2025年湘師大新版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年湘師大新版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷813考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中，不正確的是（）A.培養(yǎng)貼附性細(xì)胞時(shí)要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)表面光滑、無(wú)毒、易于貼附B.需將培養(yǎng)細(xì)胞的松蓋培養(yǎng)瓶置于95%CO2和5%O2的混合氣體培養(yǎng)箱中C.傳代培養(yǎng)時(shí)，少數(shù)細(xì)胞會(huì)克服細(xì)胞壽命的自然極限，其遺傳物質(zhì)已經(jīng)改變D.培養(yǎng)正常的或病變的細(xì)胞，可用于生理、病理、藥理等方面的研究2、植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理；培養(yǎng)過(guò)程的順序及誘導(dǎo)的植物激素分別是()

①體細(xì)胞全能性②離體植物器官、組織或細(xì)胞③根、芽④生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素⑤生長(zhǎng)素和乙烯⑥愈傷組織⑦再分化⑧脫分化⑨植物體A.①、②⑦⑥⑧③⑨、④B.①、②⑧⑥⑦③⑨、④C.①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤D.①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤3、一只羊的卵細(xì)胞核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后，這個(gè)卵細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次分裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用途，但是不能（）A.有選擇地繁殖某一性別的家畜B.繁殖家畜中的優(yōu)秀個(gè)體C.用于保存物種D.改變物種的基因型4、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大多取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織B.培養(yǎng)過(guò)程中需要使用胰蛋白酶獲得離散的細(xì)胞C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液與植物組織培養(yǎng)液的組成成分相同D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)5、動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段中，最基礎(chǔ)的是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)B.動(dòng)物細(xì)胞融合C.生產(chǎn)單克隆抗體D.動(dòng)物細(xì)胞核移植6、如圖是中國(guó)科學(xué)家首次用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆出兩只獼猴的簡(jiǎn)單流程，敘述錯(cuò)誤的是（）

A.培養(yǎng)供體體細(xì)胞的培養(yǎng)液中常需添加動(dòng)物血清B.卵母細(xì)胞去核和體細(xì)胞注射常在顯微鏡下操作C.克隆猴的誕生利用了體外受精和胚胎移植技術(shù)D.克隆后代的遺傳物質(zhì)與供體體細(xì)胞不完全一致7、蘋果醋具有較好的營(yíng)養(yǎng)和保健功能。下列有關(guān)家庭制作蘋果醋的操作中，錯(cuò)誤的是（）A.碗中加少量米酒敞口靜置，取表面菌膜B.選取成熟較度高的蘋果洗凈后榨汁C.向蘋果汁中加入適量的蔗糖和抗生素D.醋酸發(fā)酵階段每隔一段時(shí)間進(jìn)行攪拌8、用農(nóng)桿菌侵染水稻（二倍體）細(xì)胞，獲得1條染色體上R基因被插入T-DNA的個(gè)體T0．T-DNA插入基因的位置如圖1所示。T0自交得T1，同時(shí)用P1、P2、P3為引物檢測(cè)T1個(gè)體的基因組成情況，如圖2所示。（圖1箭頭方向?yàn)橐锼谧渔湹难由旆较?；R基因被T-DNA插入后，用P1、P2為引物無(wú)法完成PCR）。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.該實(shí)驗(yàn)中所用的P1、P2、P3三種引物均為單鏈DNAB.R基因被T-DNA插入后可能會(huì)導(dǎo)致基因無(wú)法表達(dá)相應(yīng)蛋白C.用P1、P2引物進(jìn)行PCR得到產(chǎn)物的個(gè)體均為R基因純合子D.W、H、M個(gè)體的比例不為1：2：1，是因?yàn)檎{(diào)查的樣本數(shù)量較小評(píng)卷人得分二、多選題(共8題，共16分)9、下列關(guān)于試管嬰兒技術(shù)的敘述，正確的是（）A.在采集卵母細(xì)胞之前，需要給供卵者注射適量的促性腺激素，促進(jìn)排卵B.從卵巢中吸取的卵母細(xì)胞，必須經(jīng)體外培養(yǎng)獲能處理后才能用于受精C.受精過(guò)程中，卵母細(xì)胞會(huì)發(fā)生透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)，阻止多精入卵D.設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)，有利于生育健康的下一代，不會(huì)造成社會(huì)危害10、科學(xué)家運(yùn)用基因工程技術(shù)，將人凝血因子基因?qū)肷窖虻氖芫阎校嘤錾窖蛉橄偕锓磻?yīng)器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入山羊的受精卵B.在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子存在于乳腺細(xì)胞，而不存在于其他細(xì)胞C.人凝血因子基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNAD.科學(xué)家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因重組在一起，從而使人凝血因子基因只在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)11、近年來(lái)；全人源化單克隆抗體技術(shù)發(fā)展迅速，利用轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)進(jìn)行全人源化單克隆抗體的制備流程如圖所示，下列說(shuō)法正確的是（）

