臨床常見病原菌檢驗(yàn)（微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)課件）

第七章病原性球菌及檢驗(yàn)病原性球菌:對人有致病性的球菌.主要引起化膿性炎癥,又稱化膿性球菌，主要有9屬。G+C：葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬G-C：奈瑟菌屬、卡他布蘭漢菌屬1.掌握葡萄球菌屬生物學(xué)性狀和微生物檢驗(yàn)，尤其是鑒別要點(diǎn)。2.熟悉葡萄球菌屬致病性和免疫性。3.葡萄球菌屬所致疾病的防治原則。

學(xué)習(xí)目的與要求第一節(jié)葡萄球菌屬

(Staphylococcus)45種，21個(gè)亞種，最常見、最重要的致病菌是金黃色葡萄球菌G+，球形，無鞭毛、無芽孢，

固體培養(yǎng)基：呈葡萄串狀排列

液體培養(yǎng)基：成單、成雙或短鏈狀排列（鏈球菌）一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)與染色金黃色葡萄球菌金黃色脂溶性色素（二）培養(yǎng)特性表皮葡萄球菌在普通瓊脂平皿上的白色色素表皮葡萄球菌在血平板上的白色色素中等大小，圓形凸起，不透明、有色、S型菌落。葡萄球菌菌落形態(tài)（普通瓊脂平板）

液體：均勻渾濁生長金黃色葡萄球菌有透明溶血環(huán)。表皮葡萄球菌無溶血環(huán)。

耐鹽：

10-15%g/LNaCl培養(yǎng)基中生長選擇性平板：高鹽甘露醇平板，致病菌可分解甘露醇產(chǎn)酸使指示劑呈淡黃色。G-菌在此平板上不生長。

金黃色葡萄球菌在高鹽甘露醇平板上的淡黃色菌落選擇性平板：卵黃高鹽平板，金葡菌可產(chǎn)生卵磷脂酶，分解卵黃在菌落周圍形成白色沉淀環(huán)。金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌（三）生化反應(yīng)葡萄糖（O/F）實(shí)驗(yàn)：發(fā)酵型，分解多種糖類產(chǎn)酸(如：葡萄糖，麥芽糖，蔗糖，甘露醇）、蛋白質(zhì)、氨基酸F型O型-型（三）生化反應(yīng)甘露醇發(fā)酵試驗(yàn):金黃色葡萄球菌陽性,其他陰性.（三）生化反應(yīng)血漿凝固酶試驗(yàn):金黃色葡萄球菌陽性,其他陰性.

致病性葡萄球菌可產(chǎn)生2種血漿凝固酶：結(jié)合型（細(xì)菌凝集）游離型（血漿凝固）陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)SlidexStaphPlus可快速鑒定金黃色葡萄球菌

此試驗(yàn)不僅可檢測金黃色葡萄球菌凝固酶，還可檢測葡萄球菌A蛋白（SPA）。

（三）生化反應(yīng)乳膠凝集試驗(yàn):（金葡菌陽性）（三）生化反應(yīng)液體培養(yǎng)物煮沸15min

37℃3h甲苯胺藍(lán)核酸瓊脂耐熱DNA酶試驗(yàn):致病性葡萄球菌可產(chǎn)生耐熱DNA酶分解DNA，使藍(lán)色變?yōu)榉凵?。（金葡菌陽性）（四）抗原?gòu)造１、蛋白抗原（ＳＰＡ）：種屬特異性，抗吞噬作用２、多糖抗原：型特異性

45個(gè)種及21亞種

1、按是否產(chǎn)生凝固酶分類：凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）

凝固酶陽性葡萄球菌：金葡菌

（五）分類:（六）抵抗力

無芽胞菌中最強(qiáng)，耐干燥，對石炭酸、升汞、龍膽紫敏感。易產(chǎn)生耐藥性變異，如：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）院內(nèi)感染常見菌。所致疾病侵襲性疾?。ɑ撔愿腥荆ㄑ獫{凝固酶、耐熱核酸酶）①金黃色葡萄球菌癤、癰、外科切口、創(chuàng)傷等局部化膿性感染。播散入血后可引起全身感染②表皮葡萄球菌醫(yī)院感染的重要病原菌，尤其見于免疫抑制和中性粒細(xì)胞減少患者③腐生葡萄球菌尿路感染④溶血葡萄球菌醫(yī)院感染。免疫功能低下者，易引起菌血癥、外科術(shù)后感染等。從泌尿感染檢測時(shí)數(shù)量多或成為優(yōu)勢菌應(yīng)視為病原菌⑤人葡萄球菌多數(shù)為非致病菌，少數(shù)可致病，引起敗血癥毒素性疾?。c毒素）食物中毒，皮膚燙傷綜合征，毒性休克綜合征假膜性腸炎長期使用抗生素所致的菌群失調(diào)癥二、臨床意義三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本采集（二）檢驗(yàn)程序（三）檢驗(yàn)方法三、微生物學(xué)檢驗(yàn)（一）標(biāo)本采集根據(jù)病情采集標(biāo)本

種類：膿液、傷口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、腦脊液、糞便等。

注意：無菌操作，避免正常菌群污染。（二）葡萄球菌檢驗(yàn)程序膿液、咽拭子、穿刺液尿液、痰液腦脊液血液糞便、嘔吐物直接涂片染色增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)（血平板）分離培養(yǎng)（高鹽甘露醇平板）取可疑菌落鑒定試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)涂片染色、觸酶試驗(yàn)血漿凝固酶耐熱核酸酶甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)其他鑒定試驗(yàn)報(bào)告初報(bào)（三）檢驗(yàn)方法1、直接涂片適用于：正常情況下無菌的標(biāo)本（如腦脊液）伴有炎癥細(xì)胞的其他體液標(biāo)本、膿液等初步報(bào)告：“查見革蘭陽性球菌,葡萄狀排列，疑為葡萄球菌”2、分離培養(yǎng)

