2025年中圖版選修3生物下冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年中圖版選修3生物下冊月考試卷988考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、用下列方法采集到的卵母細胞中，能直接與獲能精子完成受精的是（）A.用促性腺激素處理，從輸卵管中沖取到的卵母細胞B.從屠宰場已屠宰母畜的卵巢中采集到的卵母細胞C.借助內(nèi)窺鏡從活體動物的卵巢中吸取到的卵母細胞D.借助腹腔鏡從活體動物的卵巢中吸取到的卵母細胞2、在單克隆抗體制備中，關(guān)于雜交瘤細胞制備的敘述，正確的是()A.可利用電激等物理方法誘導(dǎo)動物細胞融合B.可利用細胞中染色體組數(shù)篩選出雜交瘤細胞C.利用了細胞膜的流動性和基因重組等原理D.篩選得到的雜交瘤細胞可直接用于生產(chǎn)單克隆抗體3、試管牛、試管苗和克隆羊三者均屬于生物工程技術(shù)的杰出成果，下面敘述正確的是（）A.都屬于無性生殖能保持母本性狀B.都不會發(fā)生基因重組C.都充分體現(xiàn)了體細胞的全能性D.都能實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速大量繁殖4、下列關(guān)于哺乳動物胚胎工程和細胞工程的敘述，正確的是（）A.為獲得更多的胚胎，往往采用激素注射促進雄鼠同期發(fā)情B.將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細胞即為雜交瘤細胞C.細胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常添加血清等物質(zhì)D.體外受精是指獲得能量的精子和成熟的卵細胞在相應(yīng)溶液中受精5、小鼠克隆胚胎著床后胎盤發(fā)育顯著異?？赡苁桥c克隆胚胎中H3K27me3印記基因過度表達有關(guān)，H3K27me3印記基因敲除極大提高了體細胞克隆的成功率。H3K27me3印記基因敲除的實驗組克隆小鼠的體重與受精卵來源的小鼠一致，而對照組克隆小鼠的體重顯著高于受精卵來源的小鼠；實驗組克隆小鼠的胎盤直徑和重量也顯著低于對照組克隆小鼠，而與受精卵來源的小鼠一致。相關(guān)分析正確的是（）A.克隆胚胎過大可能是克隆胚胎著床后成活率低的原因B.克隆胚胎過大的原因可能是克隆胚胎的胎盤過大C.H3K27me3印記基因過度表達抑制胎盤的發(fā)育D.H3K27me3印記基因的表達產(chǎn)物可能影響早期胚胎滋養(yǎng)層細胞的發(fā)育6、下列關(guān)于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是A.卵裂期細胞的體積隨分裂次數(shù)增加而不斷增大B.囊胚的滋養(yǎng)層細胞可發(fā)育成動物體的任何組織器官C.動物胚胎發(fā)育的早期有一段時間是在透明帶內(nèi)進行的D.培育試管嬰兒涉及體內(nèi)受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等7、如圖為某農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的模式圖；下列敘述錯誤的是（）

A.該生態(tài)工程的設(shè)計體現(xiàn)了整體性原理B.沼渣、沼液還田的主要目的是為農(nóng)作物提供有機物C.該生態(tài)工程中應(yīng)用了物質(zhì)的良性循環(huán)技術(shù)D.建立沼氣池可提高人類對光合產(chǎn)物的能量利用率評卷人得分二、填空題(共6題，共12分)8、生物學(xué)家利用基因工程技術(shù)通過生物反應(yīng)器生產(chǎn)人的血清蛋白。請根據(jù)相關(guān)知識回答下列問題：

（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是________

（3）基因工程中最常用的運載體是______

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達，說明人和牛______9、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個體，其主要步驟如圖所示。回答下列問題：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對其進行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進行步驟乙時，受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。10、基因治療：基因治療是指用正常基因_______或______患者細胞中有缺陷的基因，從而達到治療疾病的目的。11、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復(fù)后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應(yīng)的__________細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。12、下圖表示哺乳動物精子和卵細胞發(fā)生和成熟的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）③過程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來的；④過程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開始的時期是__________；雌性動物卵泡的形成的時期是__________。

（4）初級卵母細胞進行Ⅰ過程是在__________時期完成的，Ⅱ過程是在__________過程中完成的。13、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個體，其主要步驟如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對其進行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進行步驟乙時，受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。評卷人得分三、判斷題(共5題，共10分)14、一般情況下一個卵細胞只能由一個精子發(fā)生融合形成受精卵()A.正確B.錯誤15、精子入卵后形成雄原核；同時卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核()A.正確B.錯誤16、受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段，在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在子宮內(nèi)完成。（選擇性必修3P56）()A.正確B.錯誤17、下圖表示哺乳動物發(fā)育過程的幾個階段；請判斷下列題的敘述是否正確？

