2025年北師大版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年北師大版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下圖是某同學(xué)設(shè)計(jì)的桑葚果實(shí)加工流程；相關(guān)敘述正確的是（）

A.a過(guò)程可用果膠酶處理以提高出汁率B.b過(guò)程桑葚汁要裝滿發(fā)酵瓶，造成無(wú)氧環(huán)境，有利于酒精發(fā)酵C.b過(guò)程每隔一段時(shí)間要敞開(kāi)發(fā)酵瓶一次，放出CO2D.c過(guò)程所需要的最適發(fā)酵溫度比b過(guò)程低2、將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來(lái)組成一個(gè)融合基因，再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是（）A.追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過(guò)程B.追蹤目的基因插入到染色體上的位置C.追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的分布D.顯示目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)3、CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1．6~5倍，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱?？茖W(xué)家推測(cè)，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列錯(cuò)誤的是（）

A.多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多已免疫的B淋巴細(xì)胞B.經(jīng)多次篩選可得到既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47抗體的細(xì)胞C.實(shí)驗(yàn)組中巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系需放入CO2培養(yǎng)箱D.對(duì)照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于實(shí)驗(yàn)組可驗(yàn)證上述推測(cè)4、2018年中國(guó)科研團(tuán)隊(duì)利用一只流產(chǎn)的雌性獼猴胚胎的成纖維細(xì)胞經(jīng)克隆得到一對(duì)克隆猴“姐妹花”，它們的誕生具有重大意義。其中幾個(gè)關(guān)鍵的技術(shù)創(chuàng)新與突破有：①在將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞前用滅活的病毒短暫處理；②通過(guò)反復(fù)試驗(yàn)，可以在10秒之內(nèi)對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行去核操作，在15秒之內(nèi)將供體細(xì)胞注入到去核的卵母細(xì)胞里；③將組蛋白去甲基化酶的mRNA和組蛋白脫乙酰酶抑制劑注入重構(gòu)胚。以下相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.用滅活的病毒處理供體細(xì)胞的目的是促進(jìn)兩細(xì)胞融合B.克隆猴與人類遺傳背景更接近，以其為模型研發(fā)藥物可有效縮短藥物研發(fā)進(jìn)程C.組蛋白去甲基化有利于基因的表達(dá)從而促進(jìn)重構(gòu)胚的發(fā)育D.胚胎移植時(shí)進(jìn)行同期發(fā)情處理，目的是降低代孕母猴對(duì)克隆猴“姐妹花”的免疫排斥反應(yīng)5、甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質(zhì)；將甜蛋白基因?qū)敕芽商岣叻烟鹞?，改善番茄品質(zhì)。下圖是甜蛋白基因和Ti質(zhì)粒上限制酶切割位點(diǎn)示意圖。下列敘述正確的是（）

A.可使用XbaⅠ和HindⅢ處理切割甜蛋白基因和Ti質(zhì)粒B.可使用XbaⅠ和EcoRⅠ處理切割甜蛋白基因和Ti質(zhì)粒C.啟動(dòng)子能被DNA聚合酶識(shí)別，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄D.重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后，受體細(xì)胞能合成卡那霉素6、T4溶菌酶在高溫時(shí)易失去活性。研究人員對(duì)編碼T4溶菌酶的基因進(jìn)行改造，使T4溶菌酶第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼幔摪腚装彼崤c第97位的半胱氨酸之間形成一個(gè)二硫鍵，提高了酶的耐熱性。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.T4溶菌酶耐熱性提高的原因是組成該酶的氨基酸種類和數(shù)量發(fā)生了改變B.T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程，自然界中的酶都可通過(guò)蛋白質(zhì)工程進(jìn)行改造C.蛋白質(zhì)工程與中心法則的流動(dòng)方向一致，即DNA→mRNA→蛋白質(zhì)D.若高溫使蛋白質(zhì)分子的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，蛋白質(zhì)的功能也會(huì)受到影響評(píng)卷人得分二、多選題(共5題，共10分)7、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物精子、卵子的發(fā)生及受精作用的敘述，正確的是（）A.卵細(xì)胞膜反應(yīng)是防止多精入卵的一道屏障B.卵子形成的過(guò)程需在卵巢和輸卵管內(nèi)完成C.卵子發(fā)生時(shí)，MⅠ和MⅡ過(guò)程是不連續(xù)的，但細(xì)胞質(zhì)均等分配D.精子和卵子結(jié)合的過(guò)程中，卵子完成減數(shù)第二次分裂8、下列關(guān)于生物技術(shù)的安全性及倫理問(wèn)題的觀點(diǎn)，錯(cuò)誤的是（）A.應(yīng)嚴(yán)格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因，避免產(chǎn)生對(duì)人類有害的物質(zhì)B.當(dāng)今社會(huì)的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn)，反對(duì)治療性克隆C.反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是因?yàn)樵嚬軏雰杭夹g(shù)屬于無(wú)性繁殖方式D.生物武器具有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn)，應(yīng)嚴(yán)格禁止9、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問(wèn)題的觀點(diǎn)，正確的是（）A.利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎的性別，設(shè)計(jì)試管嬰兒B.基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題C.運(yùn)用試管嬰兒技術(shù)解決不孕問(wèn)題D.大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交10、人群中有部分人體內(nèi)缺乏乳糖分解酶,飲用鮮牛奶后會(huì)導(dǎo)致腸胃不適；消化不良?！暗腿樘悄膛！钡恼Q生,有望給患有“乳糖不耐癥”的人群提供“放心奶”。如圖是“低乳糖奶牛”的培育過(guò)程,相關(guān)敘述不正確的是（）