50ml葡萄糖肉湯（增菌）

渾濁無菌（7天）報(bào)告：無菌生長腦脊液、膿液、穿刺液、咽拭、尿液血平板血液標(biāo)本5ml糞便、嘔吐物高鹽甘露醇平板血平板3、鑒定試驗(yàn)（1）觸酶試驗(yàn)：葡萄球菌屬（+）（2）葡萄糖氧化發(fā)酵（O/F）實(shí)驗(yàn)（發(fā)酵型）（3）血漿凝固酶試驗(yàn)：金黃色葡萄球菌（+）（4）甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：金黃色葡萄球菌（+）（5）耐熱DNA酶實(shí)驗(yàn)：藍(lán)色變?yōu)榉凵?）凝固酶陰性的葡萄球菌鑒定：新生霉素敏感試驗(yàn)金黃色葡萄球菌

表皮葡萄球菌

腐生葡萄球菌表3幾種常見葡萄球菌的鑒別細(xì)菌菌落顏色溶血觸酶凝固酶甘露醇新生霉素金黃色金黃色β+++S葡萄球菌表皮葡萄白色γ+--S球菌溶血葡萄白色β+--S/R球菌腐生葡萄檸檬黃γ+--R球菌形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù):G+、葡萄串狀排列、球菌觸酶試驗(yàn)：+葡萄球菌凝固酶試驗(yàn)?zāi)堂冈囼?yàn)：+菌落特征：金黃色，β溶血金黃色葡萄球菌凝固酶試驗(yàn)：陰性新生霉素敏感試驗(yàn)

小結(jié)第三節(jié)腸球菌屬是腸道中的正常菌群；條件致病如尿路感染、腹部和盆腔感染、敗血癥、腦膜炎；導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染；臨床分離率為第二位陽性球菌。一、生物學(xué)特性（一）形態(tài)染色

G+球菌，單個(gè)、成雙或短鏈狀排列。無莢膜、芽胞，少數(shù)菌株有鞭毛。

營養(yǎng)要求較高。能在高鹽（6.5%NaCl）、高膽汁（40%）、10~45℃生長。

菌落（BA）：中等大小、圓形、灰白色、不透明、S型，有γ、β或α溶血，易乳化。（二）培養(yǎng)特性能分解多種糖類產(chǎn)酸觸酶（-）PYR（吡咯烷酮-β-萘基酰胺）試驗(yàn)（+）膽汁七葉苷試驗(yàn)（+）--鏈球菌鑒別（三）生化反應(yīng)

目前分21種。引起醫(yī)院內(nèi)感染常見的是糞腸球菌和屎腸球菌。

（四）分類（五）抵抗力

對理化因素抵抗力弱。但對大多數(shù)抗生素天然耐藥。二、微生物學(xué)檢驗(yàn)

（一）標(biāo)本采集

尿液、血液、腦脊液、膿汁分泌物等。（二）檢驗(yàn)程序尿液、膿汁、穿刺液血液涂片染色分離培養(yǎng)（血平板、5%CO2）初報(bào)挑選可疑菌落增菌培養(yǎng)（葡萄糖肉湯、5%CO2）PYR試驗(yàn)?zāi)懼呷~苷試驗(yàn)6.5%NaCl生長試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)（D群）報(bào)告（三）檢驗(yàn)方法1、直接鏡檢適用于：痰、膿、腦脊液、穿刺液標(biāo)本。2、分離培養(yǎng)

血平板：灰白色，圓形，中等大小，不透明，S型菌落，周圍有α溶血或γ溶血。選擇培養(yǎng)基：疊氮膽汁七葉苷瓊脂平板。3、鑒定試驗(yàn)（1）菌屬鑒定試驗(yàn)：觸酶試驗(yàn)：-

PYR試驗(yàn)：腸球菌、A群鏈球菌、某些凝固酶陰性葡萄球菌為（+）膽汁七葉苷試驗(yàn)：+

鹽耐受試驗(yàn)：+（6.5%NaCl生長試驗(yàn)）

3、鑒定試驗(yàn)（2）菌屬內(nèi)種鑒定試驗(yàn)：表3-8、表3-9臨床主要鑒定糞腸球菌、屎腸球菌。

第四節(jié)

奈瑟菌屬

--腦膜炎奈瑟菌G+球菌葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬等G-球菌奈瑟菌屬、卡他布蘭漢菌屬等一、腦膜炎奈瑟菌

G-，腎形或咖啡豆形，凹面或平面相對，成雙排列；無鞭毛，無芽孢；從病人新分離菌株多有莢膜和菌毛。（一）生物學(xué)性狀1、形態(tài)與染色

2、培養(yǎng)特性

生長條件：

◆專性需氧菌，初次分離需5%～10%CO2；

◆

<30℃/>40℃則不生長；

◆最適pH為7.4～7.6；

◆營養(yǎng)要求苛刻（常用巧克力平板、卵黃雙抗平板、氨基酸平板）。一、腦膜炎奈瑟菌（一）生物學(xué)性狀

生長現(xiàn)象：○巧克力平板——灰白色、灰褐色半透明菌落、1-2mm，濕潤、似水滴狀；一、腦膜炎奈瑟菌（一）生物學(xué)性狀○血平板——同上，不溶血(生長略差)○卵黃雙抗平板（選擇性平板）——無色、較大、扁平S型菌落○菌落在鹽水中易乳化○血清肉湯——均勻渾濁生長，可出現(xiàn)自溶現(xiàn)象一、腦膜炎奈瑟菌（一）生物學(xué)性狀

3、生化反應(yīng)一、腦膜炎奈瑟菌（一）生物學(xué)性狀

觸酶（+）、氧化酶（+）

3、生化反應(yīng)一、腦膜炎奈瑟菌（一）生物學(xué)性狀①

②

③

④

奈瑟菌糖分解試驗(yàn)①葡萄糖②麥芽糖③乳糖④蔗糖指示劑：酚紅①

②

③

④

淋病奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌4、抗原構(gòu)造和分類一、腦膜炎奈瑟菌（一）生物學(xué)性狀根據(jù)莢膜多糖群特異性抗原的不同，將本菌分成13個(gè)血清群。我國病例主要由A群引起；B群散發(fā)，但病情嚴(yán)重；C群極少見。