A.該技術(shù)能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應(yīng)B.過(guò)程①②采用核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性C.過(guò)程⑧要經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選、克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)等過(guò)程D.體外培養(yǎng)B細(xì)胞也可以大量獲得針對(duì)該抗原的單克隆抗體12、下列關(guān)于土壤中纖維素分解菌的分離與計(jì)數(shù)，敘述正確的是（）A.可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌B.培養(yǎng)基中應(yīng)含大量的葡萄糖或蔗糖提供生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)C.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌D.菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基13、下列關(guān)于基因工程中幾種工具的敘述，正確的是（）A.限制酶可水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可將末端堿基互補(bǔ)的兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)C.DNA聚合酶能夠從核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對(duì)重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因14、細(xì)菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在與其他細(xì)菌的競(jìng)爭(zhēng)中占優(yōu)勢(shì)，其中tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白。研究人員利用野生型細(xì)菌X及其不同突變體進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)：在固體培養(yǎng)基表面放置一張能隔離細(xì)菌的濾膜，將一種菌（下層菌）滴加在濾膜上后再放置第二張濾膜，滴加等量的另一種菌（上層菌），共同培養(yǎng)后，對(duì)上、下層菌計(jì)數(shù)得到如圖結(jié)果。下列分析正確的是（）

A.實(shí)驗(yàn)中的培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基和濾膜均需要進(jìn)行滅菌處理B.對(duì)上、下層菌計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)采用稀釋涂布平板法而不能用顯微鏡直接計(jì)數(shù)C.由甲、乙、丙三組結(jié)果可推測(cè)tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性D.野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體和tcel突變體的競(jìng)爭(zhēng)中均占優(yōu)勢(shì)15、為保障公共健康；需要定期對(duì)公共飲用水進(jìn)行衛(wèi)生檢測(cè)。飲用水的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是100mL不得檢出大腸桿菌或者1000mL不超過(guò)3個(gè)大腸桿菌。若要確定飲用水是否合格，可采用膜過(guò)濾法檢測(cè)，過(guò)程如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.檢測(cè)前一般需要對(duì)水樣收集瓶、培養(yǎng)皿、鑷子等進(jìn)行干熱滅菌B.完成過(guò)濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上，在25℃下培養(yǎng)觀察C.為減少實(shí)驗(yàn)誤差，應(yīng)按照上述實(shí)驗(yàn)步驟多次取樣重復(fù)進(jìn)行檢測(cè)D.可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)法替代膜過(guò)濾法檢測(cè)飲用水中的大腸桿菌數(shù)量16、已知蘇云金芽孢桿菌中的毒蛋白基因B和豇豆中的胰蛋白酶抑制劑基因D均可導(dǎo)致棉鈴蟲死亡，棉花的短果枝由基因A控制，基因A所在的染色體有片段缺失，含片段缺失染色體的雄配子致死?？蒲腥藛T將抗蟲基因B和D導(dǎo)入棉花的同一條染色體上獲得了基因型為AaBD的多個(gè)短果枝抗蟲棉植株，讓其自交得到F1（不考慮減數(shù)分裂時(shí)的染色體互換）。下列說(shuō)法正確的是（）A.若抗蟲基因與控制果枝的基因位于兩對(duì)同源染色體上，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產(chǎn)生的配子基因型為AAaaDB.若基因D與a位于同一條染色體上，則F1中短果枝抗蟲:短果枝不抗蟲:長(zhǎng)果枝抗蟲＝2:1:1C.若F1中短果枝抗蟲:長(zhǎng)果枝不抗蟲＝1:1，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產(chǎn)生雌配子的基因型為ABD和aD.若F1中短果枝抗蟲:短果枝不抗蟲:長(zhǎng)果枝抗蟲:長(zhǎng)果枝不抗蟲＝3:1:3:1，則果枝基因和抗蟲基因可能位于兩對(duì)同源染色體上評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)17、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？____________________________18、酵母菌是______________微生物。酵母菌進(jìn)行有氧呼吸的反應(yīng)式如下：______________________；酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸的反應(yīng)式如下：_________________。19、基因工程操作一般經(jīng)歷如下四個(gè)步驟：_____。20、去除DNA中的雜質(zhì)，可以直接在DNA粗提取液中加入___________，反應(yīng)10—15分鐘，嫩肉粉中的________________能夠分解_______________。21、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。22、生物數(shù)據(jù)庫(kù)的知識(shí)與正在迅猛發(fā)展的生物信息學(xué)有關(guān)。什么是生物信息學(xué)________？23、第四步：_____評(píng)卷人得分四、判斷題(共4題，共28分)24、通過(guò)體細(xì)胞核移植技術(shù)已經(jīng)獲得了多種克隆動(dòng)物，該技術(shù)的成功率已經(jīng)很高。（選擇性必修3P54）()A.正確B.錯(cuò)誤25、利用基因工程技術(shù)建立移植器官工廠是目前基因工程取得實(shí)際應(yīng)用成果非常多的領(lǐng)域。（選擇性必修3P90）()A.正確B.錯(cuò)誤26、我國(guó)政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。（選擇性必修3P108）()A.正確B.錯(cuò)誤27、我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。（選擇性必修3P104）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共20分)28、金黃色葡萄球菌是一種常見(jiàn)的食源性致病微生物；該菌具耐高鹽的特性。哥倫比亞血平板含無(wú)菌脫纖維羊血，金黃色葡萄球菌可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，產(chǎn)生透明的溶血圈。如圖為檢測(cè)鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請(qǐng)回答：

