2025年湘教新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年湘教新版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷305考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、關于DNA粗提取與鑒定實驗的敘述，錯誤的是（）A.DNA不溶于體積分數(shù)為95%的預冷酒精B.香蕉、魚卵或豬血都是理想的實驗材料C.提取植物材料的DNA需先研磨破碎細胞D.沸水浴中二苯胺試劑與DNA反應呈藍色2、小鼠胚胎干細胞可從小鼠的囊胚中獲取，經定向誘導可獲得多種功能細胞。下列敘述正確的是（）A.為獲得更多的囊胚，需采用激素注射促進雄鼠產生更多的精子B.胚胎干細胞和其他細胞的全能性不同是由于含有的核基因不同C.用胰蛋白酶將胚胎組織細胞的膜蛋白消化后可獲得分散的細胞D.胚胎干細胞和誘導出的各種細胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)3、關于利用細胞工程方法，以H7N9病毒的核衣殼蛋白為抗原制備單克隆抗體，下列相關敘述正確的是（）A.用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內，產生的血清抗體為單克隆抗體B.體外培養(yǎng)單個已免疫的B淋巴細胞可以獲得大量抗H7N9病毒的單克隆抗體C.將等量已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合，經PEG誘導融合后的細胞均為雜交瘤細胞D.利用該單克隆抗體與H7N9病毒的核衣殼蛋白特異性結合的方法可診斷出H7N9病毒感染者4、已知剛果紅是一種染料，它可以與纖維素反應形成紅色復合物，但并不與水解后的纖維二糖、葡萄糖等發(fā)生這種反應。為純化菌種，在含有剛果紅的鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細菌，培養(yǎng)結果如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整B.圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細菌數(shù)量均太多，應從Ⅲ區(qū)挑取單菌落C.該實驗結果因單菌落太多，不能達到菌種純化的目的D.菌落周圍的纖維素被降解后，可與剛果紅反應發(fā)成磚紅色5、某課題組為得到青蒿素產量高的新品系，通過一定的技術，使青蒿素合成過程的某一關鍵酶基因fps在野生青蒿中得到了過量表達，其過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

A.PCR過程中，溫度需要控制在90℃以上的目的是破壞氫鍵B.構建重組質粒過程中，目的基因需插入Ti質粒的T-DNA上C.基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止密碼子和標記基因等D.用熒光標記的fps基因作為探針可以檢測目的基因是導入成功6、用PCR方法檢測轉基因植株是否成功導入目的基因時，得到以下電泳圖譜。其中1號為DNA標準樣液（Marker），10號為蒸餾水，PCR時加入的模板DNA如圖所示。據(jù)此作出的分析，不合理的是（）

A.PCR產物的分子大小在250-500bp之間B.3號樣品為不含目的基因的載體DNAC.9號樣品對應植株不是所需的轉基因植株D.10號確定反應體系等對結果沒有干擾7、動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎，相關敘述正確的是（）A.因為動物血清成分已研究清楚，所以在動物細胞培養(yǎng)基中加入動物血清B.懸浮培養(yǎng)的雜交瘤細胞會因細胞密度過大、發(fā)生接觸抑制等因素而分裂受阻C.體外培養(yǎng)從牛卵巢采集的卵母細胞，細胞表面相互接觸時細胞才停止分裂增殖D.將小鼠成纖維細胞誘導為多能干細胞，體外分化后可治療小鼠的鐮狀細胞貧血評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)8、研究人員從土壤中篩選得到酵母菌纖維素酶高產菌株；并對其降解纖維素的條件進行了研究。據(jù)圖分析正確的是（）

A.篩選該高產菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)B.探究最適溫度時應盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右C.該酵母菌高產菌株產生纖維素酶的最適溫度是35℃D.利用該高產菌株降解纖維素時需嚴格保持厭氧環(huán)境9、營養(yǎng)缺陷型菌株是野生型菌株經過人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種生長因子的能力，只能在補充了相應的生長因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長的變異菌株。某研究小組對酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上，一段時間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種（不改變菌落位置）到乙、丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，進一步培養(yǎng)得到如下圖所示結果。下列分析正確的是（）

