2025年滬科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年滬科版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷695考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下列有關(guān)基因工程、細(xì)胞工程、胚胎工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.植物基因工程主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力，改良農(nóng)作物品質(zhì)等B.植物組織培養(yǎng)過程中將愈傷組織包埋在人工種皮中，就形成了人工種子C.牛胚胎移植時(shí)可用囊胚期滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定D.制備單克隆抗體時(shí)，常用滅活的病毒和聚乙二醇等進(jìn)行細(xì)胞融合2、如圖表示基因工程中目的基因的獲取示意圖，相關(guān)敘述不正確的是（）

A.①過程的完成需要逆轉(zhuǎn)錄酶B.②過程需用限制性核酸內(nèi)切酶C.目前獲取目的基因的方法只有，上圖所示的兩種D.cDNA的構(gòu)建需要提前了解目的基因的有關(guān)信息3、家庭釀制的紅葡萄酒味道純正，無任何添加劑和防腐劑，干凈沒有毒性。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.為了清洗葡萄表皮殘留的農(nóng)藥，應(yīng)用自來水反復(fù)沖洗B.為了增加葡萄酒的量，需向釀制容器內(nèi)多加入些白糖C.為了防止環(huán)境中雜菌污染，發(fā)酵時(shí)應(yīng)在容器口置一紗布D.釀制時(shí)，容器應(yīng)放在陰涼處保存，不要隨意打開蓋子4、大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和陰離子去垢劑（SDS）處理后；擬核DNA就會纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時(shí)間，質(zhì)粒分布在上清液中。利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的分析錯(cuò)誤的是（）

A.DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可以用冷酒精析出上清液中的DNAB.DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，可用二苯胺試劑在沸水加熱條件下鑒定DNAC.用限制酶I和Ⅱ處理提取的產(chǎn)物，電泳出現(xiàn)圖結(jié)果，說明未提取到質(zhì)粒D.用瓊脂糖凝膠電泳鑒定質(zhì)粒，被染色的質(zhì)粒還需要通過紫外燈照射才能看到結(jié)果5、從土壤中篩選纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，正確的是（）A.土壤取樣→梯度稀釋→稀釋涂布平板→挑選菌落B.土壤取樣→選擇培養(yǎng)→稀釋涂布平板→挑選菌落C.土壤取樣→梯度稀釋→選擇培養(yǎng)→挑選菌落D.土壤取樣→梯度稀釋→稀釋涂布平板→選擇培養(yǎng)→挑選菌落6、大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時(shí)間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述不正確的是（）

A.提取DNA時(shí)可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解B.將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定C.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理D.根據(jù)電泳結(jié)果，質(zhì)粒上一定沒有限制酶I和II的切割位點(diǎn)，而有限制酶III的切割位點(diǎn)7、某課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新品系，通過一定的技術(shù)，使青蒿素合成過程的某一關(guān)鍵酶基因fps在野生青蒿中得到了過量表達(dá)，其過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.PCR過程中，溫度需要控制在90℃以上的目的是破壞氫鍵B.構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中，目的基因需插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上C.基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止密碼子和標(biāo)記基因等D.用熒光標(biāo)記的fps基因作為探針可以檢測目的基因是導(dǎo)入成功評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)8、利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖所示；下列敘述正確的是（）

A.過程①需使用逆轉(zhuǎn)錄酶B.過程②需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C.過程③使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCl溶液制備D.過程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞9、2012年6月29日，中國首例設(shè)計(jì)嬰兒誕生。這個(gè)嬰兒的父母均為地中海貧血基因的攜帶者。此前，二人曾育有一女，患有重度地中海貧血，為了再生一個(gè)健康的孩子，用他的臍帶血幫助姐姐進(jìn)行造血干細(xì)胞移植，設(shè)計(jì)了這個(gè)嬰兒。下列有關(guān)說法正確的是（）A.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”利用體外受精、胚胎移植、植入前胚胎遺傳學(xué)診斷技術(shù)等B.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”均為有性生殖C.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”都要進(jìn)行胚胎選擇，二者選擇的目的相同D.設(shè)計(jì)嬰兒性別是“設(shè)計(jì)試管嬰兒”的第一步10、從藍(lán)光到紫外線都能使綠色熒光蛋白（GFP）激發(fā)；發(fā)出綠色螢光。研究人員將某病毒的外殼蛋白（L1）基因與GFP基因連接，獲得了L1-GFP融合基因，并將其插入質(zhì)粒PO，構(gòu)建了重組質(zhì)粒P1。下圖為P1部分結(jié)構(gòu)和限制酶酶切位點(diǎn)的示意圖，相關(guān)敘述正確的是（）

A.將L1-GFP融合基因插入質(zhì)粒PO時(shí)，使用了E1、E2和E4三種限制性核酸內(nèi)切酶B.可借助基因工程、核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因的克隆牛C.可采用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測該融合基因是否存在于轉(zhuǎn)基因牛的不同組織細(xì)胞中D.若在某轉(zhuǎn)基因牛皮膚細(xì)胞中觀察到綠色熒光，則說明L1基因在該細(xì)胞中完成表達(dá)11、廚余垃圾是指居民日常生活及食品加工、飲食服務(wù)、單位供餐等活動中產(chǎn)生的垃圾。廢液中的淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)，易腐爛變質(zhì)，滋生病原微生物等。若處理不當(dāng)，可能造成嚴(yán)重的污染。圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌組合可以將有機(jī)廚余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，減輕環(huán)境污染。為制備分解有機(jī)廚余垃圾的微生物菌劑，某科研小組對兩菌種進(jìn)行了最佳接種量比的探究實(shí)驗(yàn)，并得出下圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下面敘述錯(cuò)誤的是（）