（1）從功能上看7．5％NaCl（高鹽）肉湯培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，用該培養(yǎng)基對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行培養(yǎng)的主要目的是提高_(dá)__________。

（2）從培養(yǎng)過(guò)程分析，振蕩培養(yǎng)可以____________________________；更有利于微生物的生長(zhǎng)。

（3）在配制哥倫比亞血平板時(shí)，添加無(wú)菌脫纖維羊血是在高壓蒸汽滅菌________（填“之前”或“之后”），原因是________________________。

（4）圖中血平板上的接種方法是________________。經(jīng)規(guī)范操作并多次重復(fù)，血平板上均出現(xiàn)__________的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌。但牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非牛奶所攜帶，因此需要對(duì)本次操作進(jìn)行完善，具體方案是________________。29、嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β-萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶。為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用；開(kāi)展了以下實(shí)驗(yàn)。如圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜，如表為幾種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)通常情況下，獲得的目的基因需要進(jìn)行擴(kuò)增，最簡(jiǎn)便的方法是_________技術(shù)。

(2)分析上圖，可選擇_______和_______兩種不同的限制酶切割質(zhì)粒，以防止質(zhì)粒自身環(huán)化。質(zhì)粒被切割后，可用_______將其與目的基因連接。在動(dòng)物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)通常的方法是_______。

(3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)開(kāi)______。

(4)蛋白質(zhì)工程是二代基因工程，它的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→_______→_______→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)30、某生物興趣小組設(shè)計(jì)如圖裝置進(jìn)行果酒和果醋發(fā)酵；回答下列問(wèn)題：

（1）果酒的制作離不開(kāi)酵母菌。酒精發(fā)酵時(shí)，酒精產(chǎn)生的場(chǎng)所是酵母菌的_____。若用平板劃線法和稀釋涂布平板法分別純化培養(yǎng)酵母菌時(shí)，則這兩種接種方法操作過(guò)程中的共同點(diǎn)是_____（答出兩點(diǎn)）。

（2）制作果酒時(shí)，發(fā)酵瓶中需預(yù)留1/3空間的主要目的是_____；每隔段時(shí)間要打開(kāi)氣體出口的主要目的是_____。

（3）利用獲得的果酒生產(chǎn)果醋時(shí)，氣體入口應(yīng)持續(xù)通無(wú)菌空氣的原因是_____。

（4）果醋釀制成功后，某同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定果醋中某菌種的數(shù)量時(shí)，在同一稀釋倍數(shù)下涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是35、167和176．其他同學(xué)建議不宜將這三個(gè)數(shù)據(jù)求平均值來(lái)計(jì)算該菌種數(shù)量，理由是_____。31、M蛋白在人體神經(jīng)發(fā)育過(guò)程中起重要作用；M基因發(fā)生突變或表達(dá)異?？蓪?dǎo)致神經(jīng)發(fā)育紊亂性疾病，如Rett綜合征和MDS等。

(1)M蛋白可識(shí)別并結(jié)合甲基化DNA，進(jìn)而調(diào)控靶基因的_____。

(2)對(duì)一位Rett綜合征患者進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)；其M基因發(fā)生了一個(gè)堿基對(duì)的替換，細(xì)胞內(nèi)只有截短的M蛋白。

①一個(gè)堿基對(duì)的替換導(dǎo)致M基因的mRNA_____；翻譯后合成了截短的M蛋白。

②研究者提出，可通過(guò)改造tRNA使患者細(xì)胞能夠合成正常長(zhǎng)度的M蛋白。請(qǐng)簡(jiǎn)述利用該技術(shù)治療此類Rett綜合征的基本原理。_____

(3)圖1為一個(gè)MDS患者的家系圖。采集全部家系成員外周血進(jìn)行檢測(cè)；核型分析未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目異常，測(cè)序發(fā)現(xiàn)其M基因均為野生型，M基因表達(dá)的檢測(cè)結(jié)果如圖2，M基因拷貝數(shù)如下表。

檢測(cè)對(duì)象M基因拷貝數(shù)Ⅰ11Ⅰ23Ⅱ13Ⅱ22正常男性1正常女性2

①根據(jù)以上信息推測(cè)Ⅱ2患病的原因。_____

②女性體細(xì)胞中有一條X染色體是失活的，失活X染色體上絕大多數(shù)基因被沉默。用限制酶HpaⅡ剪切Ⅰ2基因組DNA；然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增及電泳，結(jié)果如圖3。