A.犢牛的性狀和黑白花奶牛的性狀完全一致B.卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到MⅡ期然后用離心法去核C.犢牛的出生體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性D.體細(xì)胞核移植技術(shù)可用于人類組織器官的移植和保護(hù)瀕危動(dòng)物11、圖甲為培育轉(zhuǎn)基因生物時(shí)選用的載體，圖乙是含有目的基因的一段DNA序列，圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.若通過(guò)PCR技術(shù)提取該目的基因，應(yīng)該選用引物a和引物cB.構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)應(yīng)選用BamHⅠ和HindⅡ這兩種限制酶C.圖乙中一個(gè)DNA分子在PCR儀中經(jīng)過(guò)四輪復(fù)制得到所需目的基因的分子數(shù)為8個(gè)D.只利用含四環(huán)素的培養(yǎng)基就可以直接篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的受體細(xì)胞評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)12、平板劃線法是通過(guò)____________在_______________培養(yǎng)基表面______________的操作，將__________的菌種______________分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由____________繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的_______________，這就是_______________________。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的______________，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到_____________培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成____________，從而能在培養(yǎng)基表面形成___________________。13、請(qǐng)回答下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題：

（1）一些持支持態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為，由于不同物種間存在__________，同時(shí)花粉的傳播距離和__________有限；轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物很難與其它植物雜交，因而不大可能對(duì)生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過(guò)程中，絕大多數(shù)科學(xué)家都能自覺(jué)遵守科學(xué)研究道德。例如，把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有___________的生物上；對(duì)外源DNA進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免能夠表達(dá)出對(duì)人體有毒性或過(guò)敏的___________．

（3）一些持反對(duì)態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為，由于克隆技術(shù)尚不成熟，現(xiàn)在就做克隆人很可能孕育出有嚴(yán)重缺陷的孩子。但是支持克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為，一些技術(shù)問(wèn)題可以通過(guò)胚胎分級(jí)、______和__________等方法得到解決。

（4）對(duì)于克隆技術(shù)，中國(guó)政府的態(tài)度是___________．但不反對(duì)___________。14、本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進(jìn)行________的測(cè)定。15、纖維素酶是一種__________，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即__________、___________和_______________，前兩種酶使纖維素分解成___________，第三種酶將纖維二糖分解成_____________。正是在這三種酶的協(xié)同作用下，纖維素最終被__________成葡萄糖，為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)，同樣，也可以為人類所利用。16、統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_____________。這是因?yàn)開(kāi)_____________________。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來(lái)表示。除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。17、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的______——“分子運(yùn)輸車”18、生物數(shù)據(jù)庫(kù)的知識(shí)與正在迅猛發(fā)展的生物信息學(xué)有關(guān)。什么是生物信息學(xué)________？19、應(yīng)用分析與比較的方法，對(duì)生殖性克隆與治療性克隆進(jìn)行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項(xiàng)目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共20分)20、某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基；成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題。

（1）培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是__________，這種培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。

（2）“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源是來(lái)自培養(yǎng)基中的__________。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌”呼吸作用的類型是__________。

