DB45T 2829-2023 地中海貧血篩查與診斷技術(shù)規(guī)范

45TechnicalspecificationsforscrI 2 2 2 2 2 5 5 5 本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定1地中海貧血篩查與診斷技術(shù)規(guī)范本文件適用于廣西壯族自治區(qū)行政區(qū)域內(nèi)醫(yī)療機(jī)構(gòu)非輸血依賴型地貧non-transfusiondependentt輸血依賴型地貧transfusiondependenttha產(chǎn)前診斷prenataldiag對(duì)可疑出生缺陷的胎兒在出生前應(yīng)用各種檢測(cè)手段，產(chǎn)24縮略語(yǔ)HbA2：血紅蛋白A2（HemoglobinDNA：脫氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAciMCV：紅細(xì)胞平均體積（MeanCorMCH：紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MeanCorpusculSOP：標(biāo)準(zhǔn)操作程序（StandardOperationNMPA：國(guó)家藥品監(jiān)督管理局(NationalMedicalMedicalProductsAdministration)EDTA：乙二胺四乙酸（EthyleneDiamin5.1篩查人群全人群均可篩查，重點(diǎn)篩查人群包括：婚前、孕前、產(chǎn)前的夫婦及新生兒、疾病查因人群等。5.2篩查流程5.3篩查技術(shù)用含EDTA抗凝劑的真空采血管，靜脈采血2ml，輕輕混勻，避免標(biāo)本溶血，采樣后及時(shí)送檢，4h5.3.1.2試劑和儀器5.3.1.3檢測(cè)方法MCV——紅細(xì)胞平均體積，單位為分升（fL3A——每升血液中血細(xì)胞比容，單位為百分比（%）；B——每升血液中紅細(xì)胞數(shù)，單位為1012每升（1012/MCH——紅細(xì)胞平均血紅蛋白量，單位為匹克（pg)；B——每升血液中紅細(xì)胞數(shù)，單位為1012每升（1012/5.3.1.4質(zhì)控物5.3.1.5參考區(qū)間28天～18歲兒童參考區(qū)間按WS/T779執(zhí)行，成年人參考區(qū)間按WS/T45.3.2.1標(biāo)本處理5.3.2.1.1檢測(cè)樣本不受飲食和采血時(shí)間的影響。5.3.2.1.2按照適用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的5.3.2.2檢測(cè)方法學(xué)5.3.2.3檢測(cè)系統(tǒng)5.3.2.3.1應(yīng)選用有NMPA認(rèn)證的分5.3.2.3.3實(shí)驗(yàn)室啟用/更換一個(gè)新的分析系統(tǒng)檢測(cè)臨床樣5.3.2.3.4試劑的性能驗(yàn)證方法宜參考CNAS-GL037進(jìn)行，5.3.2.4質(zhì)控物5.3.2.4.1質(zhì)控物應(yīng)有良好的長(zhǎng)期穩(wěn)定性，宜選擇商品制品，或自制。5.3.2.4.3實(shí)驗(yàn)室自制新鮮冰凍全血質(zhì)控物，原料為足量的混合新鮮全血，采用凍存管分裝，并對(duì)均45.3.2.5測(cè)定5.3.2.5.1所用試劑、耗材應(yīng)按說(shuō)明書(shū)要5.3.2.5.2實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定標(biāo)準(zhǔn)操作程序，包含但不限于以下內(nèi)容：項(xiàng)目名稱、檢測(cè)原理、樣本采集及5.3.2.6報(bào)告（％）5.3.2.6.4異常血紅蛋白，宜以血紅蛋白組別歸屬進(jìn)行報(bào)告（如H5.3.2.6.5存在圖譜異?；驒z測(cè)結(jié)果異常，應(yīng)提供結(jié)果描述和檢測(cè)建議，以利于臨床醫(yī)生判斷結(jié)果。5.3.2.7參考區(qū)間5.3.2.7.2產(chǎn)前樣本臍帶血，尚無(wú)參考區(qū)間。5.3.2.7.4血紅蛋白組分在小于2歲以內(nèi)的年5.3.2.7.5宜根據(jù)檢測(cè)方法學(xué)設(shè)定不同年齡參考區(qū)間。