圖3中引物組合應(yīng)為_(kāi)____。

③Ⅰ2的M基因拷貝數(shù)高于正常女性，但表型正常，請(qǐng)結(jié)合以上研究提出合理解釋。_____32、金黃色葡萄球菌腸毒素（SEs）是一類可溶性小分子蛋白質(zhì)；是引起細(xì)菌性食物中毒及腸胃炎的主要因素之一?；卮鹣铝袉?wèn)題：

(1)為了用基因工程制備SEs純品，科研人員首先需要___________；若采用___________技術(shù)進(jìn)行這一階段的操作，前提條件是要有一段_________________________________；以便合成引物。

(2)科研人員利用如圖所示的質(zhì)粒進(jìn)行基因工程操作的核心步驟，即___________，已知在新霉素抗性基因內(nèi)部存在HindIII識(shí)別序列，質(zhì)粒的其他部位和目的基因內(nèi)部均無(wú)XbaI、SacI、HindIII三種限制酶的識(shí)別位點(diǎn)，假設(shè)SEs基因?yàn)?80bp，在進(jìn)行操作時(shí)，若選擇SacI對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行酶切，缺點(diǎn)是___________；若選擇XbaI、SacI對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行酶切，缺點(diǎn)是_________________，因此最好選用_______________對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行酶切。操作成功后的結(jié)構(gòu)（M）長(zhǎng)___________bp。

(3)若以大腸桿菌為受體細(xì)胞，導(dǎo)入M前需在大腸桿菌的培養(yǎng)液中加入適量的___________。33、許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ基因；其編碼的產(chǎn)物β—半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落呈現(xiàn)白色?；蚬こ讨谐＠迷撛韽氖荏w細(xì)胞中篩選出導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞，過(guò)程如圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答：

(1)基因工程中，基因表達(dá)載體的組成包括復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、_________、_________。

(2)限制酶EcoRI的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是Sma_I的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)是圖中目的的基因被切割下來(lái)和質(zhì)粒連接之前，需在目的基因的右側(cè)連接相應(yīng)的末端，連接的末端序列是_________，連接過(guò)程中需要的基本工具是_________。

(3)轉(zhuǎn)化過(guò)程中，大腸桿菌應(yīng)先用Ca2+處理，使其處于能吸收周圍_________的狀態(tài)。

(4)菌落顏色為白色的是_________，原因是_________。

(5)檢測(cè)菌落③中的目的基因是否表達(dá)，可采用的方法是_________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、B【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上；稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。

【詳解】

A；細(xì)胞會(huì)貼壁生長(zhǎng)；培養(yǎng)貼附性細(xì)胞時(shí)要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)表面光滑、無(wú)毒、易于貼附，A正確；

B、需將培養(yǎng)細(xì)胞的松蓋培養(yǎng)瓶置于95%空氣和5%O2的混合氣體培養(yǎng)箱中；B錯(cuò)誤；

C；隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多；絕大部分細(xì)胞分裂停止，但極少數(shù)細(xì)胞克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性，與正常細(xì)胞相比，其遺傳物質(zhì)已發(fā)生突變，C正確；

D；科學(xué)家培養(yǎng)正?；蚋鞣N病變的細(xì)胞；用于生理、病理、藥理等方面的研究，如用于篩選抗癌藥物等，為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù)，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】2、B【分析】【詳解】

試題分析：（1）植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理是：植物細(xì)胞具有全能性；即①；

（2）植物組織培養(yǎng)過(guò)程：離體植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織根；芽→植物體；即②⑧⑥⑦③⑨；

（3）決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是：植物激素的種類和比例；特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要，被稱為“激素杠桿”，因此誘導(dǎo)的激素為生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，即④。

考點(diǎn)：植物培養(yǎng)的條件及過(guò)程3、D【分析】【分析】

動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體，用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。利用體細(xì)胞克隆技術(shù)可以加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育；可用于保護(hù)瀕危物種，有選擇地繁殖某一性別的家畜，克隆技術(shù)屬于無(wú)性繁殖，克隆動(dòng)物的基因型與供核動(dòng)物相同，不能改變動(dòng)物的基因型。

【詳解】

A；克隆可以有選擇地繁殖某一性別的家畜；A不符題意；

B；克隆技術(shù)可以促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育；B不符題意；

C；克隆動(dòng)物可應(yīng)用于瀕危物種的保護(hù)；C不符題意；

D；克隆動(dòng)物的基因型與核供體相同；故不能改變動(dòng)物的細(xì)胞核基因型，D正確。

故選D。4、C【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖。

【詳解】

A；用于培養(yǎng)的細(xì)胞大多取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織；因?yàn)檫@些細(xì)胞生命力旺盛，細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，A正確；

B；將所取的組織先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞；B正確；

C；植物組織培養(yǎng)基中需要有機(jī)營(yíng)養(yǎng)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中要加入各種有機(jī)營(yíng)養(yǎng)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分；此外還需加入動(dòng)物血清等天然成分，C錯(cuò)誤；

D；動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合、核移植等；其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是基礎(chǔ)，D正確。