5、抵抗力

一、腦膜炎奈瑟菌（一）生物學(xué)性狀抵抗力弱。對寒冷、光、干燥等十分敏感。室溫僅存活3h、55℃5min死亡。采集標(biāo)本：注意保溫迅速送檢（床旁接種）。對磺胺類、青霉素、鏈霉素均敏感。

一、腦膜炎奈瑟菌（二）臨床意義（1）致病物質(zhì)莢膜、菌毛、內(nèi)毒素（為主）（2）所致疾病流行性腦脊髓膜炎（呼吸道飛沫傳播）兒童易感預(yù)后有牢固免疫力

一、腦膜炎奈瑟菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)血液、腦脊液增菌（血清肉湯）分離培養(yǎng)（巧克力、血平板）鑒定試驗(yàn)

鼻咽拭子卵黃雙抗平板腦脊液瘀血點(diǎn)離心上沉清淀液物5%CO2涂片染色等5%CO25%CO2初步報(bào)告

一、腦膜炎奈瑟菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)1、標(biāo)本采集患者：鼻咽腔、腦脊液、血液、皮膚出血瘀斑滲出物上呼吸道感染和帶菌者：鼻咽拭子注意：標(biāo)本應(yīng)保溫、保濕和避免日光照射

立即送檢

平板預(yù)溫

一、腦膜炎奈瑟菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)2、檢驗(yàn)方法（1）標(biāo)本直接鏡檢（腦脊液沉淀或瘀斑滲出液）查見G-雙球菌，具有診斷價(jià)值，作初步報(bào)告。

一、腦膜炎奈瑟菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)2、檢驗(yàn)方法（2）分離培養(yǎng)與鑒定腦脊液、血液增菌巧克力平板鼻咽拭子等卵黃雙抗平板鑒定CO2培養(yǎng)

一、腦膜炎奈瑟菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)3、檢驗(yàn)方法菌落、形態(tài)染色符合葡萄糖、麥芽糖：+;氧化酶：+；觸酶：+巧克力瓊脂22

℃培養(yǎng)

：不生長腦膜炎球菌的主要鑒定依據(jù)：二、淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）即淋球菌為淋病的病原體，人是唯一天然宿主和傳染源1．形態(tài)結(jié)構(gòu)G-，球形或腎形，成對排列有莢膜，無芽胞和鞭毛2．培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高，30-37

℃生長，須在含有血液或血清的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，常用血液、巧克力等培養(yǎng)基初次分離，須5-10%CO2才能生長發(fā)育菌落：凸起，光滑、圓形，灰褐色，半透明3.生化反應(yīng)氧化酶試驗(yàn)：（+）觸酶：（+）葡萄糖（+），麥芽糖（-）易自溶4．抵抗力特點(diǎn)抵抗力弱，在干燥環(huán)境中僅能存活1-2h，濕熱55℃5min,100℃立即死亡。室溫下存活1-2d。對消毒劑極敏感１、致病物質(zhì)：菌毛、外膜蛋白、等２、所致疾?。呵址溉祟惷谀蛏诚到y(tǒng)引起淋病(首位性病)

新生兒眼炎（二）致病性與免疫性1．標(biāo)本采集標(biāo)本：男性：尿道分泌物女性：陰道分泌物全身性淋病：血液、泌尿、生殖道的各種分泌物、尿液立即送檢

２．檢驗(yàn)程序(三)微生物學(xué)檢驗(yàn)?zāi)撝?、分泌物直接涂片染?/p>

分離培養(yǎng)血、巧克力、TM平板5－10%co235℃18－24h鑒定試驗(yàn)涂染檢氧化酶糖發(fā)酵藥敏試驗(yàn)報(bào)告

初步報(bào)告35℃18－24h（１）直接涂片鏡檢急性淋?。菏戎行粤＜?xì)胞內(nèi)外大量G-，腎形雙球菌——具有診斷意義慢性淋?。虹R檢較困難３．檢驗(yàn)方法（２）分離培養(yǎng)

即采集即培養(yǎng)，常用含有兩種以上抗生素（萬古霉素、粘菌素、磺胺類等）的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)（如ML、TM）5-10%CO2培養(yǎng)基先預(yù)溫。氧化酶試驗(yàn)：（+）觸酶：（+）（多數(shù)奈瑟菌為陰性）葡萄糖（+），麥芽糖（-）

PCR：靈敏，特異，標(biāo)本不受限制(不需活菌)（３）鑒定69二、

埃希菌屬學(xué)習(xí)任務(wù)70

掌握大腸埃希菌的主要生物學(xué)特性

及鑒定方法1掌握大腸埃希菌的檢驗(yàn)方法2熟悉大腸埃希菌的致病性3一、生物學(xué)性狀71（一）形態(tài)與染色革蘭陰性短桿菌，多數(shù)有周鞭毛，有莢膜或微莢膜，致病菌多有菌毛，均無芽孢。一、生物學(xué)性狀72（二）培養(yǎng)特性培養(yǎng)條件：無特殊要求菌落特征：

血平板——S型菌落，某些菌株可呈β溶血

選擇性平板上：

SS平板、Mac平板：

乳糖分解型菌落（紅色菌落）

EMB平板：紫黑色有金屬光澤菌落

一、生物學(xué)性狀73（二）培養(yǎng)特性SS平板EMB平板MAC平板一、生物學(xué)性狀74（三）生化反應(yīng)氧化酶試驗(yàn)-、觸酶+、O/F(F)、

硝酸鹽還原+葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇：⊕KIA：上層底層氣體H2SAA＋－MIU：

動(dòng)力吲哚尿酶＋＋－MCVi一、生物學(xué)性狀I(lǐng)IMViC：＋＋－－√√√√一、生物學(xué)性狀76（四）抗原構(gòu)造抗原種類：O、H、K抗原意義：表示大腸埃希菌血清型抗原鑒定對腸致病性大腸桿菌有

重要意義。血清型表示式：O:K:H如O111:K58:H2、O157:H2一、生物學(xué)性狀77（五）抵抗力對理化因素抵抗力不強(qiáng)；對常用的化學(xué)消毒劑敏感；煌綠等對大腸埃希菌有抑制作用。二、臨床意義78（一）致病因素

