2025年粵教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年粵教版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷970考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下列生物技術(shù)操作對遺傳物質(zhì)的改造，不能遺傳給子代的是（）A.將含胰島素基因的表達載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌，篩選獲得的基因工程菌B.通過植物體細胞雜交獲得的番茄--馬鈴薯雜種植株C.將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細胞后回輸患者，進行基因治療D.將生長激素基因?qū)肽膛Ｊ芫?，培育出能分泌含生長激素乳汁的奶牛2、ES細胞的應用價值不包括（）A.可用于治療人類的肝衰竭、少年糖尿病等B.可以培育出人造組織器官C.可以治療人類的闌尾炎、過敏性反應等D.可作為研究體外細胞分化的理想材料3、初期出現(xiàn)高燒、疲累、頭痛、背痛，繼而在臉部、手臂和腿部出現(xiàn)紅疹。由此癥狀可以判斷是由下列哪種病毒引起（）A.天花病毒B.波特淋菌C.肉毒桿菌D.炭疽桿菌4、下列不屬于利用基因工程技術(shù)制取的藥物是（）A.從大腸桿菌體內(nèi)獲得白細胞介素B.從酵母菌體內(nèi)獲得干擾素C.從大腸桿菌體內(nèi)獲得胰島素D.青霉菌生產(chǎn)青霉素5、“X基因”是DNA分子上一個有遺傳效應的片段；若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝“X基因”，需在PCR反應中加入兩種引物，兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如圖甲所示。經(jīng)4輪循環(huán)后，產(chǎn)物中有五種不同的DNA分子，如圖乙所示，其中第③和④種DNA分子的個數(shù)有（）

A.8個B.6個C.4個D.2個6、某生物興趣小組嘗試對土壤中分解尿素的細菌進行分離并計數(shù)，相關(guān)敘述正確的是（）A.制備選擇培養(yǎng)基時，需加入尿素、瓊脂、葡萄糖、硝酸鹽等物質(zhì)B.用活菌計數(shù)法統(tǒng)計結(jié)果，活菌的實際數(shù)目往往比統(tǒng)計的菌落數(shù)低C.脲酶將尿素分解成氨使培養(yǎng)基的pH降低，加入酚紅指示劑后變紅D.每克樣品中的菌株數(shù)＝（C÷V）×M，C為某一稀釋度下平板上的平均菌落數(shù)7、穿刺接種是用接種針蘸取少量的菌種，沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺，如某細菌具有鞭毛而能運動，則在穿刺線周圍能夠生長。下列敘述錯誤的是（）

A.穿刺接種可用于鑒定微生物的呼吸作用類型B.穿刺接種可用于保藏厭氧菌種或研究微生物的運動C.相對于平板劃線法，穿刺接種所需的培養(yǎng)基添加的瓊脂較多D.相對于稀釋涂布平板法，穿刺接種不可用于樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計8、下圖表示形成DNA并進行PCR擴增的過程。據(jù)圖分析，下列敘述正確的是（）

A.①過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶B.②過程所需的原料是核糖核苷酸C.③過程需要解旋酶破壞氫鍵D.④過程的兩種引物之間能互補配對9、世界上首只體細胞（猴胎兒的成纖維細胞）克隆猴“中中”于2017年11月27日誕生，10天后第二只克隆猴“華華”誕生。國際權(quán)威學術(shù)期刊《細胞》于2018年1月25日以封面文章形式在線發(fā)布這一重要成果，該成果表明我國在靈長類體細胞核移植技術(shù)研究方面已經(jīng)走在世界前列。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.該培育過程屬于無性繁殖B.該培育過程涉及細胞核移植、早期胚胎培育和胚胎移植等技術(shù)C.該項研究的原理是動物細胞的全能性D.該項研究對于器官移植等具有重大的意義評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)10、下列有關(guān)利用酵母菌發(fā)酵制作葡萄酒的敘述，錯誤的是（）A.葡萄糖在酵母菌細胞的線粒體內(nèi)分解成丙酮酸B.制作葡萄酒時，酵母菌先在有氧條件下大量繁殖C.制作過程中，酵母菌始終處于堿性環(huán)境D.酵母菌的發(fā)酵產(chǎn)物不會影響自身的代謝活動11、微衛(wèi)星DNA是廣泛分布于真核生物基因組中的簡單重復序列。由于重復單位的重復次數(shù)在個體間呈高度特異性并且數(shù)量豐富，因此，微衛(wèi)星DNA可以作為分子標記，并有著廣泛應用。根據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點判斷，這種分子標記可應用于（）A.人類親子鑒定B.種群遺傳多樣性研究C.誘導基因突變D.冠狀病毒遺傳物質(zhì)測序12、蛋白質(zhì)工程就是通過對蛋白質(zhì)化學、蛋白質(zhì)晶體學和蛋白質(zhì)動力學的研究，獲得有關(guān)蛋白質(zhì)理化特性和分子特性的信息，在此基礎(chǔ)上對編碼蛋白質(zhì)的基因進行有目的的設(shè)計和改造，通過基因工程技術(shù)獲得可以表達蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因生物，中華鱘是一種瀕危野生動物。研究者試圖通過蛋白質(zhì)工程改造中華鱘體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)，使其更加適應現(xiàn)在的水域環(huán)境。下列有關(guān)說法錯誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程可定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)B.改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實現(xiàn)C.改造后的中華鱘和現(xiàn)有中華鱘不再是同一物種D.改造后的中華鱘的后代不具有改造的蛋白質(zhì)13、下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同B.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株D.煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細胞培養(yǎng)能得到細胞代謝產(chǎn)物14、細菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在與其他細菌的競爭中占優(yōu)勢，其中tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白。研究人員利用野生型細菌X及其不同突變體進行了實驗：在固體培養(yǎng)基表面放置一張能隔離細菌的濾膜，將一種菌（下層菌）滴加在濾膜上后再放置第二張濾膜，滴加等量的另一種菌（上層菌），共同培養(yǎng)后，對上、下層菌計數(shù)得到如圖結(jié)果。下列分析正確的是（）