（3）在上述實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是__________。

（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時(shí)，常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種，此過(guò)程中所用的接種工具是__________，操作時(shí)采用__________滅菌的方法。

（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉，這樣做的目的是____________________。

（6）某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用104、105、106倍稀釋液進(jìn)行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿。從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對(duì)照實(shí)驗(yàn)是__________，此對(duì)照實(shí)驗(yàn)的目的是____________________。21、硝酸鹽是植物主要的氮肥形式；植物能感知硝酸鹽并快速誘導(dǎo)基因表達(dá)，調(diào)控生長(zhǎng)發(fā)育。為了研究植物如何感知硝酸鹽，科學(xué)家進(jìn)行了相關(guān)研究。

(1)植物吸收氮元素后可以用于合成__________等組成生物大分子的單體。

(2)細(xì)胞膜上的C蛋白一直被認(rèn)為能夠感受和轉(zhuǎn)運(yùn)硝酸鹽。在以硝酸鹽為唯一氮源的培養(yǎng)基上，同時(shí)培養(yǎng)野生型、C基因缺失突變體和N基因缺失突變體擬南芥，結(jié)果如下圖。研究者認(rèn)為N蛋白更可能是硝酸鹽的受體，而C蛋白不是，作出此判斷的依據(jù)是__________。

(3)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，N蛋白可以直接結(jié)合硝酸鹽，之后會(huì)引起N蛋白__________的改變，使N蛋白兩端相互靠近，從而激活其轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能，通過(guò)__________進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)調(diào)節(jié)相關(guān)基因表達(dá)。

(4)利用N蛋白與硝酸鹽結(jié)合的特點(diǎn)；研究者通過(guò)基因工程將黃色熒光蛋白基因切成兩半分別連接到N基因的兩端，轉(zhuǎn)入野生型擬南芥，試圖構(gòu)建一個(gè)結(jié)合硝酸鹽后可以發(fā)出熒光的硝酸鹽感受器。

①請(qǐng)以擬南芥為材料設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)該感受器是否構(gòu)建成功。_____

②在實(shí)際生產(chǎn)中，為提高作物產(chǎn)量經(jīng)常過(guò)量使用氮肥，因此會(huì)對(duì)生態(tài)環(huán)境造成破壞。請(qǐng)從可持續(xù)發(fā)展角度分析該硝酸鹽感受器的應(yīng)用價(jià)值。_____22、干燥綜合征（SS）是臨床常見(jiàn)的一種自身免疫?。换颊哐逯写嬖诙喾N抗體，其中以SSB抗體特異性最強(qiáng)。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫的過(guò)程。回答下列問(wèn)題：

(1)利用RNA通過(guò)①過(guò)程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。為了針對(duì)性獲得cDNA，應(yīng)如何設(shè)計(jì)逆轉(zhuǎn)錄第一步時(shí)的DNA引物______，設(shè)計(jì)引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)，應(yīng)在相應(yīng)引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點(diǎn)。

(3)③過(guò)程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。23、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應(yīng)性強(qiáng)，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶基因（DGAT1）與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達(dá)載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻，主要研究過(guò)程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因?yàn)橐罁?jù)設(shè)計(jì)的一對(duì)引物，1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

(1)過(guò)程①中需要的酶有____________，過(guò)程②應(yīng)選用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因時(shí)，將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點(diǎn)有____________。

①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達(dá)④方便取用。

(3)過(guò)程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌通過(guò)____________（方法）接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有____________。

(4)為檢測(cè)表達(dá)載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達(dá)，研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完成下表。實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)要操作過(guò)程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察其生長(zhǎng)情況②____________在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個(gè)單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號(hào)備用PCR驗(yàn)證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，進(jìn)行PCR驗(yàn)證，未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對(duì)照油脂含量測(cè)定利用索氏抽提法分別測(cè)定③____________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計(jì)并比較PCR驗(yàn)證結(jié)果及藻體中油脂的含量評(píng)卷人得分五、綜合題(共1題，共7分)24、近年來(lái)；《舌尖上的中國(guó)》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中不乏利用微生物發(fā)酵制作的美食，如素有“東方奶酪”之稱的“石寶寨牌”忠州豆腐乳；中國(guó)泡菜領(lǐng)導(dǎo)品牌“吉香居”等。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題。

