臨床常見微生物的鑒定-厭氧菌鑒定

產(chǎn)氣莢膜梭菌生物學(xué)性狀形態(tài)染色G+粗大桿菌，無鞭毛，有莢膜，芽胞橢圓形，位于次極端，寬度小于菌體培養(yǎng)特性與生化不嚴(yán)格厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，繁殖快（1代8min）血平板雙層溶血環(huán)（內(nèi)環(huán)β溶血、外環(huán)α溶血）生化代謝活躍，分解多種糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣，“洶涌發(fā)酵。根據(jù)其主要毒素的抗原性分A、B、C、D、E5個(gè)型，A型為主致病性致病物質(zhì)——能產(chǎn)生十余種外毒素，有的即為胞外酶α毒素（卵磷脂酶）——增加血管通透性，溶血、壞死作用，最重要β毒素——組織壞死ε毒素，腸毒素等

所致疾病氣性壞疽（產(chǎn)氣莢膜梭菌為主）:創(chuàng)傷感染、傷口條件與破傷風(fēng)相似,潛伏期短8-48h。局部組織壞死，產(chǎn)生大量氣體，組織氣腫（捻發(fā)音），壓迫神經(jīng)末梢，劇烈疼痛并伴有惡臭，最后大塊肌肉壞死，毒素入血（毒血癥），全身中毒癥狀，休克、死亡（30%）。食物中毒較輕，1-2天自愈壞死性腸炎（C型）死亡率高達(dá)40%。微生物學(xué)檢查與防治微生物學(xué)檢查由于氣性壞疽發(fā)病急劇、后果嚴(yán)重，病原學(xué)診斷十分重要直接涂片鏡檢（G+大桿菌、有莢膜）分離培養(yǎng)鑒定動(dòng)物試驗(yàn)防治原則——無類毒素特異性預(yù)防及時(shí)清創(chuàng)、擴(kuò)創(chuàng)切除壞死組織——截肢大劑量青霉素氣性壞疽多價(jià)抗毒素高壓氧艙法艱難梭菌G+粗大桿菌，有鞭毛，芽胞，卵圓形位于次極端專性厭氧（對(duì)氧極度敏感），分離培養(yǎng)困難而故名，須用特殊培養(yǎng)腸道正常菌群，與長(zhǎng)期應(yīng)用抗生素的假膜性腸炎有關(guān)

一、生物學(xué)性狀形態(tài)染色G+細(xì)桿狀，周毛菌，呈鼓槌狀培養(yǎng)特性專性厭氧，血平板上呈擴(kuò)散生長(zhǎng)，有β溶血，肉渣培養(yǎng)基生長(zhǎng)良好（混濁、變黑、有腐臭味）抵抗力強(qiáng)，芽胞在干燥土壤中可存活數(shù)十年，耐熱100℃1h，對(duì)青霉素敏感破傷風(fēng)梭菌

致病性與免疫性傳染途徑及傷口條件破傷風(fēng)為創(chuàng)口感染，能否發(fā)生感染的條件——傷口的厭氧微環(huán)境傷口窄而深，混有泥土及異物壞死組織多，局部缺血伴有需氧菌或兼性厭氧菌的混合感染致病物質(zhì)——破傷風(fēng)痙攣毒素（外毒素）為神經(jīng)毒素，毒性強(qiáng)，與脊髓前角運(yùn)動(dòng)細(xì)胞及腦干細(xì)胞有高度的親和力破傷風(fēng)痙攣毒素的作用機(jī)制所致疾病——破傷風(fēng)潛伏期：7-14天，長(zhǎng)短取決于傷口與CNS距離臨床表現(xiàn)：癥狀取決于拮抗肌力量對(duì)比牙關(guān)緊閉、吞咽困難、苦笑面容、角弓反張等，陣發(fā)性抽搐等，嚴(yán)重者因呼吸肌痙攣窒息死亡防治原則人工自動(dòng)免疫——類毒素（百白破三聯(lián)疫苗）平時(shí)預(yù)防正確處理傷口——防止形成厭氧微環(huán)境人工被動(dòng)免疫——抗毒素緊急預(yù)防治療抗毒素+抗生素+鎮(zhèn)靜解痙藥物