故選C。5、A【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有很多；其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物工程技術(shù)的基礎(chǔ)。

【詳解】

動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等；其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物工程技術(shù)的基礎(chǔ)，A正確，BCD錯(cuò)誤。

故選A。6、C【分析】【分析】

核移植的概念為動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。

【詳解】

A；培養(yǎng)供體體細(xì)胞的培養(yǎng)液中常需添加動(dòng)物血清以補(bǔ)充其發(fā)育所需的物質(zhì)；A正確；

B；卵母細(xì)胞去核和體細(xì)胞注射常在顯微鏡下操作；B正確；

C；克隆猴培育過(guò)程中需要運(yùn)用細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)；是一種無(wú)性生殖方式，沒(méi)有完成體外受精，C錯(cuò)誤；

D；克隆出的后代與供體的遺傳物質(zhì)和表現(xiàn)型不完全一致；因?yàn)楣w提供了核基因和部分質(zhì)基因，細(xì)胞質(zhì)基因還來(lái)自受體卵母細(xì)胞，同時(shí)表現(xiàn)型除了受基因控制外，還受外界環(huán)境因素的影響，D正確。

故選C。7、C【分析】【分析】

參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰┰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；碗中加少量米酒敞口靜置；為醋酸菌營(yíng)造有氧環(huán)境，使其進(jìn)行醋酸發(fā)酵，此后可取表面菌膜作為菌種，A正確；

B；蘋果醋制作時(shí)原料應(yīng)選用新鮮、成熟度好的蘋果；B正確；

C；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；若加入抗生素會(huì)殺死發(fā)酵菌，C錯(cuò)誤；

D；醋酸桿菌為好氧型菌；進(jìn)行有氧呼吸，故醋酸發(fā)酵階段每隔一段時(shí)間進(jìn)行攪拌以營(yíng)造有氧環(huán)境，D正確。

故選C。8、C【分析】【分析】

用農(nóng)桿菌侵染水稻（二倍體）細(xì)胞；獲得1條染色體上R基因被插入T-DNA的個(gè)體T0，T0為雜合子，其自交后代理論上為1：2：1。

【詳解】

A；引物一般為單鏈DNA分子；A正確；

B；R基因被T-DNA插入后；R基因被破壞，所以無(wú)法表達(dá)相應(yīng)蛋白，B正確；

C；R基因被T-DNA插入后；用P1、P2為引物無(wú)法完成PCR，用P1、P2引物進(jìn)行PCR得到產(chǎn)物的個(gè)體不可能是R基因純合子，C錯(cuò)誤；

D；T0為雜合子；自交后代理論上為1：2：1，圖中W、H、M個(gè)體的比例不為1：2：1，可能是因?yàn)檎{(diào)查的樣本數(shù)量較小，誤差較大所致，D正確。

故選C。二、多選題(共8題，共16分)9、A:C【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過(guò)體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

【詳解】

A；在采集卵母細(xì)胞之前；需要給供卵者注射適量的促性腺激素，促進(jìn)超數(shù)排卵，A正確；

B；從卵巢中吸取的卵母細(xì)胞；必須經(jīng)體外培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精，B錯(cuò)誤；

C；受精過(guò)程中；卵母細(xì)胞會(huì)發(fā)生透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)，這是防止多精入卵的兩道屏障，C正確；

D；以治療為目的的設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)；是救治患者最好、最快捷的辦法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在倫理問(wèn)題，D錯(cuò)誤。

故選AC。

【點(diǎn)睛】10、B:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物：

(1)基因來(lái)源：藥用蛋白基因+乳腺組織特異性表達(dá)的啟動(dòng)子(原理：基因的選擇性表達(dá))。

(2)成果：乳腺生物反應(yīng)器。

(3)過(guò)程：將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起；導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中，最終培育的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后，可以通過(guò)分泌的乳汁生產(chǎn)所需要的藥物。(只有在產(chǎn)下雌性動(dòng)物個(gè)體中，轉(zhuǎn)入的基因才能表達(dá))。

【詳解】

A；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；因此可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵，A正確；

B；在該轉(zhuǎn)基因羊中；人凝血因子存在于所有細(xì)胞中，但只在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，B錯(cuò)誤；

C；人凝血因子基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄后；RNA聚合酶以DNA分子一條鏈為模板合成mRNA，C錯(cuò)誤；

D；科學(xué)家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起；從而使人凝血因子基因只在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)，D錯(cuò)誤。

故選BCD。11、A:C【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞，將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；利用轉(zhuǎn)基因鼠技術(shù)進(jìn)行全人源化單克隆抗體；能降低單克隆抗體藥物的免疫排斥反應(yīng)，A正確；

B；過(guò)程①②利用的是轉(zhuǎn)基因技術(shù)；B錯(cuò)誤；

C；融合后的細(xì)胞需要用選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細(xì)胞；還要經(jīng)過(guò)克隆化培養(yǎng)、（專一性）抗體檢測(cè)等，C正確；

D；B細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下不能無(wú)限增殖；體外培養(yǎng)B細(xì)胞不能獲得大量的單克隆抗體，D錯(cuò)誤。