（_____）（1）從A到C的過程中有機物的含量減少。

（_____）（2）A；B時期胚胎中的細胞都是全能細胞。

（_____）（3）胚胎移植必須使用處于B或C時期的胚胎。

（_____）（4）圖示過程細胞通過有絲分裂增殖，遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生改變。A.正確B.錯誤18、在生態(tài)工程建設(shè)中，只能遵循“先污染、破壞、再治理”的發(fā)展思路______A.正確B.錯誤評卷人得分四、實驗題(共2題，共8分)19、研究者取野生型小鼠（I+I-）的胚胎干細胞轉(zhuǎn)入胚胎干細胞，用含新霉素抗性基因替換I+基因的外顯子2片段使其變?yōu)槭スδ艿腎-基因，再將突變的胚胎干細胞移回野生型小鼠胚胎，培育出帶突變基因（I-）的雜合子小鼠。用此雜合體小鼠與野生型小鼠進行雜交實驗，并通過DNA分子雜交技術(shù)檢測小鼠的基因型，結(jié)果如圖b。

（1）檢測小鼠的基因型；需根據(jù)______序列設(shè)計DNA分子探針。根據(jù)雜交實驗結(jié)果推測，I基因的功能是與_______有關(guān)。

（2）分析系譜圖______（能/不能）判斷I+、I-基因的顯；隱性；理由是_____________。

（3）只有突變基因來自_______（父本/母本）時；雜合子小鼠才表現(xiàn)出發(fā)育遲緩，由此推測來自______的I基因在體細胞中不表達。

（4）為驗證以上推測；提取小鼠體細胞的總RNA，檢測Actin基因（編碼細胞骨架蛋白）和新霉素基因的RNA，請將支持推測的實驗結(jié)果填入下表i；ii、iii處。（能檢測到用“+”表示，檢測不到用“-”表示）

。

野生型小鼠。

突變基因來自父本的雜合子小鼠。

突變基因來自母本的雜合子小鼠。

Actin基因的RNA

+

+

+

新霉素抗性基因的RNA

i____

ii_________

iii_________

（5）若人類的某種遺傳病以此種方式遺傳，用常規(guī)的基因診斷能否確定胎兒是否發(fā)?。咳绻苷堈f明理由；如果不能，請?zhí)岢鲆环N確診胎兒是否發(fā)病的檢測方案。_________________。20、回答下列（一）；（二）小題：

（一）科研人員從山西老陳醋的醋醅中分離出產(chǎn)酸能力強的醋桿菌；回答下列相關(guān)問題：

（1）已知溴甲酚紫pH變色范圍是5.2（黃色）～6.8（紫色）。在分離醋桿菌用的培養(yǎng)基中加入溴甲酚紫作為_______以鑒別產(chǎn)醋桿菌。配制培養(yǎng)基時，加入經(jīng)_________滅菌的乙醇，乙醇的主要作用是___________。

（2）三角瓶、試管、培養(yǎng)皿等用牛皮紙或報紙包扎好后置于高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌，要注意滅菌物品不能放太滿太擠，要留出空隙以利于______。滅菌后，通常將實驗用具放入60℃～80℃的烘箱中烘干，目的是_________。

（3）取10g山西老陳醋的醋醅等梯度稀釋，用___________取10-3、10-4、10-5稀釋度的樣品稀釋液0．1mL涂布于平板分離培養(yǎng)基上，30℃倒置培養(yǎng)48h。若要篩選產(chǎn)酸能力強的菌種，需挑選若干個___________比值大的菌落，分別用________擴增；然后離心檢測培養(yǎng)液中醋酸含量。

（二）胚胎干細胞（ES細胞）介導(dǎo)法的主要操作過程是：將外源基因?qū)肱咛ジ杉毎?；然后將轉(zhuǎn)基因的胚胎干細胞注射于受體動物胚胎后可參與宿主的胚胎構(gòu)成。如圖是利用胚胎干細胞介導(dǎo)法培育出熒光小鼠的過程。回答下列問題：

（1）從水母中獲取綠色熒光蛋白基因有多種方法。將水母的全部基因用_______切成片段，插入到載體分子中，并將所得的_______轉(zhuǎn)入大腸桿菌，通過_________使目的基因擴增；再用某種探針釣取目的基因。

（2）③過程常用________方法，④過程中飼養(yǎng)層的作用是_______，⑤過程注入的胚胎干細胞具有______特點，從而可分化成個體的各種組織和器官。在進行⑥之前，需對受體母鼠進行_______處理。