（1）我國(guó)釀醋的歷史悠久；其主要生產(chǎn)工藝流程如圖。

在果酒制作時(shí)，酒精發(fā)酵階段，參與反應(yīng)的酵母菌菌種來(lái)自于葡萄皮上的野生型酵母菌，在___________________的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。當(dāng)氧氣和糖源充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將__________________________________。

（2）制作吉香居泡菜時(shí)，起主要作用的微生物是____________．泡菜制作中鹽和水的比例是_____。泡菜中的亞硝酸鹽過(guò)多會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害，通常用________法檢測(cè)亞硝酸鹽含量。

（3）“石寶寨牌”忠州豆腐乳前期發(fā)酵是在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下溫度應(yīng)控制在___________，并保持一定的濕度，然后向長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用_______________，同時(shí)，鹽還能____________，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。之后要加入配置好的鹵湯，其中鹵湯中加酒的含量應(yīng)控制在12%左右。酒精含量過(guò)高，_____________；酒精含量過(guò)低，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、A【分析】【分析】

果酒和果醋制作過(guò)程中的相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作：

（1）材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄；榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗，除去枝梗。

（2）滅菌：①榨汁機(jī)要清洗干凈；并晾干。②發(fā)酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機(jī)榨取葡萄汁。

（4）發(fā)酵：①將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶；要留要大約13的空間，并封閉充氣口。②制葡萄酒的過(guò)程中，將溫度嚴(yán)格控制在18℃～25℃，時(shí)間控制在10～12d左右，可通過(guò)出料口對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行。及時(shí)的監(jiān)測(cè)。③制葡萄醋的過(guò)程中，將溫度嚴(yán)格控制在30℃～35℃，時(shí)間控制在前7～8d左右，并注意適時(shí)通過(guò)充氣口充氣。

【詳解】

A；植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠；果膠酶能破壞細(xì)胞壁，提高出汁率，A正確；

B、b過(guò)程桑葚汁不能裝滿發(fā)酵瓶；要留有1/3的空間，B錯(cuò)誤；

C、b過(guò)程發(fā)酵過(guò)程會(huì)產(chǎn)生氣體，每隔一段時(shí)間要擰松瓶蓋一次（不能敞開(kāi)發(fā)酵瓶），放出CO2；C錯(cuò)誤；

D、c過(guò)程所需要的最適發(fā)酵溫度（30～35℃）比b過(guò)程（最適發(fā)酵溫度為18～25℃）高；D錯(cuò)誤。

故選A。

【點(diǎn)睛】2、C【分析】【分析】

解答本題的關(guān)鍵是明確“只有目的基因表達(dá)形成的蛋白質(zhì)才能發(fā)出綠色熒光”；再據(jù)此分析各選項(xiàng)。

【詳解】

A；只有目的基因表達(dá)形成的蛋白質(zhì)才能發(fā)出綠色熒光；因此不能追蹤目的基因在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制過(guò)程，A錯(cuò)誤；

B；只有目的基因表達(dá)形成的蛋白質(zhì)才能發(fā)出綠色熒光；因此不能追蹤目的基因插入到染色體上的位置，B錯(cuò)誤；

C；目的基因表達(dá)的蛋白質(zhì)帶有綠色熒光；這樣可以追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布，C正確；

D；只能追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的分布；不能追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，D錯(cuò)誤。

故選C。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟，了解基因工程技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合題中信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。3、D【分析】【分析】

單克隆抗體制備過(guò)程需要用到動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)；該過(guò)程中需要對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行兩次篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

單克隆抗體特異性強(qiáng)；靈敏度高；并能大量制備。

【詳解】

A；由圖可知；①過(guò)程為用CD47免疫小鼠，此過(guò)程需要多次進(jìn)行，目的是使小鼠產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；經(jīng)多次篩選得到的雜交瘤細(xì)胞即具有B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗CD47抗體的特性；又具有骨髓瘤細(xì)胞能大量增殖的特性，B正確；

C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要放到含95%空氣和5%CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；C正確；

D；由題干“抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用”可知；若實(shí)驗(yàn)組中抗CD47的單克隆抗體與腫瘤細(xì)胞表面的CD47結(jié)合，從而解除了CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，最終導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的吞噬指數(shù)高于對(duì)照組，才可以驗(yàn)證科學(xué)家們推測(cè)，D錯(cuò)誤。