A.巨大芽孢桿菌生長過程中需要氮源，圓褐固氮菌生長過程中不需要氮源B.要統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量可采用平板劃線法和稀釋涂布平板法C.將1mL菌液稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接0．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為3．9×105D.處理該類廚余垃圾廢液，兩菌種的最佳接種量比為1：112、土壤被稱為“微生物的天然培養(yǎng)基”?？茖W(xué)工作者要從土壤中分離或鑒定需要的微生物，需要配制選擇培養(yǎng)基，再通過接種、培養(yǎng)、純化、篩選等技術(shù)獲得微生物。下列關(guān)于培養(yǎng)基對微生物的分離或鑒定的敘述，正確的是（）A.從土壤中分離出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培養(yǎng)基，在滅菌后將培養(yǎng)基調(diào)至酸性B.從土壤中分離出纖維素的分解菌，需要配制含纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基且加剛果紅C.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，采用稀釋涂布平板法可分離出分解尿素的分解菌D.從土壤中分離固氮微生物需要配制不含氮源的培養(yǎng)基，且培養(yǎng)條件要適宜13、據(jù)人民網(wǎng)報(bào)道，“一對名為露露和娜娜的基因編輯嬰兒于2018年11月在中國健康誕生。這對雙胞胎的一個(gè)基因經(jīng)過修改，使她們出生后即能天然抵抗艾滋病。這是世界首例免疫艾滋病的基因編輯嬰兒”。下列有關(guān)說法不正確的是（）A.基因編輯制造人類的行為是符合倫理道德的B.基因編輯技術(shù)，可改變?nèi)祟愡M(jìn)化的速度和方向，有利于人類的進(jìn)化C.通過基因編輯技術(shù)改變了人類的遺傳物質(zhì)，使人類進(jìn)化成新物種D.基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究，但不能用于編輯嬰兒14、如圖是青蛙的胚胎細(xì)胞核移植的過程，下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.過程1代表對體細(xì)胞采用顯微操作去核B.青蛙囊胚除了可以作為核移植的供體細(xì)胞外，也可以直接進(jìn)行胚胎移植C.胚胎細(xì)胞核移植成功率遠(yuǎn)低于成體細(xì)胞核移植D.我國支持治療性克隆，反對生殖性克隆15、農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)；并以此環(huán)為模板，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法正確的是（）

A.進(jìn)行PCR擴(kuò)增的依據(jù)是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理B.進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要的酶有解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列D.通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對，可確定T-DNA的插入位置16、已知蘇云金芽孢桿菌中的毒蛋白基因B和豇豆中的胰蛋白酶抑制劑基因D均可導(dǎo)致棉鈴蟲死亡，棉花的短果枝由基因A控制，基因A所在的染色體有片段缺失，含片段缺失染色體的雄配子致死。科研人員將抗蟲基因B和D導(dǎo)入棉花的同一條染色體上獲得了基因型為AaBD的多個(gè)短果枝抗蟲棉植株，讓其自交得到F1（不考慮減數(shù)分裂時(shí)的染色體互換）。下列說法正確的是（）A.若抗蟲基因與控制果枝的基因位于兩對同源染色體上，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產(chǎn)生的配子基因型為AAaaDB.若基因D與a位于同一條染色體上，則F1中短果枝抗蟲:短果枝不抗蟲:長果枝抗蟲＝2:1:1C.若F1中短果枝抗蟲:長果枝不抗蟲＝1:1，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產(chǎn)生雌配子的基因型為ABD和aD.若F1中短果枝抗蟲:短果枝不抗蟲:長果枝抗蟲:長果枝不抗蟲＝3:1:3:1，則果枝基因和抗蟲基因可能位于兩對同源染色體上評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)17、（1）致病菌：第二次世界大戰(zhàn)期間，侵華日軍在中國領(lǐng)土上修建了幾十座_____工廠，曾用數(shù)千名中國人做實(shí)驗(yàn)，還曾在中國20多個(gè)地區(qū)使用了_____；造成了幾十萬中國老百姓死亡。日本戰(zhàn)敗投降時(shí)，侵華日軍又一次把培養(yǎng)的細(xì)菌釋放出來，在中國造成傳染病大流行。

（2）生化毒劑：如_____分子可以阻滯神經(jīng)末梢釋放_____；從而引起肌肉麻痹。

（3）病毒：如_____病毒；在年輕人普遍都沒有接種天花疫苗的情況下，若有人用天花病毒或某些動物的痘病毒作為生物武器，后果不堪設(shè)想。

（4）基因重組致病菌：這些致病菌是人類的_____致病菌，可讓大批受感染者突然發(fā)病，而又無藥可醫(yī)。18、動物細(xì)胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。19、DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，二苯胺要___________。20、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。21、科學(xué)家采用定點(diǎn)誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個(gè)二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項(xiàng)技術(shù)的要點(diǎn)是什么？_________評卷人得分四、判斷題(共3題，共30分)22、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，就是聽之任之，不管不問（______）A.正確B.錯(cuò)誤23、植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性。()A.正確B.錯(cuò)誤24、蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級結(jié)構(gòu)，而這種高級結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜。（選擇性必修3P95）()A.正確B.錯(cuò)誤評卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共28分)25、學(xué)校開展以“利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作食品”為主題的相關(guān)活動。小余同學(xué)興致勃勃地回家；發(fā)現(xiàn)冰箱中可用的原材料有草莓；豆腐、白蘿卜、牛奶等。請回答下列問題：

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次發(fā)酵保存下來的發(fā)酵物中的______進(jìn)行發(fā)酵；制作食品的技術(shù)。

（2）小余同學(xué)將草莓洗凈、切塊，裝入瓶中。加入原漿醋（經(jīng)糧食直接釀制，不經(jīng)勾兌）少許、白糖兩勺，置于保溫箱中，每隔一段時(shí)間擰開瓶蓋換氣，兩周后得到草莓醋。小余同學(xué)加入原漿醋的目的是接種更多的______，加入糖并經(jīng)常開蓋換氣的目的是保證______都充足。保溫箱溫度應(yīng)保持在______℃。

（3）小余同學(xué)還打算制作一些腐乳和蘿卜泡菜給住宿生作早餐。從豆腐到腐乳，多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其中起主要作用的是_______，屬于______（填“真核”或“原核”）生物。豆腐中的成分也會發(fā)生一定的變化，其中蛋白質(zhì)被分解成______，脂肪被分解成______；用白蘿卜制作泡菜的過程中，能達(dá)到縮短腌制時(shí)間的操作有______（填下面的序號）。