A.實驗中的培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基和濾膜均需要進行滅菌處理B.對上、下層菌計數(shù)時應采用稀釋涂布平板法而不能用顯微鏡直接計數(shù)C.由甲、乙、丙三組結(jié)果可推測tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性D.野生型細菌X在與tcel-tcil雙突變體和tcel突變體的競爭中均占優(yōu)勢15、治療性克隆的做法是先從需要救治的患者身上提取細胞，然后將該細胞的遺傳物質(zhì)植入一個去除了細胞核的卵細胞中，該卵細胞開始自行分裂，直至形成一個早期胚胎，從早期胚胎中提取胚胎干細胞后將其培養(yǎng)成人們所需要的各種人體器官。下列有關(guān)說法正確的是（）A.可采用開放式培養(yǎng)的方式，置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)胚胎干細胞B.該早期胚胎發(fā)育始于受精卵，胚胎是由囊胚內(nèi)部的細胞團不斷增殖分化而來C.治療性克隆中運用胚胎移植技術(shù)，一般不選擇原腸胚進行胚胎移植D.我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何克隆性實驗評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)16、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。17、對于DNA的粗提取而言，就是利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在__________方面的差異，提取DNA，去除雜質(zhì)。（人教P54）18、注意：a生理基礎(chǔ)：______，______

b植物細胞融合前需用______和______除去細胞壁19、請寫出基因工程的概念：_________________。請寫出胚胎移植的概念：_____________________。請分別寫出植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的原理_________。20、生物數(shù)據(jù)庫的知識與正在迅猛發(fā)展的生物信息學有關(guān)。什么是生物信息學________？21、研究表明，轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的大面積種植有效遏制了棉鈴蟲害，也顯著地降低了化學農(nóng)藥的使用量?但是，科研人員也發(fā)現(xiàn)，棉田中一種體型很小的盲蝽蟓卻容易爆發(fā)成災?有人認為這與大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉有關(guān)?我們應如何看待這種觀點_____？如果回答問題有困難，可以請教老師或通過互聯(lián)網(wǎng)尋找答案。評卷人得分四、實驗題(共4題，共24分)22、鐵皮石斛是我國名貴中藥；生物堿是其有效成分之一，應用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖（簡稱PLBs，類似愈傷組織）生產(chǎn)生物堿的實驗流程如下：

在固體培養(yǎng)基上；PLBs的重量；生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖所示，請回答下列問題：

⑴選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是_____，誘導外植體形成PLBs的過程稱______。

⑵與黑暗條件下相比，PLBs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在_______，_______，____。

⑶脫落酸（ABA）能提高生物堿含量；但會抑制PLBs的生長。若采用液體培養(yǎng)，推測添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學們擬開展探究實驗驗證該推測，在設(shè)計實驗方案是探討了以下問題：

①ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式：設(shè)4個ABA處理組，1個空白對照組，3次重復。因ABA受熱易分解，故一定濃度的無菌ABA母液應在各組液體培養(yǎng)基______后按比例加入。②實驗進程和取樣：實驗50天完成，每10天取樣，將樣品（PLBs）稱重（g/瓶）后再測定生物堿含量。如初始（第0天）數(shù)據(jù)已知，實驗過程中還需測定的樣品數(shù)為______。

③依所測定數(shù)據(jù)確定適宜的ABA濃度和培養(yǎng)時間：當某3個樣品（重復樣）的_____時，其對應的ABA濃度為適宜濃度，對應的培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。23、餐廚垃圾廢液中的淀粉；蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物數(shù)量相對較少，存在發(fā)酵周期長、效率低等缺點，極易對環(huán)境造成污染。為探究用圓褐固氮菌、巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液時，單獨接種和混合接種的效果差異及最佳接種量比，以制備微生物菌劑，研究者做了如下實驗：

（1）將兩種菌液進行不同配比分組處理如下表所示：。編號R0R1R2R3圓褐固氮菌：巨大芽孢桿菌1：00：11：12：1

將上表菌液分別接種于l00mL________________中進行振蕩培養(yǎng)。本實驗還需設(shè)置空白對照，對照組接種________________。