12%≤HbA≤40%60%≤HbF≤90%0%≤HbA2≤1.0%83%≤HbA≤95%0%≤HbF≤13%0.8%≤HbA2≤3.0%91.5%≤HbA≤97.9%0%≤HbF≤5%2.4%≤HbA2≤——MCV＜82fl；——MCH＜27pg；——HbA2＜2.4%；——HbF＞5%；——MCV、MCH低于其年齡段參考范圍56.1.1.2地中海貧血基因診斷（產(chǎn)前標(biāo)本）臨床基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備產(chǎn)前診斷資質(zhì)。6.1.1.3地中海貧血基因（罕見(jiàn)型）診斷6.1.2.1實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員應(yīng)具有檢驗(yàn)資格證，且應(yīng)經(jīng)過(guò)國(guó)家級(jí)或省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心培訓(xùn)并取得《臨床6.1.2.2實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員應(yīng)具有檢驗(yàn)資格證，且應(yīng)經(jīng)過(guò)國(guó)家級(jí)或省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心培訓(xùn)并取得《臨床6.1.2.3地中海貧血基因診斷（靜脈血）結(jié)果6.1.2.4地中海貧血基因診斷（產(chǎn)前標(biāo)本）結(jié)果報(bào)告審核人員應(yīng)具備副高職稱及以上的職稱。6.1.2.5地中海貧血篩查、基因診斷人員應(yīng)每——地中海貧血篩查陽(yáng)性；——育齡夫婦雙方，陽(yáng)性一方為缺失型α0-地中海貧血（--/，如：--SEA/、--THAI/、--FIL/等）——育齡夫婦雙方，陽(yáng)性一方為α+-缺失型及α-非缺失型時(shí)，當(dāng)配偶一方篩查為陰性結(jié)果（包括），——育齡夫婦雙方，其中一方為β-地中海貧血基因攜帶者，配偶一方進(jìn)行血紅蛋白組分分析，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性時(shí)，進(jìn)行地中海貧血基因檢測(cè)；當(dāng)配偶一方血紅蛋白電泳篩查提示存在異常血——臍血血紅蛋白篩查陽(yáng)性時(shí)；6——臨床適應(yīng)癥。檢測(cè)應(yīng)填寫(xiě)申請(qǐng)單，申請(qǐng)單參見(jiàn)附錄E，宜包括但不限于以下內(nèi)容：申請(qǐng)單抬頭、受檢者姓名、年6.2.1.4.1按照適用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的常規(guī)方法采集6.2.1.4.2檢測(cè)樣本不受飲食和采血時(shí)間6.2.1.4.5樣本如未能及時(shí)檢測(cè)，可——樣本在常溫條件下短期保存7天——凝膠成像分析儀；——雜交儀；——核酸濃度測(cè)定儀；應(yīng)選擇NMPA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室的地貧基因檢測(cè)試a)樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室唯一編號(hào)；7b)手工方法提取核酸的，按照試劑盒提取說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；c)使用核酸提取儀的，按照儀器操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；d)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，按照實(shí)驗(yàn)室SOP文件進(jìn)行清理b)按照試劑盒說(shuō)明書(shū)分裝、配制反應(yīng)液（如有需要）；b)可疑結(jié)果，宜使用另一種檢測(cè)方法a)檢驗(yàn)報(bào)告單應(yīng)體現(xiàn)檢測(cè)方法、檢測(cè)范圍及標(biāo)本類型。