故選AC。12、A:D【分析】【分析】

纖維素分解菌能合成和分泌纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可以篩選出纖維素分解菌。

【詳解】

A；木材、秸稈中富含纖維素；故可以從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌，A正確；

B；應(yīng)該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌；只有纖維素分解菌能夠存活，B錯(cuò)誤；

C；接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理；接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理，培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法處理，C錯(cuò)誤；

D；菌落只能在固體培養(yǎng)基中形成；菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基，D正確。

故選AD。13、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

【詳解】

A；限制酶可識(shí)別并在特定位置水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵；A正確；

B；DNA連接酶可以連接黏性末端相同；即末端堿基互補(bǔ)的兩個(gè)DNA片段之間的磷酸二酯鍵，B正確；

C；DNA聚合酶只能從核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C錯(cuò)誤；

D；標(biāo)記基因可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)；故作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對(duì)重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因，D正確。

故選ABD。14、A:B:C【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；為避免雜菌的污染；實(shí)驗(yàn)中的濾膜、培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基等均需滅菌處理，A正確；

B；對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法是稀釋涂布平板法；具體方法是：先將菌體進(jìn)行梯度稀釋，再涂布到濾膜的表面，待菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)進(jìn)行計(jì)數(shù)，不能用顯微鏡直接計(jì)數(shù)的原因是顯微鏡直接計(jì)數(shù)不能區(qū)分死菌和活菌，B正確；

C；tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白；乙組中野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel-tcil雙突變體，后者無(wú)法產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在競(jìng)爭(zhēng)中占據(jù)優(yōu)勢(shì)；而在丙組中，野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel突變體，后者可以產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生長(zhǎng)受到抑制，由此推測(cè)，tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性，C正確；

D；由甲組、乙組可知；野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體的競(jìng)爭(zhēng)中均占優(yōu)勢(shì)，由甲組、丙組可知，野生型細(xì)菌X在與tcel突變體的競(jìng)爭(zhēng)中不占優(yōu)勢(shì)，D錯(cuò)誤。

故選ABC。15、B:D【分析】【分析】

細(xì)菌的數(shù)目可以通過(guò)濾膜法來(lái)測(cè)定。將已知體積的水過(guò)濾后；將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈黑色，根據(jù)黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算水樣中大腸桿菌的數(shù)量。微生物接種時(shí)，為了避免其它雜菌的污染，接種過(guò)程要進(jìn)行無(wú)菌操作。灼燒滅菌常適用于接種環(huán)；接種針；干熱滅菌常適用于玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具；高壓蒸汽滅菌常適用于無(wú)菌水、培養(yǎng)基。

【詳解】

A；檢測(cè)前需要對(duì)水樣收集瓶、濾膜、培養(yǎng)基、鑷子滅菌；防止雜菌干擾，A正確；

B；完成過(guò)濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上；在37℃下培養(yǎng)觀察，B錯(cuò)誤；

C；為減少實(shí)驗(yàn)誤差；按照上述實(shí)驗(yàn)步驟多次取樣重復(fù)進(jìn)行檢測(cè)，取平均值作為實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，C正確；

D；大腸桿菌較??；不能用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)法替代膜過(guò)濾法檢測(cè)，D錯(cuò)誤。

故選BD。16、C:D【分析】【分析】

由題意知；B；D位于一條染色體上，因此不遵循自由組合定律?；駻所在的染色體有片段缺失，含片段缺失染色體的雄配子致死，如果A（a）與BD分別位于兩對(duì)同源染色體上，則遵循自由組合定律，基因型為AaBD產(chǎn)生的配子的類型及比例是ABD：a：aBD：A=1：1：1：1；如果A（a）與BD位于一對(duì)同源染色體上，則A（a）與BD也不遵循自由組合定律，基因型為AaBD的個(gè)體產(chǎn)生的配子的類型是ABD：a=1：1或者是aBD：A=1：1。

【詳解】

A；由于抗蟲基因B和D位于棉花的同一條染色體上；若抗蟲基因與控制果枝的基因位于兩對(duì)同源染色體上，則基因型為AaBD的短果枝抗蟲棉植株產(chǎn)生的配子基因型為ABD、A、aBD、a，A錯(cuò)誤；

B、若基因B、D與a位于同一條染色體上，則該植株產(chǎn)生的雌配子有A、aBD兩種，雄配子只有aBD一種，則F1中AaBD（短果枝抗蟲）：aaBD（長(zhǎng)果枝抗蟲）＝1:1；B錯(cuò)誤；

C、若F1中短果枝抗蟲（A_BD）:長(zhǎng)果枝不抗蟲（aa）＝1:1；則可推測(cè)親本產(chǎn)生的雄配子為a，故親本產(chǎn)生雌配子的基因型為ABD和a，C正確；