侵襲力：

K抗原、菌毛等——有助于細(xì)菌定植

毒素：

內(nèi)毒素——導(dǎo)致發(fā)熱、DIC等

志賀樣毒素——上皮細(xì)胞死亡脫落、腸出血

腸毒素（外毒素）——引起腹瀉不耐熱腸毒素（LT）耐熱腸毒素（ST）二、臨床意義79（二）所致疾病1、腸外感染（機(jī)會(huì)感染）：如泌尿系感染、膽囊炎、腹膜炎、敗血癥等在各類感染中的比例，居各種細(xì)菌之首80

腸外感染大腸埃希菌是腸道正常菌群的主要成員，是人類重要的條件致病菌。是環(huán)境、食品、飲用水的衛(wèi)生檢測的重要指標(biāo)。二、臨床意義≤3個(gè)大腸菌群指數(shù)/1L飲水≤

100個(gè)細(xì)菌總數(shù)/1ml飲水我國的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：在環(huán)境和食品衛(wèi)生學(xué)上，常被用作糞便污染的檢測指標(biāo)81二、臨床意義（二）所致疾病1、腸外感染（機(jī)會(huì)感染）：如泌尿系感染、膽囊炎、腹膜炎、敗血癥等2、腸內(nèi)感染：由致病性大腸埃希菌引起，主要表現(xiàn)為腹瀉。在各類感染中的比例，居各種細(xì)菌之首二、臨床意義82引起腸內(nèi)感染的大腸桿菌主要有五類，其生化特性基本相同（EIEC除外），抗原構(gòu)造及毒素不同。菌株侵襲部位疾病與癥狀腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌（ETEC）小腸旅行者腹瀉、嬰幼兒腹瀉、水樣便、腹痛腸致病型大腸埃希菌（EPEC）小腸嬰幼兒腹瀉、水樣便（有黏液無血液）、腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）結(jié)腸志賀樣腹瀉，膿血黏便腸出血型大腸埃希菌（EHEC）結(jié)腸出血性結(jié)腸炎等，水瀉、血便，可出現(xiàn)暴發(fā)流行腸集聚型大腸埃希菌（EAEC）小腸嬰兒腹瀉、水樣便、脫水三、微生物學(xué)檢驗(yàn)831、標(biāo)本采集腸外感染：

根據(jù)病變部位不同采集不同標(biāo)本，如血液、尿液、分泌物等——腸道外感染大腸埃希菌檢驗(yàn)三、微生物學(xué)檢驗(yàn)842、檢驗(yàn)方法

（1）顯微鏡檢查(觀察有無G-桿菌)標(biāo)本→革蘭染色鏡檢→初步報(bào)告——腸道外感染大腸埃希菌檢驗(yàn)三、微生物學(xué)檢驗(yàn)852、檢驗(yàn)方法（2）分離培養(yǎng)標(biāo)本(無菌標(biāo)本先增菌)血平板（+弱選擇性平板)

37℃、有氧培養(yǎng)經(jīng)18～24小時(shí)?！c道外感染大腸埃希菌檢驗(yàn)三、微生物學(xué)檢驗(yàn)86——腸道外感染大腸埃希菌檢驗(yàn)（3）菌落及鏡檢挑可疑菌落→鏡檢，若為G-無芽胞桿菌→生化鑒定

★可疑菌落：

MAC——紅色菌落、EMB——紫紅色/紫黑色、有金屬光澤、血平板——灰白色S型菌落

2、檢驗(yàn)方法三、微生物學(xué)檢驗(yàn)87——腸道外感染大腸埃希菌檢驗(yàn)（4）生化鑒定

?初步鑒定：

定科：氧化酶-、糖發(fā)酵（F）、觸酶+、硝酸鹽還原+定屬：KIA、MIU?最后鑒定：

定種：IMViC等2、檢驗(yàn)方法三、微生物學(xué)檢驗(yàn)KIAMIUIMViC斜面底層氣體H2S動(dòng)力吲哚尿酶IMViCAA＋－＋＋－＋＋－－88大腸埃希菌典型生化反應(yīng)結(jié)果三、微生物學(xué)檢驗(yàn)89（1）標(biāo)本采集——腸道內(nèi)感染大腸埃希菌檢驗(yàn)采集新鮮糞便、肛拭子、食物殘?jiān)?、微生物學(xué)檢驗(yàn)90（2）檢驗(yàn)方法——腸道內(nèi)感染大腸埃希菌檢驗(yàn)（1）分離培養(yǎng)標(biāo)本腸道桿菌選擇性平板（SS/EMB/MAC）

于37℃、有氧培養(yǎng)經(jīng)18～24小時(shí)。三、微生物學(xué)檢驗(yàn)91（2）檢驗(yàn)方法——腸道內(nèi)感染大腸埃希菌檢驗(yàn)（2）鑒定致腹瀉大腸桿菌與腸道外感染的大腸桿菌生物性狀相似，但有特殊的抗原構(gòu)造、腸毒素或毒力因子等?！锾艨梢删洹R檢，若為G-無芽胞桿菌

→生化試驗(yàn)+血清學(xué)鑒定、毒素測定

三、微生物學(xué)檢驗(yàn)92——腸道內(nèi)感染大腸埃希菌檢驗(yàn)——ETEC的鑒定生化反應(yīng)符合大腸埃希菌血清學(xué)鑒定符合ETEC血清型毒素檢測：方法LT質(zhì)粒ST質(zhì)粒生物學(xué)方法家兔或小白鼠腸袢試驗(yàn)家兔或小白鼠腸袢試驗(yàn)皮膚毛細(xì)血管通透性試驗(yàn)乳鼠灌胃試驗(yàn)免疫學(xué)法ELISA、固相放免ELISA（2）檢驗(yàn)方法三、微生物學(xué)檢驗(yàn)93——腸道內(nèi)感染大腸埃希菌檢驗(yàn)——EPEC的鑒定生化反應(yīng)符合大腸埃希菌血清學(xué)鑒定符合EPEC血清型

