《體外診斷產(chǎn)品原材料中阻斷劑性能評(píng)價(jià)》

ICS11.100.10

CCSC30

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/CIXXX—2024

體外診斷產(chǎn)品原材料中阻斷劑性能評(píng)價(jià)

Performanceevaluationofblockersinrawmaterialsforinvitro

diagnosticproducts

（征求意見(jiàn)稿）

2024-XX-XX發(fā)布2024-XX-XX實(shí)施

中國(guó)國(guó)際科技促進(jìn)會(huì)發(fā)布

T/CIXXX—2024

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................3

2規(guī)范性引用文件.....................................................................3

3術(shù)語(yǔ)和定義.........................................................................3

4總體要求...........................................................................3

5免疫檢測(cè)干擾和評(píng)價(jià)方法.............................................................3

6阻斷劑基本要求.....................................................................4

7檢測(cè)程序...........................................................................4

8試驗(yàn)注意事項(xiàng).......................................................................5

9數(shù)據(jù)處理與分析.....................................................................5

10性能評(píng)估研究中的變更..............................................................7

11再評(píng)估............................................................................7

參考文獻(xiàn)..............................................................................8

I

T/CIXXX—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。

本文件由北京科躍中楷生物技術(shù)有限公司提出。

本文件由中國(guó)國(guó)際科技促進(jìn)會(huì)歸口。

本文件起草單位：北京科躍中楷生物技術(shù)有限公司、北京晶華生物技術(shù)有限公司、。

本文件主要起草人：……

II

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體外診斷產(chǎn)品原材料中阻斷劑性能評(píng)價(jià)

1范圍

本文件規(guī)定了體外診斷產(chǎn)品原材料中阻斷劑性能評(píng)價(jià)的總體要求、免疫檢測(cè)干擾和評(píng)價(jià)方法、阻斷

劑基本要求、檢測(cè)程序、試驗(yàn)注意事項(xiàng)、數(shù)據(jù)處理與分析、性能評(píng)估研究中的變更和再評(píng)估。

本文件適用于體外診斷產(chǎn)品原材料中阻斷劑的性能評(píng)價(jià)，基于定性或定量測(cè)量并通過(guò)閾值判斷的

結(jié)果評(píng)價(jià)消除干擾對(duì)體外診斷檢測(cè)系統(tǒng)的影響。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T29791.1體外診斷醫(yī)療器械制造商提供的信息（標(biāo)示）第1部分：術(shù)語(yǔ)、定義和通用要

求

YY/T1441體外診斷醫(yī)療器械性能評(píng)估通用要求

YY/T1789.5—2023體外診斷檢驗(yàn)系統(tǒng)性能評(píng)價(jià)方法第5部分：分析特異性

WS/T416干擾實(shí)驗(yàn)指南

3術(shù)語(yǔ)和定義

GB/T29791.1、WS/T416界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

阻斷劑blockers

應(yīng)用于在體外診斷試劑開(kāi)發(fā)過(guò)程中，用于減少來(lái)自患者樣本中的蛋白質(zhì)干擾或者試驗(yàn)過(guò)程中的其

他因素影響并由此可能造成的假陽(yáng)性、假陰性的錯(cuò)誤檢測(cè)結(jié)果的物料統(tǒng)稱(chēng)。

4總體要求

在對(duì)阻斷劑性能評(píng)價(jià)時(shí)，其計(jì)劃、實(shí)施、評(píng)價(jià)和文件化等相關(guān)過(guò)程應(yīng)符合YY/T1441的規(guī)定。

應(yīng)規(guī)定所有管理和實(shí)施阻斷劑性能評(píng)估相關(guān)人員的責(zé)任和相互關(guān)系，并確保具備充足的資源。

應(yīng)設(shè)計(jì)評(píng)價(jià)方案，并進(jìn)行測(cè)試，做好相關(guān)記錄，所有文件和記錄作為該產(chǎn)品技術(shù)文件的一部分。

