嵌合抗原受體修飾T細(xì)胞(CAR-T細(xì)胞)制劑制備質(zhì)量管理規(guī)范(征求意見稿)

嵌合抗原受體修飾T細(xì)胞（CAR-T細(xì)胞）制劑制備質(zhì)量管理規(guī)范（征求意見稿）中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會發(fā)布目次前言II引言III1范圍12術(shù)語和定義13基本要求23.1基本原則23.2人員的要求23.3場所和設(shè)施23.4物料24載體制備34.1質(zhì)粒制備34.2非病毒載體制備的基本要求34.3病毒載體制備的基本要求35細(xì)胞制備過程中的要求35.1樣本的要求35.2T細(xì)胞的采集和分離45.3操作的要求45.4細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)及擴(kuò)增的要求45.5安全性及有效性檢測55.6CAR-T細(xì)胞制劑的質(zhì)量要求55.7CAR-T細(xì)胞凍存、運(yùn)輸與復(fù)蘇的要求56CAR-T制劑的質(zhì)量控制與放行57追溯58保密原則69附則6參考文獻(xiàn)7前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》給出的規(guī)則起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。本標(biāo)準(zhǔn)由中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會制定，由中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會實(shí)施。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會醫(yī)藥生物技術(shù)臨床應(yīng)用專業(yè)委員會。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。引言近年來，免疫治療經(jīng)歷了一系列突飛猛進(jìn)的發(fā)展，以特異性過繼免疫細(xì)胞療法及免疫檢查點(diǎn)抗體療法為代表的新型免疫治療技術(shù)因其在臨床研究中取得的顯著療效而成為學(xué)術(shù)界和產(chǎn)業(yè)界共同關(guān)注的焦點(diǎn)。其中，嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫療法（ChimericAntigenReceptorT-CellImmunotherapy，CAR-T療法）因其在白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤的治療中展現(xiàn)出顯著的治療效果而成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。隨著我國對CAR-T技術(shù)的研究不斷深入，國內(nèi)企業(yè)的積極布局和產(chǎn)業(yè)鏈的延伸，我國的CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)也在緊隨國際趨勢的發(fā)展。然而，目前國內(nèi)關(guān)于CAR-T細(xì)胞的制備和質(zhì)量控制缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)和管理規(guī)范，各制備機(jī)構(gòu)或應(yīng)用機(jī)構(gòu)之間無法進(jìn)行正常的評估和交流，一定程度上不利于細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)的專業(yè)化發(fā)展。只有確立了安全、規(guī)范、穩(wěn)定、可追溯的行業(yè)規(guī)范，才能從源頭保證整個CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)的規(guī)范性和安全性。為了適應(yīng)我國CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)的需要，加強(qiáng)CAR-T細(xì)胞治療的管理，規(guī)范細(xì)胞制備過程，保證CAR-T細(xì)胞制品在臨床應(yīng)用的安全性，促進(jìn)國際間同行的交流，有必要制定中國醫(yī)藥生物技術(shù)行業(yè)的CAR-T細(xì)胞制劑制備質(zhì)量管理規(guī)范。嵌合抗原受體修飾T細(xì)胞（CAR-T細(xì)胞）制劑制備質(zhì)量管理規(guī)范1范圍1.1為協(xié)助CAR-T細(xì)胞制劑制備機(jī)構(gòu)（以下簡稱機(jī)構(gòu)）在制備過程中避免污染、交叉污染、混淆及差錯，且保證CAR-T細(xì)胞制劑的安全性、生物學(xué)效應(yīng)，參照《免疫細(xì)胞制劑制備質(zhì)量管理自律規(guī)范》等相關(guān)規(guī)定和指導(dǎo)原則，制定本規(guī)范。1.2本規(guī)范所稱的CAR-T指用于治療的、經(jīng)體外基因?qū)牒蟊磉_(dá)嵌合型抗原受體的人源T細(xì)胞，T細(xì)胞來源于患者自體或異體外周血淋巴細(xì)胞。1.3本規(guī)范適用于CAR-T細(xì)胞制劑制備的所有階段。2術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。