p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義培訓(xùn)課件

1研究背景研究目的223實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論44結(jié)論5研究方法1p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025研究背景白血?。╨eukemia）是一類造血干細(xì)胞的惡性克隆性疾病。目前，白血病的確切病因尚不明了，但腫瘤的發(fā)生均與腫瘤相關(guān)基因的異常表達(dá)密切相關(guān)，異常表達(dá)的腫瘤相關(guān)基因所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)由于不適當(dāng)?shù)啬M正常蛋白的生長作用方式及細(xì)胞生長、分化紊亂，而導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。如何提高白血病診斷及治療水平，提高患者生存質(zhì)量，一直是醫(yī)生十分關(guān)注的問題。2p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025研究背景抑癌基因p53代謝過程細(xì)胞增殖DNA轉(zhuǎn)錄細(xì)胞生長一些腫瘤中，則有其它的因素改變阻斷p53的功能以促進(jìn)腫瘤的發(fā)生——p73基因P53抑癌機(jī)制3p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025研究背景p73基因是1997年Kaghad等在篩選介導(dǎo)胰島素信號(hào)傳遞因子(IRS21)時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)的，定位于人類1號(hào)染色體1p36.33。測序發(fā)現(xiàn)其序列與p53基因有高度同源性。1p36是多種人類腫瘤基因缺失熱點(diǎn)區(qū)域，且認(rèn)為該區(qū)存在多個(gè)抑癌基因。由于其特殊定位及其與p53基因結(jié)構(gòu)和功能的高度同源性，p73基因被認(rèn)為可能是抑癌基因。

但有學(xué)者提出p73基因在肝癌、結(jié)腸癌、膀胱癌組織中表達(dá)明顯增高，其表達(dá)水平與腫瘤惡性程度明顯相關(guān)。而且p73基因在不同腫瘤中表達(dá)水平差異很大，顯示了抑癌基因和癌基因的雙重特性。4p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025研究背景-p73的作用機(jī)制p73基因由于高甲基化而表達(dá)缺失?？赡苁歉呒谆淖兞嘶驑?gòu)型，影響DNA特異序列與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，使基因不能轉(zhuǎn)錄。低水平或失表達(dá)過度表達(dá)癌基因作用抑癌基因作用cancerc2Abl酪氨酸激酶可使P73蛋白的半衰期延長或蛋白磷酸化導(dǎo)致P73蛋白過表達(dá)。發(fā)揮對(duì)細(xì)胞生長的抑制和凋亡作用。p73基因的缺失：p73基因存在雜合性缺失（LOH）。5p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025研究背景-相關(guān)腫瘤研究軟組織肉瘤血液系統(tǒng)惡性腫瘤乳腺癌宮頸癌膀胱癌p73肺癌前列腺癌

在惡性腫瘤中，p73基因在不同類型細(xì)胞的腫瘤中有不同的生物學(xué)行為，6p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025研究目的檢測成人急性白血?。ˋL）患者p73基因mRNA的表達(dá)情況,從而探討p73基因與白血病發(fā)病、復(fù)發(fā)及預(yù)后的關(guān)系，為成人AL的臨床治療提供更有意義的指導(dǎo)作用。7p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025研究方法及實(shí)驗(yàn)技術(shù)

選取2008年6月-2009年3月期間在山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院及山西省腫瘤醫(yī)院血液科住院的初治及復(fù)發(fā)或難治急性白血病患者100例，經(jīng)臨床及骨髓涂片細(xì)胞形態(tài)學(xué)、細(xì)胞化學(xué)檢查，按張之南主編《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》確診。