（2）培養(yǎng)3天后測定活菌數(shù)，取一定量菌液用_____________法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)，該方法包括_____________和____________兩個操作。進行計數(shù)時，可依據(jù)______________對兩種菌進行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在__________內(nèi)的平板。實驗結(jié)果如下圖所示，由實驗結(jié)果可知___________________。

24、有研究表明CDKN2B基因與小鼠的壽命有關(guān)；科學家將該基因?qū)胄∈篌w內(nèi)，統(tǒng)計其壽命是否高于正常小鼠。圖1表示CDKN2B基因與相關(guān)限制酶酶切位點，該基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA堿基序列與A鏈的堿基序列相同（T；U視為相同的堿基），圖2為質(zhì)粒簡圖，請回答下列有關(guān)問題：

（1）科學家首先采用PCR技術(shù)對目的基因進行擴增。PCR過程中每一循環(huán)有兩次升溫一次降溫，其中降溫的目的是_______________________________________________________。

（2）科學家在構(gòu)建基因表達載體過程時，目的基因應插在___________和___________之間才能正常表達。單獨使用限制酶HindⅢ分別切割目的基因和載體后產(chǎn)生黏性末端。攜帶CDKN2B基因的重組質(zhì)粒成功導入細胞后，發(fā)現(xiàn)約一半的細胞中沒有檢測到CDKN2B蛋白，原因是___________。為了避免這種現(xiàn)象的發(fā)生，應對以上方法進行改進，改進措施為___________。

（3）若想讓一個轉(zhuǎn)入了目的基因的受精卵發(fā)育成多個個體，可以采用___________技術(shù)，操作時應注意做到_______________________________________________________。25、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過污染飼料引起畜禽中毒反應。CYP3A是豬體內(nèi)降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導CYP3A基因表達水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級”或“次級”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進入豬細胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動子上游的兩個調(diào)控序列，為研究T-2毒素誘導CYP3A基因表達的機理，研究者首先將不同調(diào)控序列分別和CYP3A基因啟動子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構(gòu)建表達載體，再分別導入豬肝細胞，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進行培養(yǎng)；24h后檢測LUC酶活性，計算啟動子活性相對值，結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調(diào)控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對CYP3A的誘導；B2是Spl的結(jié)合位點。研究者推測，NF-Y通過與B1結(jié)合，與Sp1共同調(diào)控CYP3A基因的表達。

①為證明Bl是NF-Y的結(jié)合位點，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細胞核蛋白提取物混合，實驗分組及結(jié)果如圖2．據(jù)實驗結(jié)果推測，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進而推測第5組結(jié)果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設(shè)計實驗進一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，實驗設(shè)計思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測CYP3A基因的啟動子活性。據(jù)此分析，實驗假設(shè)是_____。評卷人得分五、綜合題(共3題，共15分)26、泡菜是人們?nèi)粘Ｉ钪斜容^喜歡食用的一種食品；但是泡菜中卻含有亞硝酸鹽。某研究性學習小組的同學為了探究泡菜在發(fā)酵過程中不同食鹽濃度和發(fā)酵時間對亞硝酸鹽含量變化的影響，設(shè)計了相關(guān)實驗進行研究。請回答下面的問題：

（1）制作泡菜的原理是______________________，制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料，原因是______________。

（2）測定亞硝酸鹽含量的實驗原理是：在_________條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生_________反應后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成_________色染料。將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準顯色液進行目測比較；可以估測出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

（3）如圖是該活動小組記錄的三種食鹽濃度的泡菜中的亞硝酸鹽含量與發(fā)酵天數(shù)的關(guān)系圖。

根據(jù)此實驗結(jié)果，你認為制作泡菜比較適合的食鹽濃度為______________。

（4）泡菜的制作方法不當，很容易造成泡菜變質(zhì)，甚至發(fā)霉變味，試分析可能的原因________________。27、體細胞胚發(fā)生是植物體細胞經(jīng)體外培養(yǎng)再生成胚狀體并發(fā)育為完整植株的過程。研究發(fā)現(xiàn)L基因在棉花胚狀體形成過程中差異表達；研究者對其功能進行研究。

(1)棉花體細胞胚發(fā)生通過_____技術(shù)實現(xiàn)，外植體需經(jīng)過_____形成非胚性愈傷組織，再分化成胚性愈傷組織并進一步形成胚狀體。

(2)研究者取L基因過表達和干擾L基因表達的轉(zhuǎn)基因棉花的下胚軸；接種在培養(yǎng)基上誘導胚狀體的發(fā)生，結(jié)果如圖1。

①培養(yǎng)基應含有_____（有機物、無機物至少各1種）等營養(yǎng)物質(zhì)。接種前，下胚軸需進行_____處理。

②據(jù)圖1可知，L基因表達_____胚性愈傷組織的提前分化。

(3)L基因表達產(chǎn)物可結(jié)合靶基因啟動子并激活轉(zhuǎn)錄；研究發(fā)現(xiàn)L基因過表達的棉花細胞中P蛋白含量增加。為探究P基因是否為L基因調(diào)控的靶基因，研究者克隆出P基因的啟動子，經(jīng)處理后連接熒光素酶（LUC）基因構(gòu)建表達載體，導入煙草的原生質(zhì)體，結(jié)果如圖2。