（3）關(guān)于受體母鼠妊娠產(chǎn)下的子代小鼠的特點，下列敘述正確的是_____________。

A．各細胞都有綠色熒光蛋白基因；所以全身每個細胞都有綠色熒光蛋白產(chǎn)生。

B．各細胞都有綠色熒光蛋白基因；但只有部分細胞有綠色熒光蛋白產(chǎn)生。

C．不是所有細胞都有綠色熒光蛋白基因；所以只有部分細胞有綠色熒光蛋白產(chǎn)生。

D．該小鼠產(chǎn)生的配子中含綠色熒光蛋白基因的概率為1/2評卷人得分五、非選擇題(共3題，共24分)21、下列是基因工程的有關(guān)問題；請回答：

(1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA分子中的特定核苷酸序列；并可以使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的________(填化學(xué)鍵名稱)斷裂，形成的末端總體可分為兩種類型，分別是________。

(2)目的基因和運載體重組時需要的工具酶是________；和限制性核酸內(nèi)切酶相比，它對所重組的DNA兩端堿基序列________(有或無)專一性要求。

(3)圖1表示構(gòu)建表達載體時的某種質(zhì)粒與目的基因。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是－G↓GATCC－，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC－。分析可知，最好選擇限制酶________切割質(zhì)粒，限制酶________切割目的基因所在的DNA，這樣做的好處分別是________、________。22、馬鈴薯是表達外源蛋白的理想受體材料。某科研小組通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得高產(chǎn)重組人血清白蛋白（rHSA)的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯；下圖是該小組構(gòu)建的基因表達載體中T-DNA示意圖。請回答：

（1）天然農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA上具有tms和tmr基因（分別控制合成植物生長素和細胞分裂素），在人工改造質(zhì)粒時應(yīng)使用________切除這兩個基因，以防止____________________。

（2）構(gòu)建基因表達載體時，在rHSA基因兩端分別加上限制酶KpnⅠ和SalⅠ的識別序列（兩種酶切割產(chǎn)生不同的黏性末端)，從基因表達角度分析其目的是____________?？蒲行〗MPCR擴增rHSA基因時，其中一種引物堿基序列為：5＇-CGGGGTACCGCCACCATGGATGCACACAAG-3＇，該序列含有KpnⅠ識別序列和增強表達的序列5＇-GCCACC-3＇，則限制酶KpnⅠ的識別序列是_______________。

（3）將基因表達載體轉(zhuǎn)入處于___________的農(nóng)桿菌細胞中。用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化液與馬鈴薯愈傷組織共培養(yǎng)一段時間后，為了得到已轉(zhuǎn)化且不含農(nóng)桿菌的愈傷組織，將感染后的愈傷組織轉(zhuǎn)移至含有潮霉素和羧芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，加潮霉素的目的是_______________，加羧芐青霉素的目的是____________。23、為擴大耕地面積；增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了水稻新品系。圖1為幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖2為耐鹽基因的部分序列，圖3；圖4中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。

（1）圖4中限制性核酸內(nèi)切酶作用于圖2中的________(填“a”或“b”)處；其特異性表現(xiàn)為_______。如同時用EcoRⅠ和HindⅢ酶切外源DNA，若在每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷，則從理論上講，經(jīng)該酶酶切后，這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的DNA片段種類數(shù)是______________。

（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒時；如同時使用EcoRⅠ和HindⅢ酶，則可以形成__________種重組質(zhì)粒。

（3）由導(dǎo)入目的基因的水稻細胞培養(yǎng)成植株需要利用_________技術(shù)；該技術(shù)的核心是______________。

（4）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的____________作探針進行分子雜交檢測，又要用_____________方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。評卷人得分六、綜合題(共3題，共9分)24、科研人員通過基因工程實現(xiàn)了β-甘露聚糖酶基因在豬腸道野生酵母菌中的表達；使原來不能被豬利用的粗纖維在豬腸道內(nèi)被分解成可直接吸收的單糖。下圖為構(gòu)建工程菌的部分過程，其中介導(dǎo)序列能引導(dǎo)載體整合到酵母菌的染色體DNA上。請據(jù)圖回答：

(1)①過程中需要的工具酶是___________，其最適溫度的范圍一般是___________(a.55~60℃，b.70~75℃，c.90~95℃)。②③過程中的工具酶作用的化學(xué)鍵是___________。

(2)①過程從野生酵母菌染色體DNA中PCR擴增介導(dǎo)序列時，科研人員設(shè)計了如下一對引物：和其中下劃線部分序列的設(shè)計依據(jù)是___________，方框部分序列的設(shè)計目的是___________。

(3)若BamhI酶切的DNA末端與BglⅡ酶切的DNA末端可以被DNA連接酶連接，原因是___________，連接的部位，這兩種酶___________(填“都能”、“都不能”或“只有一種能”)切開，原因是___________。

(4)若使用EcoRⅠ和SalI酶對重組表達載體進行完全酶切并鑒定，可得到___________種DNA片段。25、辣椒素受體（TRPV1）廣泛分布于感覺神經(jīng)元等多種細胞的膜上；與人類感知疼痛；熱有關(guān)。它的發(fā)現(xiàn)者獲得2021年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。

(1)在食用辣椒時，辣椒素與TRPV1結(jié)合，導(dǎo)致感覺神經(jīng)元產(chǎn)生_______電位，最終傳至_______產(chǎn)生熱；痛感；即辣覺。

(2)在TRPV1的發(fā)現(xiàn)歷程中，研究者利用大鼠能夠感知疼痛的神經(jīng)元為材料，提取細胞中的總RNA，通過逆轉(zhuǎn)錄得到_______，將擴增的基因片段構(gòu)建成表達載體，分別導(dǎo)入辣椒素_______（選填“敏感”或“不敏感”）細胞；再經(jīng)辣椒素處理后，通過特定技術(shù)手段，確定了可被辣椒素激活的TRPV1.