①將白蘿卜切成小塊②用沸水短時(shí)間處理白蘿卜塊。

③添加陳泡菜汁④向容器中通入無菌空氣。

（4）小余同學(xué)欲從泡菜汁中分離制作酸奶的乳酸菌，首先對陳泡菜汁進(jìn)行過濾，然后取濾液用無菌水進(jìn)行充分______，再用涂布器接種到特定的______培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選。26、金黃色葡萄球菌是一種常見的食源性致病微生物；該菌具耐高鹽的特性。哥倫比亞血平板含無菌脫纖維羊血，金黃色葡萄球菌可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，產(chǎn)生透明的溶血圈。如圖為檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答：

（1）從功能上看7．5％NaCl（高鹽）肉湯培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，用該培養(yǎng)基對金黃色葡萄球菌進(jìn)行培養(yǎng)的主要目的是提高_(dá)__________。

（2）從培養(yǎng)過程分析，振蕩培養(yǎng)可以____________________________；更有利于微生物的生長。

（3）在配制哥倫比亞血平板時(shí)，添加無菌脫纖維羊血是在高壓蒸汽滅菌________（填“之前”或“之后”），原因是________________________。

（4）圖中血平板上的接種方法是________________。經(jīng)規(guī)范操作并多次重復(fù)，血平板上均出現(xiàn)__________的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌。但牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非牛奶所攜帶，因此需要對本次操作進(jìn)行完善，具體方案是________________。27、科研人員利用營養(yǎng)菌（只能利用乳糖；但不能降解四環(huán)素）和抗性菌（不能利用乳糖，但能降解四環(huán)素）對細(xì)菌間的相互作用進(jìn)行了探究。

(1)將兩種菌液分別用______法單獨(dú)接種于加入含四環(huán)素并以乳糖為唯一碳源的______（選填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，培養(yǎng)皿中均未出現(xiàn)菌落，推測兩種菌______（填“發(fā)生”或“未發(fā)生”）可遺傳變異。

(2)將兩種菌混合后接種在與上述成分相同的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，培養(yǎng)基中兩種菌落均有生長，推測兩種菌實(shí)現(xiàn)了“互利共生”，其原因最可能是：抗性菌增殖，______，為營養(yǎng)菌存活提供保障；營養(yǎng)菌增殖，______；代謝產(chǎn)物為抗性菌生長提供碳源。

(3)為進(jìn)一步驗(yàn)證上述現(xiàn)象；科研人員設(shè)計(jì)了如圖所示裝置進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

①實(shí)驗(yàn)操作：在接種了營養(yǎng)菌和抗性菌混合菌液的培養(yǎng)板，左側(cè)加入以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基，右側(cè)加入含______的培養(yǎng)基；培養(yǎng)基可從與兩側(cè)逐漸擴(kuò)散到混合菌液培養(yǎng)板上。一段時(shí)間后檢測混合菌液培養(yǎng)板上兩種菌的數(shù)量情況。

②預(yù)期結(jié)果：左側(cè)______；右側(cè)______。28、使用日益廣泛的手機(jī)；在方便人們通訊聯(lián)絡(luò)的同時(shí)也成為細(xì)菌等病原體傳播的途徑。為了解手機(jī)上細(xì)菌的情況，某興趣小組進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請回答相關(guān)問題：

(1)取附著在手機(jī)上細(xì)菌進(jìn)行取樣培養(yǎng)后，對菌液進(jìn)行系列梯度稀釋的目的是_______。

(2)A平板上生長的菌落有多種形態(tài)，說明附著在手機(jī)細(xì)菌有____種。若要使菌落能在A平板上生長，下列培養(yǎng)基組分中最合理的是_____(選填“甲、乙、丙”)，原因是_____。可采取____________來檢測培養(yǎng)基A制備是否合格。培養(yǎng)基編號培養(yǎng)基組分甲蔗糖、NaC1、瓊脂、水乙牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、水丙蛋白胨、NaCl、蔗糖、水

(3)初篩后將平板B的菌落通過“影印”方法接種到C培養(yǎng)基上培養(yǎng)，使C培養(yǎng)基對應(yīng)位置上出現(xiàn)相同菌落。然后用伊紅-美藍(lán)染液對C進(jìn)行染色，根據(jù)染色后D中出現(xiàn)的結(jié)果，可判斷平板B中______(選填圖中數(shù)字)是大腸桿菌的菌落。

(4)某同學(xué)采用平板劃線法進(jìn)一步純化大腸桿菌，接種培養(yǎng)一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)不間斷長滿菌落，第二劃線區(qū)上幾乎無菌落，產(chǎn)生此情況的可能原因____________。評卷人得分六、綜合題(共3題，共9分)29、pUC質(zhì)粒載體如圖所示；目的基因插入到Amp'或LacZ'中均會導(dǎo)致相應(yīng)基因失活。篩選含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌可采用藍(lán)白斑法，機(jī)制如下：LacZ'基因在IPTG誘導(dǎo)下表達(dá)的α-肽可與大腸桿菌自身編碼的β-肽互補(bǔ)從而產(chǎn)生有活性的β-半乳糖苷酶，該酶能夠水解X-gal使菌落呈藍(lán)色，否則呈白色。某科研人員利用LacZ'基因與目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體A后再轉(zhuǎn)化大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}。

（1）1967年科學(xué)家發(fā)現(xiàn)質(zhì)粒能自我復(fù)制；并可以在細(xì)菌細(xì)胞間轉(zhuǎn)移，這一發(fā)現(xiàn)為_______找到了一種運(yùn)載工具。

（2）目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因；也可以是一些具有_______的因子。若需快速得到大量目的基因，可采用PCR技術(shù)，該技術(shù)一般由_______三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。

（3）作為基因表達(dá)載體除了需要有復(fù)制原點(diǎn)；標(biāo)記基因、目的基因外；還需要具有_______。為了避免目的基因的自身環(huán)化，寫出構(gòu)建基因表達(dá)載體A的主要實(shí)驗(yàn)步驟：_______