實驗組原生質(zhì)體還應導入_____。

結(jié)果說明_____。

(4)P蛋白可抑制生長素極性運輸。為探究生長素運輸對胚狀體形成的影響，研究者將生長素運輸抑制劑添加到培養(yǎng)基中，檢測胚性愈傷組織的分化率；結(jié)果如圖3。

①比較圖1、圖3結(jié)果，表明生長素運輸抑制劑處理可以_____。

②實驗結(jié)果不能說明“L基因僅通過影響生長素的運輸進而影響胚狀體的形成”，理由是_____。28、人乳鐵蛋白（hLF）廣泛分布于乳汁等外分泌液，初乳中含量較高，對細菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究，主要流程如圖，圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點，neor為新霉素抗性基因；BLG基因為β乳球蛋白基因，GFP基因為綠色熒光蛋白基因。請回答：

(1)過程①方法的基本原理是先以人乳腺細胞總RNA為模板通過逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA（互補DNA），再通過PCR技術(shù)擴增相應的DNA片段——hLF基因。但是過程①中，不能從人肌肉細胞中提取RNA用于RT-PCR，這是因為____________，在RT-PCR過程中，加入的引物需在____________端添加識別序列的限制酶是____________；以便于hLF基因插入pEB質(zhì)粒中。

(2)過程②中，hLF基因插入到BLG基因之后，利用后者的啟動子的目的是____________。

(3)將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠存活的細胞應該是導入了____________的細胞，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細胞是否有____________以篩選出轉(zhuǎn)染成功的細胞。

(4)科研過程中，可以用PCR技術(shù)檢測受體細胞中的染色體上DNA上是否____________或檢測____________?？梢杂胈___________技術(shù)，檢測hLF基因是否翻譯成人乳鐵蛋白。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、C【分析】【分析】

基因治療是指將外源正常基因?qū)氚屑毎?；以糾正或補償缺陷和異常基因引起的疾病，以達到治療目的。其中也包括轉(zhuǎn)基因等方面的技術(shù)應用，也就是將外源基因通過基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將其插入病人的適當?shù)氖荏w細胞中，使外源基因制造的產(chǎn)物能治療某種疾病。從廣義說，基因治療還可包括從DNA水平采取的治療某些疾病的措施和新技術(shù)。

【詳解】

A；將含胰島素基因的表達載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌；篩選獲得的基因工程菌可以通過二分裂的方式遺傳給后代，A不符合題意；

B；通過植物體細胞雜交獲得的番茄--馬鈴薯雜種植株；遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，可以通過無性繁殖遺傳給子代，B不符合題意；

C；將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細胞；只是淋巴細胞含有這個基因，其生殖細胞的該基因沒有改變，因此不能遺傳給子代，C符合題意；

D；將生長激素基因?qū)肽膛Ｊ芫眩皇芫押猩L素基因，受精卵培育成的奶牛含有該基因，因此可以遺傳給后代，D不符合題意。

故選C。2、C【分析】【分析】

哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞。ES細胞具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積?。患毎舜?、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞。

【詳解】

A；ES細胞可用于治療人類的某些頑癥；如帕金森綜合癥、肝衰竭、少年糖尿病等疾病，與題意不符，A錯誤；

B；ES細胞具有發(fā)育的全能性；可培育出人造器官，解決目前臨床上存在的供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題，與題意不符，B錯誤；

C；人類的闌尾炎是炎癥引起的；過敏反應是免疫失調(diào)病，ES細胞不能用于治療這些疾病，與題意相符，C正確；

D；ES細胞具有自我更新和分化的潛能；可作為研究體外細胞分化的理想材料，與題意不符，D錯誤。

故選C。

【點睛】3、A【分析】【分析】

1；生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等．把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果。

2；生物武器的特點：單位面積效應大；有特定的傷害對象；具有傳染性；危害時間久；不易被發(fā)現(xiàn)和鑒定；使用者本身易受傷害；生物武器造價低；技術(shù)難度不大，隱秘性強，可以在任何地方研制和生產(chǎn)。