A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.乙中生長的酵母菌都不屬于營養(yǎng)缺陷型菌株10、白地霉侵染是導致柑橘酸腐病的主要原因，實驗證明桔梅奇酵母通過分泌普切明酸對白地霉具有生物防治能力。已知鐵是真菌生長的必需元素，是胞內重要酶活性中心的組成部分。普切明酸是桔梅奇酵母產生的一種水溶性鐵螯合劑，能快速在培養(yǎng)基中擴散并與其中的Fe3+形成穩(wěn)定紅色復合物。研究配制的含有不同濃度FeCl3的培養(yǎng)基如下表所示。實驗結果為隨FeCl3濃度增大，抑菌圈紅色加深但變窄，如下圖所示。相關敘述正確的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水瓊脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素，瓊脂不是營養(yǎng)物質B.白地霉采用了平板劃線法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.結果表明，F(xiàn)eCl3濃度增大，普切明酸與Fe3+結合的數(shù)量減少D.結果表明，F(xiàn)eCl3能降低桔梅奇酵母對白地霉的防治效果11、茯磚茶的制作包括發(fā)酵與發(fā)花等工序，發(fā)酵前要下“誘水”，下“誘水”就是將原有老茶煮水后噴灑在料堆之上。發(fā)花可使磚茶原料在加工過程中形成“金花”，學名“冠突散囊菌”——茶界“益生菌”，也是國家茶業(yè)界二級機密保護菌種。下列相關敘述錯誤的是（）A.茯磚茶的制作需利用酵母菌等多種細菌進行發(fā)酵B.下“誘水”相當于微生物培養(yǎng)過程中的“接種”，推測相關菌種可耐熱C.發(fā)酵過程涉及多種酶催化，發(fā)酵后飲用有利于營養(yǎng)物質的吸收D.茯磚茶發(fā)酵完成后要滅菌并密封，有利于長期保存12、玉米秸稈轉化為綠色能源酒精是解決能源危機的措施之一，具體的工藝流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.用酸或堿預處理有利于酶與底物充分接觸，提高催化效率B.步驟③中，酵母菌在發(fā)酵初期更多分布在發(fā)酵液的上層C.隨培養(yǎng)次數(shù)的增加，分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定D.發(fā)酵過程中酒精濃度升高會抑制酵母菌代謝活動，同時使發(fā)酵液pH降低，發(fā)酵停止13、克隆動物常用的核移植方法主要有細胞質內注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細胞的細胞核吸出注入去核卵母細胞質內；后者是直接將供體細胞注入去核卵母細胞透明帶內，然后促使兩個細胞融合。世界首例體細胞克隆北極狼的供體細胞來自哈爾濱極地公園的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細胞來自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。下列敘述錯誤的是（）A.克隆北極狼的性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬和比格犬的基因共同決定B.相比之下，透明帶下注射法對供體細胞核和卵母細胞的損傷更小C.供體細胞注入卵母細胞透明帶內后，就可自行進入卵母細胞D.細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發(fā)生了基因重組評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)14、20世紀70年代以后；以基因工程為代表的一大批生物技術成果，進入人類的生產和生活，特別是在醫(yī)藥和農業(yè)生產上發(fā)揮了極大的作用，但是與其他高新技術一樣，生物技術也同樣具有雙刃劍效應。如同其他高新技術一樣，轉基因成果和轉基因技術也需要你的理性看待。在轉基因生物安全方面；

（1）你認為轉基因生物有哪些優(yōu)點，①____________②___________③__________。

（2）你認為轉基因生物有哪些缺點，①____________②___________③__________。

（3）你對于轉基因生物的態(tài)度是__________。15、統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目_____________。這是因為______________________。因此，統(tǒng)計結果一般用而不是用活菌數(shù)來表示。除了上述的活菌計數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。16、基因進入受體細胞的______——“分子運輸車”17、功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中______部位的兩個核苷酸之間的______斷開，因此具有______。18、去除DNA中的雜質，可以在濾液中加入2mol/L濃度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再調節(jié)NaCL溶液濃度為0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用濃度為2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________19、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖：可以高效快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖。