（2）檢驗(yàn)方法三、微生物學(xué)檢驗(yàn)94——腸道內(nèi)感染大腸埃希菌檢驗(yàn)——EIEC的鑒定生化反應(yīng)特點(diǎn)與志賀菌相似：發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、不發(fā)酵或遲緩分解乳糖(ONPG試驗(yàn))、多數(shù)菌株動(dòng)力陰性與志賀菌鑒別：醋酸鈉試驗(yàn)、葡萄糖銨利用試驗(yàn)、黏質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸試驗(yàn)，毒力測定：豚鼠眼結(jié)膜試驗(yàn)（+）血清學(xué)鑒定：符合EIEC血清型（O152、O124）（2）檢驗(yàn)方法三、微生物學(xué)檢驗(yàn)生化反應(yīng)鑒別試驗(yàn)EIEC志賀菌粘質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸＋－醋酸鹽利用＋－賴氨酸脫羧＋－95——腸道內(nèi)感染大腸埃希菌檢驗(yàn)——EIEC的鑒定（2）檢驗(yàn)方法三、微生物學(xué)檢驗(yàn)96——腸道內(nèi)感染大腸埃希菌檢驗(yàn)——EHEC的鑒定生化反應(yīng)符合大腸桿菌，但O157:H7不發(fā)酵山梨醇血清學(xué)鑒定：代表為O157:H7（2）檢驗(yàn)方法三、微生物學(xué)檢驗(yàn)97大腸埃希菌鑒定依據(jù)G-桿菌、觸酶+、氧化酶-、葡萄糖發(fā)酵、硝酸鹽還原+在腸道選擇平板上為發(fā)酵乳糖的有色菌落在KIA上多為AA＋－（乳、葡、氣體、H2S）在MIU中為＋＋－（動(dòng)力、吲哚、脲酶）IMViC為＋＋－－致病性大腸埃希菌除生化反應(yīng)符合外，必須做

血清學(xué)鑒定或毒力測定。第二節(jié)

非發(fā)酵革蘭陰性桿菌掌握非發(fā)酵菌的概念、主要特點(diǎn)、初步分類方法了解產(chǎn)堿桿菌及其他非發(fā)酵革蘭陰性桿菌的主要生物學(xué)性狀掌握銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌的主要生物學(xué)性狀及微生物學(xué)檢驗(yàn)非發(fā)酵菌的概念什么是非發(fā)酵菌？一群不發(fā)酵葡萄糖（不利用或以氧化形式利用）的需氧或兼性厭氧、無芽胞的革蘭陰性桿菌。發(fā)酵型（F）氧化型(O)產(chǎn)堿型(-)非發(fā)酵菌的主要特點(diǎn)：1、G-桿菌、無芽胞；2、專性需氧（少數(shù)兼性厭氧）3、O/F試驗(yàn)：-/O；4、氧化酶為：+（不動(dòng)桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌為-）5、動(dòng)力試驗(yàn)（懸滴法為主，穿刺法在培養(yǎng)基頂部4mm，培養(yǎng)4-6h）常見種類：假單胞菌屬、不動(dòng)桿菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、莫拉菌屬、（假單胞菌科）（奈瑟菌科）（產(chǎn)堿桿菌科）（奈瑟菌科）初步分類：可通過氧化酶、O/F、動(dòng)力等試驗(yàn)加以初步分類。假單胞菌屬不動(dòng)桿菌屬莫拉菌屬產(chǎn)堿桿菌屬氧化酶+-++O/FO/-O/---動(dòng)力+--+臨床特點(diǎn)：1、多為條件致病菌（標(biāo)本中反復(fù)檢出結(jié)合臨床表現(xiàn)確定感染病原菌）2、對抗生素有天然耐藥（重復(fù)藥敏試驗(yàn)及聯(lián)合用藥）3、臨床分離率高，占革蘭陰性菌的40%第一節(jié)假單胞菌屬假單胞菌屬主要種類：銅綠假單胞菌；熒光假單胞菌；惡臭假單胞菌；

產(chǎn)堿假單胞菌；……代表菌種:銅綠假單胞菌自然界、人體廣泛分布第一節(jié)假單胞菌屬共同特征：

1．G-桿菌，無芽胞，有莢膜，有單端鞭毛或叢鞭毛；

2．動(dòng)力（+）、氧化酶（+）、觸酶（+）、O/F（O）；

3.專性需氧（少數(shù)兼性厭氧）、營養(yǎng)要求不高、某些菌株可產(chǎn)水溶性色素；4.最適生長溫度35℃，4℃及42℃生長試驗(yàn)可起到鑒別作用第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（一）生物學(xué)性狀1．形態(tài)染色

G-桿菌、長短不一，形態(tài)多樣；端單鞭毛、運(yùn)動(dòng)活潑；臨床分離株有莢膜和菌毛；產(chǎn)熒光素（青膿素）和綠膿素（特征）。革蘭染色第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（一）生物學(xué)性狀2．培養(yǎng)特性

條件：營養(yǎng)要求不高、某些菌株可在兼性厭氧條件下生長最適35℃；4℃不生長、42℃生長第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（一）生物學(xué)性狀2．培養(yǎng)特性（典型型、大腸桿菌型、黏液型、侏儒型、粗糙型）第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌普通平板：傘狀伸展普通平板第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌血平板金屬光澤，生姜味，β溶血第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（一）生物學(xué)性狀3．生化反應(yīng)氧化酶：+O/F：O硝酸鹽還原試驗(yàn)：+精氨酸雙水解：+明膠液化：+枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)：+*

抗原結(jié)構(gòu)*

抵抗力>其他G-無芽孢菌，耐受多種抗生素和消毒劑，在潮濕環(huán)境中能長期生存。H抗原：鞭毛蛋白，分型脂多糖外膜蛋白

保護(hù)性抗原、免疫原性強(qiáng)

屬特異性O(shè)抗原第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌4.抗原構(gòu)造及抵抗力

