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文檔簡介

PAGE14-第36講細(xì)胞工程考點(diǎn)一植物細(xì)胞工程技術(shù)及其應(yīng)用1.細(xì)胞工程(1)操作水平:細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平。(2)目的:依據(jù)人的意愿來變更細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品。2.植物細(xì)胞的全能性(1)概念:具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。(2)物質(zhì)基礎(chǔ):細(xì)胞中具有本物種全部遺傳信息。(3)表達(dá)條件:具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu),處于離體狀態(tài),供應(yīng)肯定的養(yǎng)分、激素和其他相宜外界條件。3.植物組織培育技術(shù)(1)原理:植物細(xì)胞的全能性。(2)條件:無菌和人工限制、人工配制的培育基、相宜的培育條件。(3)過程4.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)概念:將不同種的植物體細(xì)胞,在肯定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。(2)過程(如圖)①去壁:對應(yīng)圖中a過程,即去除細(xì)胞壁,獲得具有活力的原生質(zhì)體,用到的酶是纖維素酶和果膠酶。②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合③植物體細(xì)胞雜交勝利的標(biāo)記:形成雜種植株。④優(yōu)點(diǎn):克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。⑤變異類型:染色體變異。5.植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑①微型繁殖:用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培育技術(shù)。②作物脫毒:選取作物莖尖、根尖等無毒組織進(jìn)行組織培育,獲得脫毒苗的技術(shù)。③人工種子:以植物組織培育得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等為材料,經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子,可以解決某些植物牢固率低、繁殖困難的問題。(2)作物新品種的培育:單倍體育種和突變體的利用。(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn):即利用植物組織培育技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料和生物堿等。1.植物組織培育與植物體細(xì)胞雜交在依據(jù)的原理、技術(shù)操作等方面有何不同?(1);

(2)。

提示:(1)前者依據(jù)的原理為細(xì)胞的全能性;后者依據(jù)的原理,除細(xì)胞的全能性外,還有細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特性,即細(xì)胞膜具有肯定的流淌性(2)前者操作技術(shù)主要為脫分化、再分化等;后者的操作技術(shù)除脫分化、再分化外,還要用酶解法去除細(xì)胞壁,用肯定的方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合2.通過植物體細(xì)胞雜交形成的雜交植株是否肯定可育?提示:是否可育看同源染色體能否正常聯(lián)會。若植物體細(xì)胞雜交過程得到的雜種植物存在同源染色體,能正常聯(lián)會,則可育。3.生長素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培育中特別重要,人們常把它們稱為“激素杠桿”。簡述它們在組織培育中各發(fā)揮何種作用?提示:當(dāng)生長素含量高于細(xì)胞分裂素時(shí),主要誘導(dǎo)植物組織脫分化和根原基的形成;而當(dāng)細(xì)胞分裂素含量高于生長素時(shí),則主要誘導(dǎo)植物組織再分化和芽原基的形成。4.回答細(xì)胞分化、脫分化和再分化過程的相關(guān)問題:(1)脫分化形成的愈傷組織細(xì)胞與正常體細(xì)胞相比,前者在結(jié)構(gòu)上的特點(diǎn)是。