D、若F1中短果枝抗蟲（A_BD）:短果枝不抗蟲（A_）:長(zhǎng)果枝抗蟲（aaBD）:長(zhǎng)果枝不抗蟲（aa）＝3:1:3:1；則可推測(cè)雄配子有a和aBD兩種，即A/a基因與BD基因沒(méi)有連鎖關(guān)系，故果枝基因和抗蟲基因可能位于兩對(duì)同源染色體上，D正確。

故選CD。三、填空題(共7題，共14分)17、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO219、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】嫩肉粉木瓜蛋白酶蛋白質(zhì)21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)22、略

【分析】【詳解】

生物信息學(xué)是研究生物信息的采集、處理、存儲(chǔ)、傳播,分析和解釋等各方面的學(xué)科，也是隨著生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的迅猛發(fā)展，生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)相結(jié)合形成的一門新學(xué)科，生物信息學(xué)主要是核酸和蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)處理和分析?！窘馕觥可镄畔W(xué)是研究生物信息的采集、處理、存儲(chǔ)、傳播,分析和解釋等各方面的學(xué)科，也是隨著生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的迅猛發(fā)展，生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)相結(jié)合形成的一門新學(xué)科23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的檢測(cè)和鑒定四、判斷題(共4題，共28分)24、B【分析】【詳解】

目前；用體細(xì)胞核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物的成功率還很低。

故錯(cuò)誤。25、B【分析】【詳解】

基因工程技術(shù)可以使建立移植器官工廠的設(shè)想成為現(xiàn)實(shí)；說(shuō)明并未開(kāi)始實(shí)際應(yīng)用。

故題中描述錯(cuò)誤。26、A【分析】【詳解】

生殖性克隆存在倫理道德等方面的問(wèn)題，我國(guó)政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。本說(shuō)法正確。27、A【分析】【詳解】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)；過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管。

該說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共20分)28、略

【分析】【分析】

1；選擇培養(yǎng)基：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件；同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。

2；根據(jù)題意分析；金黃色葡萄球菌可破壞哥倫比亞血平板上菌落周圍的紅細(xì)胞，產(chǎn)生透明的溶血圈。

【詳解】

（1）金黃色葡萄球菌具耐高鹽的特性；可用7.5％NaCl（高鹽）肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，可進(jìn)一步提高金黃色葡萄球菌的濃度。

（2）振蕩培養(yǎng)的目的是使微生物與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，增加O2濃度；更有利于微生物生長(zhǎng)。

（3）因?yàn)闊o(wú)菌脫纖維羊血上有紅細(xì)胞；而高溫會(huì)破壞紅細(xì)胞。故添加無(wú)菌脫纖維羊血是在高壓蒸汽滅菌之后。

（4）根據(jù)圖中最右邊的圖示可知；接種方法是平板劃線法。已知金黃色葡萄球菌可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，產(chǎn)生透明的溶血圈。故若要初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，則血平板上要均出現(xiàn)周圍出現(xiàn)透明溶血圈的菌落。本實(shí)驗(yàn)缺乏對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)不完善，還需要設(shè)置不加（鮮）牛奶但其他操作和培養(yǎng)條件均相同的對(duì)照組。

【點(diǎn)睛】

本題旨在考查學(xué)生理解選擇培養(yǎng)基的原理和應(yīng)用、平板劃線法的使用要點(diǎn)，把握知識(shí)的內(nèi)在聯(lián)系并應(yīng)用相關(guān)知識(shí)綜合解決問(wèn)題的能力?！窘馕觥窟x擇金黃色葡萄球菌的濃度使微生物與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸/增加O2之后防止高溫破壞紅細(xì)胞平板劃線法周圍出現(xiàn)透明溶血圈設(shè)置不加（鮮）牛奶但其他操作和培養(yǎng)條件均相同的對(duì)照組29、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作過(guò)程主要包括四個(gè)步驟：目的基因的獲?。换虮磉_(dá)載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)耸荏w細(xì)胞；目的基因的檢測(cè)與鑒定。（1）目的基因的獲取方法目的基因的獲取方法主要有從自然界已有的物種中分離出來(lái)（如鳥槍法從基因文庫(kù)或cDNA文庫(kù)中獲?。?、人工合成（常用的方法有化學(xué)合成法和反轉(zhuǎn)錄法）、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體；需分別用限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，用限制酶切割質(zhì)粒時(shí)，選擇的限制酶不可以破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子等必須的結(jié)構(gòu)。用DNA連接酶連接，構(gòu)成重組質(zhì)粒。（3）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法：將含有目的基因的表達(dá)載體提純→從雌性動(dòng)物體內(nèi)取出卵（可在體外受精，也可在體內(nèi)受精）→采用顯微注射儀進(jìn)行顯微注射→將注射了目的基因的受精卵經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)一段時(shí)間后，移植到雌性動(dòng)物的輸卵管或子宮內(nèi)，使其發(fā)育成為具有新性狀的動(dòng)物。