b)檢驗(yàn)報(bào)告單應(yīng)體現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果并書(shū)寫(xiě)基因型，不應(yīng)下臨床診斷性報(bào)告。c)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果有異常發(fā)現(xiàn)，應(yīng)進(jìn)行備注描d)可疑結(jié)果，應(yīng)進(jìn)行罕見(jiàn)型地中海貧血基因檢測(cè)的，應(yīng)由行業(yè)主管部門(mén)批準(zhǔn)的罕見(jiàn)型地中海貧e)報(bào)告單簽發(fā)應(yīng)雙人簽字，其中一名為中級(jí)及以上——有生育非輸血依賴型地中海貧血患兒風(fēng)險(xiǎn)的夫婦，進(jìn)行遺傳咨詢，宜知情選擇地中海貧血基8——基本信息：申請(qǐng)單抬頭、受檢者姓名、年齡、民族、檢測(cè)項(xiàng)目、聯(lián)系電話、申請(qǐng)科室、申請(qǐng)——檢測(cè)孕婦血細(xì)胞分析、凝血功能檢測(cè)、RH血型、乙肝、艾滋病、丙肝、梅毒結(jié)果6.2.2.7.1侵入性產(chǎn)前診斷操作采集的絨毛、羊水、臍血，樣本采集后及時(shí)送檢。如未能及時(shí)檢測(cè)宜6.2.2.7.2肉眼可見(jiàn)明顯血色的羊水樣本，應(yīng)9b)按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)和結(jié)果判斷；見(jiàn)6.2.1.8.3，并增加產(chǎn)前樣本檢測(cè)先判斷是否存在母源污染，當(dāng)母源污染影響結(jié)果判斷時(shí)，應(yīng)重——多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)（MLPA——二代測(cè)序技術(shù)（NGSa)按所用試劑盒說(shuō)明書(shū)在儀器上設(shè)置擴(kuò)增參數(shù)，并保存，供長(zhǎng)期使用；b)按照試劑盒說(shuō)明書(shū)分裝、配制反應(yīng)液；6.2.3.5.1參照所使用檢測(cè)方法的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)6.2.3.5.2基因檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合家系、篩查結(jié)果、臨床信息進(jìn)行綜合6.2.3.6.2檢驗(yàn)報(bào)告單應(yīng)體現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果并書(shū)寫(xiě)基因型，不應(yīng)下臨床診斷性6.2.3.6.4本檢測(cè)為實(shí)驗(yàn)室自配試劑，僅供臨床醫(yī)生參考，不應(yīng)作為排除性檢測(cè)結(jié)果，宜結(jié)合臨床癥7.1.1.2.1在每批進(jìn)行樣本測(cè)試前，應(yīng)先進(jìn)行質(zhì)控物分析，以確定分析系統(tǒng)狀態(tài)良好，測(cè)定結(jié)果可靠7.1.1.2.2當(dāng)出現(xiàn)失控現(xiàn)象，應(yīng)進(jìn)行失控分析，并采取相應(yīng)的措施。質(zhì)量控制限的設(shè)定及失控判斷規(guī)7.1.2.1.2質(zhì)控品應(yīng)包括提取、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析的全過(guò)程，實(shí)驗(yàn)結(jié)果陰性質(zhì)控品應(yīng)為陰性，陽(yáng)性質(zhì)控7.1.2.1.3整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程應(yīng)兩名實(shí)驗(yàn)7.1.2.2.1宜通過(guò)實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性、不同7.2.1項(xiàng)目每年應(yīng)至少參加省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心或國(guó)家級(jí)臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)量地貧篩查人群地貧篩查人群地貧初篩陰性地貧初篩陽(yáng)性常規(guī)地貧基因分析未見(jiàn)異?？