【詳解】

高燒、疲累、頭痛繼而在明顯部位出現(xiàn)紅疹是天花患者的癥狀，是由天花病毒引起的，A正確，BCD錯誤。4、D【分析】【分析】

基因工程藥物（1）來源：轉(zhuǎn)基因工程菌。工程菌是指采用基因工程的方法；使外源基因得到高效率表達的菌株類細胞系。

（2）成果：人胰島素；細胞因子、抗體、疫苗么長激素、干擾素等。

【詳解】

A；利用基因工程技術(shù)可制取藥物；如外源白細胞介素基因在大腸桿菌中表達制取白細胞介素，屬于基因工程制藥，A錯誤；

B；利用基因工程技術(shù)可制取藥物；如使外源干擾素基因在酵母菌體內(nèi)表達獲得干擾素，屬于基因工程制藥，B錯誤；

C；利用基因工程技術(shù)可制取藥物；如使外源胰島素基因在大腸桿菌體內(nèi)表達獲得胰島素，屬于基因工程制藥，C錯誤；

D；青霉素是青霉菌自身基因表達產(chǎn)生的；因此在青霉菌體內(nèi)提取的青霉素不屬于基因工程藥品，D正確。

故選D。5、B【分析】PCR：

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術(shù)；

（2）原理：DNA雙鏈復制；

（3）條件：模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；

（4）過程：高溫變性；低溫復性、中溫延伸。

（5）結(jié)果：經(jīng)過n次擴增，形成的DNA分子數(shù)是2n個；其中只有2條單鏈不含有引物。

【詳解】

通過圖中信息可知；“X基因”第1次復制得到兩個DNA：①和②各1個；“X基因”第2次復制得到4個DNA：①復制得①和③；②復制得②和④；“X基因”第3次復制得到8個DNA：①復制得①和③、③復制得③和⑤、②復制得②和④、④復制得④和⑤；“X基因”第4次復制得到16個DNA：①復制得①和③、②復制得②和④、2個③復制得2個③和2個⑤、2個④復制得2個④和2個⑤、兩個⑤復制得到4個⑤。

從上面的推測可知，經(jīng)4輪循環(huán)產(chǎn)物后，產(chǎn)物中有8個⑤、3個④、3個③、1個②、1個①。因此，經(jīng)4輪循環(huán)后，第③和④種DNA分子的個數(shù)有：3+3=6個，故選B。6、D【分析】1；培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素；只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。

2；分解尿素的細菌的鑒定細菌合成的脲酶將尿素分解成氨；氨會使培養(yǎng)基的堿性增強。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素。

3；統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：

（1）顯微鏡直接計數(shù)法①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板；在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計數(shù)板計數(shù)；③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌；

（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌．通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作：a、設(shè)置重復組，增強實驗的說服力與準確性；b；為了保證結(jié)果準確；一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。③計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】

A；分離土壤中分解尿素的細菌；培養(yǎng)基中要有尿素、瓊脂糖、葡萄糖，尿素給分解尿素的細菌提供氮源，不能加硝酸鹽，否則無法起到選擇出尿素分解菌的作用，A錯誤；

B；用活菌計數(shù)法統(tǒng)計結(jié)果時；有的活菌在培養(yǎng)過程中會死亡，而有的菌落是由多個活菌共同形成的，故活菌的實際數(shù)目往往比統(tǒng)計的菌落數(shù)高，B錯誤；

C；脲酶將尿素分解成氨使培養(yǎng)基的pH增加；加入酚紅指示劑后變紅，C錯誤；

D；每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M；其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)，D正確。

故選D。7、C【分析】【分析】

穿刺接種在保藏厭氧菌種或研究微生物的運動時常采用此法。做穿刺接種時；用的接種工具是接種針。用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基。它的做法是：用接種針蘸取少量的菌種，沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺，如某細菌具有鞭毛而能運動，則在穿刺線周圍能夠生長。

【詳解】

A、由分析可知，穿刺接種可用于鑒定微生物的呼吸作用類型，A正確；

B、穿刺接種常用于保藏厭氧菌種或研究微生物的運動，因此需要接種在半固體培養(yǎng)基中，B正確；

C、由分析可知，相對于平板劃線法，穿刺接種所需的培養(yǎng)基添加的瓊脂較少，C錯誤；

D、稀釋涂布平板法可用于活菌計數(shù)，而穿刺接種不可用于樣品中活菌數(shù)量統(tǒng)計，D正確。

故選C。8、A【分析】【分析】

分析題圖：①是以RNA為模板形成單鏈DNA的逆轉(zhuǎn)錄過程；②是以單鏈DNA為模板合成雙鏈DNA的DNA復制過程；③④⑤依次是PCR反應過程中的變性；復性、延伸階段。

【詳解】

A；①過程為逆轉(zhuǎn)錄；需要逆轉(zhuǎn)錄酶，A正確；

B；②過程由DNA單鏈合成DNA雙鏈過程；所需要的原料為脫氧核糖核苷酸，B錯誤；

C；③過程為變性；溫度上升到90℃至95℃時，雙鏈DNA解聚為單鏈，不需要解旋酶破壞氫鍵，C錯誤；

D；④過程為復性；溫度降到55℃至60℃時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條DNA單鏈結(jié)合，但引物對之間不能互補配對，D錯誤。

故選A。9、C【分析】【分析】

細胞核移植概念：將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。

【詳解】

A；克隆猴的誕生屬于動物體細胞核移植；形成過程沒有經(jīng)過生殖細胞的融合，所以屬于無性繁殖，A正確；

B；獲得克隆猴的培育過程中用到的細胞工程技術(shù)主要有核移植、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植等；B正確；