提示:高度液泡化、無定形、細(xì)胞壁薄(2)脫分化和再分化是否都須要光照?提示:脫分化不須要光照,再分化須要光照。(3)利用紫草細(xì)胞脫分化形成的愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行培育提取紫草素,與常規(guī)的從植物體內(nèi)提取具有的明顯優(yōu)點(diǎn)是什么?(至少答出三點(diǎn))提示:可以克服地理、氣候等植物生長環(huán)境條件的限制;實(shí)現(xiàn)工業(yè)化、自動化生產(chǎn);產(chǎn)量大、純度高。(4)從分化、脫分化和再分化的結(jié)果看,它們的實(shí)質(zhì)都是什么?提示:基因在特定的時(shí)間和空間條件下選擇性表達(dá)的結(jié)果。(5)誘導(dǎo)愈傷組織形成的胚狀體,通過包袱上人工種皮,可以制成人工種子。通過這一途徑獲得的“人工種子”與雜交育種獲得種子相比,其優(yōu)點(diǎn)是什么?(答一點(diǎn)即可)提示:可以解決作物繁殖實(shí)力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題。題型一植物組織培育過程分析1.下圖表示基因型為AaBb的水稻的花藥通過無菌操作,接入試管后,在肯定條件下形成試管苗的培育過程。下列相關(guān)敘述錯誤的是(D)A.愈傷組織是花藥細(xì)胞通過有絲分裂后形成的不規(guī)則的細(xì)胞團(tuán)B.在愈傷組織的形成過程中,必需從培育基中獲得水、無機(jī)鹽和小分子的有機(jī)物等養(yǎng)分物質(zhì)C.為促進(jìn)花藥細(xì)胞分裂生長,在培育基中應(yīng)加入相宜濃度的生長素等植物激素D.試管苗可能出現(xiàn)的基因型有AABB或AAbb或aaBB或aabb解析:花藥是通過減數(shù)分裂形成的,其基因型為AB或Ab或aB或ab,由花藥發(fā)育而來的個(gè)體未經(jīng)秋水仙素處理,是單倍體。2.為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培育條件和植株再生實(shí)力,某探討小組的試驗(yàn)過程如下圖。下列敘述正確的是(D)A.過程①獲得的原生質(zhì)體需懸浮在30%蔗糖溶液中B.過程②需提高生長素的比例以促進(jìn)芽的分化C.過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生D.原生質(zhì)體雖無細(xì)胞壁但仍保持細(xì)胞的全能性解析:過程①是制備原生質(zhì)體,獲得的原生質(zhì)體若懸浮在30%的蔗糖溶液中會失水皺縮;過程②是植物組織培育的再分化過程,需提高細(xì)胞分裂素的比例以促進(jìn)芽的分化;秋水仙素的作用是抑制紡錘體的形成,且脫分化形成的愈傷組織細(xì)胞已經(jīng)具備細(xì)胞壁,故過程③不須要用秋水仙素處理;原生質(zhì)體雖無細(xì)胞壁,但含有細(xì)胞核,細(xì)胞核中含有個(gè)體發(fā)育所需的全部遺傳信息,故原生質(zhì)體仍保持細(xì)胞的全能性。3.(2024·全國Ⅱ卷)植物組織培育技術(shù)在科學(xué)探討和生產(chǎn)實(shí)踐中得到廣泛的應(yīng)用?;卮鹣铝袉栴}:(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比,這種微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有

(答出2點(diǎn)即可)。

(2)通過組織培育技術(shù),可把植物組織細(xì)胞培育成胚狀體,再通過人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示),這種人工種子在相宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是。人工胚乳能夠?yàn)榕郀铙w生長供應(yīng)所需的物質(zhì),因此應(yīng)含有植物激素、和等幾類物質(zhì)。

(3)用脫毒苗進(jìn)行繁殖,可以削減作物感染病毒。為了獲得脫毒苗,可以選取植物的進(jìn)行組織培育。

(4)植物組織培育技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細(xì)胞培育成一個(gè)完整植株的基本程序是(用流程圖表示)。