肉毒梭菌生物學(xué)性狀

G+大桿菌，有鞭毛，芽胞橢圓形，粗于菌體，位于極端，網(wǎng)球拍狀菌體嚴(yán)格厭氧，普通平板生長(zhǎng)R型菌落，可消化肉渣，變黑腐敗抵抗力芽胞強(qiáng)，100℃3-5h，180℃5-15min肉毒毒素：不耐熱，100℃1min破壞耐酸，胃酸24h不破壞致病性致病物質(zhì)——肉毒毒素:是一種強(qiáng)烈的神經(jīng)外毒素，是目前已知毒素中毒力最強(qiáng)者，對(duì)人的致死劑量是0.1μg。肉毒毒素作用機(jī)制（嗜神經(jīng)毒素）作用部位—腦神經(jīng)核—外周神經(jīng)—肌肉神經(jīng)接頭處阻止乙酰膽堿的釋放—自主神經(jīng)末梢→運(yùn)動(dòng)神經(jīng)末梢功能失調(diào)→肌肉松弛性麻痹（軟癱）所致疾病毒素性食物中毒（肉毒中毒）食品：罐頭、香腸、臘腸、發(fā)酵豆制品潛伏期短臨床表現(xiàn)無胃腸道癥狀，為神經(jīng)末梢麻痹癥狀、乏力、頭痛眼肌（復(fù)視、斜視、眼瞼下垂）喉?。ㄍ萄世щy、咀嚼不靈、語(yǔ)言障礙）膈?。ê粑щy、死亡率高20-70%）微生物學(xué)檢查與防治檢測(cè)毒素——?jiǎng)游镌囼?yàn)加強(qiáng)相關(guān)食品的衛(wèi)生監(jiān)督和管理，發(fā)病后盡早注射肉毒多價(jià)抗毒素肉毒素美容肉毒素可以阻斷神經(jīng)與肌肉間的神經(jīng)沖動(dòng)，使過度收縮的小肌肉放松，進(jìn)而達(dá)到除皺的效果。或者是利用其可以暫時(shí)麻痹肌肉的特性，使肌肉因失去功能而萎縮，來達(dá)到雕塑線條的目的，也就是通常所說的去皺和瘦臉。無芽胞厭氧菌

臨床常見菌

G+

消化鏈球菌屬、消化球菌屬球菌

G-

韋榮菌屬

G+

丙酸桿菌、雙岐桿菌、真桿菌、乳桿菌桿菌

G-

類桿菌、梭桿菌一、脆弱類桿菌(一)生物學(xué)特性1．形態(tài)與染色革蘭陰性桿菌，多數(shù)菌種兩端鈍圓而濃染，菌體中間不易著色或染色較淺．形似空泡。陳舊培養(yǎng)可呈多形性。無鞭毛，無芽胞，脆弱類桿菌可形成莢膜。2．培養(yǎng)特性本菌專性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求較高，培養(yǎng)基中需加人氯化血紅素和維生素K1。經(jīng)24－48h培養(yǎng)，菌落直徑1－3mm圓形、微凸、半透明、灰白色、表面光滑、邊緣整齊，多數(shù)菌株不溶血。在20％膽汁(或2g／L膽鹽)可促進(jìn)生長(zhǎng)。在類桿菌膽汁七葉苷(BBE)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)旺盛，菌落較大，菌落周圍有黑色暈圈。3．生化試驗(yàn)脆弱類桿菌能發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖和蔗糖．水解七葉苷，耐20％膽汁，不還原硝酸鹽，尿素酶陰性。(二)致病性以脆弱類桿菌最重要，占臨床厭氧菌分離株的25％，類桿菌分離株的50％，可引起女性生殖系統(tǒng)感染、膿胸、顱內(nèi)感染及菌血癥等。(三)微生物學(xué)檢驗(yàn)1．標(biāo)本采集根據(jù)不同感染部位按厭氧菌標(biāo)本采集的要求采集血液、膿汁或組織等。2．檢驗(yàn)程序

3．檢驗(yàn)方法及鑒定(1)顯微鏡檢查：標(biāo)本直接涂片，經(jīng)革蘭