（4）轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌需放在含有氨芐青霉素、_______的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，篩選出白色的菌落即為含有______的大腸桿菌。30、I：如圖所示是畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法；請分析回答下列問題：

（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ均用到的生物技術(shù)有________________和________________。

（2）用激素處理的目的是使B牛____________，從B牛體內(nèi)獲得的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到____________（填細(xì)胞分裂時(shí)期）才能與精子結(jié)合。

（3）在自然受精情況下，A牛的精子必須在B牛的生殖道中經(jīng)過相應(yīng)的生理變化后，才能與B牛的卵子結(jié)合，完成受精作用，這個(gè)過程叫做_______。卵子受精的標(biāo)志是___________。將方法Ⅰ中的受精卵移入到____________中繼續(xù)培養(yǎng)；待胚胎培養(yǎng)至囊胚期，可取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定。

II：如圖所示為用基因工程與胚胎工程培育良種牛的過程；請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③表示基因工程中________________________過程。

（2）用促性腺激素處理良種母牛的目的是________________________。

（3）如果轉(zhuǎn)基因牛D的牛奶中含有________________________，則說明人血清白蛋白基因在個(gè)體水平已表達(dá)成功。31、圖1為培育轉(zhuǎn)AFPs基因（抗凍基因）番茄的示意圖；外源DNA和質(zhì)粒上均標(biāo)出了酶切位點(diǎn)及相關(guān)抗性基因，其中Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環(huán)素抗性基因。請分析并回答下列問題：

(1)據(jù)圖分析，若需使用插入滅活法篩選并鑒定重組質(zhì)粒，應(yīng)優(yōu)先選用限制酶____________對目的基因和質(zhì)粒切割。在形成的重組質(zhì)粒上，能被RNA聚合酶識別且結(jié)合的部位稱為____________。

(2)圖2中的A鏈和B鏈來自于AFPs基因。欲利用PCR技術(shù)對AFPs基因擴(kuò)增4次循環(huán)，應(yīng)選取的引物是____________，需要的引物數(shù)量是___________個(gè)。在這個(gè)過程中，還需要添加___________酶。

(3)為提高導(dǎo)入成功率，常利用____________處理農(nóng)桿菌，Ti質(zhì)粒含有的____________可將目的基因整合到番茄細(xì)胞的染色體DNA上，采用___________技術(shù)將番茄細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因番茄。若要獲得抗凍能力更強(qiáng)的抗凍番茄，可以對AFPs基因進(jìn)行改造，最終得到相應(yīng)的蛋白質(zhì)，該過程需用到__________工程。檢測轉(zhuǎn)基因番茄是否產(chǎn)生抗凍蛋白，所用的方法是__________。

(4)用插入滅活法篩選出的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌在含氨芐青霉素培養(yǎng)基和含四環(huán)素培養(yǎng)基上的存活情況分別是___________。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

1；植物細(xì)胞工程的應(yīng)用：

（1）植物繁殖的新途徑微型繁殖：保持優(yōu)良品種的遺傳特性；高效快速地實(shí)現(xiàn)大量繁殖：

①作物脫毒：利用分生區(qū)附近（如莖尖）組織培養(yǎng)獲得脫毒苗；

②人工種子：胚狀體；不定芽、頂芽和腋芽等包上人工種皮制成；

（2）作物新品種的培育：單倍體育種；突變體的利用；

（3）細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：培養(yǎng)到愈傷組織階段；

2；誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的常用方法有聚乙二醇（PEG）融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等。

【詳解】

A；植物基因工程主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力；改良農(nóng)作物品質(zhì)等，A正確；

B；人工種子中包埋的是頂芽、腋芽、不定芽或胚狀體；而不是愈傷組織，B錯(cuò)誤；

C；囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞與內(nèi)細(xì)胞團(tuán)具有相同的遺傳物質(zhì)；因此可用來進(jìn)行性別鑒定，C正確；

D；制備單克隆抗體需要制備雜交瘤細(xì)胞；誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的過程常用滅活的病毒和聚乙二醇（PEG）等，D正確。

故選B。2、C【分析】【分析】

題圖分析；圖中顯示了兩種獲取目的基因的方法。圖中①表示逆轉(zhuǎn)錄過程，②表示用限制酶切割DNA分子得到一定大小范圍DNA，③表示獲取目的基因。

【詳解】

A；①為逆轉(zhuǎn)錄過程；完成該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶，A正確；

B；②表示將DNA分子切割；因此需用限制性核酸內(nèi)切酶，B正確；

C；目前獲取目的基因的方法除了從基因文庫中獲取外；還可利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工化學(xué)合成，C錯(cuò)誤；

D；cDNA的構(gòu)建需要首先獲得相應(yīng)的mRNA；因此，cDNA的構(gòu)建需要提前了解目的基因的有關(guān)信息，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中；起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌。在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高，紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。

20℃左右最適宜酵母菌繁殖酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18℃-25℃。

【詳解】

A；為了清洗葡萄表皮殘留的農(nóng)藥；應(yīng)用自來水浸泡和沖洗，但是不要反復(fù)沖洗，這樣會洗點(diǎn)葡萄皮自帶的酵母菌，A錯(cuò)誤；

B；為了增加葡萄酒的量；需向釀制容器內(nèi)加適量白糖，加太多白糖可能會使發(fā)酵液滲透壓增大，酵母菌失水而死，B錯(cuò)誤；

C；發(fā)酵過程需要嚴(yán)格無氧；所以最好密封瓶口，而且定期排氣，C錯(cuò)誤；

D；釀制時(shí)；容器應(yīng)放在陰涼處保存，因?yàn)榻湍妇淖钸m溫度在18℃-25℃，不要隨意打開蓋子以免雜菌污染，D正確。

故選D。4、C【分析】【分析】

DNA的鑒定：在沸水浴條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

DNA不容易酒精溶液；細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離。

【詳解】

A；通過分析可知；DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可以用冷酒精析出上清液中的DNA，A正確；