故選D。4、D【分析】【分析】

克隆過(guò)程（核移植）中一般利用未受精的去核卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞；原因是卵細(xì)胞體積大，易操作，營(yíng)養(yǎng)豐富，未受精的卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有激活體細(xì)胞的細(xì)胞核全能性的物質(zhì)。對(duì)供體注射促性腺激素可以促進(jìn)其超數(shù)排卵，獲得更多的卵母細(xì)胞；受體卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進(jìn)行核移植。

【詳解】

A；誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法之一是滅活病毒誘導(dǎo)法；可見(jiàn)，用滅活的病毒處理供體細(xì)胞的目的是促進(jìn)兩細(xì)胞融合，A正確；

B；克隆猴是非人靈長(zhǎng)類；與人類親緣關(guān)系非常接近，研發(fā)出的藥物用于人類患者出現(xiàn)無(wú)效或副作用的幾率大大降低，可有效縮短藥物研發(fā)進(jìn)程，B正確；

C；題干中“將組蛋白去甲基化酶的mRNA和組蛋白脫乙酰酶抑制劑注入重構(gòu)胚”；說(shuō)明降低組蛋白的甲基化水平，提高組蛋白的乙?；?，從而激活重構(gòu)胚的發(fā)育，C正確；

D；胚胎移植時(shí)進(jìn)行同期發(fā)情處理；是為胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境，此時(shí)代孕母猴對(duì)外來(lái)胚胎基本不存在免疫排斥，D錯(cuò)誤。

故選D。5、A【分析】【分析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

選擇合適的限制酶對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割的原則：①不能破壞目的基因②不能破壞所有的抗性基因（至少保留一個(gè)）③最好選擇兩種限制酶分別切割質(zhì)粒和目的基因；防止目的基因和質(zhì)粒反向連接，同時(shí)要防止目的基因自身環(huán)化和質(zhì)粒的自身環(huán)化。

【詳解】

A、目的基因內(nèi)有BamHⅠ識(shí)別序列，因此不能選擇BamHⅠ切割目的基因，因此目的基因左側(cè)應(yīng)選擇限制酶XbaⅠ切割，由目的基因的轉(zhuǎn)錄方向可以推測(cè)，目的基因右側(cè)應(yīng)選擇靠近終止子的限制酶HindⅢ，而不能選擇靠近啟動(dòng)子的EcoRⅠ，因此需要用XbaⅠ和HindⅢ處理切割甜蛋白基因和Ti質(zhì)粒；A正確；

B、若用XbaⅠ和EcoRⅠ處理切割甜蛋白基因；則目的基因與質(zhì)粒會(huì)發(fā)生反向連接，不能正常按轉(zhuǎn)錄方向轉(zhuǎn)錄，B錯(cuò)誤；

C；啟動(dòng)子能被RNA聚合酶識(shí)別；啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，C錯(cuò)誤；

D；重組質(zhì)粒中含有的是卡那霉素抗性基因；不是卡那霉素合成基因，不能合成卡那霉素，D錯(cuò)誤。

故選A。6、D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期蛋白質(zhì)的功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。

【詳解】

由題意可知，T4溶菌酶耐熱性提高的原因是組成該酶的氨基酸種類及空間結(jié)構(gòu)均發(fā)生了改變，A錯(cuò)誤；T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程，酶大多是蛋白質(zhì)，少數(shù)是RNA，蛋白質(zhì)工程只能用于改造蛋白質(zhì)類，B錯(cuò)誤；蛋白質(zhì)工程與中心法則的流動(dòng)方向相反，C錯(cuò)誤；若高溫使蛋白質(zhì)分子的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，蛋白質(zhì)的功能也會(huì)受到影響，D正確。故選D。二、多選題(共5題，共10分)7、B:D【分析】【分析】

1；受精階段主要包括：精子穿越放射冠和透明帶；進(jìn)入卵細(xì)胞膜，原核形成和配子結(jié)合。

2；阻止多精入卵的兩道屏障：透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)。

3；多數(shù)哺乳動(dòng)物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的；場(chǎng)所在卵巢。MⅡ是在受精過(guò)程中完成的，場(chǎng)所在輸卵管中。

【詳解】

A；透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障；A錯(cuò)誤；

B；卵子形成時(shí)的減數(shù)第一次分裂過(guò)程在卵巢內(nèi)完成；減數(shù)第二次分裂過(guò)程在輸卵管完成，B正確；

C；卵子發(fā)生時(shí)；MⅠ和MⅡ過(guò)程是不連續(xù)的，初級(jí)卵母細(xì)胞和次級(jí)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)不均等分配，C錯(cuò)誤；