性能評(píng)價(jià)的負(fù)責(zé)人應(yīng)對(duì)性能評(píng)價(jià)結(jié)果最終評(píng)定和審查，并形成評(píng)價(jià)報(bào)告。

5免疫檢測(cè)干擾和評(píng)價(jià)方法

免疫檢測(cè)干擾

免疫檢測(cè)干擾是一類(lèi)會(huì)引起檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性或假陰性現(xiàn)象的泛指，潛在的干擾因素包括內(nèi)源性抗

體或病人樣本中的其它結(jié)合蛋白、多反應(yīng)抗體、自身抗體（嗜異性抗體）和人抗動(dòng)物抗體等干擾物質(zhì)。

3

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在免疫檢測(cè)時(shí)，干擾物可通過(guò)非特異性結(jié)合來(lái)干擾抗體和分析物之間的反應(yīng)，一方面抑制測(cè)定反應(yīng)物與

檢測(cè)抗體的結(jié)合，產(chǎn)生假陰性，另一方面又可以在缺少測(cè)定反應(yīng)物的情況下與捕獲和檢測(cè)抗體結(jié)合，從

而產(chǎn)生假陽(yáng)性。

評(píng)價(jià)方法

5.2.1由于遺傳、環(huán)境及個(gè)體因素的不同，導(dǎo)致臨床樣本的成分較為復(fù)雜，在原料的研發(fā)中會(huì)主要考

慮在臨床實(shí)際需求的基礎(chǔ)上制定符合的標(biāo)準(zhǔn)。

5.2.2本文件的評(píng)價(jià)方法主要是圍繞消除干擾進(jìn)行的評(píng)價(jià)，主要使用臨床樣本進(jìn)行的評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)方法

應(yīng)符合YY/T1789.5—2023中第5章、第6章的要求。

6阻斷劑基本要求

阻斷劑有助于提高檢測(cè)的靈敏度和特異性，有效地減少非特異性結(jié)合以增加信噪比，提高診斷試劑

的臨床使用性能，應(yīng)滿(mǎn)足以下基本要求：

——有效地阻斷測(cè)定反應(yīng)物與干擾物的非特異性結(jié)合；

——不影響體系反應(yīng)曲線和正常樣本檢測(cè)結(jié)果；

——不與其他試劑有效成分發(fā)生交叉反應(yīng)；

——批間精密性高，質(zhì)量穩(wěn)定。

7檢測(cè)程序

樣品準(zhǔn)備

7.1.1臨床樣本

7.1.1.1樣本采集方式及穩(wěn)定性應(yīng)符合試劑和對(duì)比試劑說(shuō)明書(shū)有關(guān)要求。

7.1.1.2應(yīng)從未服用過(guò)藥物的健康人群中采集新鮮血清樣本，混合后成為基礎(chǔ)樣本（對(duì)照樣本），樣

本來(lái)源應(yīng)可溯源。樣本背景信息包括但不限于：樣本來(lái)源、唯一且可追溯的編號(hào)、樣本類(lèi)型和其他與該

檢測(cè)相關(guān)的背景信息（如年齡、性別、干擾因素等）。

7.1.2標(biāo)準(zhǔn)品

應(yīng)采用有效期內(nèi)相同批號(hào)、與被評(píng)價(jià)系統(tǒng)配套的標(biāo)準(zhǔn)品或經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證可用于被評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)的產(chǎn)

品，試劑的儲(chǔ)存與配制應(yīng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

7.1.3干擾樣本

含有潛在干擾物的臨床樣本，通常通過(guò)患有特定疾病的患者獲得，一般選擇影響較大、精密度較好

的樣本?？蛇x擇高濃度、中間濃度、低濃度干擾樣本。

測(cè)定重復(fù)次數(shù)

評(píng)價(jià)阻斷劑消除干擾的效果時(shí)需排除方法精密度對(duì)結(jié)果的影響，每個(gè)濃度水平應(yīng)重復(fù)測(cè)定5次。