2.1嵌合抗原受體T細(xì)胞（CAR-T細(xì)胞）ChimericAntigenReceptorTCell，CAR-Tcell經(jīng)過基因工程修飾的，可表達(dá)被導(dǎo)入的含有抗原識別片段、T細(xì)胞受體活化分子、共刺激信號等信號分子的CAR基因的T細(xì)胞。2.2外周血單個核細(xì)胞PeripheralBloodMononuclearCell，PBMC血液中具有單個核的細(xì)胞，主要包括淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞和少量其他細(xì)胞類型。2.3質(zhì)粒Plasmid是一類存在于細(xì)菌和真菌細(xì)胞中獨(dú)立于染色體DNA而自主復(fù)制的共價、閉合、環(huán)狀DNA分子，是基因工程最常見的運(yùn)載體。2.4目的基因TargetGene人工構(gòu)建的具有明確功能的基因或基因片段。2.5載體Vector在基因工程重組DNA技術(shù)中將DNA片段（目的基因）轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)其他添加成分殘余量進(jìn)行檢測，如細(xì)胞因子等。5.6.4使用磁珠抗體刺激T細(xì)胞的，應(yīng)檢測細(xì)胞中的殘余磁珠量。5.6.5應(yīng)對細(xì)胞存活率和回輸數(shù)量進(jìn)行檢測。5.6.6應(yīng)對終產(chǎn)品中CAR-T細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)率、免疫表型進(jìn)行檢測。5.6.7應(yīng)檢測CAR-T細(xì)胞制劑對特異性腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。如果制備的是異體CAR-T細(xì)胞，還應(yīng)檢測CAR-T細(xì)胞對正常細(xì)胞的殺傷。5.6.8用病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞并對病毒RCR完成檢測之后，應(yīng)留取部分CAR-T細(xì)胞以備將來需要時對RCR的檢測。應(yīng)進(jìn)行RCR的長期隨訪檢測。5.7CAR-T細(xì)胞凍存、運(yùn)輸與復(fù)蘇的要求5.7.1CAR-T產(chǎn)品應(yīng)用之前可先凍存，待質(zhì)控試驗(yàn)結(jié)束證實(shí)結(jié)果無問題后再復(fù)蘇并進(jìn)行回輸。5.7.2凍存、運(yùn)輸與復(fù)蘇的方法、凍存液以及凍存容器等應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證，保證細(xì)胞質(zhì)量和安全性。6CAR-T制劑的質(zhì)量控制與放行6.1機(jī)構(gòu)應(yīng)具有CAR-T細(xì)胞制劑的檢測能力，并配備相關(guān)專業(yè)技術(shù)人員和設(shè)備，建立制劑質(zhì)量控制檢測標(biāo)準(zhǔn)和操作規(guī)程，確立制劑質(zhì)量檢驗(yàn)和放行的操作規(guī)程，所有的檢測方法應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證。對整個制備過程中各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制均符合標(biāo)準(zhǔn)方可進(jìn)行臨床應(yīng)用。6.2每批次的CAR-T細(xì)胞制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的檢測項(xiàng)目應(yīng)至少包括：無菌檢測、支原體檢測、內(nèi)毒素檢測、外源血清殘留、細(xì)胞存活率、細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞表型、效應(yīng)細(xì)胞比率、CAR轉(zhuǎn)導(dǎo)效率、復(fù)制型病毒等，檢測方法參見現(xiàn)行版《中國藥典》生物制品相關(guān)規(guī)程。7追溯應(yīng)建立完整的細(xì)胞制備過程記錄系統(tǒng)以及標(biāo)識標(biāo)簽系統(tǒng)和免疫細(xì)胞制劑編碼系統(tǒng)，以確保CAR-T細(xì)胞制劑的辨識并防止制劑混雜，確保其唯一性和可追溯性。記錄和標(biāo)識應(yīng)當(dāng)遵循相關(guān)法律和規(guī)范的要求。細(xì)胞制備記錄包括每天的細(xì)胞狀況，細(xì)胞數(shù)量，轉(zhuǎn)導(dǎo)條件，細(xì)胞因子濃度等具體信息。標(biāo)識系統(tǒng)應(yīng)記錄患者姓名、病歷號、病種、細(xì)胞制劑名稱、批號、收獲日期及時間、規(guī)格（細(xì)胞數(shù)量/體積）、儲存條件、效期（精確時間）等。每個患者的信息應(yīng)當(dāng)雙人復(fù)核。每份CAR-T細(xì)胞制劑必須編制唯一的編碼，通過它能追溯到患者信息以及該細(xì)胞制劑操作和最終處理的所有記錄，并建立相關(guān)程序能夠關(guān)聯(lián)新舊編碼。8保密原則應(yīng)采取措施，保證病人的隱私信息不被泄露。9附則其他關(guān)于免疫細(xì)胞制備的要求以及人員、設(shè)備、樣品儲存與運(yùn)輸、標(biāo)識與追溯系統(tǒng)等細(xì)則，參見中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會制定的《免疫細(xì)胞制劑制備質(zhì)量管理自律規(guī)范》。參