C；克隆猴的原理是動物細胞核具有全能性；C錯誤；

D；該項研究對于器官移植等具有重大的意義；D正確。

故選C。二、多選題(共6題，共12分)10、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是單細胞的真核生物；屬于真菌，代謝類型是兼性厭氧型。在氧氣充足時，酵母菌進行有氧呼吸，將葡萄糖分解為二氧化碳和水；在無氧條件下，進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

【詳解】

A；利用酵母菌發(fā)酵的方式制作葡萄酒時；酵母菌進行無氧呼吸，葡萄糖在酵母菌細胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)被分解成丙酮酸，A錯誤；

B；酵母菌繁殖需要空氣；在完全隔絕空氣的情況下，酵母菌繁殖幾代就停止了，要維持酵母菌長時間發(fā)酵，必須供給一定的氧氣，故制作葡萄酒時酵母菌先在有氧條件下大量增殖，B正確；

C、酵母菌發(fā)酵的后期，由于產(chǎn)生的CO2和其他代謝產(chǎn)物的積累；發(fā)酵液呈酸性，C錯誤；

D；酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生的酒精會對酵母菌的生長產(chǎn)生抑制作用；D錯誤。

故選ACD。11、A:B【分析】【分析】

微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡單重復序列；由于重復單位的重復次數(shù)在個體間呈高度特異性并且數(shù)量豐富，可以作為分子標記應用于人類親子鑒定；種群遺傳多樣性研究。

【詳解】

AB；微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡單重復序列；且重復單位的重復次數(shù)在個體間呈高度特異性，因此可用于人類親子鑒定、物種間親緣關(guān)系鑒定、物質(zhì)和遺傳多樣性的研究等，AB正確；

C；誘導基因突變的因素有物理因素、化學因素和生物因素；與微衛(wèi)星DNA的特性無關(guān)，C錯誤；

D；冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是RNA；其測序與微衛(wèi)星DNA的特性無關(guān)，D錯誤。

故選AB。12、C:D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。也就是說，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包含多學科的綜合科技工程領(lǐng)域。

基本流程：從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對應的脫氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程可以通過改造基因來定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)；A正確；

B；因為基因指導蛋白質(zhì)的合成；所以改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實現(xiàn)，B正確；

C；改造后的中華鱘具有新的性狀；但其和現(xiàn)有中華鱘之間沒有生殖隔離，仍是同一物種，C錯誤；

D；蛋白質(zhì)工程改造的是基因；可以遺傳給子代，因此改造后的中華鱘的后代也具有改造的蛋白質(zhì)，D錯誤。

故選CD。13、A:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較。比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理細胞的全能性細胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分營養(yǎng)物質(zhì)（蔗糖）、植物激素等營養(yǎng)物質(zhì)（葡萄糖）、動物血清等培養(yǎng)結(jié)果植物體細胞株、細胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無毒苗等獲得細胞或細胞產(chǎn)物分散處理無有脫分化有無

【詳解】

A；動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同；如動物細胞培養(yǎng)需要加血清，植物細胞培養(yǎng)不需要添加血清，A正確；

B；植物組織培養(yǎng)不需要胰蛋白酶；B錯誤；

C；動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)；莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株，C正確；

D；煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體；小鼠雜交瘤細胞培養(yǎng)能得到細胞代謝產(chǎn)物，D正確。

故選ACD。14、A:B:C【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；為避免雜菌的污染；實驗中的濾膜、培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基等均需滅菌處理，A正確；

B；對活菌進行計數(shù)的方法是稀釋涂布平板法；具體方法是：先將菌體進行梯度稀釋，再涂布到濾膜的表面，待菌落數(shù)穩(wěn)定時進行計數(shù)，不能用顯微鏡直接計數(shù)的原因是顯微鏡直接計數(shù)不能區(qū)分死菌和活菌，B正確；

C；tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白；乙組中野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel-tcil雙突變體，后者無法產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在競爭中占據(jù)優(yōu)勢；而在丙組中，野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel突變體，后者可以產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生長受到抑制，由此推測，tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性，C正確；

D；由甲組、乙組可知；野生型細菌X在與tcel-tcil雙突變體的競爭中均占優(yōu)勢，由甲組、丙組可知，野生型細菌X在與tcel突變體的競爭中不占優(yōu)勢，D錯誤。

故選ABC。15、C【分析】【分析】

治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細胞和組織（皮膚；神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。中國政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；不反對治療性克隆。

【詳解】

A；開放式組織培養(yǎng)一般是指使組織培養(yǎng)脫離嚴格無菌的操作環(huán)境；在自然、開放的有菌環(huán)境中進行操作。，動物細胞一般不能采用這種方式，A錯誤；

B；胚胎是由整個受精卵發(fā)育而來的；囊胚內(nèi)部的細胞不能發(fā)育為完整的胚胎，B錯誤；

C；胚胎移植技術(shù)；一般采用桑椹胚或囊胚進行移植，C正確；

D；我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何形式的生殖性克?。坏遣环磳χ委熜钥寺?，D錯誤。