(3)骨關(guān)節(jié)炎（OA）發(fā)病機制復(fù)雜；主要是由多種類型的細胞分泌過量的細胞因子引起（下圖左），癥狀表現(xiàn)為關(guān)節(jié)腫脹；疼痛等。上述細胞表面存在大量TRPV1，進一步研究發(fā)現(xiàn)，TRPV1在緩解OA癥狀方面具有明顯作用（下圖右）。

請在答題紙相應(yīng)位置上補充由辣椒素激活TRPV1后，減輕OA癥狀的作用機制。____

(4)請從A~F中挑選最合適組合，以驗證阻斷N蛋白入核會引起IL-6等細胞因子含量的升高____。A．加入辣椒素B．不加辣椒素C．阻斷N蛋白與K蛋白分離的藥物XD．阻斷N蛋白入核的藥物YE．檢測細胞核內(nèi)N蛋白的含量F．檢測IL-6等細胞因子的含量26、I．為研究肝癌致病機理；利用下圖所示方法獲取相關(guān)癌基因以進一步研究。

（1）上圖中，A過程需要用________酶，D過程需要回收________（未雜交/雜交）的含32P的cDNA單鏈，繼而通過人工合成，獲得________；并用其構(gòu)建基因文庫。

II．下圖是治療性克隆時獲取病人胚胎干細胞的過程。

（2）細胞①是病人的體細胞（如皮膚細胞），細胞②往往是處于_________期的卵母細胞。圖示方法一和方法二都使用了去核卵母細胞，主要是因為________。處于⑤時期的胚胎叫做______________。

（3）將分離出的胚胎干細胞放入有分化誘導(dǎo)因子的培養(yǎng)液中，誘導(dǎo)其分化成所需類型細胞或器官，完成該過程的實質(zhì)是____。對于先天不能生成T細胞的免疫缺陷病人，需要誘導(dǎo)產(chǎn)生_________（填免疫器官）。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、A【分析】【分析】

）卵母細胞的采集和培養(yǎng)主要方法是：用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子；第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞或直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。

【詳解】

A；從輸卵管中沖取到定的卵母細胞可直接與獲能精子完成受精；A正確；

BCD；從卵巢中采集的卵母細胞一般培養(yǎng)到成熟后才與精子共同培養(yǎng)完成受精；BCD錯誤。

故選A。

【點睛】

熟記教材相關(guān)知識即可分析作答。2、A【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程：

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細胞。

（2）獲得雜交瘤細胞。

①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；

②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。

（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。

（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

單克隆抗體制備中可利用電激等物理方法直接誘導(dǎo)兩個細胞的融合，A正確；因為觀察細胞染色體需要對細胞解離等處理，細胞已會死亡，所以不能通過觀察染色體的數(shù)目和形態(tài)篩選雜交瘤細胞，B錯誤；利用了細胞膜的流動性和細胞增殖等原理，C錯誤；用選擇培養(yǎng)基篩選得到的雜交瘤細胞需要再專一抗體檢測和克隆化培養(yǎng)后才能用于生產(chǎn)單克隆抗體，D錯誤。故選A。3、D【分析】試管嬰兒是采用體外受精、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)形成的，屬于有性生殖，會發(fā)生基因重組,A、B錯誤；克隆羊是采用體細胞核移植、胚胎移植等技術(shù)后形成的，體現(xiàn)了體細胞細胞核的全能性，C錯誤；這三者都能實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速大量繁殖，D正確。4、C【分析】【分析】

胚胎移植概念：是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的；生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。其中提供胚胎的個體叫供體（遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀），接受胚胎的個體叫受體（有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力）。

【詳解】

A；為了獲得更多的囊胚；可以采用激素注射促進成熟雌性個體超數(shù)排卵，然后將卵細胞從母體內(nèi)取出，在試管內(nèi)與人工采集的精子進行體外受精，培育成胚胎，A錯誤；

B；將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合；經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細胞不都是雜交瘤細胞，還有B細胞自身融合的細胞、骨髓瘤細胞自身融合的細胞等，B錯誤；

C；由于人們對細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚；因此在細胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常添加血清等物質(zhì)，C正確；