型特異性第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（二）臨床意義1、致病物質(zhì)：

內(nèi)毒素、外毒素、酶、菌毛、莢膜等。2、所致疾病條件致病菌（抵抗力下降者）醫(yī)院感染的重要病原菌（消毒不嚴(yán)的器皿和溶液、侵入性治療等）

第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)1、標(biāo)本采集血液、腦脊液、胸腹水、分泌物、痰、引流液等醫(yī)院環(huán)境監(jiān)控：空氣、水、地面、醫(yī)療器械等第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)2、檢驗(yàn)方法(1)顯微鏡檢查：標(biāo)本直接涂片革蘭染色鏡檢：為革蘭陰性桿菌（腦脊液等離心后取沉淀鏡檢）第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)2、檢驗(yàn)方法體液、血液、環(huán)境用品增菌（營養(yǎng)肉湯）其他標(biāo)本血平板、MAC平板、SS平板(2)分離培養(yǎng)：(3)生化鑒定第一節(jié)假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)3、檢驗(yàn)要點(diǎn)：（1）鏡下：形態(tài)、染色性（2）培養(yǎng)：菌落多樣性、色素、氣味、溶血環(huán)（3）生化：氧化酶、O/F根據(jù)以上鑒定特征，可初步鑒定為銅綠假單胞菌若色素產(chǎn)生不典型，可加做硝酸鹽還原、明膠液化、精氨酸雙水解酶及4℃不生長而42℃生長試驗(yàn)進(jìn)行最終鑒定。銅綠假單胞菌快速鑒定微生物教研組段巧玲

95%以上的銅綠假單胞菌可通過以下觀察而得到初步鑒定：菌落特征：較大、呈灰綠色或藍(lán)綠色、有生姜樣氣味氧化酶：陽性（10秒內(nèi)）水溶性綠膿素產(chǎn)生

若無色素（或色素不典型），則：42℃培養(yǎng)：能夠生長乙酰胺酶：+硝酸鹽還原：+端鞭毛（1根），有動(dòng)力42℃生長明膠液化鞭毛++極單鞭毛···銅綠假單胞菌-+極多鞭毛···熒光假單胞菌--極多鞭毛···惡臭假單胞菌O/F試驗(yàn)：O氧化酶：+硝酸鹽還原：+明膠液化：+精氨酸雙水解酶：+標(biāo)本分離培養(yǎng)基涂片檢查肉湯培養(yǎng)基血瓊脂平板SS、麥康凱瓊脂平板挑選可疑菌落（37℃培養(yǎng)18－24h觀察有無色素產(chǎn)生無色素菌株42℃+綠膿素+綠膿菌熒光素銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌的鑒定程序-“發(fā)光豬肉”第一節(jié)假單胞菌屬第二節(jié)不動(dòng)桿菌屬

不動(dòng)桿菌屬常見為六個(gè)種：醋酸鈣不動(dòng)桿菌洛菲不動(dòng)桿菌溶血不動(dòng)桿菌鮑曼不動(dòng)桿菌瓊氏不動(dòng)桿菌約翰遜不動(dòng)桿菌第二節(jié)不動(dòng)桿菌屬一、生物學(xué)性狀多為球桿狀第二節(jié)不動(dòng)桿菌屬M(fèi)AC平板多數(shù)不動(dòng)桿菌可氧化分解乳糖血平板上的灰白色菌落第二節(jié)不動(dòng)桿菌屬二、致病性

為條件致病菌、粘附性極強(qiáng)、為醫(yī)院感染常見病原菌。分離率在非發(fā)酵菌中居首位?？芍潞粑?、消化道、泌尿生殖道感染等。

其中，鮑曼不動(dòng)桿菌最多見。第二節(jié)不動(dòng)桿菌屬三、微生物學(xué)檢驗(yàn)第二節(jié)不動(dòng)桿菌屬三、微生物學(xué)檢驗(yàn)

G-球桿菌，常呈雙排列、似雙球桿菌，有時(shí)不易脫色，動(dòng)力陰性。

O/F：O（鮑曼、醋酸鈣）/–；觸酶：+氧化酶–動(dòng)力–硝酸鹽還原–

大多數(shù)能氧化分解乳糖鮑曼不動(dòng)桿菌42℃可生長三者均為陰性在革蘭陰性桿菌中極為罕見第二節(jié)不動(dòng)桿菌屬三、鮑曼不動(dòng)桿菌鑒定要點(diǎn)

1.G-球桿菌，呈雙排列。

2.O/F：O/-；觸酶：+

3.氧化酶–

4.動(dòng)力–

5.硝酸鹽還原–

鮑曼不動(dòng)桿菌42℃可生長,O/F:O不動(dòng)桿菌屬第一節(jié)弧菌屬二、副溶血性弧菌（一）生物性狀

1．形態(tài)染色

G-直或微彎的桿菌（鹽度不適應(yīng)時(shí)出現(xiàn)梨狀，絲狀），單鞭毛、側(cè)身周鞭毛（固體培養(yǎng)基）。第一節(jié)弧菌屬二、副溶血性弧菌2．培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求不高，嗜鹽性，最適鹽濃度3.5％NaCl，無鹽培養(yǎng)基不生長；耐堿，最適pH7.7~8.0，pH9.5仍能生長，對酸敏感。第一節(jié)弧菌屬二、副溶血性弧菌2．培養(yǎng)特性TCBS平板第一節(jié)弧菌屬二、副溶血性弧菌2．培養(yǎng)特性第一節(jié)弧菌屬二、副溶血性弧菌3．生化反應(yīng)氧化酶吲哚VP

驗(yàn)99驗(yàn)驗(yàn)枸櫞酸鹽尿素酶硫化氫賴氨酸脫羧酶鳥氨酸脫羧酶精氨酸雙水解酶

耐鹽試驗(yàn)

（NaCl%）

產(chǎn)

酸01710葡萄糖乳糖蔗糖甘露醇阿拉伯糖水楊苷++----++--++-+--+--試驗(yàn)用培養(yǎng)基均應(yīng)含3.5%NaCl。第一節(jié)弧菌屬二、副溶血性弧菌

待檢菌

人O型血或兔血平板馬血平板（不溶血）

(我萋培養(yǎng)基：高鹽7%NaCl、D-甘露醇)

β溶血

神奈川現(xiàn)象+：致病株副溶血性弧菌在普通血平板上不溶血或只產(chǎn)生α溶血。某些菌株在含高鹽（7%)的人O型血或兔血以及D-甘露醇作為碳源的我萋瓊脂平板上可產(chǎn)生β溶血，稱為神奈川現(xiàn)象。第一節(jié)弧菌屬二、副溶血性弧菌（二）臨床意義