作物脫毒：采用______組織培養(yǎng)來除去病毒（因為植物分生區(qū)附近的病毒______）

人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經_____包裝得到的種子。優(yōu)點：完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，______；方便儲藏和運輸。

人工種子的結構包括：______、_____和______。20、有時還需進行______的鑒定。如轉基因抗蟲植物是否出現(xiàn)______。21、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結構和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評卷人得分四、判斷題(共2題，共8分)22、要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造氨基酸序列來完成。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤23、轉入油菜的抗除草劑基因，可能通過花粉傳入環(huán)境中。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共1題，共8分)24、【生物技術實踐】

科學家發(fā)現(xiàn)家蠅體內存在一種抗菌活性蛋白；這種蛋白質具有極強的抗菌能力，受到研究者重視。

（1）分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質分子的______________、大小及形狀不同，在電場中的________不同而實現(xiàn)分離。

（2）可用金黃色葡萄球菌來檢驗該蛋白的抗菌特性?？咕鷮嶒炛兴门囵B(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細菌生長提供_________和_______________。

（3）分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的_____________；確定該蛋白質的抗菌效果。

（4）細菌培養(yǎng)常用的接種方法有_______和___________。實驗結束后，對使用過的培養(yǎng)基應進行_____________處理。評卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)25、根據(jù)基因工程的有關知識；回答下列問題：

（1）限制性內切酶切割DNA分子后產生的片段，其末端類型有________________和_________________。

（2）質粒運載體用EcoRⅠ切割后產生的片段如圖：

為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內切酶切割，該酶必須具有的特點是________________________________________。

（3）根據(jù)來源的不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即_______DNA連接酶和________DNA連接酶。

（4）基因工程中除質粒外，________________和_____________也可作為運載體。

（5）若用重組質粒轉化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是________________________________。

（6）基因工程核心的步驟是____________________________，這一過程需要用到的工具酶主要是_______________________________________。26、通過細胞工程技術；利用甲；乙兩種植物的各自優(yōu)勢（甲耐鹽、乙高產），培育高產耐鹽的雜種植株。請完善下列實驗流程并回答問題：

（1）A是________________酶，D是具有________優(yōu)良性狀的幼芽。D長成的幼苗需要選擇的原因是______________________________________。

（2）由C形成植株的過程利用了________________技術，愈傷組織形成D需要經過________過程。整個培養(yǎng)過程要在________的條件下進行。

（3）植物體細胞融合成功的標志是__________________。這項新技術具有的重要意義是_____________________。

（4）已知甲、乙植物分別為四倍體、二倍體，則“甲——乙植株”屬于________倍體植株。27、迄今為止新型冠狀病毒仍在全球傳播；接種疫苗是預防新型冠狀病毒的有效手段。

(1)某科研單位以新型冠狀病毒的S蛋白及此蛋白上受體結合域（RBD）作為免疫原靶點成分，設計研制重組蛋白疫苗。構建重組RBD基因時加入了GP67信號肽基因序列，然后以及Bac-to-Bac桿狀病毒作為重組基因的_____，以昆蟲細胞作為_____表達RBD蛋白；加入獨有的AddaVax佐劑，制備了RBD蛋白二聚體疫苗。

(2)我國科興及北京生物兩款新冠滅活疫苗均使用Vero細胞（非洲綠猴腎細胞的傳代細胞系）進行病毒擴增培養(yǎng)。

①Vero細胞的合成培養(yǎng)基中通常加入_____等天然成分，Vero細胞的傳代培養(yǎng)過程中需要使用_____使細胞分傲。

②采用細胞工程技術生產新型冠狀病毒的單克隆抗體，需要從已痊愈的志愿者體內獲得一定量的_____細胞，并將其與小鼠的_____細胞進行融合。融合后的細胞經篩選后還需要進行_____處理，并通過_____檢測才能獲得所需的雜交瘤細胞。