解析:(1)微型繁殖技術(shù)屬于無性繁殖,具有能保持植物原有的遺傳特性、繁殖速度快的特點(diǎn)。(2)人工種子由胚狀體、人工胚乳及人工種皮等組成。人工種皮常具備透氣性,以保證胚狀體的細(xì)胞呼吸,人工胚乳需含有胚狀體生長所須要的物質(zhì),包括植物激素、礦質(zhì)元素和糖等物質(zhì)。(3)為獲得脫毒苗,一般選取植物的莖尖進(jìn)行組織培育,因?yàn)榍o尖組織細(xì)胞中幾乎不含病毒。(4)將含有目的基因的細(xì)胞培育成一個(gè)完整植株的基本程序,即組織培育過程,詳細(xì)如下:含目的基因的細(xì)胞愈傷組織小植株。答案:(1)能保持植物原有的遺傳特性,繁殖速度快(2)有利于胚狀體進(jìn)行呼吸作用礦質(zhì)元素糖(3)莖尖(4)含目的基因的細(xì)胞愈傷組織小植株題型二植物體細(xì)胞工程及應(yīng)用4.“白菜—甘藍(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種,它具有生長期短和耐貯存等優(yōu)點(diǎn)。下圖是“白菜—甘藍(lán)”的培育過程示意圖,下列描述錯誤的是(C)A.培育過程中,實(shí)現(xiàn)①②過程常用的物質(zhì)為纖維素酶和果膠酶B.過程③的誘導(dǎo)方法有物理法和化學(xué)法兩種C.⑤過程中進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是減數(shù)分裂,形成的雜種植物幼苗遺傳物質(zhì)發(fā)生變更D.植物體細(xì)胞雜交方法的優(yōu)點(diǎn)是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙解析:依據(jù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以確定①②是利用纖維素酶和果膠酶除去細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體,③是兩種細(xì)胞的原生質(zhì)體融合,形成融合的原生質(zhì)體,常用物理法和化學(xué)法兩種誘導(dǎo)方法,其遺傳物質(zhì)發(fā)生了變更,是白菜細(xì)胞和甘藍(lán)細(xì)胞遺傳物質(zhì)的集合,其細(xì)胞分裂方式為有絲分裂;植物體細(xì)胞雜交克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。5.(2024·黑龍江哈爾濱二模)紫草素是紫草細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,可作為生產(chǎn)治療燙傷藥物的原料。探討人員通過培育紫草細(xì)胞生產(chǎn)紫草素。為了獲得紫草素,某制藥公司利用植物組織培育技術(shù),從培育的愈傷組織中提取這種有效成分。請回答下列問題:(1)培育時(shí),通常選擇新生的芽作為外植體,這是因?yàn)?/p>

。

將離體的芽培育在人工配制的培育基上,賜予相宜的培育條件,誘導(dǎo)其依次產(chǎn)生、,最終形成完整的植株。

(2)假設(shè)紫草與另一種植物A均為二倍體藥用植物(紫草細(xì)胞中有2n條染色體,A植物細(xì)胞中有2m條染色體)。某藥物探討所擬利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育同時(shí)含有兩種有效成分的新型藥用植物。為了得到原生質(zhì)體需用酶和酶去除兩植物的細(xì)胞壁,然后誘導(dǎo)其融合形成雜種細(xì)胞。

(3)融合形成的雜種細(xì)胞在有絲分裂后期含有條染色體。雜種細(xì)胞培育成的新型藥用植物為倍體,在這個(gè)過程中所利用的生物學(xué)原理是。

解析:(1)由于新生芽的細(xì)胞分化程度低,簡單誘導(dǎo)脫分化,因此組織培育時(shí)常以此作為外植體。將離體的芽培育在人工配制的培育基上,賜予相宜的培育條件,誘導(dǎo)其依次產(chǎn)生愈傷組織和叢芽,最終形成完整的植株。(2)去掉植物的細(xì)胞壁,常用纖維素酶和果膠酶處理。(3)因?yàn)樽喜莺椭参顰均為二倍體,因此融合的雜種細(xì)胞中含染色體2(n+m),有絲分裂后期的染色體數(shù)目為4(n+m)。新型藥用植物為四倍體。依據(jù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。答案:(1)細(xì)胞分化程度低,簡單誘導(dǎo)脫分化愈傷組織叢芽(2)纖維素果膠(3)4(n+m)四植物細(xì)胞具有全能性植物體細(xì)胞雜交后的遺傳物質(zhì)分析(1)遺傳特性:雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì),故雜種植株具備兩種植物的遺傳特性。(2)染色體組①染色體組數(shù)=兩種植物體細(xì)胞內(nèi)染色體組數(shù)之和。②植物體細(xì)胞雜交形成的雜種植株,有幾個(gè)染色體組就稱為幾倍體。考點(diǎn)二動物細(xì)胞培育和核移植技術(shù)1.動物細(xì)胞培育(1)地位:動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有動物細(xì)胞培育、動物細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞融合等。其中動物細(xì)胞培育技術(shù)是其他動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。(2)培育過程(3)培育條件①無菌、無毒環(huán)境②養(yǎng)分:除糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素之外,通常還需加入血清、血漿等一些自然成分。③相宜的溫度:36.5±0.5℃;相宜的pH:7.2~7.4。④氣體環(huán)境2.動物體細(xì)胞克隆技術(shù)(核移植技術(shù))(1)原理:動物細(xì)胞核具有全能性。(2)核移植分類:胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。(3)核移植過程(以克隆高產(chǎn)奶牛為例)(4)應(yīng)用①加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。②愛護(hù)瀕危物種。③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。④作為異種移植的供體。⑤用于組織器官的移植。1.動物細(xì)胞體外培育時(shí),通常要在培育基中補(bǔ)充肯定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培育影響的試驗(yàn)結(jié)果。(1)從該圖供應(yīng)的信息可以獲得的正確結(jié)論有

