抗菌藥物敏感性試驗（微生物學檢驗技術(shù)課件）

1.抗菌藥物種類及作用學習目標掌握抗菌藥物的常見種類及作用臨床常用抗菌藥物種類喹諾酮類糖肽類氨基糖苷類氯霉素類、磺胺類林可酰胺類及合成抗菌藥物四環(huán)素類、β-內(nèi)酰胺類大環(huán)內(nèi)酯類(一)

β－內(nèi)酰胺類抗生素1.青霉素類抗生素：包括青霉素G、耐青霉素酶青霉素、廣譜青霉素(氨芐青霉素、美洛西林、哌拉西林)等。2.頭孢菌素類抗生素：第一代(頭孢唑林、頭孢氨芐、頭孢拉定)、第二代(頭孢孟多、頭孢西汀，頭孢呋新，頭孢克羅等)、第三代

(頭孢哌酮（先鋒必）、頭孢三嗪（菌必治）、頭孢噻肟鈉、頭孢他啶、頭孢唑肟等)

。第四代如頭孢地嗪、頭孢噻唑肟、頭孢吡肟等。適用于多重耐藥G-桿菌嚴重感染，對厭氧菌也有很好的抗菌作用3.其他β－內(nèi)酰胺類抗生素

(1)單環(huán)β－內(nèi)酰胺類抗生素:主要有氨曲南和卡蘆莫南。(2)頭霉素類和氧頭孢烯類抗生素:主要有頭孢西丁、頭孢替坦、頭孢美唑。（3）碳青霉烯類抗生素:

主要有亞胺培南、米洛培南、必安培南、帕尼培南。（4）β－內(nèi)酰胺類抑制劑:

主要有克拉維酸、舒巴坦和他唑巴坦。所有β－內(nèi)酰胺類抗生素都具有β－內(nèi)酰胺環(huán)這一結(jié)構(gòu)，通過抑制細胞壁粘肽合成酶，即青霉素結(jié)合蛋白（penicillinbindingproteins，PBPs），從而阻礙細胞壁合成而發(fā)揮殺菌作用。（二）氨基糖苷類抗生素可干擾細菌蛋白質(zhì)合成,主用于對革蘭氏陰性菌、綠膿桿菌等感染的治療，按其來源分為：①由鏈霉菌屬發(fā)酵濾液提取獲得，有鏈霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龍霉素、新霉素；②由小單胞菌屬發(fā)酵濾液中提取，有慶大霉素、福提霉素；③半合成氨基糖苷類：有阿米卡星、奈替米星、地貝卡星等。（三）喹諾酮類抗生素是一種DNA旋轉(zhuǎn)酶抑制劑，它作用于細菌DNA旋轉(zhuǎn)酶，干擾DNA超螺旋結(jié)構(gòu)的解旋，從而阻礙DNA的復制。第一代為窄譜抗生素，有新惡酸、奈啶酸和惡喹酸。第二代為廣譜類抗生素，抗菌強度依次為環(huán)丙沙星、氧氟沙星、洛美沙星、氟咯沙星、培氟沙星、諾氟沙星。第三代為超廣譜類抗生素，有司帕沙星、妥舒沙星、左氟沙星等。（四）大環(huán)內(nèi)酯類抗生素:

作用于核糖體50S亞基，抑制肽?；D(zhuǎn)移酶，阻止轉(zhuǎn)肽作用和mRNA位移，抑制細菌蛋白質(zhì)的合成。常用的有：紅霉素、柱晶白霉素、麥迪霉素、乙酰螺旋霉素。（五）四環(huán)素、氯霉素和林可酰胺類抗生素

1.四環(huán)素為廣譜抗生素，能特異性地與細菌核糖體30S亞基的A位置結(jié)合?？咕钚缘捻樞颍簽槊字Z環(huán)素＞多西環(huán)素＞美他環(huán)素＞地美環(huán)素。2.氯霉素類抗生素，包括氯霉素、甲砜霉素。3.林可酰胺類抗生素，主要有鹽酸林可霉素、克林霉素。（六）糖肽類抗生素常用的有萬古霉素和替卡拉寧。（七）其他合成抗菌藥