測(cè)定步驟

7.3.1設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案

4

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根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目特點(diǎn)選擇實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法，進(jìn)行試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)，常規(guī)的免疫檢測(cè)方法雙抗夾心法、競(jìng)

爭(zhēng)法、IgM捕獲法及免疫比濁等。

7.3.2樣品分裝

將實(shí)驗(yàn)系列樣品分裝，按干擾物濃度從低到高排序并標(biāo)號(hào)。

7.3.3配備工作液

往反應(yīng)體系的工作溶液中加入一定劑量的阻斷劑，配備成含有阻斷劑的工作液，該反應(yīng)體系為待評(píng)

價(jià)實(shí)驗(yàn)組，另一組是對(duì)照組，反應(yīng)體系中無(wú)任何額外添加的工作液。

7.3.4檢測(cè)

按照樣本的分組和試驗(yàn)方案計(jì)劃順序進(jìn)行檢測(cè)，記錄檢測(cè)結(jié)果，進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理與分析。

8試驗(yàn)注意事項(xiàng)

試驗(yàn)研究者

試驗(yàn)的研究者應(yīng)能正確、熟練使用阻斷劑，以及相關(guān)的信息、質(zhì)控程序、維護(hù)程序等。在試驗(yàn)開(kāi)始

時(shí)，應(yīng)對(duì)阻斷劑進(jìn)行基本參數(shù)的檢測(cè)，對(duì)照樣本和實(shí)驗(yàn)樣本狀態(tài)或樣本供體的病理或生理學(xué)狀態(tài)的確認(rèn)；

試驗(yàn)中應(yīng)運(yùn)行質(zhì)控程序，一旦阻斷劑的參數(shù)出現(xiàn)問(wèn)題應(yīng)重新檢測(cè)。

數(shù)據(jù)收集

在數(shù)據(jù)收集過(guò)程中，應(yīng)對(duì)所有數(shù)據(jù)及時(shí)記錄并檢查。如確定某些異常結(jié)果由可解釋、可接受的原因

引起，應(yīng)記錄原因并將其剔除出數(shù)據(jù)分析。如不能確定原因，應(yīng)將原始結(jié)果保留在數(shù)據(jù)集中。

數(shù)據(jù)檢測(cè)

應(yīng)及時(shí)檢測(cè)數(shù)據(jù)的完整性和有效性。如果因質(zhì)控原因或其他已識(shí)別和確認(rèn)出的錯(cuò)誤來(lái)源，影響到數(shù)

據(jù)的真實(shí)性時(shí)，則剔除錯(cuò)誤數(shù)據(jù)，并及時(shí)重復(fù)測(cè)試以補(bǔ)充數(shù)據(jù)。若剔除數(shù)據(jù)較多時(shí)，應(yīng)考慮測(cè)量系統(tǒng)性

能的穩(wěn)定性及此時(shí)進(jìn)行性能評(píng)價(jià)的適宜性。

結(jié)果追蹤

每份樣本的測(cè)定應(yīng)根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)的置信水平與干擾標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算。應(yīng)對(duì)非預(yù)期結(jié)果進(jìn)行追蹤，獲得與

樣品或受試者有關(guān)的額外信息。

9數(shù)據(jù)處理與分析

描述性統(tǒng)計(jì)

9.1.1測(cè)定均值

計(jì)算實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中干擾樣本的測(cè)定均值，統(tǒng)計(jì)評(píng)估阻斷劑對(duì)干擾樣本的消除干擾效果。

9.1.2數(shù)據(jù)審查

5

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測(cè)定均值試驗(yàn)的結(jié)果可用差異圖、直方圖、散點(diǎn)圖等方式直觀表達(dá)，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和審查，觀察

數(shù)據(jù)是否覆蓋了線性/測(cè)量區(qū)間以及是否存在離群值，并初步了解待評(píng)價(jià)體系和對(duì)比體系測(cè)量值之間的

