和A_pR為標(biāo)記基因；圖中KmR和A_pR存在于質(zhì)粒中的作用是便于重組DNA分子的篩選，C正確；

D；限制酶和DNA連接酶的作用部位為磷酸二酯鍵；D錯誤。

故選ABC。14、A:C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：①限制酶；能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；②DNA連接酶，連接兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵；③運載體，質(zhì)粒是最常用的運載體，除此之外，還有λ噬菌體衍生物、動植物病毒。

2；基因治療：把正常的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)有缺陷的細胞中；使該基因的表達產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達到治療疾病的目的?；蛑委煼譃轶w外基因治療和體內(nèi)基因治療兩種類型。

【詳解】

A；根據(jù)題干信息“由一個向?qū)NA（sgRNA）分子引導(dǎo)Cas9蛋白到一個特定的基因位點進行切割”；再結(jié)合圖解可知能夠行使特異性識別DNA序列并切割特定位點功能的分子是向?qū)NA（sgRNA）分子和Cas9蛋白，其類似于基因工程中限制酶，作用的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵，A錯誤；

B；非基因編輯對象也可能含有與sgRNA配對的堿基序列；造成sgRNA選錯對象與之錯誤結(jié)合而脫靶，sgRNA的序列長短影響成功率，序列越短，脫靶率越高，B正確；

C；染色體變異會引起基因的數(shù)目或排列順序改變；利用此技術(shù)對目標(biāo)基因部分DNA片段進行切除屬于基因內(nèi)部堿基對的改變，不改變基因的數(shù)目和排列順序，故不屬于染色體變異，C錯誤；

D；sgRNA的雙鏈區(qū)域的堿基互補配對原則遵循的是DNA與RNA之間的配對關(guān)系；而目標(biāo)基因的雙鏈區(qū)域遵循的是DNA之間的配對方式，故兩者不同，D正確。

故選AC。15、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一種抗原檢測系統(tǒng)；將一段已知序列的DNA片段標(biāo)記到抗體2上，通過抗原抗體的特異性識別并結(jié)合，抗體2會和固定抗體1；抗生素形成復(fù)合物“固定抗體1—抗生素—抗體2”，再用PCR方法將這段DNA進行擴增，通過檢測PCR產(chǎn)物的量，即可推知固定抗體1上吸附的抗生素的量。

【詳解】

A；免疫PCR中所用的DNA不選用受檢樣品（牛乳）中可能存在的DNA。待檢測的牛乳中可能含有牛乳腺細胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若圖示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，經(jīng)過PCR擴增后的產(chǎn)物中，不僅有抗體2上的DNA擴增產(chǎn)物，還可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的擴增產(chǎn)物，使檢測結(jié)果偏大，A正確；

B；如果第三次沖洗不充分；可能使殘留的、呈游離狀態(tài)的抗體2上的DNA也作為PCR的模板參與擴增，會出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象，B正確；

CD；微量抗原抗體反應(yīng)；是通過PCR技術(shù)擴增抗體2上連接的DNA，最后通過檢測擴增產(chǎn)物—DNA的量來確定抗生素的量的方法。因此，PCR擴增產(chǎn)物的量與牛乳中抗生素的量呈正相關(guān)，抗原、抗體的數(shù)量可通過PCR技術(shù)間接擴增放大，C錯誤，D正確。

故選ABD。三、填空題(共7題，共14分)16、略

【解析】①.胚胎細胞②.體細胞17、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的愿望；進行嚴格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦子生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進行設(shè)計和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。

基因工程的原理是基因重組；其優(yōu)點是打破了生殖隔離。但由于科學(xué)發(fā)展水平的限制，目前科學(xué)家對基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機制等都了解得相當(dāng)有限；再加上轉(zhuǎn)移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因；同時，由于外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的，因此在轉(zhuǎn)基因生物中，有時候會出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因生物具有以下優(yōu)點：

作物產(chǎn)量高；能解決糧食短缺問題；利用基因工程生產(chǎn)的抗蟲作物能夠減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染；利用基因工程培育的生長迅速；營養(yǎng)品豐富的生物，能增加食物營養(yǎng)，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能夠生產(chǎn)稀缺的生化藥物。

（2）轉(zhuǎn)基因生物受限于科學(xué)發(fā)展水平；可能會產(chǎn)生以下問題：

轉(zhuǎn)基因生物與同種生物雜交；可能產(chǎn)生重組病菌；重組病毒或超級雜草；導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因生物的外源基因有可能與感染轉(zhuǎn)基因生物的某些細菌或病毒雜交，從而重組出對人類或其他生物有害的病原體，可能使疾病的傳播跨越物種障礙。

（3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)取得了巨大的成果；但科學(xué)技術(shù)是把雙刃劍，面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，而不能因噎廢食。

【點睛】

本題考查轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，意在考查學(xué)生對轉(zhuǎn)基因生物安全性問題的識記與理解。【解析】解決糧食短缺問題減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染增加食物營養(yǎng)，提高附加值能產(chǎn)生有毒蛋白或新過敏原可能產(chǎn)生重組病菌、重組病毒或超級雜草可能使疾病的傳播跨越物種障礙趨利避害不能因噎廢食18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】磷酸二酯19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現(xiàn)配現(xiàn)用20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】組織單個細胞培養(yǎng)基生長和繁殖21、略

【分析】【詳解】

致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，從一個宿主轉(zhuǎn)移到另一個宿主，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。同時近年來由于溫室效應(yīng)加劇，也會使致病微生物的繁殖周期變短，可能會使危害性更大，因此我們需要積極開展科學(xué)研究，掌握防范的措施和防范，實現(xiàn)最好的防護，目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用?！窘馕觥恐虏∥⑸锸侵缚梢郧址溉梭w，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。目前對致病微生物最好的防護措施還是疫苗的研究和使用。22、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術(shù)，其目的是用于生育，獲得人的復(fù)制品；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)，其目的是用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會用到的技術(shù)有體細胞核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；治療性克隆在獲取胚胎干細胞后，根據(jù)治療目的誘導(dǎo)干細胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會應(yīng)用到的技術(shù)為干細胞培養(yǎng)技術(shù)。【解析】生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細胞核移植技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細胞核移植技術(shù)，早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育，獲得人的復(fù)制品用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療四、實驗題(共2題，共20分)23、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內(nèi)是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實驗?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測，即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復(fù)細胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進行通讀，進而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細胞內(nèi)都沒有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異?！窘馕觥?1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異24、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細胞；使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達載體導(dǎo)入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過①過程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補配對，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設(shè)計引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。

（2）對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時；引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開始擴增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會破環(huán)SSB基因，故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長，③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長的菌落進一步純化后將菌體破碎處理，經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。

（4）將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性，如果該蛋白有抗原性，會引起機體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實驗內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體。【解析】(1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長的。

(4)提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體五、綜合題(共3題，共6分)25、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲?。焕肞CR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）基因表達載體的作用是：①使目的基因在受體細胞中能穩(wěn)定存在；并且遺傳給子代，②使目的基因能夠表達；該作用的發(fā)揮需要復(fù)制原點。

（2）構(gòu)建基因表達栽體時選用的限制酶是XbaI和HindIII，操作成功后的表達載體長13603-2246+1182=12539bp。若選擇