1.硝基呋喃類用于腸道、尿路感染和外用消毒，有呋喃坦啶和呋喃唑酮。

2.硝基咪唑類對厭氧菌有抗菌作用，對需氧菌無效，有甲硝唑和替硝唑。（八）磺胺類藥物及增效劑分三類：①用于全身感染的藥物，分為短效、中效、長效三類，有磺胺甲惡唑，磺胺嘧啶、磺胺甲氧吡嗪；②腸道起作用的藥物有柳氮磺胺啶銀、磺胺二甲氧嘧啶；③局部應(yīng)用的藥物有磺胺米隆、磺胺酰鈉。2.常規(guī)藥敏試驗藥物選擇原則學習目標掌握常規(guī)藥敏試驗藥物選擇原則常規(guī)藥敏試驗選藥原則CLSI試驗藥物分成A、B、C、U、O五組,A組所列的抗生素為常規(guī)、主要試驗和常規(guī)報告藥物,B組

為首選試驗藥物，但只被選擇性報告：①對A組同類抗生素耐藥；②特定來源的標本，如三代頭孢菌素使用于腦脊液中的腸桿菌，磺胺甲惡唑使用于尿道分離的細菌；③多種微生物感染；④多部位感染；⑤對A組抗生素過敏、耐受或無反應(yīng)。⑥控制感染為目的。常規(guī)藥敏試驗選藥原則C組替代性或補充性藥物。①同一單位存在對一種或幾種耐藥的、廣泛流行或局部流行的菌株；②對首選藥物過敏；③治療少見菌感染（氯霉素對沙門菌屬腸道外菌株）；④控制感染為目的。U組僅用于或主要用于泌尿道感染的藥物。O組為對該組細菌有臨床適應(yīng)證，但一般不允許常規(guī)試驗并報告的藥物。常規(guī)藥敏試驗選藥原則我國主要遵循美國臨床實驗室標準化委員會（CLSI）制定的抗菌藥物選擇原則。U組：僅用于治療泌尿道感染的藥物。C組：在A、B組藥物過敏或耐藥時選用；B組：只在A組藥物耐藥、過敏、無效時選擇性報告;A組：包括對特定菌群的常規(guī)試驗并常規(guī)報告的藥物；常規(guī)藥敏試驗選藥原則選擇性報告：——細菌對A組抗菌藥物耐藥時

——病人對A組抗菌藥物過敏/不適

——多部位感染時常規(guī)藥敏試驗選藥原則2.稀釋法學習目標掌握稀釋法的操作及結(jié)果判斷微寄室方昕MIC（最低抑菌濃度）MBC（最低殺菌濃度）抗菌藥物能抑制試驗菌生長的最低濃度。

抗菌藥物能殺滅試驗菌的最低濃度。一、稀釋法的概念以一定濃度的抗菌藥物與培養(yǎng)基進行一系列不同倍數(shù)稀釋，經(jīng)培養(yǎng)后觀察被試菌株的最低抑菌濃度，根據(jù)CLSI提供的MIC解釋標準判斷細菌對抗菌藥物的敏感程度。稀釋法中使用肉湯培養(yǎng)基為肉湯稀釋法，使用瓊脂培養(yǎng)基為瓊脂稀釋法。濃度4

8 163264128256μg/ml混

清抗菌藥物素倍比稀釋，接種菌105CFU/ml，孵育溫度35℃，16～20h，判讀結(jié)果。二、肉湯稀釋法結(jié)果判別：

無可見細菌生長的藥物最低濃度為該試驗菌的MIC，從無菌生長的管中取液體菌種于血平板，經(jīng)適宜條件培養(yǎng)過夜，無菌生長的藥物最低濃度即為MBC.

藥物濃度16

3264128256

μg/ml制備含對倍抗生素濃度梯度的平板，制備菌懸液，點種菌，