潛在變異特征。

9.1.3數(shù)據(jù)圖分析

9.1.3.1概述

差異圖、直方圖和散點(diǎn)圖等可顯示待評(píng)價(jià)體系和對(duì)比體系的比較結(jié)果。數(shù)據(jù)分析需根據(jù)具體檢測(cè)條

件選擇特定類(lèi)型的對(duì)比圖。

9.1.3.2差異圖

差異圖的x軸表示測(cè)量濃度（如：待評(píng)價(jià)體系和對(duì)比體系的測(cè)量平均值），y軸表示待評(píng)價(jià)體系和對(duì)

比體系測(cè)量值的差值（如：二者的絕對(duì)差值或百分比差值）。

9.1.3.3直方圖

直方圖的x軸表示測(cè)量組，每個(gè)測(cè)量組的被測(cè)樣本信息，y軸表示實(shí)際檢測(cè)值。

9.1.3.4散點(diǎn)圖

散點(diǎn)圖應(yīng)顯示所有數(shù)據(jù)，其x軸表示對(duì)比體系的測(cè)量結(jié)果，y軸表示待評(píng)價(jià)體系的測(cè)量結(jié)果，x軸和

y軸應(yīng)使用相同的數(shù)值范圍和間距。

回歸分析

9.2.1回歸分析方法

根據(jù)9.1判斷數(shù)據(jù)是否滿(mǎn)足相應(yīng)的假設(shè)前提，并據(jù)此確定最佳的回歸分析方法。常見(jiàn)的回歸分析方

法包括Deming回歸、Passing-Bablok回歸分析和最小二乘回歸等。

9.2.2回歸模型選擇

由于實(shí)驗(yàn)方法的不同，回歸模型的選擇也具有差異。免疫學(xué)檢測(cè)中的模型有多種，如Logit-log直

線回歸常用于競(jìng)爭(zhēng)法，Logisitic四參數(shù)曲線回歸常用于夾心法等。

性能評(píng)價(jià)

9.3.1線性回歸

計(jì)算阻斷劑消除干擾后對(duì)反應(yīng)體系標(biāo)準(zhǔn)曲線的影響，在兩組實(shí)驗(yàn)中均采用相同水平的5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)，

通過(guò)回歸分析得出相應(yīng)的最佳擬合曲線與數(shù)字模型。獲得線性回歸方程（1）計(jì)算添加阻斷劑對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲

線的影響程度以及回歸系數(shù)及截距的95%可信區(qū)間。

???=?+???············································································(1)

式中：

b——回歸系數(shù)；

a——截距；

x——代表對(duì)照體系的檢測(cè)結(jié)果；

y——代表添加阻斷劑的實(shí)驗(yàn)組的檢測(cè)結(jié)果。

9.3.2偏差分析

6

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計(jì)算評(píng)估實(shí)驗(yàn)組的樣本與對(duì)照組的樣本測(cè)量結(jié)果的偏差。以對(duì)照組樣本的測(cè)定均值為x值，消除干

擾的實(shí)驗(yàn)組樣本的均值為y值，繪出兩組實(shí)驗(yàn)中樣本的信號(hào)強(qiáng)度和消除干擾后信號(hào)強(qiáng)度之間的相關(guān)，兩

組數(shù)集的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于95%。

9.3.3交叉反應(yīng)

阻斷劑的交叉反應(yīng)性應(yīng)在存在和不存在干擾物的情況下進(jìn)行測(cè)試，測(cè)試方法參考YY/T1789.5—

2023中第7章。

性能報(bào)告

9.4.1性能報(bào)告應(yīng)至少包括或提及：

——遵循的方案；

——涉及的批次；

——獲得的所有結(jié)果；

——數(shù)據(jù)分析；

——判定標(biāo)準(zhǔn)；

——結(jié)論。

9.4.2性能報(bào)告中應(yīng)包含對(duì)該項(xiàng)研究的描述、結(jié)果分析以及對(duì)性能主張的審查結(jié)論。報(bào)告也應(yīng)討論遇

到的非預(yù)期結(jié)果，適當(dāng)時(shí)，應(yīng)該