B；DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液；這樣可以去除DNA中的某些雜質(zhì)，提取的DNA可用二苯胺試劑在沸水加熱條件下生成藍(lán)色，B正確；

C；限制性酶Ⅰ和限制性酶Ⅱ處理提取的產(chǎn)物；只得到一條帶，說明提取物是環(huán)狀DNA，即提取物為質(zhì)粒，C錯(cuò)誤；

D；用瓊脂糖凝膠電泳鑒定質(zhì)粒；被染色的質(zhì)粒還需要通過紫外燈照射才能看到結(jié)果，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】5、B【分析】【分析】

從土壤中分離纖維素分解菌的一般步驟是：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布培養(yǎng)和篩選菌株．篩選纖維素分解菌需要用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基；纖維素分解菌可以用剛果紅染液進(jìn)行鑒別，在培養(yǎng)基中加入剛果紅染液，在其菌落周圍會出現(xiàn)透明圈。

【詳解】

從從土壤中分離纖維素分解菌的一般步驟是：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布培養(yǎng)和篩選菌株。

故選B。

【點(diǎn)睛】6、D【分析】【分析】

DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA時(shí)加入酒精，是為了讓DNA析出，蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解，A正確；

B；將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑在沸水條件進(jìn)行鑒定，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色，B正確；

C；DNA帶負(fù)電；電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理，C正確；

D；因?yàn)橘|(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個(gè)切割位點(diǎn)，也可能沒有切割位點(diǎn)，D錯(cuò)誤。

故選D。7、C【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)；使反應(yīng)體系中的模板DNA解旋為單鏈的條件是加熱至90℃以上，目的是破壞DNA分子中的氫鍵，A正確；

B；構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒的過程中；需將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，B正確；

C；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；終止密碼子位于mRNA上，C錯(cuò)誤；

D；檢驗(yàn)?zāi)康幕蚴欠窀窈系角噍锘蚪M中；可用DNA分子雜交法，即將fps基因制成基因探針，與青蒿基因組DNA雜交，而檢測目的基因是否表達(dá)，常用抗原-抗體雜交法，D正確。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)8、A:D【分析】【分析】

過程①是以mRNA為模板合成DNA的過程；即逆轉(zhuǎn)錄過程；過程②表示利用PCR擴(kuò)增目的基因；過程③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌；過程④培養(yǎng)并篩選轉(zhuǎn)基因大腸桿菌，級工程菌。

【詳解】

A；過程①是以mRNA為模板合成DNA的過程；即逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化，故A正確；

B；過程②表示利用PCR擴(kuò)增目的基因；在PCR過程中，不需要解旋酶，是通過控制溫度來達(dá)到解旋的目的，故B錯(cuò)；

C；利用氯化鈣處理大腸桿菌；使之成為感受態(tài)細(xì)胞，故C錯(cuò)；

D；檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA中；可以采用DNA分子雜交技術(shù)，故D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】9、A:B【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

【詳解】

A；“設(shè)計(jì)試管嬰兒”利用體外受精、胚胎移植、植入前胚胎遺傳學(xué)診斷技術(shù)等；A正確；

B；“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”均利用了體外受精技術(shù)；均為有性生殖，B正確；

C；“設(shè)計(jì)試管嬰兒”與“試管嬰兒”都要進(jìn)行胚胎選擇；但二者選擇的目的不同，C錯(cuò)誤；

D；體外受精獲得許多胚胎是“設(shè)計(jì)試管嬰兒”的第一步；D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】10、B:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；將L1-GFP融合基因插入質(zhì)粒P0時(shí)；使用了El和E4兩種限制性核酸內(nèi)切酶，A錯(cuò)誤；

B；可借助基因工程、核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因的克隆牛；B正確；

C；可采用DNA分子雜交技術(shù)檢測該融合基因是否存在于轉(zhuǎn)基因牛的不同組織細(xì)胞中；抗原-抗體雜交技術(shù)用于檢測目的基因是否成功表達(dá)，C錯(cuò)誤；

D；若在某轉(zhuǎn)基因牛皮膚細(xì)胞中觀察到綠色熒光；則說明L1基因在該細(xì)胞中完成表達(dá)，D正確。

故選BD。11、A:B:C:D【分析】【分析】

微生物接種的方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。若要對微生物進(jìn)行取樣計(jì)數(shù)，接種方法只能是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。

【詳解】

A；微生物的生長需要碳源、氮源、無機(jī)鹽等物質(zhì)；只是有些固氮菌由于能利用氮?dú)庾鳛榈矗恍枰谂囵B(yǎng)基中添加氮源，A錯(cuò)誤；

B；平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)；B錯(cuò)誤；

C、將1mL菌液稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接0．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為（42+39+36）÷3÷0．1×100×1000=3．9×107；C錯(cuò)誤；

D；根據(jù)圖示可知；兩菌種的接種量比為1:1時(shí)比兩菌種的接種量比為2:1時(shí)效果好，但由于該實(shí)驗(yàn)設(shè)置的兩菌種的接種量比例的組數(shù)過少，所以無法判斷處理該類廚余垃圾廢液的兩菌種的最佳接種量比，D錯(cuò)誤。

故選ABCD。12、B:C:D【分析】【分析】

選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某理化因素抗性的原理而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。具有只允許特定的微生物生長；而同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長的功能。

【詳解】

A；青霉素能殺死細(xì)菌；對真菌無影響，因此，從土壤中分離出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培養(yǎng)基，且調(diào)試pH需要在滅菌前，A錯(cuò)誤；

B；纖維素分解菌含纖維素水解酶能利用纖維素；其他微生物不能利用纖維素，剛果紅和纖維素形成紅色復(fù)合物，纖維素被分解后出現(xiàn)透明圈，所以能分離和篩選纖維素的分解菌，B正確；

C、分解尿素的分解菌能合成脲酶，把尿素分解成NH3，NH3再轉(zhuǎn)化NO3-、NH4+被植物利用；其他微生物細(xì)胞中不能合成脲酶，不能利用尿素，在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上不能生長，C正確；