故選C。三、填空題(共6題，共12分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉(zhuǎn)錄法化學合成法17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】物理和化學性18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細胞膜流動性植物細胞全能性纖維素酶果膠酶19、略

【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學為理論基礎(chǔ)，以分子生物學和微生物學的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預先設(shè)計的藍圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。

2；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。

3；動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖，其原理是細胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性。

【點睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動植物細胞培養(yǎng)等相關(guān)知識，意在考察考生對知識點的理解掌握程度?！窘馕觥竣?又叫基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)②.又稱受精卵移植，是指將雌性動物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)③.植物細胞全能性、細胞增殖20、略

【分析】【詳解】

生物信息學是研究生物信息的采集、處理、存儲、傳播,分析和解釋等各方面的學科，也是隨著生命科學和計算機科學的迅猛發(fā)展，生命科學和計算機科學相結(jié)合形成的一門新學科，生物信息學主要是核酸和蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)的計算機處理和分析?！窘馕觥可镄畔W是研究生物信息的采集、處理、存儲、傳播,分析和解釋等各方面的學科，也是隨著生命科學和計算機科學的迅猛發(fā)展，生命科學和計算機科學相結(jié)合形成的一門新學科21、略

【分析】【詳解】

生物之間存在（種間）競爭多關(guān)系，該區(qū)域的棉鈴蟲與盲蝽蟓之間共同以棉花為食，種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉后，棉鈴蟲不能存活，盲蝽蟓的食物等資源充足，故大量繁殖，爆發(fā)成災。【解析】該區(qū)域的棉鈴蟲與盲蝽蟓之間存在競爭關(guān)系，種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉后，棉鈴蟲不能存活，盲蝽蟓大量繁殖四、實驗題(共4題，共24分)22、略

【分析】【分析】

【詳解】

⑴新生營養(yǎng)芽分裂能力強；細胞分化程度低，容易誘導形成PLBs；根據(jù)題干可知，PLBs，類似愈傷組織，外植體形成愈傷組織的過程是脫分化。⑵據(jù)圖分析，光照下PLBs的重量高于黑暗條件下，原因可能是生長起始較快，快速生長時間較長，PLBs產(chǎn)量較高。⑶①由于ABA受熱易分解，所以各種液體培養(yǎng)基滅菌后，冷卻，再加入不同濃度的ABA。②根據(jù)題干可知，實驗50天完成，每10天取樣，需要取5次樣；空白組不需要重復，處理組，每組重復三次，因此每次取樣中，需要記錄15個樣品中的數(shù)據(jù)，取樣5次共需要測定的樣品數(shù)為75。③適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量，當樣品的PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大時，其對應的ABA濃度為適宜濃度，對應的培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。

【考點】

本題主要考查植物組織培養(yǎng)和設(shè)計實驗，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系、具有對一些生物學問題進行初步探究的能力和并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行解釋、分析和處理的能力?！窘馕觥考毎只潭鹊?，容易誘導形成PLBs細胞的脫分化生長起始較快快速生長時間較長PLBs產(chǎn)量較高滅菌、冷卻75PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大23、略

【分析】微生物實驗室培養(yǎng)的實驗操作：1；制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程為：計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。2、純化大腸桿菌：（1）原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞；使其長成單個的菌落，這個單個菌落就是一個純化的細菌菌落。（2）微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在-起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

（1）將上表菌液分別接種于100mL餐廚垃圾廢液中進行振蕩培養(yǎng)；振蕩處理的目的是增加溶液中的溶氧量；有利于目的菌與溶液充分接觸；本實驗還需設(shè)置對照組為接種等量無菌水。

（2）測定活菌數(shù)；需要利用稀釋涂布平板法，接種時故需要取一定量菌液進行梯度稀釋，然后分別取0.1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。進行計數(shù)時，可依據(jù)菌落的特征對兩種菌進行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在30-300內(nèi)的平板。由實驗結(jié)果可知：兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1:1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化。

【點睛】

本題結(jié)合圖表，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記制備培養(yǎng)基的過程;識記接種微生物常用的兩種方法及微生物的計數(shù)方法，能結(jié)合柱形圖中信息準確答題?！窘馕觥磕巢蛷N垃圾廢液等量無菌水稀釋涂布平板系列（梯度）稀釋涂布平板菌落特征30~300兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1：1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化24、略

【分析】【分析】

1；PCR擴增的過程是：目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈；引物與單鏈相應互補序列結(jié)合，然后在DNA聚合酶作用下進行延伸，如此重復循環(huán)多次。

2；構(gòu)建基因表達載體過程時；目的基因應插在啟動子和終止子之間才能正常表達。

【詳解】

（1）PCR過程中每次循環(huán)兩次升溫（變性和延伸）和一次降溫（復性）；其中降溫（復性）的目的是讓兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。