。

提示:①有無血清對正常細(xì)胞培育的影響不同;②培育基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培育;③培育基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培育影響不大(2)動物細(xì)胞培育時(shí)為什么要加入血清?提示:因血清和血漿中含有多種維持細(xì)胞正常代謝和生長的物質(zhì),如蛋白質(zhì)、氨基酸、未知的促生長因子等。因此細(xì)胞培育時(shí),為保證細(xì)胞能順當(dāng)生長和繁殖,一般需添加血清、血漿等自然成分。2.如圖為動物體細(xì)胞核移植過程流程圖,據(jù)圖回答下列問題:(1)去掉受體卵母細(xì)胞的核的目的是

。

提示:使核移植動物的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自有利用價(jià)值的動物供應(yīng)的細(xì)胞核(2)核移植的供體細(xì)胞一般都選10代以內(nèi)的細(xì)胞,其緣由是

提示:核移植時(shí),做供核一方的一般是傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞,緣由是10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型,遺傳物質(zhì)不發(fā)生變更(3)動物體細(xì)胞核移植的難度高于胚胎細(xì)胞核移植的緣由是

提示:動物胚胎的細(xì)胞分化程度低,復(fù)原其全能性相對簡單,而動物體細(xì)胞分化程度高,復(fù)原其全能性特別困難題型一動物細(xì)胞培育過程及所需條件等1.下列關(guān)于動物細(xì)胞培育的敘述,正確的是(D)A.培育保留接觸抑制的細(xì)胞在培育瓶壁上可形成多層細(xì)胞B.克隆培育法培育過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生變更C.二倍體細(xì)胞的傳代培育次數(shù)通常是無限的D.惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培育解析:由于細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸抑制,細(xì)胞在培育瓶壁上只能形成單層的細(xì)胞;克隆培育法中細(xì)胞都是由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過有絲分裂而來的,所以細(xì)胞的基因型相同,多數(shù)不會發(fā)生變更;二倍體細(xì)胞傳代培育至10代多數(shù)會死亡,只有少數(shù)的細(xì)胞能夠培育至50代以后成為細(xì)胞系,而惡性細(xì)胞系的細(xì)胞具有癌變的特點(diǎn),能夠無限增殖,可以進(jìn)行傳代培育。2.對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培育。下列說法錯誤的是(B)A.在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí),可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.動物細(xì)胞培育應(yīng)在含5%CO2的恒溫培育箱中進(jìn)行,CO2的作用是刺激細(xì)胞呼吸C.為了防止動物細(xì)胞培育過程中細(xì)菌的污染,可向培育液中加入適量的抗生素D.在合成培育基中,通常需加入血清、血漿等自然成分解析:動物細(xì)胞培育一般用液體培育基,添加5%CO2的主要目的是調(diào)整培育液的pH,使之適合動物細(xì)胞的生存,而非刺激細(xì)胞的呼吸。3.某探討小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí),以動物細(xì)胞為材料,測定藥物對體外培育細(xì)胞的毒性,供給的細(xì)胞有甲、乙兩種,甲為骨髓瘤細(xì)胞,乙為經(jīng)免疫過的正常漿細(xì)胞,請答題:(1)將數(shù)量相等的甲和乙分別置于培育瓶中培育,培育液及其他培育條件均相同且相宜。一段時(shí)間后,視察到的現(xiàn)象是。