D、固氮菌能利用空氣中N2；其他微生物不能利用，因此需要配制不含氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，且培養(yǎng)條件要適宜，D正確。

故選BCD。13、A:B:C【分析】【分析】

基因編輯技術(shù)屬于基因工程；而對于人體胚胎的操作又涉及胚胎工程，所有對于人體的操作都應(yīng)經(jīng)過安全性審查，要符合倫理道德；但用于疾病預(yù)防領(lǐng)域的研究又具有進(jìn)步意義。

【詳解】

A；基因編輯制造人類的行為不符合倫理道德；A錯(cuò)誤；

B；基因編輯技術(shù)；只是對個(gè)別人個(gè)別基因進(jìn)行編輯，不一定改變?nèi)祟愡M(jìn)化的速度和方向，B錯(cuò)誤；

C；基因編輯技術(shù)改變了人類的遺傳物質(zhì)；但并沒有出現(xiàn)生殖隔離，即沒有形成新物種，C錯(cuò)誤；

D；基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究；具有進(jìn)步意義，但不能用于編輯嬰兒，D正確。

故選ABC。14、A:B:C【分析】【分析】

我國政府一再重申四不原則：不贊成；不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。原因如下：1克隆人只是某些人出于某種目的制造出的“產(chǎn)品”；沒有“父母”，這可能導(dǎo)致他們在心理上受到傷害；2由于技術(shù)問題，可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的克隆人；3克隆人的家庭地位難以認(rèn)定，這可能使以血緣為紐帶的父子、兄弟和姐妹等人倫關(guān)系消亡；4生殖性克隆人沖擊了現(xiàn)有的一些有關(guān)婚姻、家庭和兩性關(guān)系的倫理道德觀念；5生殖性克隆人是對人類尊嚴(yán)的侵犯；6生殖性克隆人破壞了人類基因多樣性的天然屬性，不利于人類的生存和進(jìn)化。

【詳解】

A；過程1代表對卵母細(xì)胞或卵細(xì)胞采用顯微操作去核；而不是對體細(xì)胞去核，也可以采用紫外線照射去除細(xì)胞核，A錯(cuò)誤；

B；青蛙屬于體外受精；體外發(fā)育不需要進(jìn)行胚胎移植，B錯(cuò)誤；

C；胚胎細(xì)胞分化程度低；移植成功率遠(yuǎn)高于成體細(xì)胞核移植，C錯(cuò)誤；

D；我國政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)；但是支持治療性克隆，D正確。

故選ABC。15、A:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR擴(kuò)增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理；A正確；

B；進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B錯(cuò)誤；

C；DNA的兩條鏈反向平行；子鏈從引物的3′端開始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列，C錯(cuò)誤；

D；通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對；即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】16、C:D【分析】【分析】

由題意知；B；D位于一條染色體上，因此不遵循自由組合定律?；駻所在的染色體有片段缺失，含片段缺失染色體的雄配子致死，如果A（a）與BD分別位于兩對同源染色體上，則遵循自由組合定律，基因型為AaBD產(chǎn)生的配子的類型及比例是ABD：a：aBD：A=1：1：1：1；如果A（a）與BD位于一對同源染色體上，則A（a）與BD也不遵循自由組合定律，基因型為AaBD的個(gè)體產(chǎn)生的配子的類型是ABD：a=1：1或者是aBD：A=1：1。

【詳解】

A；由于抗蟲基因B和D位于棉花的同一條染色體上；若抗蟲基因與控制果枝的基因位于兩對同源染色體上，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產(chǎn)生的配子基因型為ABD、A、aBD、a，A錯(cuò)誤；

B、若基因B、D與a位于同一條染色體上，則該植株產(chǎn)生的雌配子有A、aBD兩種，雄配子只有aBD一種，則F1中AaBD（短果枝抗蟲）：aaBD（長果枝抗蟲）＝1:1；B錯(cuò)誤；

C、若F1中短果枝抗蟲（A_BD）:長果枝不抗蟲（aa）＝1:1；則可推測親本產(chǎn)生的雄配子為a，故親本產(chǎn)生雌配子的基因型為ABD和a，C正確；

D、若F1中短果枝抗蟲（A_BD）:短果枝不抗蟲（A_）:長果枝抗蟲（aaBD）:長果枝不抗蟲（aa）＝3:1:3:1；則可推測雄配子有a和aBD兩種，即A/a基因與BD基因沒有連鎖關(guān)系，故果枝基因和抗蟲基因可能位于兩對同源染色體上，D正確。

故選CD。三、填空題(共5題，共10分)17、略

【分析】【詳解】

（1）早在第二次世界大戰(zhàn)中；侵華日軍就組建了從事細(xì)菌戰(zhàn)的731部位和100部隊(duì)，并在中國領(lǐng)土上修建了幾十座細(xì)菌武器工廠，大量培養(yǎng)鼠疫；霍亂、傷寒、炭疽和菌痢等一系列能使人致命的傳染性疾病。曾用數(shù)千名中國人做實(shí)驗(yàn)，還曾在中國20多個(gè)地區(qū)使用了細(xì)菌武器，造成了幾十萬中國老百姓死亡。日本戰(zhàn)敗投降時(shí)，侵華日軍又一次把培養(yǎng)的細(xì)菌釋放出來，在中國造成傳染病大流行。

（2）某些國家或恐怖組織大量生產(chǎn)肉毒桿菌毒素；肉毒桿菌毒素分子可以阻滯神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿，從而引起肌肉麻痹。

（3）1978年天花就已經(jīng)在地球上消滅；但是某些國家至今保留著天花病毒菌株，今天，在年輕人普遍都沒有接種天花疫苗的情況下，若有人用天花病毒或某些動物的痘病毒作為生物武器，后果不堪設(shè)想。