③雜交瘤細胞所產生的單克隆抗體具有的優(yōu)點是_____。28、非霍奇金淋巴瘤是一種起源于淋巴組織的血液系統(tǒng)惡性腫瘤（細胞表面高表達CD19蛋白）治療方法是利用基因工程的方法使T細胞表達能足夠靶定抗原的受體（CAR）；改造后的T細胞被稱為CAR-T，可以識別并攻擊帶有特定抗原的癌細胞，同時激活機體自免疫從而達到抗癌的效果。請回答下列問題：

(1)目前制造CAR-T細胞大部分是采用慢性病毒感染的方式使T細細胞表達CAR。

①獲得CAR基因（實質為抗CD19蛋白的抗體基因）：將抗CD19蛋白的抗體基因作為PCR反應的模板；并依據(jù)_____設計一個對特殊性引物來擴大應該的原因。

②構建基因表達載體：圖1為所用載體示意圖；表格為限制酶的序列及切割位置。為使目標與載體正確連接，在擴增目標基因時，應在其引物的_____端別引入_____兩種不同限制酶的序列。目的基因和載體連接時，可選_____（選填“E.coliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”）。

③將目的基因導入受體細胞：將重組質粒通過_____技術導入T細胞。

④重組質粒的篩選與確定：將轉化后的T細胞置于含_____培養(yǎng)基礎上進行培養(yǎng)；通過流式細胞試驗證明CAR-T細胞的結構是否成功。

。限制酶識別順序HindIIIA↓AGCTTPvit2CAG↓CTGKpnIG↓GTACCEcoRIG↓AATTCPstICTGCA↓GBamHIG↓GATCC

(2)采用病毒作為傳遞體存在隨機插入的安全隱患；CRISPR/Cas9技術作為第三代基因編譯工具（圖2），sgRNA可引導Cas9蛋白在特定位置進行切割來完成基因的編輯?？茖W家利用該技術制作的CAR-T細胞，在非霍奇金淋巴瘤臨床前的治療中取得理想成效。其操作原理如圖3所示。

①sgRNA能與基因特異識別；結合的原理是_____；基因編輯工具中對基因進行剪切的是_____。

②細胞表面的PD-L1蛋白和T細胞表面的PD-1受體結合；發(fā)出免疫抑制信號，現(xiàn)實免疫逃逸。該研究小組利用CRISPR/Cas9技術切割T細胞中PD-1基因的同時導入靶向PD-1基因的同源重組序列，利用同源重組修復的原理將_____重組在PD-1基因內部，制作了非病毒定點整合的CAR-T細胞，如圖3。

③綜上所述信息分析，與病毒感染的CAR-T細胞相比較，該方法產生的CAR-T細胞在非霍奇金淋巴瘤的治療中的優(yōu)勢有：可以_____插入抗CD19蛋白的抗體基因，降低隨機插入的安全隱患，提高CAR-T細胞的安全性；可以使PD-1基因突變，降低腫瘤細胞_____的可能性，提高CAR-T細胞的有效。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

1；DNA的溶解性：DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于冷酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質溶于酒精。

2；DNA的鑒定：在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色。

【詳解】

A、根據(jù)以上分析可知，DNA不溶于95%的冷酒精，但溶于2mol?L-1的NaCl溶液；A正確；

B；豬為哺乳動物；其成熟的紅細胞中不含細胞核和細胞器，即不含DNA，因此不能作為該實驗的材料，B錯誤；

C；利用植物組織提取DNA時；須先破碎細胞，破碎細朐時需添加食鹽和洗滌劑進行研磨，添加該物質的目的是瓦解細胞膜，而加入食鹽的目的是溶解并提取DNA，C正確；

D；在沸水浴的條件下；DNA遇二苯胺會被染成藍色，D正確。

故選B。2、D【分析】【分析】

1；胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）。

2；ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中；能夠維持不分化的狀態(tài)。在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛磺酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向不同類型的組織細胞分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段。

【詳解】

A；為了獲得更多的囊胚；可以采用激素促進成熟雌性個體超數(shù)排卵，然后將卵細胞從母體內取出，在試管內與人工采集的精子進行體外受精，培育成胚胎，A錯誤；

B；胚胎干細胞和其他細胞含有的核基因是相同的；而兩者的全能性不同是由于分化程度不同，B錯誤；

C；運用細胞培養(yǎng)技術可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞；首先必須用胰蛋白酶處理內細胞團，分解細胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個細胞，C錯誤；