(2)動物細(xì)胞培育須要滿意肯定的條件,下列有關(guān)表述正確的有(選擇填寫下列條件前的序號)。

①對培育液和培育用具進(jìn)行無菌處理,在細(xì)胞培育液中添加肯定量的抗生素,定期更換培育液,這些做法都有利于供應(yīng)一個(gè)無菌無毒的培育環(huán)境;②在運(yùn)用合成培育基時(shí),通常需加入血漿等自然成分;③全部動物細(xì)胞培育的相宜溫度均為36.5±0.5℃,多數(shù)哺乳動物細(xì)胞生存的相宜pH為7.0左右;④動物細(xì)胞培育所需的氣體只是O2,因?yàn)镺2是細(xì)胞代謝所必需;⑤培育液中需添加肯定濃度和比例的生長素與細(xì)胞分裂素,以誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化和再分化。(3)藥物試驗(yàn)須要大量細(xì)胞,甲、乙看來都不適合用于試藥,理由是:

。

(4)令甲、乙細(xì)胞融合,所獲雜交細(xì)胞在體外培育條件下,具有的特點(diǎn)。

(5)已知癌基因X過量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生親密相關(guān),要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對乙細(xì)胞生長的影響,可將乙細(xì)胞分為A、B兩組,A組細(xì)胞培育液中加入Y藥物,B組細(xì)胞培育液中加入無菌生理鹽水,經(jīng)培育后,從A、B兩組收集等量細(xì)胞,通過分別檢測X基因在A、B兩組細(xì)胞中的合成水平的差異,確定Y的藥效。