（4）目前，有一些國家對重組基因技術(shù)制造全新的致病菌表現(xiàn)了極大的興趣，這些人類從來沒有接觸過的致病菌，可以讓大批受感染者突然發(fā)病，而又無藥可醫(yī)?！窘馕觥竣?細(xì)菌武器②.細(xì)菌武器③.肉毒桿菌毒素④.乙酰膽堿⑤.天花⑥.從未接觸過18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠(yuǎn)緣雜交的不親和性細(xì)胞遺傳細(xì)胞免疫、19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現(xiàn)配現(xiàn)用20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺21、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒岣逿4溶菌酶的耐熱性。這項(xiàng)技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共3題，共30分)22、B【分析】【詳解】

理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，正確的做法是趨利避害，而不能因噎廢食，所以本題錯(cuò)誤。23、B【分析】【詳解】

植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)，最終獲得了完整的植株，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，而植物細(xì)胞培養(yǎng)的目的使獲得大量的植物細(xì)胞，從而獲得次生代謝物，利用的原理是細(xì)胞增殖，故錯(cuò)誤。24、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級結(jié)構(gòu)，而這種高級結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜，并且蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)具有多樣性，這也在一定程度上增加了蛋白質(zhì)工程的難度，故說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共28分)25、略

【分析】【分析】

醋酸菌是好氧性細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷８榈闹谱骼玫奈⑸镏饕敲?，多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，這些小分子物質(zhì)有利于人體的消化和吸收。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次發(fā)酵保存下來的發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵；制作食品的技術(shù)；一般不需要嚴(yán)格滅菌。

（2）原漿醋中含有發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的醋酸菌；加入原漿醋的目的是接種更多的醋酸菌，加入糖并經(jīng)常開蓋換氣的目的是保證糖源；氧氣都充足，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌適宜的發(fā)酵溫度為30~35℃，故保溫箱溫度應(yīng)保持在30~35℃。

（3）腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉；毛霉屬于真核生物，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，這些小分子物質(zhì)有利于人體的消化和吸收。①將白蘿卜切成小塊可以擴(kuò)大白蘿卜與腌料的接觸面積，縮短腌制時(shí)間，①正確；②用沸水短時(shí)處理，可抑制某些微生物的繁殖，提高泡菜品質(zhì)，也可縮短腌制時(shí)間，②正確；③泡菜汁中含有一定量的發(fā)酵菌種，所以在腌制過程中，加入一些已經(jīng)腌制過泡菜汁可縮短腌制時(shí)間，③正確；④泡菜制作所需菌種為乳酸菌，制作過程中應(yīng)保持無氧環(huán)境，向容器中通入無菌空氣不利于腌制，④錯(cuò)誤；綜上分析，①②③操作能達(dá)到縮短腌制時(shí)間。

（4）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌；首先對經(jīng)多次發(fā)酵的泡菜汁進(jìn)行過濾，然后取濾液用無菌水進(jìn)行稀釋，再用涂布分離的方法在特定的熱選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選乳酸菌。

【點(diǎn)睛】

本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用，意在考查考生對發(fā)酵原理、發(fā)酵過程的識記和應(yīng)用能力?！窘馕觥课⑸锎姿峋窃?、氧氣30~35毛霉真核小分子肽和氨基酸甘油和脂肪酸①②③稀釋選擇26、略

【分析】【分析】

1；選擇培養(yǎng)基：人為提供有利于目的菌株生長的條件；同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基。

2；根據(jù)題意分析；金黃色葡萄球菌可破壞哥倫比亞血平板上菌落周圍的紅細(xì)胞，產(chǎn)生透明的溶血圈。

【詳解】

（1）金黃色葡萄球菌具耐高鹽的特性；可用7.5％NaCl（高鹽）肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，可進(jìn)一步提高金黃色葡萄球菌的濃度。

（2）振蕩培養(yǎng)的目的是使微生物與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，增加O2濃度；更有利于微生物生長。

（3）因?yàn)闊o菌脫纖維羊血上有紅細(xì)胞；而高溫會破壞紅細(xì)胞。故添加無菌脫纖維羊血是在高壓蒸汽滅菌之后。

（4）根據(jù)圖中最右邊的圖示可知；接種方法是平板劃線法。已知金黃色葡萄球菌可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，產(chǎn)生透明的溶血圈。故若要初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，則血平板上要均出現(xiàn)周圍出現(xiàn)透明溶血圈的菌落。本實(shí)驗(yàn)缺乏對照組，實(shí)驗(yàn)不完善，還需要設(shè)置不加（鮮）牛奶但其他操作和培養(yǎng)條件均相同的對照組。

【點(diǎn)睛】

本題旨在考查學(xué)生理解選擇培養(yǎng)基的原理和應(yīng)用、平板劃線法的使用要點(diǎn)，把握知識的內(nèi)在聯(lián)系并應(yīng)用相關(guān)知識綜合解決問題的能力。【解析】選擇金黃色葡萄球菌的濃度使微生物與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸/增加O2之后防止高溫破壞紅細(xì)胞平板劃線法周圍出現(xiàn)透明溶血圈設(shè)置不加（鮮）牛奶但其他操作和培養(yǎng)條件均相同的對照組27、略

【分析】【分析】

接種最常用的方法是平板劃線法和稀擇涂布平板法；接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)甚表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體菌落。

【詳解】

（1）為了觀察菌落；需用固體培養(yǎng)基，接種方法為平板劃線法或稀釋涂布平板均可，培養(yǎng)皿中均未出現(xiàn)菌落，說明未發(fā)生可遺傳變異。

（2）混合接種能形成菌落的原因是相互產(chǎn)生或創(chuàng)造了各自所需的物質(zhì)或條件；所以推測兩種菌最可能是：抗性菌增殖，降解了四環(huán)素，為營養(yǎng)菌存活提供保障；營養(yǎng)菌增殖，分解了乳糖，代謝產(chǎn)物為抗性菌生長提供營養(yǎng)所需。

（3）①由題意可知；營養(yǎng)菌只能利用乳糖，但不能降解四環(huán)素，抗性菌不能利用乳糖，但能降解四環(huán)素，故在接種了營養(yǎng)菌和抗性菌混合菌液的培養(yǎng)板，左側(cè)加入以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基，右側(cè)應(yīng)加入四環(huán)素但不含乳糖的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基可從與兩側(cè)逐漸擴(kuò)散到混合菌液培養(yǎng)板上。