D；精子和卵子結(jié)合的過(guò)程中；卵子完成減數(shù)第二次分裂，形成雌原核，并排出第二極體，D正確。

故選BD。8、B:C【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

2；生物武器的特點(diǎn)：?jiǎn)挝幻娣e效應(yīng)大；有特定的傷害對(duì)象；具有傳染性；危害時(shí)間久；不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；使用者本身易受傷害；生物武器造價(jià)低；技術(shù)難度不大，隱秘性強(qiáng)，可以在任何地方研制和生產(chǎn)。

【詳解】

A；嚴(yán)格選擇轉(zhuǎn)基因植物的目的基因；可避免產(chǎn)生對(duì)人類有害的物質(zhì)，減少人們對(duì)轉(zhuǎn)基因食物安全的擔(dān)憂，A正確；

B；當(dāng)今社會(huì)的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn)；反對(duì)生殖性克隆，但是不反對(duì)治療性克隆，B錯(cuò)誤；

C；試管嬰兒技術(shù)利用了體外受精技術(shù)；屬于有性繁殖，試管嬰兒可以設(shè)計(jì)嬰兒的性別，反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒，C錯(cuò)誤；

D；生物武器是指有意識(shí)的利用微生物、毒素、昆蟲(chóng)侵襲敵人的軍隊(duì)、人口、農(nóng)作物或者牲畜等目標(biāo)；以達(dá)到戰(zhàn)爭(zhēng)目的一類武器，有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn)，應(yīng)嚴(yán)格禁止，D正確。

故選BC。9、B:C【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全(滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變)、生物安全(對(duì)生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)。

【詳解】

A；設(shè)計(jì)試管嬰兒；會(huì)引起性別失調(diào)，違背倫理道德，我國(guó)不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎的性別，A錯(cuò)誤；

B；應(yīng)基于科學(xué)和理性討論轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題；B正確；

C；運(yùn)用試管嬰兒技術(shù)可以解決不孕問(wèn)題；C正確；

D；大量引入國(guó)外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交；可能造成基因污染和環(huán)境安全，D錯(cuò)誤。

故選BC。10、A:B【分析】分析題圖：圖示為“低乳糖奶?！钡呐嘤^(guò)程；首先采用基因工程技術(shù)將“乳糖分解酶基因”導(dǎo)入受體細(xì)胞，再采用核移植技術(shù)；早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；犢牛的細(xì)胞核基因來(lái)自黑白花奶牛；但其細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自卵母細(xì)胞，因此其性狀與黑白花奶牛的性狀不完全一致，A錯(cuò)誤；

B；核移植的受體細(xì)胞一般選用MⅡ期卵母細(xì)胞；進(jìn)行去核時(shí)，通過(guò)顯微操作去除卵母細(xì)胞中的核，用微型吸管可一并吸出細(xì)胞核與第一極體，B錯(cuò)誤；

C；犢牛的出生屬于細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用；體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，C正確；

D；體細(xì)胞核移植技術(shù)可用于人類組織器官的移植和保護(hù)瀕危動(dòng)物；D正確。

故選AB。

【點(diǎn)睛】11、B:D【分析】【分析】

分析題圖：構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)；不能選用限制酶BamHⅠ，否則會(huì)導(dǎo)致兩種抗性基因都被破壞，因此應(yīng)該選擇Bc1I和HindⅢ這兩種限制酶，根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c。

【詳解】

A；PCR技術(shù)要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結(jié)合；根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c，A正確；

B；根據(jù)圖甲可知；BamHⅠ會(huì)導(dǎo)致兩種抗性基因都被破壞，同時(shí)為防止目的基因自身環(huán)化，因此只能選BclI和HindⅢ兩種限制酶切割，B錯(cuò)誤；

C；圖乙中一個(gè)DNA分子在PCR儀中經(jīng)過(guò)四輪復(fù)制可得到16個(gè)DNA片段；其中所需目的基因的分子數(shù)為8個(gè)，C正確；

D；由于選擇BclI和HindⅢ這兩種限制酶；破壞了氨芐青霉素抗性基因，但沒(méi)有破壞四環(huán)素抗性基因，因此應(yīng)該先用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出含有基因表達(dá)載體和普通質(zhì)粒的大腸桿菌，再用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基加氨芐青霉素含普通質(zhì)粒的大腸桿菌能生存，而含重組質(zhì)粒的不能生存，從而篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的受體細(xì)胞，D錯(cuò)誤。