2；蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。

【詳解】

（1）獲取目的基因的方法主要有三種；最簡(jiǎn)便的是PCR技術(shù)。

（2）用限制酶切割質(zhì)粒時(shí)；選擇的限制酶不可以破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)；啟動(dòng)子、終止子等必須的結(jié)構(gòu)，由圖可知可選用NdeⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割質(zhì)粒。用DNA連接酶將切割后的質(zhì)粒與目的基因連接。在動(dòng)物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)通常的方法是顯微注射法。

（3）上述建構(gòu)好的表達(dá)載體含有能夠表達(dá)β-萄糖苷酶(BglB)的基因；轉(zhuǎn)基因大腸桿菌能夠分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能夠降解纖維素。

（4）蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列?！窘馕觥?1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA連接酶顯微注射法。

(3)轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列六、綜合題(共4題，共24分)30、略

【分析】【分析】

1；果酒的制作原理是讓酵母菌在有氧條件下大量繁殖；然后在無(wú)氧條件下產(chǎn)生酒精。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。

果醋制作的原理：

當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)；醋酸菌將葡萄汁中的糖類分解成醋酸。

當(dāng)缺少糖源時(shí)；醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）酵母菌通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精；無(wú)氧呼吸進(jìn)行的場(chǎng)所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。用平板劃線法和稀釋涂布平板法分別純化培養(yǎng)微生物時(shí)，二者都需要在固體培養(yǎng)基上操作；都需要在酒精燈火焰附近接種。

（2）在制作果酒過(guò)程中；首先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，發(fā)酵瓶中留有1/3空間不加發(fā)酵液；瓶?jī)?nèi)空氣的主要作用是為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣。果酒發(fā)酵過(guò)程中，酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，每隔一段時(shí)間打開(kāi)氣體出口可將二氧化碳排出，以防止發(fā)酵瓶?jī)?nèi)氣壓過(guò)高引起爆裂。

（3）果醋發(fā)酵時(shí)需要醋酸菌；醋酸菌為好氧型細(xì)菌，故制作果醋時(shí)，氣體入口應(yīng)持續(xù)通入無(wú)菌空氣。

（4）該同學(xué)涂布了3個(gè)平板；統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是35；167和176，其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差，若計(jì)算平均值會(huì)導(dǎo)致結(jié)果可信度低。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋的制作，要求考生識(shí)記參與果酒、果醋的微生物及其代謝類型，掌握果酒、果醋制作的原理及條件，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)?！窘馕觥考?xì)胞質(zhì)基質(zhì)采用固體培養(yǎng)基、在酒精燈火焰旁接種等（合理即可）防止發(fā)酵旺盛時(shí)汁液的溢出排出發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的二氧化碳果醋發(fā)酵時(shí)需要醋酸菌，醋酸菌為好氧型細(xì)菌此同學(xué)的結(jié)果中，一個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差，若計(jì)算平均值會(huì)導(dǎo)致結(jié)果可信度低31、略

【分析】【分析】

引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的短單鏈核酸。用于PCR的引物長(zhǎng)度通常為20?30個(gè)核苷酸。引物使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。

【詳解】

（1）基因表達(dá)的第一個(gè)階段是轉(zhuǎn)錄；蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合可調(diào)控轉(zhuǎn)錄過(guò)程。

（2）①M(fèi)蛋白截短；說(shuō)明氨基酸數(shù)目減少，終止密碼子提前，即一個(gè)堿基對(duì)的替換導(dǎo)致M基因的mRNA提前出現(xiàn)終止密碼子。

②tRNA的作用是攜帶氨基酸；終止密碼子一般不對(duì)應(yīng)相應(yīng)的氨基酸，定點(diǎn)突變tRNA基因，使tRNA能識(shí)別終止密碼子，該tRNA即可在提前終止密碼子處將氨基酸添加到肽鏈中，從而獲得正常長(zhǎng)度的肽鏈。

（3）①核型分析未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目異常，說(shuō)明發(fā)生的是基因變化，而測(cè)序發(fā)現(xiàn)其M基因均為野生型，說(shuō)明基因未突變，而是基因數(shù)目的變化。從圖示信息分析，I1含有一個(gè)M基因，是正常男性，M基因mRNA相對(duì)含量較低，Ⅱ2是男性患者，Ⅱ2含有兩個(gè)M基因，M基因mRNA相對(duì)含量較高而得病，其母親I2含有3個(gè)M基因，但表現(xiàn)正常，可知該基因遺傳符合X染色體隱性遺傳特點(diǎn)，說(shuō)明其從母親處獲得的X染色體含2個(gè)M基因，M基因重復(fù)使M蛋白含量高于正常值，導(dǎo)致靶基因表達(dá)異常，而Ⅱ1個(gè)體含有3個(gè)M基因一個(gè)來(lái)自父親；兩個(gè)來(lái)自母親。

②引物使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸，該過(guò)程需要得到含有酶切位點(diǎn)和CAG重復(fù)序列的基因產(chǎn)物，故選引物1和引物3；根據(jù)PCR結(jié)果分析AR1酶切和非酶切結(jié)果相同，說(shuō)明該染色體失活而未被酶切，說(shuō)明I2兩條X染色體中，AR1所在的X染色體完全失