D；精子獲能是指精子獲得受精的能力并不是指“獲得能量”；D錯誤。

故選C。5、C【分析】【分析】

1；生物體通過無性繁殖所生成的群體或個體稱為克?。挥蓜游矬w內(nèi)一個細胞經(jīng)過無性生殖過程進而發(fā)育形成的動物個體為克隆動物。體細胞克隆即取出一個雙倍體細胞核移入一個去核的卵細胞，并在一定條件下進行核卵重組，再植入代孕母體中發(fā)育成新個體的過程。供體細胞均來自高度分化的體細胞，其種類繁多、數(shù)量無限。

2；H3K27me3印記基因敲除極大提高了克隆的成功率；H3K27me3印記基因敲除的實驗組克隆小鼠的體重與受精卵來源的小鼠一致，顯著低于對照組克隆小鼠的體重，說明克隆胚胎過大可能降低克隆胚胎著床后成活率。

【詳解】

A；通過分析可知；克隆小鼠的體重顯著高于受精卵來源的小鼠，故克隆胚胎過大可能是克隆胚胎著床后成活率低的原因，A正確；

B；實驗組克隆小鼠的胎盤直徑和重量顯著低于對照組克隆小鼠；而與受精卵來源的小鼠一致，說明克隆胚胎過大的原因可能是克隆胚胎的胎盤過大，B正確；

C；H3K27me3印記基因敲除的實驗組；克隆小鼠的胎盤直徑和重量顯著低于對照組克隆小鼠，而與受精卵來源的小鼠一致，說明HBK27me3印記基因可促進胎盤的發(fā)育，C錯誤；

D；H3K27me3印記基因可影響胎盤的發(fā)育；而胎盤是由滋養(yǎng)層細胞發(fā)育而來的，故其表達產(chǎn)物可能影響早期胚胎滋養(yǎng)層細胞的發(fā)育，D正確。

故選C。

【點睛】6、C【分析】【分析】

胚胎發(fā)育過程：（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；

（2）桑椹胚：32個細胞左右的胚胎[之前所有細胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細胞]；（3）囊胚：細胞開始分化；其中個體較大的細胞叫內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔[注：囊胚的擴大會導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化]；（4）原腸胚：內(nèi)細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔[細胞分化在胚胎期達到最大限度]。

【詳解】

卵裂期細胞的體積隨分裂次數(shù)增加而不斷減小，A錯誤；囊胚的滋養(yǎng)層細胞可發(fā)育成胎盤和胎膜，B錯誤；動物胚胎發(fā)育的早期有一段時間是在透明帶內(nèi)進行的，因此孵化前的早期胚胎處于游離狀態(tài)，C正確；培育試管嬰兒涉及體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等，D錯誤；故選C。7、B【分析】【分析】

圖示是某農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的模式圖；在該農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中，農(nóng)作物可以成為家畜的飼料和人的食物，家畜也能成為人的食物，沼氣池中的微生物可以利用農(nóng)作物秸稈；人和家畜糞便中的有機物，而沼液和沼渣又可以為農(nóng)作物提供肥料，從而達到了物質(zhì)利用的良性循環(huán)，減少了環(huán)境污染，實現(xiàn)了能量的多級利用。

【詳解】

A；整體性原理的含義是進行生態(tài)工程建設(shè)時不但要考慮到自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律；更重要的是，還要考慮到經(jīng)濟和社會等系統(tǒng)的影響力，從圖中呈現(xiàn)的“農(nóng)作物和家畜可為人類提供食物”等信息可以看出，該生態(tài)工程的設(shè)計體現(xiàn)了整體性原理，A正確；

B；農(nóng)作物不能直接利用有機物；沼渣、沼液還田的主要目的是為農(nóng)作物提供含N、P、K等的無機物，B錯誤；

C；分析圖示可知；該生態(tài)工程充分利用了農(nóng)作物秸稈、人與畜的糞便等廢棄物中的物質(zhì)，應(yīng)用了物質(zhì)的良性循環(huán)技術(shù)，C正確；

D；建立沼氣池；其中的沼渣、沼液能為農(nóng)作物提供肥料，進而促進植物生長，提高人類對光合產(chǎn)物中的能量利用率，D正確。

故選B。

【點睛】

本題結(jié)合某農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的模式圖，考查生態(tài)農(nóng)業(yè)的相關(guān)知識，要求考生識記生態(tài)工程依據(jù)的生態(tài)學(xué)原理，掌握生態(tài)系統(tǒng)的功能，尤其是物質(zhì)循環(huán)和能量流動，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各選項。二、填空題(共6題，共12分)8、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”即切割DNA的是限制核酸內(nèi)切酶簡稱限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是DNA連接酶；

（3）基因工程中最常用的運載體是質(zhì)粒；

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達；說明人和牛共用一套遺傳密碼。

【考點定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA連接酶質(zhì)粒共用一套遺傳密碼9、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動物應(yīng)為常見或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對精子進行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實現(xiàn)的前提是受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點睛】