故選BD。三、填空題(共8題，共16分)12、略

【解析】①.接種環(huán)②.瓊脂固體③.連續(xù)劃線④.聚集⑤.逐步稀釋⑥.一個(gè)細(xì)胞⑦.子細(xì)胞群體⑧.菌落⑨.梯度稀釋⑩.瓊脂固體?.單個(gè)細(xì)胞?.單個(gè)的菌落13、略

【分析】1；試管嬰兒技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過(guò)體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

3；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；生物安全主要是指轉(zhuǎn)基因生物釋放到環(huán)境中，可能會(huì)對(duì)生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險(xiǎn)和威脅。

【詳解】

（1）一些持支持態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為；由于不同物種間存在生殖隔離，同時(shí)花粉的傳播距離和存活時(shí)間有限，不會(huì)造成轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物與其它植物的雜交，因而也不太可能對(duì)生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過(guò)程中；為保證轉(zhuǎn)基因生物的安全，要把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有特定缺陷的生物上；對(duì)外源DNA進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免能夠表達(dá)出對(duì)人體有毒性或過(guò)敏的蛋白質(zhì)等等。

（3）堅(jiān)持克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為；一些技術(shù)問(wèn)題可以通過(guò)胚胎分級(jí)；基因診斷和染色體檢查等方法得到解決。

（4）中國(guó)政府對(duì)于克隆技術(shù)的態(tài)度是禁止生殖性克??；但不反對(duì)治療性克隆。

【點(diǎn)睛】

本題難度一般，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的要求，結(jié)合基因工程的應(yīng)用，綜合考查了基因工程、試管嬰兒和轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題，并且深入考查了相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)，要求考生能夠構(gòu)建一定的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)．面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食?！窘馕觥竣?生殖隔離②.存活時(shí)間③.特定缺陷④.蛋白質(zhì)⑤.基因診斷⑥.染色體檢查⑦.禁止生殖性克隆人⑧.治療性克隆14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】復(fù)合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖水解16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落菌落數(shù)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】載體18、略

【分析】【詳解】

生物信息學(xué)是研究生物信息的采集、處理、存儲(chǔ)、傳播,分析和解釋等各方面的學(xué)科，也是隨著生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的迅猛發(fā)展，生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)相結(jié)合形成的一門(mén)新學(xué)科，生物信息學(xué)主要是核酸和蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)處理和分析?！窘馕觥可镄畔W(xué)是研究生物信息的采集、處理、存儲(chǔ)、傳播,分析和解釋等各方面的學(xué)科，也是隨著生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的迅猛發(fā)展，生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)相結(jié)合形成的一門(mén)新學(xué)科19、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個(gè)體的克隆性技術(shù)，其目的是用于生育，獲得人的復(fù)制品；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)，其目的是用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實(shí)現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會(huì)用到的技術(shù)有體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；治療性克隆在獲取胚胎干細(xì)胞后，根據(jù)治療目的誘導(dǎo)干細(xì)胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會(huì)應(yīng)用到的技術(shù)為干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)?！窘馕觥可承钥寺≈咐每寺〖夹g(shù)獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個(gè)體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細(xì)胞核移植技術(shù)，早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育，獲得人的復(fù)制品用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療四、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共20分)20、略

【分析】【分析】

微生物的培養(yǎng)；培養(yǎng)基的成分必須含有碳源；氮源、水和無(wú)機(jī)鹽。獲取純凈微生物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌入侵。實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。

【詳解】

（1）本實(shí)驗(yàn)是分離出降解的有機(jī)化合物A的菌種；所以培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選降解的有機(jī)化合物A的菌種，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）分析培養(yǎng)基的配方可知；該培養(yǎng)基由化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制而成，其他成分中為體現(xiàn)出提供碳源和氮源，因此化合物A為目的菌提供了碳源和氮源；在培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)該振蕩培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液中的溶氧量，故目的菌是需氧微生物，呼吸作用的類型是有氧呼吸。

（3）獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是無(wú)菌技術(shù)；防止外來(lái)雜菌入侵。

（4）平板劃線操作的工具是接種環(huán)；對(duì)于接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)該是灼燒滅菌。