常通過海產(chǎn)品、鹽腌食物等致食物中毒或急性腸炎，糞便呈水樣或糊狀、粘液血便。耐熱直接溶血素（TDH）耐熱相關(guān)溶血素（TRH）第一節(jié)弧菌屬微生物學(xué)檢查1．標(biāo)本采集

糞便（水樣便）

肛門拭子

可疑食物

標(biāo)本需及時(shí)送檢，否則應(yīng)放保存液或運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)（3.5%NaCL蛋白胨水或卡－布培養(yǎng)基）。第一節(jié)弧菌屬二、副溶血性弧菌標(biāo)本

增菌培養(yǎng)（3.5%NaCl蛋白胨水）

分離培養(yǎng)（TCBS、高鹽平板）動(dòng)力試驗(yàn)鑒定生化試驗(yàn)、NaCl生長試驗(yàn)神奈川現(xiàn)象毒素測定染色鏡檢檢驗(yàn)程序：試驗(yàn)菌無鹽蛋白胨水7%NaCl蛋白胨水待測菌（嗜鹽菌）-+++金葡菌（耐鹽菌）++大腸埃希菌(非嗜鹽菌)+++--：無菌生長；+：有菌生長；+++：細(xì)菌生長茂盛嗜鹽性試驗(yàn)：取待測菌、耐鹽金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌培養(yǎng)液各一接種環(huán)，分別接種于無鹽蛋白胨水和7％NaCl蛋白胨水中．置37℃培養(yǎng)6-12h，觀察結(jié)果。第一節(jié)弧菌屬二、副溶血性弧菌第四節(jié)

布魯菌屬◆為人畜共患疾病的病原菌◆主要種類：羊布魯桿菌、牛布魯

桿菌、豬布魯桿菌、犬布魯桿菌等生物學(xué)性狀◆形態(tài)：革蘭氏染色陰性小球桿狀，但不易著色，偶見兩極濃染，毒力菌株有微莢膜。◆培養(yǎng)：嚴(yán)格需氧菌，營養(yǎng)要求高；初次分離時(shí)，需5～10%CO2；常用肝浸液雙相培養(yǎng)基；生長緩慢，培養(yǎng)5～7天后才出現(xiàn)透明的小菌落。30天未生長則報(bào)告陰性。生物學(xué)性狀柯茲洛夫斯基染色法生物學(xué)性狀血平板上生長現(xiàn)象生物學(xué)性狀◆生化反應(yīng)：觸酶+，氧化酶+，大多數(shù)能分解尿素和產(chǎn)生硫化氫◆抗原構(gòu)造：抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜。主要有A和M抗原，羊布魯菌A:M約為1:20；牛布魯菌A:M約為20:1；豬布魯菌A:M約為2:1；

可通過A、M因子血清凝集試驗(yàn)對布魯菌進(jìn)行鑒別臨床意義◆人畜共患疾病病原菌，與職業(yè)相關(guān)◆傳染源為病獸（牛、羊、豬等）的組織、體液及分泌物中◆傳播途徑：（完整）皮膚、呼吸道、消化道◆

侵襲力、擴(kuò)散力強(qiáng)，有較強(qiáng)內(nèi)毒素（二級以上生物安全實(shí)驗(yàn)室）◆多次進(jìn)入血液引起波浪熱◆病后可生產(chǎn)免疫力，機(jī)體對該菌以細(xì)胞免疫為主微生物學(xué)檢驗(yàn)

◆標(biāo)本采集：發(fā)熱期：血液

其他：骨髓、乳汁、尿液◆血液標(biāo)本接種雙相培養(yǎng)基或血培養(yǎng)瓶，3-7d觀察是否出現(xiàn)陽性結(jié)果，30d未生長為陰性。

◆鏡檢涂片◆動(dòng)物試驗(yàn)：豚鼠、小白鼠。分別于3-4w、6-8w解剖，觀察病變及血清學(xué)試驗(yàn)。

微生物學(xué)檢驗(yàn)◆臨床以血清學(xué)診斷為主?！粢咔樾枰獣r(shí)，可做布氏菌素皮試?！羯囼?yàn)：氧化酶、觸酶、糖分解、精氨酸脫羧、脲酶、H2S產(chǎn)生、染料抑菌試驗(yàn)等（表8-21）。厭氧菌及檢驗(yàn)第一節(jié)梭狀芽胞桿菌屬共同特性：1、G+大桿菌；2、有芽胞，芽胞直徑多數(shù)大于菌體，使菌體膨大呈梭狀；3、致病菌種多以強(qiáng)烈外毒素致病。對人致病的主要有：破傷風(fēng)梭菌破傷風(fēng)

產(chǎn)氣莢膜梭菌氣性壞疽

肉毒梭菌肉毒中毒

艱難梭菌假膜性腸炎病例：患者，男，40歲，工人。因修理拖拉機(jī)時(shí)不慎左腳底被鐵釘扎傷，未作特殊處理。6日后感全身不適，嘴嚼不便，繼之張口及吞咽困難，頸活動(dòng)受限。即針灸治療，但針刺時(shí)出現(xiàn)肌肉抽動(dòng)，第8日發(fā)展至遇強(qiáng)光、高聲則全身抽動(dòng)，牙關(guān)緊閉，呈苦笑狀面容，即送醫(yī)院求治。問題：

1.該病人應(yīng)診斷何??？根據(jù)是什么？2.該患者是如何發(fā)病的？

破傷風(fēng)梭菌主要分布于土壤、人和動(dòng)物腸道中。全世界每年約有100萬病例，30-50%病死率。當(dāng)機(jī)體受到外傷后，傷口被污染，侵入的細(xì)菌芽胞繁殖，釋放痙攣毒素，引起破傷風(fēng)。梭狀芽胞桿菌屬一、破傷風(fēng)梭菌梭狀芽胞桿菌屬1、形態(tài)染色

G+、菌體細(xì)長，芽胞正圓、位于菌體頂端，使細(xì)菌呈鼓槌狀一、破傷風(fēng)梭菌梭狀芽胞桿菌屬一、破傷風(fēng)梭菌2、培養(yǎng)特性血平板上：薄膜狀生長，菌落半透明、灰白色、