胚胎移植的實質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。10、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】取代修補11、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應(yīng)選取甲的B細胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應(yīng)的記憶細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。

【點睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒有細胞結(jié)構(gòu)；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶12、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細胞變形為精子過程，④是受精作用；

2；哺乳動物精子和卵子發(fā)生的不同點：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場所唯一（MⅠ和MⅡ的場所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場所不唯一，（MⅠ場所在卵巢，MⅡ場所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機能衰退；多數(shù)哺乳動物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來的；④過程是受精過程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線。

（3）雄性動物精子產(chǎn)生的時期是初情期；雌性動物卵泡細胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級卵母細胞進行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過程中完成的。

【點睛】

本題考查卵細胞的形成過程和受精作用等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生識記相關(guān)細節(jié)和解決問題的能力?！窘馕觥扛郀柣w輸卵管透明帶反應(yīng)卵細胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用13、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體稱為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動物應(yīng)為常見或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對精子進行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實現(xiàn)的前提是受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點睛】

胚胎移植的實質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移?！窘馕觥烤荧@能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。三、判斷題(共5題，共10分)14、A【分析】【詳解】

由于存在防止多精入卵的兩道屏障，故一個卵細胞一般只能同一個精子結(jié)合，形成受精卵，這句話是正確的。15、A【分析】【詳解】

受精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。精子入卵后形成雄原核，同時被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核，雄、雌原核充分發(fā)育后，相向移動，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此說法正確。

故正確。16、B【分析】【詳解】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段；在自然狀態(tài)下，哺乳動物的受精在輸卵管內(nèi)完成。

故錯誤。17、B【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原腸胚。圖B中1是滋養(yǎng)層，2是內(nèi)細胞團，3是透明帶，4是囊胚腔；圖C中5是外胚層，6是滋養(yǎng)層，7是原腸腔，8是內(nèi)胚層。

【詳解】

（1）從A到C的過程中細胞均需要消耗能量；故胚胎中有機物的含量均減少，（1）正確。

（2）桑椹胚之前所有細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬全能細胞，故A時期胚胎中的細胞都是全能細胞，囊胚期時細胞出現(xiàn)分化，滋養(yǎng)層細胞不是全能細胞，（2）錯誤。

（3）胚胎移植必須使用處于桑椹胚或囊胚時期的胚胎；處于A或B時期的胚胎，（3）錯誤。

（4）圖示過程細胞通過有絲分裂增殖；有絲分裂過程中可能發(fā)生突變，遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生改變，（4）正確。

故分別為√、×、×、√。18、B【分析】【詳解】

生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)力穩(wěn)定性是有一定限度的，導(dǎo)致了生態(tài)工程的局限性，使生態(tài)工程并不能解決所有的污染、破壞問題，因此不能走“先污染、破壞，后治理”的老路，故錯誤。四、實驗題(共2題，共8分)19、略

【分析】【分析】

1；DNA分子雜交技術(shù)是將轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA提取出來；在含有目的基因的DNA片段上，用放射性同位素標(biāo)記，以此作為探針與基因組DNA雜交，如果顯示出雜交帶，則說明目的基因已經(jīng)插入染色體DNA。

2；分子雜交技術(shù)是從轉(zhuǎn)基因生物中提取出mRNA；用標(biāo)記的目的基因做探針，與mRNA雜交，如果顯示雜交帶，則說明目的基因進行了轉(zhuǎn)錄。

【詳解】

（1）DNA分子雜交技術(shù)是將轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA提取出來；在含有目的基因的DNA片段上，用放射性同位素標(biāo)記，以此作為探針與基因組DNA雜交，如果顯示出雜交帶，則說明目的基因已經(jīng)插入染色體DNA，所以應(yīng)根據(jù)突變位點外顯子2新霉素，其設(shè)計分子探針雜交實驗結(jié)果檢測小鼠的基因型，需根據(jù)I基因外顯子2和新霉素抗性基因序列設(shè)計DNA分子探針。

（2）分析系譜圖可知：雜合子小鼠既有體型正常的，又有發(fā)育遲緩、體型瘦弱的，所以也無法判斷I+、I-基因的顯；隱性。

（3）由圖可知：突變基因來自父本時；雜合子子代表現(xiàn)出發(fā)育遲緩，而突變基因來自母本時，子代體表現(xiàn)正常，推測I基因來自母體時不表達，所以只有突變基因來自父本時，雜合子小鼠才表現(xiàn)出發(fā)育遲緩，由此推測來自母本的I基因在體細胞中不表達。

（4）題意顯示：新霉素抗性基因出現(xiàn)在突變個體中；野生小鼠體內(nèi)不存在，突變基因來自父本時該基因表達，提取的總RNA中含有突變基因?qū)?yīng)的mRNA，可以與RNA探針結(jié)合，由于母本中該表達，故不產(chǎn)生相應(yīng)的mRNA，無法與探針結(jié)合。故實驗結(jié)果是：表i（-）；ii（+）、iii（-）