（5））實(shí)驗(yàn)結(jié)束后；使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉，以殺死培養(yǎng)基上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。

（6）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過(guò)程應(yīng)遵循對(duì)照原則；該實(shí)驗(yàn)還應(yīng)增設(shè)一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對(duì)照，以證明培養(yǎng)基制備是否被雜菌污染，檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否滅菌合格。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記無(wú)菌技術(shù)操作方法及接種微生物接種常用的兩種方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題?！窘馕觥亢Y選目的菌選擇化合物A有氧呼吸防止外來(lái)雜菌入侵接種環(huán)灼燒防止造成環(huán)境污染不接種的空白培養(yǎng)基檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否滅菌合格21、略

【分析】【分析】

硝酸鹽是植物主要的氮肥形式；氮元素在細(xì)胞中主要用于合成蛋白質(zhì)；核酸等含氮有機(jī)物；植物根部以主動(dòng)運(yùn)輸?shù)姆绞轿諢o(wú)機(jī)鹽，以被動(dòng)運(yùn)輸?shù)姆绞竭\(yùn)輸吸水，如果土壤中無(wú)機(jī)鹽濃度過(guò)大，可能會(huì)造成植物根部難以吸水甚至失水死亡。

【詳解】

（1）含有氮元素的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸；它們的單體分別是氨基酸和核苷酸；

（2）C基因缺失突變體缺乏C蛋白擬南芥；N基因缺失突變體擬南芥缺乏蛋白；由圖分析可知，縱坐標(biāo)為鮮重，鮮重中含量最高的化合物為蛋白質(zhì)，鮮重的高低體現(xiàn)了擬南芥吸收氮元素的多少；相比于野生型，缺乏C蛋白的突變體氮元素吸收減少得不多，缺乏N蛋白的突變體顯著降低了氮元素的吸收，因此N蛋白更可能是硝酸鹽的受體，而C蛋白不是；

（3）N蛋白要激活其功能；需要改變空間結(jié)構(gòu)，再通過(guò)核孔（大分子進(jìn)出細(xì)胞核通過(guò)核孔）進(jìn)入細(xì)胞核行使功能；

（4）該感受器結(jié)合硝酸鹽后可以發(fā)出熒光；要檢測(cè)該感受器是否構(gòu)建成功，分別對(duì)野生型擬南芥（對(duì)照組）和轉(zhuǎn)基因擬南芥施加硝酸鹽，檢測(cè)是否發(fā)出黃色熒光；若野生型擬南芥不發(fā)黃色熒光，轉(zhuǎn)基因擬南芥發(fā)出黃色熒光說(shuō)明構(gòu)建成功；

要避免過(guò)量使用氮肥；需要獲得植物體內(nèi)硝酸鹽濃度并實(shí)時(shí)監(jiān)控，硝酸鹽不足時(shí)再施氮肥，過(guò)量使用氮肥。

【點(diǎn)睛】

本題考查細(xì)胞中有機(jī)物的組成與特點(diǎn)，考查學(xué)生探究實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)與結(jié)果分析能力。【解析】(1)氨基酸；核苷酸。

(2)相對(duì)于野生型；C基因缺失突變體生長(zhǎng)發(fā)育情況（鮮重）變化不大，而N基因缺失突變體生長(zhǎng)（鮮重）明顯受到抑制（降低）

(3)空間結(jié)構(gòu)核孔。

(4)分別對(duì)野生型擬南芥和轉(zhuǎn)基因擬南芥施加硝酸鹽，檢測(cè)是否發(fā)出黃色熒光；若野生型擬南芥不發(fā)黃色熒光，轉(zhuǎn)基因擬南芥發(fā)出黃色熒光說(shuō)明構(gòu)建成功可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)植物體內(nèi)硝酸鹽的濃度，從而降低對(duì)氮肥的依賴，以免過(guò)度施肥造成環(huán)境污染和浪費(fèi)以及影響植物生長(zhǎng)22、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個(gè)步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細(xì)胞；使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過(guò)①過(guò)程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補(bǔ)配對(duì)，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設(shè)計(jì)引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。

（2）對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)；引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開(kāi)始擴(kuò)增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會(huì)破環(huán)SSB基因，故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點(diǎn)。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，③過(guò)程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無(wú)菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理，經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。

（4）將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，如果該蛋白有抗原性，會(huì)引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體?！窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基