（2）基因表達載體包括標記基因；目的基因；啟動子和終止子，科學家在構(gòu)建基因表達載體過程時，目的基因應插在啟動子和終止子之間才能正常表達。單獨使用限制酶HindⅢ切割目的基因和載體后，由于部分基因反向連接，導致攜帶CDKN2B基因的重組質(zhì)粒成功導入細胞后，約一半的細胞中沒有檢測到CDKN2B蛋白。為了避免這種現(xiàn)象的發(fā)生，可以同時用兩種酶進行切割，由于SmaⅠ會破壞CDKN2B基因，不能選用該酶切割，HindⅢ會破壞質(zhì)粒的兩種標記基因，不能選用該酶切，PstⅠ和EcoRⅠ能切下完整的CDKN2B基因，并不會破壞抗四環(huán)素基因基因，因此為了避免這種現(xiàn)象的發(fā)生，可以同時用PstⅠ、EcoRⅠ分別對目的基因和載體進行酶切。

（3）來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；因此要讓一個受精卵發(fā)育成多個個體，可采用胚胎分割技術(shù)，然后經(jīng)移植獲得多胎。分割時應注意將囊胚的內(nèi)細胞團均等分割。

【點睛】

本題考查基因工程和胚胎分隔技術(shù)相關(guān)知識，掌握基因工程和胚胎分割操作步驟是解決本題的關(guān)鍵?！窘馕觥孔寖煞N引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合啟動子終止子部分基因反向連接同時用PstⅠ、EcoRI分別對目的基因和載體進行酶切胚胎分割將囊胚的內(nèi)細胞團均等分割25、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導其表達水平升高，當用兩種調(diào)控序列同時連接啟動子，啟動子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結(jié)合；突變型探針不能與NF-Y結(jié)合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結(jié)合。

【詳解】

（1）初級代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動所必需的，大多存在于細胞內(nèi)。次級代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴散的方式進入細胞。

（2）實驗的自變量是有無調(diào)控序列；根據(jù)單一變量原則，對照組的目的是為了排除無光變量的影響，除了沒有調(diào)控序列，其他處理和實驗組相同，所以對照組和實驗組豬肝細胞均導入含CYP3A基因啟動子及LUC基因的表達載體，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個調(diào)控序列和對照組活性一致，缺失一個比對照組活性略強，兩個都存在活性最高，說明這兩個調(diào)控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件。故缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個，T-2毒素都不能誘導啟動子活性明顯增強。

（3）①實驗的目的是要驗證NF-Y能與B1結(jié)合；根據(jù)第2組和第3組結(jié)果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結(jié)合位點野生型探針能與NF-Y結(jié)合，根據(jù)第4組結(jié)果，突變型探針不能與NF-Y結(jié)合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結(jié)合。故可以解釋為：結(jié)合位點突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設(shè)NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會降低CYP3A基因的啟動子的活性?！窘馕觥?1)次級自由擴散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個；T-2毒素都不能誘導啟動子活性增強。

(3)結(jié)合位點突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。五、綜合題(共3題，共15分)26、略

【分析】【分析】

1；泡菜制作的原理是乳酸菌發(fā)酵；制作的流程是原料的修整、洗滌、晾曬、切分等加工過程+泡菜鹽水→加入調(diào)味料裝壇→發(fā)酵→成品。

2；由于在泡菜制作過程中；微生物會將原料中的硝酸鹽還原形成亞硝酸鹽，因此在發(fā)酵初期亞硝酸鹽含量會逐漸升高，發(fā)酵后期亞硝酸鹽又會被某些微生物氧化成硝酸鹽，亞硝酸鹽含量又會逐漸下降，因此在泡菜制作過程中要檢測亞硝酸鹽的含量，確定合適的取食時間。

3；亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后；與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽反應呈現(xiàn)玫瑰紅色，因此制作不同濃度的亞硝酸鹽溶液制成標準顯色液，再與泡菜溶液的顯色情況進行比較從而確定泡菜中亞硝酸鹽的含量。

（1）

泡菜制作的原理是乳酸菌發(fā)酵；乳酸菌是一種厭氧菌，在無氧條件下，乳酸發(fā)酵將葡萄糖分解產(chǎn)生乳酸，形成一種獨特的風味。有些蔬菜如小白菜；蘿卜等，含有豐富的亞硝酸鹽，放置時間過久，亞硝酸鹽含量升高，而新鮮蔬菜的亞硝酸鹽含量低，因此制作泡菜時要用新鮮的蔬菜或其他原料。

（2）

測定亞硝酸鹽含量的方法是比色法；其原理是：在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，將顯色反應的樣品與已知濃度的標準液進行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

（3）

據(jù)實驗結(jié)果可知；因為食鹽濃度為5%的泡菜中亞硝酸鹽含量變化最快，說明乳酸菌代謝最旺盛，且在發(fā)酵11天后亞硝酸鹽降到最低值，所以比較適合制作泡菜的食鹽濃度為5%。

（4）

制作泡菜時；若泡菜壇子密封不嚴；取食工具不衛(wèi)生或鹽的比例過小，都會引起雜菌