D、動物細胞培養(yǎng)時需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；以維持培養(yǎng)液的pH，D正確；

故選D。3、D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取效應B細胞；將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞；克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。誘導動物細胞融合的方法有：物理法（離心；振動）、化學法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。

【詳解】

A；用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內；產生的血清抗體化學性質不單一，不是單克隆抗體，A錯誤；

B、體外培養(yǎng)單個已免疫的B淋巴細胞，由于該B淋巴細胞不能無限繁殖，所以無法獲得大量針對H7N9病毒的單克隆抗體；B錯誤；

C；將等量B細胞和骨髓瘤細胞混合；經PEG誘導融合后的細胞不都是雜交瘤細胞，還有B細胞自身融合的細胞、骨髓瘤細胞自身融合的細胞，C錯誤；

D、由于抗體具有專一性，該單克隆抗體是以H7N9病毒核衣殼蛋白為抗原制備出的，所以利用該單克隆抗體與H7N9病毒核衣殼蛋白特異性結合的方法可診斷出病毒感染者；D正確。

故選D。

【點睛】

本題考查了單克隆抗體制備的有關知識，考生要能夠識記制備過程以及制備過程中的相關注意點，注意細胞融合后產生的融合細胞不一定是雜交瘤細胞，篩選得到的雜交瘤細胞也不一定能夠產生單克隆抗體。4、B【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；倒平板時需左三圈；右三圈的輕輕晃動，以保證表面平整，A錯誤；

B；圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細菌數(shù)量均太多；應從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B正確；

C；由圖可知；該實驗的Ⅲ區(qū)已經出現(xiàn)由單個細菌繁殖而形成的菌落，所以該實驗結果能達到菌種純化的目的，C錯誤；

D；剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物；纖維素分解菌產生的纖維素酶可以水解纖維素而使菌落周圍出現(xiàn)無色透明圈，D錯誤。

故選B。

【點睛】5、C【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術擴增和人工合成?；虮磉_載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；利用PCR技術擴增目的基因時；使反應體系中的模板DNA解旋為單鏈的條件是加熱至90℃以上，目的是破壞DNA分子中的氫鍵，A正確；

B；構建重組Ti質粒的過程中；需將目的基因插入Ti質粒的T-DNA上，B正確；

C；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；終止密碼子位于mRNA上，C錯誤；

D；檢驗目的基因是否格合到青蒿基因組中；可用DNA分子雜交法，即將fps基因制成基因探針，與青蒿基因組DNA雜交，而檢測目的基因是否表達，常用抗原-抗體雜交法，D正確。

故選C。6、B【分析】【分析】

PCR過程中，可以通過設計特定的引物來擴增特定的DNA片段。4～9號是轉基因植株，理論上應包含目的基因。9號PCR結果不包含250～500bp片段；所以不是所需轉基因植株。

【詳解】

A、PCR過程中，可以通過設計特定的引物來擴增特定的DNA片段。4～9號是轉基因植株，理論上應包含目的基因，結合2號野生型和10號蒸餾水組的結果，推測包含目的基因的片段大小應為250～500bp；A正確；

B、3號PCR結果包含250～500bp片段；應包含目的基因，B錯誤；

C、9號PCR結果不包含250～500bp片段；所以不是所需轉基因植株，C正確；

D；10號放入蒸餾水；可排除反應體系等對結果的干擾，D正確。

故選B。7、D【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)是指從動物體中取出相關的組織；將它分散成單個細胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細胞生長和增殖的技術。

【詳解】

A；由于對動物血清成分尚未全部研究清楚；因此在動物細胞培養(yǎng)基中加入動物血清，A錯誤；

B；雜交瘤細胞具備腫瘤細胞可無限增殖的特點；因此不會發(fā)生接觸抑制等現(xiàn)象，B錯誤；

C；體外培養(yǎng)從牛卵巢采集的卵母細胞；需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂才具備受精的能力，在受精過程中完成減數(shù)第二次分裂，因此體外培養(yǎng)的卵母細胞不會增殖分裂，C錯誤；