（5）由該遺傳病遺傳方式特殊性可知；用常規(guī)的基因診斷不能否確定胎兒，故可以通過檢測胎兒細胞的RNA或蛋白質(zhì)來確診。

【點睛】

認(rèn)真分析題干信息是解答本題的關(guān)鍵，本題的第一空就難于突破，屬于難題級別?！窘馕觥縄基因外顯子2和新霉素抗性基因個體發(fā)育（發(fā)育速度與體型大小）不能雜合子小鼠既有體型正常的，又有發(fā)育遲緩、體型瘦弱的，無法判斷性狀的顯、隱性，所以也無法判斷I+、I-基因的顯、隱性父本母本一、+、一不能，檢測胎兒細胞的RNA或蛋白質(zhì)（合理即可）20、略

【分析】【分析】

據(jù)圖分析；目的基因是綠色熒光蛋白基因，①表示獲取目的基因，②表示構(gòu)建基因表達載體（重組質(zhì)粒），③表示將目的基因?qū)胧荏w細胞（胚胎干細胞），④表示動物細胞（胚胎干細胞）培養(yǎng)，⑤表示將胚胎干細胞注入囊胚，⑥表示胚胎移植。

【詳解】

（一）（1）根據(jù)題意分析；溴甲酚紫在不同的pH條件下會變色，因此在分離醋桿菌用的培養(yǎng)基中加入溴甲酚紫作為（酸堿）指示劑以鑒別產(chǎn)醋桿菌；加入的乙醇可以為醋酸菌提供碳源，乙醇加入前需要經(jīng)過過濾滅菌。

（2）高壓蒸汽滅菌時；滅菌鍋中的滅菌物品不能放太滿太擠，要留出空隙以利于蒸汽流通；滅菌后，通常將實驗用具放入60℃～80℃的烘箱中烘干，以除去滅菌時的水分。

（3）應(yīng)該用取樣器取稀釋度的樣品稀釋液；溴甲酚紫在酸性條件下變黃；所以若要篩選產(chǎn)酸能力強的菌種，需挑選若干個黃色環(huán)帶直徑與菌落直徑比值大的菌落，分別用液體培養(yǎng)基擴增，然后離心檢測培養(yǎng)液中醋酸含量。

（二）（1）將水母的全部基因切成片段需要用限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）；然后插入到載體分子中形成重組載體（重組質(zhì)粒），再轉(zhuǎn)入大腸桿菌，通過大腸桿菌的繁殖使目的基因擴增。

（2）③表示將目的基因?qū)胧荏w細胞（胚胎干細胞）；常用顯微注射法；④表示胚胎干細胞的培養(yǎng)過程，該過程中飼養(yǎng)層的作用是促進胚胎干細胞的分裂，抑制胚胎干細胞的分化；⑤過程注入的胚胎干細胞具有發(fā)育全能性，從而可分化成個體的各種組織和器官；⑥表示胚胎移植，在胚胎移植之前，需對受體母鼠進行同期發(fā)情處理。

（3）據(jù)圖分析可知；將含有綠色熒光蛋白基因的胚胎干細胞注入囊胚，而囊胚中的原有細胞是不含綠色熒光蛋白基因的，因此胚胎移植后產(chǎn)生的小鼠并不是所有細胞都有綠色熒光蛋白基因，所以只有部分細胞有綠色熒光蛋白產(chǎn)生。

故選C。

【點睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握微生物的培養(yǎng)與分離、基因工程、胚胎工程等知識點，能夠根據(jù)圖示分析基因工程和胚胎工程的過程，確定圖中各個數(shù)字代表的過程的名稱，進而結(jié)合題干要求分析答題?！窘馕觥浚ㄋ釅A）指示劑過濾滅菌/G6玻璃砂漏斗作為碳源蒸汽流通除去滅菌時的水分取樣器黃色環(huán)帶直徑與菌落直徑液體培養(yǎng)基限制性核酸內(nèi)切酶重組載體/重組DNA/重組質(zhì)粒大腸桿菌的繁殖顯微注射的促進胚胎干細胞的分裂，抑制胚胎干細胞的分化發(fā)育全能性同期發(fā)情C五、非選擇題(共3題，共24分)21、略

【分析】試題分析：本題考查基因工程的原理及操作步驟；掌握基因工程的操作工具及各工具的作用，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。

（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式。分別為黏性末端和平末端。

（2）目的基因和運載體重組時需要DNA連接酶連接兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。多種限制酶切割；形成不同的切割位點，所用的DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列就沒有專一性要求。