包括初發(fā)未治64例，復(fù)發(fā)或難治36例，按FAB分型，急性髓細(xì)胞白血病(AML)80例(M2,12例；M3,35例；M4,18例；M5,9例；M6,6例)，急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)20例。其中男60例，女40例，中位年齡40歲(9～65歲)。對(duì)照組為20例非白血病(NL)且骨髓象正常者。8p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025研究方法及實(shí)驗(yàn)技術(shù)AML療效標(biāo)準(zhǔn)9p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025研究方法及實(shí)驗(yàn)技術(shù)瓊脂糖凝膠電泳計(jì)算p73mRNA在AL細(xì)胞及不同細(xì)胞類型中表達(dá)的陽性率及強(qiáng)度，結(jié)合臨床分型、治療效果及預(yù)后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析確診AL患者100例及正常對(duì)照者20例骨髓標(biāo)本2ml隨機(jī)引物逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA；AMV逆轉(zhuǎn)錄酶系合成TRizol一步法提取總RNART反轉(zhuǎn)錄10p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025研究方法及實(shí)驗(yàn)技術(shù)

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

對(duì)p73mRNA在AL細(xì)胞及不同細(xì)胞類型中表達(dá)的陽性病例組與正常對(duì)照組閾值進(jìn)行t檢驗(yàn)，不同類型AL陽性率比較進(jìn)行X2檢驗(yàn)，陽性表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行單因素方差分析。P<0.05時(shí)說明差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。11p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論M123456M注：M（marker）；1（陰性對(duì)照）；2~6（AL中p73mRNA的表達(dá)）；p73擴(kuò)增產(chǎn)物長度為390bp圖3RT-PCR檢測p73mRNA表達(dá)12p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論

表2不同類型AL及對(duì)照組細(xì)胞中p73mRNA的表達(dá)組別總例數(shù)陽性例數(shù)p73表達(dá)陽性率(%)p73/β-actinAL1004949.00.63±0.65ALL20420.00.42±0.12AML804556.31.22±0.93M212650.00.46±0.22M3351851.40.73±0.46M4181055.60.53±0.44M59777.81.44±1.13M66466.70.62±0.48NL20420.00.43±0.26一般預(yù)后562239.31.19±0.52不良預(yù)后282071.41.82±0.4813p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論14p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論AML細(xì)胞p73mRNA表達(dá)陽性率56.3%ALL細(xì)胞p73mRNA表達(dá)陽性率20.0%兩組差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義1.p73基因的失表達(dá)在ALL中是高頻率發(fā)生事件，在其形成中起著抑癌基因作用。在AML中，p73基因表現(xiàn)為過度表達(dá)，起著癌基因樣作用。15p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論2.分別比較ALL及AML患者一般預(yù)后組與不良預(yù)后組p73mRNA表達(dá)率及強(qiáng)度的差異，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這說明了p73基因是AL中一個(gè)新的生物學(xué)預(yù)后因子這也證實(shí)了盡管ALL組與AML組患者初診時(shí)及治療后p73基因的表達(dá)情況不同，但都與其預(yù)后有密切關(guān)系16p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025

結(jié)論p73基因在不同類型白血病發(fā)病及預(yù)后中起的作用不同：

p73基因在ALL患者初診時(shí)有較高的陰性表達(dá)率，并在病情緩解后轉(zhuǎn)為陽性表達(dá)，起著抑癌基因樣作用；與之相反，在AML患者中p73基因高水平表達(dá)，且其表達(dá)水平隨病情的緩解而降低，表現(xiàn)為癌基因樣作用。17p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025結(jié)論p73基因的表達(dá)在急性白血病的發(fā)病中均起著重要作用，且多與較差的預(yù)后特征、對(duì)化療反應(yīng)差、早期治療失敗、較短的生存期有關(guān)。通過動(dòng)態(tài)檢測AL患者p73基因的表達(dá)情況，從而盡早決定是否需要使用更有效的治療手段(如骨髓移植BMT)或針對(duì)p73基因進(jìn)行基因治療，有希望提高急性白血病的治愈率。18p基因在急性白血病的表達(dá)和臨床意義1/22/2025[1]李陜區(qū),崔大祥,劉變英等.結(jié)腸癌中P73基因改變的意義[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2000;21:314-316.[2]

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