D；將小鼠成纖維細胞誘導為多能干細胞；體外分化后可治療小鼠的鐮狀細胞貧血，D正確。

故選D。二、多選題(共6題，共12分)8、A:B【分析】【分析】

分解纖維素微生物的分離實驗原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細菌和放線菌等，它們可以產生纖維素酶。纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；篩選該高產菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；A正確；

B；由pH與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當pH為9時，纖維素酶的活性最高，故在探究最適溫度時應盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右，B正確；

C；由溫度與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當溫度為35℃時纖維素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的溫度實驗組，故無法判斷該酵母菌高產菌株產生纖維素酶的最適溫度是35℃，C錯誤；

D；酵母菌是兼性厭氧微生物；在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要給酵母菌提高有氧環(huán)境，以保證酵母菌的數(shù)量，D錯誤。

故選AB。

【點睛】9、A:C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種；劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；由甲平板觀察可知；平板中菌落分布均勻，采用的是稀釋涂布平板法，A正確；

B；由題圖信息分析可知；甲、丙培養(yǎng)基菌落數(shù)目多，含有野生型酵母菌菌株和某種營養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，而乙培養(yǎng)皿菌株是某種營養(yǎng)缺陷型酵母菌菌株，據(jù)此推測，乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，甲和丙是補充了相應的生長因子的培養(yǎng)基，B錯誤；

C；由于基因突變具有不定向性；因此接種到甲培養(yǎng)皿的酵母菌可能還有其他營養(yǎng)缺陷型，且有些菌落不一定由一個酵母菌形成，故甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少，C正確；

D；由題圖信息分析可知；乙培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基，故該培養(yǎng)皿中能夠形成的菌落是野生型菌株，不屬于營養(yǎng)缺陷型菌株，D正確。

故選ACD。10、A:D【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質；根據(jù)物理性質分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質和氧氣的要求。

2；微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素；瓊脂是凝固劑的一種，并不是營養(yǎng)物質，在培養(yǎng)液中加入瓊脂可以使液體培養(yǎng)基成為瓊脂固體培養(yǎng)基，A正確；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接種都采用了涂布平板法；B錯誤；

C、隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，普切明酸與Fe3+的結合增強；抑菌圈的紅色加深，C錯誤；

D、普切明酸與Fe3+形成紅色復合物，但隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，抑菌圈變窄，說明FeCl3能降低桔梅奇酵母對白地霉的防治效果；D正確。

故選AD。11、A:D【分析】【分析】

根據(jù)題意分析：茯磚茶的制作包括發(fā)酵與發(fā)花等工序；發(fā)酵過程涉及多種酶催化，發(fā)酵后飲用有利于營養(yǎng)物質的吸收。

【詳解】

A；酵母菌是真菌；不是細菌，A錯誤；

B；下“誘水”就是將原有老茶煮水后噴灑在料堆之上；相當于微生物培養(yǎng)過程中的“接種”，推測相關菌種可耐熱，B正確；

C；發(fā)酵過程涉及多種酶催化；發(fā)酵后富含多種小分子營養(yǎng)物質，因此發(fā)酵后飲用有利于營養(yǎng)物質的吸收，C正確；

D；茯磚茶在儲藏過程中仍然繼續(xù)自然發(fā)酵；因此滅菌并密封處理，不利于長期保存，D錯誤。

故選AD。12、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸稈生產燃料酒精是利用微生物進行生物發(fā)酵的過程；所利用的微生物為酵母菌，通過酒精發(fā)酵將葡萄糖轉化為酒精，玉米秸稈中含有的糖類主要是纖維素，因此需要先將纖維素水解成葡萄糖，再進行發(fā)酵。

【詳解】

A；由于纖維素組成成分復雜、結構穩(wěn)定；生物降解時難以迅速進行，常用酸或堿進行預處理，初步打斷纖維素內部的化學鍵，降低聚合度，利于酶與底物充分接觸，提高催化效率，A正確；