（3）圖1中顯示，已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC-，酶Ⅰ切割質(zhì)粒不會把兩個標(biāo)記基因都破壞，最好選擇限制酶I切割質(zhì)粒。限制酶Ⅱ的識別序列和切點是一↓GATC-，目的基因兩端均有酶Ⅱ的識別序列，因此用限制酶II切割目的基因所在的DNA。【解析】磷酸二酯鍵粘性末端和平末端DNA連接酶無酶Ⅰ酶Ⅱ酶Ⅰ切割質(zhì)粒不會把兩個標(biāo)記基因都破壞目的基因兩端均有酶Ⅱ的識別序列22、略

【分析】【詳解】

試題分析：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的形成過程；考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生分析題圖獲取有效信息的能力，以及理解所學(xué)知識要點，把握知識間聯(lián)系的能力。學(xué)生可根據(jù)題圖和題干的提示；要求，梳理相關(guān)知識點，對各小題進行分析作答，同時需要學(xué)生掌握基因工程的原理、操作步驟及其一些細節(jié)問題。

（1）由于天然農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA上具有tms和tmr基因（分別控制合成植物生長素和細胞分裂素），這兩種基因表達可使植物合成植物生長素和細胞分裂素，進而影響了植物體內(nèi)內(nèi)源激素的含量，因此需要用限制性核酸內(nèi)切酶切除tms和tmr基因。

（2）據(jù)圖可知，加上的兩種限制酶的識別序列在啟動子與終止子之間，因此加上兩種限制酶的識別序列后rHSA基因能正向接入其啟動子與終止子之間，保證rHSA基因能準(zhǔn)確表達。由于引物系列中含有KpnⅠ識別序列和增強表達的序列；KpnⅠ識別序列應(yīng)該在增強表達序列5＇-GCCACC-3＇之前，即5’-GGTACC-3’。

（3）將將基因表達載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌時，首先必須用Ca2+處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)，以便于導(dǎo)入基因表達載體。將感染后的愈傷組織轉(zhuǎn)移至含有潮霉素和羧芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，加潮霉素的目的是篩選出含潮霉素抗性基因的愈傷組織，由于篩選的是愈傷組織，需要把含有潮霉素抗性基因的農(nóng)桿菌除去，因此加入羧芐青霉素的目的是除去含有潮霉素抗性基因的農(nóng)桿菌。【解析】限制酶tms和tmr基因的表達產(chǎn)物影響受體植物內(nèi)源激素的含量rHSA基因能正向接入其啟動子與終止子之間，保證rHSA基因能準(zhǔn)確表達或5’-GGTACC-3’感受態(tài)篩選出含潮霉素抗性基因的愈傷組織除去含有潮霉素抗性基因的農(nóng)桿菌23、略

【分析】試題分析：分析圖1：圖1為幾種限制酶識別序列及其切割位點。分析圖2：圖2為耐鹽基因的部分序列，其中a是磷酸二酯鍵，b是氫鍵。分析圖3：圖3表示質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖；其中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。在質(zhì)粒上存在SmaI；EcoRI、HindⅢ和BamHI等四個酶切位點，但是SmaI的切割位點就在抗生素抗性基因上，該基因為載體的標(biāo)記基因，因此不可用該酶切割。分析圖4：圖4表示含有目的基因的外源DNA分子，其中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。在目的基因上，SmaI、EcoRI、HindⅢ和BamHI四種酶也存在酶切位點，但是SmaI酶的切割位點在目的基因中間序列，該酶切割不能獲得完整的基因。

（1）限制酶的作用位點是磷酸二酯鍵；即圖2中a處；限制酶具有特異性，即特異性的識別并切割DNA。如同時用EcoRⅠ和HindⅢ酶切外源DNA，若在每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷，則從理論上講，經(jīng)該酶酶切后，這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的DNA片段種類數(shù)是9（若只切開左側(cè)的EcoRⅠ酶的切割位點，則能形成2種不同長度的DNA片段；若只切開HindⅢ酶的切割位點，則能形成2種不同長度的DNA片段；若只切開右側(cè)的EcoRⅠ酶的切割位點，則能形成2種不同長度的DNA片段；若只切開左側(cè)EcoRⅠ酶和HindⅢ酶的切割位點，則能形成3種不同長度的DNA片段，其中有2種長度之前已經(jīng)出現(xiàn)過；若只切開右側(cè)EcoRⅠ酶和HindⅢ酶的切割位點，則能形成3種不同長度的DNA片段，其中有2種長度之前已經(jīng)出現(xiàn)過；若只切開左側(cè)EcoRⅠ酶和右側(cè)EcoRⅠ酶的切割位點，則能形成3種不同長度的DNA片段，其中有2種長度之前已經(jīng)出現(xiàn)過）。

（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒時；如同時使用EcoRⅠ和HindⅢ酶，則可以形成2種重組質(zhì)粒（一種含有目的基因，另一種不含目的基因）。

（3）將導(dǎo)入目的基因的水稻細胞培養(yǎng)成植株還需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)；該技