②根據(jù)兩種菌能實(shí)現(xiàn)了“互利共生”，左側(cè)添加以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基后營養(yǎng)菌和抗性菌都能生長。右側(cè)加入含四環(huán)素的培養(yǎng)基，因沒有碳源則兩種菌都不能生長?！窘馕觥?1)（稀釋）涂布平板或平板劃線固體未發(fā)生。

(2)降解了四環(huán)素分解了乳糖。

(3)四環(huán)素但不含乳糖營養(yǎng)菌和抗性菌都能生長兩種菌都不能生長28、略

【分析】【分析】

1、微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法

①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；

②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；

③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)；為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。

(1)

取附著在手機(jī)上細(xì)菌進(jìn)行取樣培養(yǎng)后；對菌液進(jìn)行系列梯度稀釋的目的是將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，進(jìn)而獲得單個(gè)的菌落。

(2)

A平板上生長的菌落有多種形態(tài)；說明附著在手機(jī)細(xì)菌種類較多。牛肉膏；蛋白胨提供的主要營養(yǎng)是氮源、維生素和生長因子。培養(yǎng)基乙含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽這幾類營養(yǎng)物質(zhì)，且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到實(shí)驗(yàn)效果；培養(yǎng)基甲不含蛋白胨（氮源），菌落無法在該培養(yǎng)基上生長；培養(yǎng)基丙不含凝固劑（瓊脂），無法形成固體培養(yǎng)基，無法在培養(yǎng)基表面形成菌落。檢測培養(yǎng)基A制備是否合格，可將培養(yǎng)基置于適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測其是否雜菌生成。

(3)

伊紅為酸性染料；美藍(lán)為堿性染料。當(dāng)大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸時(shí)細(xì)菌帶正電荷被染成紅色，再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落，并帶有綠色金屬光澤。由圖可知3號菌落為大腸桿菌菌落。

(4)

采用平板劃線法接種培養(yǎng)一段時(shí)間后；發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域上都不間斷長滿菌落，第二劃線區(qū)域幾乎無菌落，原因可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻就劃線或未從第一區(qū)域末端開始劃線。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記微生物接種的方法、菌落計(jì)數(shù)、以及菌種保存等知識，意在考查考生對基礎(chǔ)知識的掌握和靈活運(yùn)用基礎(chǔ)知識的能力。【解析】(1)將微生物分散成單個(gè)細(xì)胞；進(jìn)而獲得單個(gè)的菌落。

(2)多乙培養(yǎng)基乙含有碳源；氮源、水、無機(jī)鹽這幾類營養(yǎng)物質(zhì)；且加入了瓊脂作為凝固劑，可以達(dá)到實(shí)驗(yàn)效果將培養(yǎng)基置于適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測其是否雜菌生成。

(3)3

(4)第一次劃線后接種環(huán)灼燒后沒有冷卻；未從第一次劃線區(qū)開始劃線六、綜合題(共3題，共9分)29、略

【分析】【分析】

1；基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等：

（1）啟動子在基因的首段；它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；

（2）終止子在基因的尾端；它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；

（3）標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選；標(biāo)記基因可以是多種抗性基因。

2；PCR技術(shù)基本反應(yīng)步驟：變性、復(fù)性、延伸。

3；在基因表達(dá)載體構(gòu)建過程中；為了避免目的基因和運(yùn)載體自身環(huán)化以及目的基因與運(yùn)載體反方向連接，一般用不同的限制酶對目的基因和運(yùn)載體進(jìn)行切割，即雙酶切割；然后再利用DNA連接酶將兩部分末端的序列進(jìn)行連接。

【詳解】

（1）質(zhì)粒能自我復(fù)制；并可以在細(xì)菌細(xì)胞間轉(zhuǎn)移，所以質(zhì)?？梢宰鳛榛蜣D(zhuǎn)移的一種運(yùn)載工具。

（2）目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因；也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。PCR技術(shù)一般由變性；復(fù)性、延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。

（3）作為基因表達(dá)載體除了需要有復(fù)制原點(diǎn)；標(biāo)記基因、目的基因外；還需要具有啟動子和終止子，以便目的基因表達(dá)。在基因表達(dá)載體構(gòu)建過程中，為了避免目的基因和運(yùn)載體自身環(huán)化以及目的基因與運(yùn)載體反方向連接，一般用不同的限制酶對目的基因和運(yùn)載體進(jìn)行切割，即雙酶切割；然后再利用DNA連接酶將兩部分末端的序列進(jìn)行連接，所以為了避免目的基因的自身環(huán)化，構(gòu)建基因表達(dá)載體A的主要實(shí)驗(yàn)步驟為用MstI和BgII雙酶切pUC質(zhì)粒載體，與用MstI和BgII雙酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)。

（4）根據(jù)題干“目的基因插入到Amp'或LacZ'中均會導(dǎo)致相應(yīng)基因失活”和藍(lán)白斑法的機(jī)制可知；科研人員利用LacZ'基因與目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體A，目的基因插入LacZ'基因中，導(dǎo)致LacZ'基因失活，Amp'基因正常表達(dá)，所以轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌能對氨芐青霉素具有抗性，且使菌落呈現(xiàn)白色，如果目的基因若不是于LacZ'基因結(jié)合，則該基因會表達(dá)，位置結(jié)合不對的重組質(zhì)粒就會使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色。所以需要加入氨芐青霉素；IPTG和X-gal篩選出轉(zhuǎn)化成功的含有重組質(zhì)粒（基因表達(dá)載體A）大腸桿菌。

【點(diǎn)睛】

該題需要掌握PCR技術(shù)的基本步驟、基因載體需要滿足的條件，以及對題干信息（如藍(lán)白斑法）作出正確的分析。【解析】基因轉(zhuǎn)移調(diào)控作用變性→復(fù)性（退火）→延伸啟動子和終止子用MstI和BgII雙酶切pUC質(zhì)粒載體，與用MstI和Bg