B；在有氧的條件下酵母菌進行出芽生殖；上層培養(yǎng)液與空氣接觸部位氧氣較多，短時間內酵母菌更多分布在發(fā)酵液的上層，B正確；

C；在選擇培養(yǎng)基中經多次培養(yǎng)；分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定，C正確；

D、發(fā)酵液pH下降是因為產生了CO2；D錯誤。

故選ABC。13、A:C:D【分析】【分析】

動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核；移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成為動物個體。

【詳解】

A；克隆北極狼的供體細胞來自野生北極狼；卵母細胞來自發(fā)情期的母犬，因此性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬的基因共同決定，比格犬只是代孕母體，不提供遺傳物質，A錯誤；

B；透明帶下注射法不抽取供體細胞的細胞核；操作簡單且對供體細胞核損傷小，同時注射的位置是卵母細胞外的透明帶，然后誘導兩個細胞融合，對卵母細胞的損傷小，B正確；

C；供體細胞注入卵母細胞透明帶內后；還需要電融合法等誘導才能使供體細胞進入卵母細胞形成重構胚，C錯誤；

D；細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程是有絲分裂過程；而基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過程，D錯誤。

故選ACD。三、填空題(共8題，共16分)14、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的愿望；進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉基因等技術，賦子生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品。由于基因工程是在DNA分子水平上進行設計和施工的，因此又叫做DNA重組技術。

基因工程的原理是基因重組；其優(yōu)點是打破了生殖隔離。但由于科學發(fā)展水平的限制，目前科學家對基因的結構；基因間的相互作用以及基因的調控機制等都了解得相當有限；再加上轉移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因；同時，由于外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的，因此在轉基因生物中，有時候會出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。

【詳解】

（1）轉基因生物具有以下優(yōu)點：

作物產量高；能解決糧食短缺問題；利用基因工程生產的抗蟲作物能夠減少農藥使用，減少環(huán)境污染；利用基因工程培育的生長迅速；營養(yǎng)品豐富的生物，能增加食物營養(yǎng)，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能夠生產稀缺的生化藥物。

（2）轉基因生物受限于科學發(fā)展水平；可能會產生以下問題：

轉基因生物與同種生物雜交；可能產生重組病菌；重組病毒或超級雜草；導入轉基因生物的外源基因有可能與感染轉基因生物的某些細菌或病毒雜交，從而重組出對人類或其他生物有害的病原體，可能使疾病的傳播跨越物種障礙。

（3）轉基因技術取得了巨大的成果；但科學技術是把雙刃劍，面對轉基因技術的利弊，正確的做法應該是趨利避害，而不能因噎廢食。

【點睛】

本題考查轉基因生物的安全性問題，意在考查學生對轉基因生物安全性問題的識記與理解?！窘馕觥拷鉀Q糧食短缺問題減少農藥使用，減少環(huán)境污染增加食物營養(yǎng)，提高附加值能產生有毒蛋白或新過敏原可能產生重組病菌、重組病毒或超級雜草可能使疾病的傳播跨越物種障礙趨利避害不能因噎廢食15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落菌落數(shù)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】載體17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】特定磷酸二酯鍵特異性18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不容的雜質析出DNA過濾溶液中的雜質DNA19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒有）胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮；胚狀體和人工胚乳。

（2）20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】個體生物學水平抗蟲性狀。21、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質工程技術替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|工程技術替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質。四、判斷題(共2題，共8分)22、B【分析】【詳解】

要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造基因中的堿基序列來完成，因為基因能指導蛋白質的生物合成，故說法錯誤。23、A【分析】【詳解】

轉入到油菜的抗除草劑基因，則可能通過減數(shù)分裂進入到花粉細胞中，進而傳入環(huán)境中的其他生物體內。本說法正確。五、實驗題(共1題，共8分)24、略

【分析】【詳解】

（1）電泳法分離蛋白質；是根據(jù)蛋白質分子的電荷；大小及形狀不同，在電場中的遷移速度不同而實現(xiàn)分離。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白質較多；可作為碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中；金黃色葡萄球菌應該不能生長或生長很少，未加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中金黃色葡萄球菌應該能生長，菌落較多。