邊緣似羽毛狀，有β溶血庖肉培養(yǎng)基：肉渣部分消化，微變黑，產(chǎn)生少

量氣體，有腐敗性惡臭梭狀芽胞桿菌屬一、破傷風(fēng)梭菌3、生化反應(yīng)生化反應(yīng)不活潑。不發(fā)酵糖類。芽胞抵抗力很強(qiáng)，耐100℃1h；在干燥的土壤和塵埃中可存活數(shù)年對青霉素敏感4、抵抗力梭狀芽胞桿菌屬一、破傷風(fēng)梭菌臨床意義

傷口深而狹窄，隔氧。

傷口內(nèi)有泥土、鐵銹等異物及

壞死組織，吸氧。

混合感染，需氧菌或兼性厭氧菌混合感染利用氧氣，耗氧。厭氧環(huán)境1、致病條件傷口的厭氧環(huán)境2、主要致病物質(zhì)：破傷風(fēng)痙攣毒素毒性極強(qiáng):對人致死量<1μg,1mg毒素可毒死3000萬只小鼠。

嗜神經(jīng)性：尤其是腦干神經(jīng)和脊髓前角神經(jīng)細(xì)胞有高度親和力。梭狀芽胞桿菌屬一、破傷風(fēng)梭菌臨床意義3、致病過程破傷風(fēng)梭菌只在局部感染，其芽胞發(fā)芽成繁殖體，產(chǎn)生破傷風(fēng)痙攣毒素，毒素沿神經(jīng)纖維間隙逆行至脊髓前角神經(jīng)細(xì)胞，上達(dá)腦干，主要作用在抑制性神經(jīng)元，阻斷抑制性介質(zhì)的釋放，導(dǎo)致肌肉強(qiáng)直痙攣——引起破傷風(fēng)。梭狀芽胞桿菌屬一、破傷風(fēng)梭菌臨床意義3.所致疾病——破傷風(fēng)典型癥狀:牙關(guān)緊閉、苦笑面容、角弓反張、呼吸困難梭狀芽胞桿菌屬一、破傷風(fēng)梭菌臨床意義4.免疫性

主要是抗毒素發(fā)揮中和作用（毒素與中樞神經(jīng)組織結(jié)合非常牢固，一旦結(jié)合即非抗毒素所能中和）人工免疫是獲得有效抗毒素的途徑及時(shí)處理傷口。避免造成厭氧環(huán)境。5、防治原則

人工被動(dòng)免疫發(fā)病時(shí)特異治療:肌肉注射破傷風(fēng)抗毒素（TAT）TAT應(yīng)用三原則:①早用

②足量

③防過敏④聯(lián)合治療梭狀芽胞桿菌屬二、產(chǎn)氣莢膜梭菌形態(tài)染色兩端平切粗大桿菌；芽胞位于次極端，呈橢圓形；無鞭毛、有莢膜梭狀芽胞桿菌屬二、產(chǎn)氣莢膜梭菌培養(yǎng)特性（1）厭氧生長，生長很快，8分鐘一代。（2）血平板：雙層溶血環(huán)。（3）蛋黃瓊脂平板：乳白色混濁圈（Nagler反應(yīng)）（4）分解多種糖類和蛋白，液化明膠，產(chǎn)生H2S。（5）庖肉培養(yǎng)基產(chǎn)大量氣體，肉渣不被消化，變?yōu)榉奂t色。（6）牛乳培養(yǎng)基中出現(xiàn)“洶涌發(fā)酵現(xiàn)象”。梭狀芽胞桿菌屬二、產(chǎn)氣莢膜梭菌培養(yǎng)特性

洶涌發(fā)酵現(xiàn)象：產(chǎn)氣莢膜梭菌在牛乳培養(yǎng)基中分解乳糖產(chǎn)酸，使牛奶中酪蛋白凝固，同時(shí)產(chǎn)生大量氣體(H2與CO2)將凝固的酪蛋白沖成蜂窩狀，氣勢洶猛。

梭狀芽胞桿菌屬二、產(chǎn)氣莢膜梭菌培養(yǎng)特性梭狀芽胞桿菌屬二、產(chǎn)氣莢膜梭菌臨床意義致病物質(zhì)：外毒素、侵襲性酶、莢膜等所致疾病：氣性壞疽、食物中毒、壞死性腸炎

（1）氣性壞疽:多見戰(zhàn)傷。表現(xiàn)：氣腫、水腫、組織壞死、劇痛、惡臭、捻發(fā)音及全身中毒為特征。不及時(shí)搶救，截肢、死亡率很高。濕性壞疽干性壞疽突發(fā)性災(zāi)難戰(zhàn)爭條件下容易發(fā)生“氣性壞疽”水氣腫組織壞死

（2）食物中毒：類似霍亂腸毒素，引起劇烈腹痛、腹瀉，可自愈。

（3）壞死性腸炎：發(fā)病急，劇烈腹痛、腹瀉，便血、腸壞死、腹膜炎，死亡率高。1、局部盡早擴(kuò)、清創(chuàng)面，用H2O2沖洗2、應(yīng)用抗生素3、早期用多價(jià)抗毒素血清3-5/次4、高壓艙治療法二、產(chǎn)氣莢膜梭菌防治原則

1.直接鏡檢：深部傷口取材，觀察有無大量明顯莢膜的G+大桿菌2.分離培養(yǎng):接種血平板或庖肉培養(yǎng)基培養(yǎng)，厭氧培養(yǎng)，觀察生長情況；生化反應(yīng)，培養(yǎng)時(shí)的“洶涌發(fā)酵”有診斷價(jià)值。3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn):出現(xiàn)動(dòng)物軀體膨脹、“泡沫肝”即可診斷。二、產(chǎn)氣莢膜梭菌微生物學(xué)檢查梭狀芽胞桿菌屬三、肉毒梭菌形態(tài)染色G+桿菌，芽胞呈橢圓形、粗于菌體，位于次極端，使細(xì)胞呈湯匙狀或網(wǎng)球拍狀梭狀芽胞桿菌屬三、肉毒梭菌培養(yǎng)特性血平板：灰白色、半透明菌落，有β溶血