解析:(1)骨髓瘤細(xì)胞在體外培育條件下能無限增殖,漿細(xì)胞在體外(體內(nèi))培育條件下不能增殖,已知甲細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞,乙細(xì)胞為漿細(xì)胞。將數(shù)量相等的甲和乙分別置于培育瓶中培育,培育液及其他培育條件均相同且相宜。一段時(shí)間后,視察到的現(xiàn)象是甲增多,乙不增多。(2)③細(xì)胞體外培育的相宜溫度和動物體溫相近,哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜,多數(shù)動物細(xì)胞生存的相宜pH為7.2~7.4,③錯誤;④動物細(xì)胞培育所需的氣體主要有氧氣和二氧化碳,O2是細(xì)胞代謝所必需,二氧化碳主要維持培育液的pH,④錯誤;⑤動物細(xì)胞培育不須要添加植物激素,⑤錯誤。(3)藥物試驗(yàn)須要大量細(xì)胞,甲、乙看來都不適合用于試藥,因?yàn)榧子胁糠只蛞呀?jīng)發(fā)生了變異,藥物對甲的效果不肯定與正常體細(xì)胞的效果相同,乙在體外培育不能增殖,不能得到大量細(xì)胞用于試藥。(4)甲、乙細(xì)胞融合,所獲雜交細(xì)胞在體外培育條件下,具有既能增殖,又能產(chǎn)生專一抗體的特點(diǎn)。(5)已知基因X的表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生親密相關(guān),而基因X的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)步驟,抗癌藥物Y的作用可能是抑制基因X的轉(zhuǎn)錄過程,也可能是抑制其翻譯過程,因此通過分別檢測基因X在A、B兩組細(xì)胞中的mRNA和相關(guān)蛋白質(zhì)合成水平的差異,可以確定Y的藥效。答案:(1)甲增多、乙不增多(2)①②(3)甲有部分基因已經(jīng)發(fā)生變異,藥物對甲的效果不肯定與對正常體細(xì)胞的效果相同;乙在體外培育不能增殖,不能得到大量細(xì)胞用于試藥(4)既能增殖又能產(chǎn)生專一抗體(5)mRNA和蛋白質(zhì)題型二細(xì)胞核移植技術(shù)及應(yīng)用4.如圖為克隆羊“多利”的培育過程示意圖。下列各項(xiàng)有關(guān)表述不正確的是(A)A.由于細(xì)胞核基因完全來自甲羊,所以克隆羊“多利”的性狀與甲羊完全一樣B.克隆羊“多利”的培育過程中采納的生物技術(shù)有核移植C.乙羊的去核卵細(xì)胞為重組細(xì)胞基因表達(dá)供應(yīng)了細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境條件D.此過程說明高度分化的動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性解析:生物的性狀是由細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同限制的,還要受環(huán)境的影響。題中“多利”羊的細(xì)胞核基因來自甲羊,而細(xì)胞質(zhì)基因來自乙羊,所以“多利”羊的性狀應(yīng)與甲羊基本相同,同時(shí)受乙羊供應(yīng)的質(zhì)基因和環(huán)境的影響。核移植應(yīng)留意的三個(gè)問題(1)克隆動物是由重組的細(xì)胞經(jīng)培育而來的,該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞,細(xì)胞核基因來源于供應(yīng)細(xì)胞核的親本,其遺傳物質(zhì)來自兩個(gè)親本。(2)克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同,少數(shù)性狀與供應(yīng)卵母細(xì)胞的動物相同,與代孕動物的性狀無遺傳關(guān)系。(3)從生殖方式的角度看,動物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)屬于無性生殖,重組細(xì)胞相當(dāng)于受精卵,須要動物細(xì)胞培育和胚胎工程技術(shù)的支持??键c(diǎn)三動物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備1.動物細(xì)胞融合(1)概念:兩個(gè)或多個(gè)動物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程,也稱細(xì)胞雜交。(2)條件:須要用聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒或電激等誘導(dǎo)因素。(3)原理:細(xì)胞膜的流淌性。(4)結(jié)果:形成具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。(5)意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。已成為探討細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段,為制造單克隆抗體開拓了新途徑。2.單克隆抗體制備(1)制備過程(2)優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備。(3)用途:作為診斷試劑;制成“生物導(dǎo)彈”,用于治療疾病和運(yùn)載藥物。下圖為單克隆抗體制備過程示意圖。請分析并回答問題:(1)制備過程中用到的技術(shù)有哪幾種?(至少答出兩條)。提示:動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞培育。(2)制備單克隆抗體至少須要經(jīng)過幾次篩選?將細(xì)胞混合并誘導(dǎo)融合后轉(zhuǎn)到HAT培育基中培育,其目的是什么?提示:兩次。篩選獲得雜交瘤細(xì)胞。(3)通過過程③篩選得到的細(xì)胞還需進(jìn)行過程④的專一性抗體檢驗(yàn),緣由是什么?提示:從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞不止一種類型。題型動物細(xì)胞融合技術(shù)及單克隆抗體的制備1.關(guān)于應(yīng)用動物細(xì)胞工程技術(shù)獲得單克隆抗X抗體的詳細(xì)操作步驟如下,其中對單克隆抗體制備的相關(guān)敘述中不正確的是(C)①將X抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞②從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲得骨髓瘤細(xì)胞③利用促細(xì)胞融合因子使兩種細(xì)胞發(fā)生融合④將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培育⑤篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞⑥從腹水中提取抗體A.試驗(yàn)依次應(yīng)當(dāng)是①②③⑤④⑥B.④過程中產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞也為克隆C.③過程獲得的細(xì)胞均可無限增殖D.③到⑤的過程中通常要經(jīng)過兩次篩選解析:③過程獲得的細(xì)胞不都能無限增殖,如B淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞不能無限增殖,因此還須要用選擇培育基進(jìn)行篩選。2.下圖為某同學(xué)依據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計(jì)生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的試驗(yàn)方案。請據(jù)圖回答下列問題:(1)制備單克隆抗體的過程中用到的動物細(xì)胞工程的技術(shù)手段有和。

(2)制備單克隆抗體的免疫學(xué)基本原理是

。

(3)該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎?,緣由是

。

(4)圖中過程②中常用作為誘導(dǎo)劑。假如能勝利獲得志向的雜交瘤細(xì)胞,該細(xì)胞的特點(diǎn)是

(答兩點(diǎn))。

(5)破傷風(fēng)桿菌的抗體最終可從

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