（4）平板劃線法、稀釋涂布平板法都能使接種的菌種在固體培養(yǎng)上充分分散，對使用過的培養(yǎng)基應進行滅菌處理，是為了防止細菌擴散污染?！窘馕觥竣?電荷（帶電情況）②.遷移速度③.碳源④.氮源⑤.數(shù)量⑥.平板劃線法⑦.稀釋涂布平板法（稀釋混合平板法）⑧.滅菌六、綜合題(共4題，共24分)25、略

【分析】【分析】

基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體；限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種；DNA連接酶分為兩類：E．coliDNA連接酶和T4DNA連接酶；基因工程常用的運載體：質粒；噬菌體的衍生物、動植物病毒。

（1）

限制性核酸內切酶（簡稱限制酶）切割DNA分子后；產生的片段末端類型有黏性末端和平末端。

（2）

目的基因與運載體具有相同的黏性末端才能連接；若用包括EcoRⅠ在內的兩種限制酶切割目的基因，則另一種限制酶必須具有的特點是：切割產生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產生的相同。

（3）

按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即E·coliDNA連接酶（來源于大腸桿菌）和T4DNA連接酶（來源于T4D噬菌體）。

（4）

基因工程中常用的運載體是質粒；此外還有λ噬菌體的衍生物和動植物病毒。

（5）

由于未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的能力極弱，因此若用重組質粒轉化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，而通常用Ca2+處理大腸桿菌細胞；使其成為感受態(tài)細胞，此時細胞壁和細胞膜的通透性增大，容易吸收重組質粒。

（6）

基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟；該過程需要用限制酶切出黏性末端，然后再用DNA連接酶連接形成重組DNA。

【點睛】

解答本題需熟記并理解DNA重組技術的基本工具、基因工程的基本操作程序并形成清晰的知識網(wǎng)絡。在此基礎上，結合問題情境，從題意中提取有效信息進行相關問題的解答?！窘馕觥浚?）平末端黏性末端。

（2）切割產生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產生的相同。

（3）T4E·coli

（4）動植物病毒λ噬菌體的衍生物。

（5）未處理的大腸桿菌吸收質粒(外源DNA)的能力極弱。

（6）基因表達載體的構建限制性核酸內切酶（限制酶）和DNA連接酶26、略

【分析】【分析】

分析圖示；圖為培育高產耐鹽的雜種植株過程：將甲；乙兩種植物細胞用A纖維素酶和果膠酶除去細胞壁，獲得甲、乙原生質體，然后用PEG誘導原生質體融合，獲得B融合的原生質體，再生細胞壁獲得C完整雜種細胞，經過脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成幼苗，經過高鹽環(huán)境選擇后獲得目標植株。

（1）

由植物細胞變成原生質體；需要去掉細胞壁，細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，酶具有專一性，所以應用纖維素酶和果膠酶處理細胞壁，即A是纖維素酶和果膠酶；利用植物組織培養(yǎng)技術可得到愈傷組織；叢芽結構和試管苗，并非每個細胞都能表達出耐鹽性狀，需要利用含鹽培養(yǎng)基進行選擇，D是具有耐鹽優(yōu)良性狀的幼芽；D長成的幼苗有耐鹽高產和耐鹽不高產兩種，故需要進行選擇。

（2）

C細胞是雜種細胞；形成植株需要利用植物組織培養(yǎng)技術；由愈傷組織形成D的過程稱為再分化過程；為避免雜菌污染，整個培養(yǎng)過程要在無菌的條件下進行。

（3）

植物體細胞融合之前；需要對植物細胞去掉細胞壁，植物體細胞融合成功的標志是雜種細胞再生出新的細胞壁；植物體細胞雜交的意義是可以克服遠緣雜交不親和的障礙。

（4）

已知甲；乙植物分別為不同種植物的四倍體、二倍體；融合后的細胞內含有6個染色體組，則融合后的“甲—乙植株”屬于異源六倍體。

【點睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)和植物體細胞融合相關知識，意在考查考生根據(jù)對細胞工程相關技術和過程的掌握，準確分析圖示過程?！窘馕觥浚?）纖維素酶和果膠耐鹽有耐鹽高產和耐鹽不高產兩種幼苗