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第3講動物細(xì)胞工程【基礎(chǔ)通關(guān)】一、動物細(xì)胞培養(yǎng)二、動物體細(xì)胞克隆技術(shù)(核移植技術(shù))1.原理:動物細(xì)胞核具有_______。2.核移植分類:_________核移植和體細(xì)胞核移植。3.過程:全能性胚胎細(xì)胞4.克隆動物:用核移植方法得到的動物。三、動物細(xì)胞融合1.原理:_______________。2.融合方法:聚乙二醇(PEG)、___________、電激等。3.意義:突破了_____________的局限,使_________成為可能,也為制造____________開辟了新途徑。細(xì)胞膜的流動性滅活的病毒有性雜交方法遠(yuǎn)緣雜交單克隆抗體四、單克隆抗體1.制備過程:2.優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、_________,并可大量制備。3.用途:作為_________,用于治療疾病和_________。靈敏度高診斷試劑運(yùn)載藥物【教材拾貝】選修3·P44進(jìn)行動物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分?用胃蛋白酶可以嗎?提示:用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2,當(dāng)pH大于6時(shí),胃蛋白酶就會失去活性。胰蛋白酶作用的適宜pH為7.2~8.4。多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性,而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高,因此胰蛋白酶更適合用于細(xì)胞培養(yǎng)?!舅仞B(yǎng)達(dá)成】
1.為什么單克隆抗體的制備選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合?(生命觀念——結(jié)構(gòu)與功能觀)提示:每一種B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體,B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)不能無限增殖;而骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖。融合后的細(xì)胞具有二者的遺傳特性,因此既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體。2.如圖為動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞增殖情況的變化曲線,圖中B、E兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。據(jù)圖分析:(科學(xué)思維——模型與構(gòu)建)(1)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的分界點(diǎn)是哪個(gè)?提示:B點(diǎn)之前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),之后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。(2)AB段和DE段繁殖速度緩慢的原因是什么?提示:AB段發(fā)生了接觸抑制;DE段細(xì)胞大部分衰老失去分裂能力。(3)E點(diǎn)后的細(xì)胞大多數(shù)具有異倍體核型,這樣的細(xì)胞有什么特點(diǎn)?提示:E點(diǎn)后的細(xì)胞屬于細(xì)胞系,能無限增殖。3.癌胚抗原(CEA)是某些癌細(xì)胞表面產(chǎn)生的一種糖蛋白,臨床上通過制備CEA的單克隆抗體來診斷癌癥。制備CEA的單克隆抗體時(shí),篩選出的雜交瘤細(xì)胞還要經(jīng)過多次篩選,最終獲得的雜交瘤細(xì)胞有
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