梢山Y(jié)果陽(yáng)性結(jié)果罕見(jiàn)地貧基因分析未見(jiàn)異常陽(yáng)性結(jié)果家系驗(yàn)證(未知突變)遺傳咨詢、診治DB45/T2829—2023A.2地中海貧血新生兒篩查流程篩查陰性篩查陽(yáng)性未見(jiàn)異?？梢山Y(jié)果陽(yáng)性結(jié)果圖A.2新生兒篩查流程圖育齡夫婦育齡夫婦雙方地貧初篩陰性雙方地貧初篩陽(yáng)性一方地貧初篩陽(yáng)性夫婦常規(guī)地貧基因分析未見(jiàn)異?？梢山Y(jié)果罕見(jiàn)地貧基因分析陽(yáng)性結(jié)果夫婦地貧基因雙陽(yáng)(生育高風(fēng)險(xiǎn)地貧患兒)產(chǎn)前診斷家系驗(yàn)證(未知突變)血細(xì)胞分析和血紅蛋白組分分析自制質(zhì)控品123456789XX醫(yī)院XX科檢驗(yàn)報(bào)告單%%%%%%%%%%%%%采樣時(shí)間：XX接收時(shí)間：XX您因，擬定進(jìn)行地中海貧血（簡(jiǎn)稱地貧）基因診斷，需采集靜床表型多不貧血，但如雙親為同型地貧攜帶者，有生育重型或中間型地貧后代的風(fēng)險(xiǎn)。(后不良。(3)重型α-地中海貧血胎兒主要表現(xiàn)為胎兒水腫、巨大胎盤(pán)、胎死宮內(nèi)及出生后無(wú)法存活，且母體易出現(xiàn)高血壓、子癇前期等并發(fā)癥。(4)重型和中間型β-地中海貧血孕期胎兒無(wú)明顯異常表現(xiàn)，出生到一定年紀(jì)后發(fā)病。目前公認(rèn)唯一治愈的方法是造血干細(xì)胞移植，但面臨無(wú)合適供體、排異反應(yīng)、移植失敗等風(fēng)險(xiǎn)，且治療費(fèi)用昂貴。大部分患者只能依賴性輸血和去鐵治療，長(zhǎng)期的治療費(fèi)用昂貴?！揪芙^擬定醫(yī)療方案的風(fēng)險(xiǎn)】可能不會(huì)發(fā)生以下介紹的檢查風(fēng)險(xiǎn)，但可能生育4)其他無(wú)法預(yù)測(cè)的外部因素可能導(dǎo)致檢測(cè)無(wú)法正常進(jìn)行，將終止該項(xiàng)檢5)受檢者為兒童時(shí)，需要父母雙方提供篩查和基因診斷結(jié)果，否則不能保6)檢測(cè)結(jié)果為新發(fā)突變時(shí)，需要父母雙方采樣進(jìn)行家系驗(yàn)證，否則無(wú)法解釋新我的醫(yī)生已經(jīng)告知我將要進(jìn)行的檢測(cè)項(xiàng)目的內(nèi)涵、此次檢查可能存在的局限性和風(fēng)險(xiǎn)、以及相關(guān)檢查我授權(quán)醫(yī)生對(duì)檢測(cè)涉及的樣本進(jìn)行處置，包括進(jìn)一步的送檢多種檢測(cè)方法、科學(xué)研究等，以幫助醫(yī)師我已經(jīng)告知受檢者（授權(quán)親屬或法定監(jiān)護(hù)人）將要進(jìn)行的檢查方式、此次檢查中及檢查后可能發(fā)生的并發(fā)癥和風(fēng)險(xiǎn)、可能存在的其他檢查方法并且解答了受檢方關(guān)于此次檢查的三聯(lián)單編號(hào)NO檢驗(yàn)費(fèi)用：元補(bǔ)助金額：元填表說(shuō)明：如果是男性，就在男方信息欄填寫(xiě)；若為女性，在女方信息欄填寫(xiě)；若為夫妻，則分別填寫(xiě)；若為小孩，則在其他說(shuō)明行填寫(xiě)其父母的基因診斷結(jié)果，若為補(bǔ)助對(duì)象，按照指示地中海貧血基因產(chǎn)前診斷知情同意書(shū)異常臨床指征，出生發(fā)病后，則需要終身依賴輸血和1)樣本如果存在母源污染，可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果判斷造成影響。因此，標(biāo)本3)如果雙盲平行試驗(yàn)結(jié)果不一致，應(yīng)重新采樣，否則將終止該項(xiàng)檢5)其他無(wú)法預(yù)測(cè)的外部因素可能導(dǎo)致檢測(cè)無(wú)法正常進(jìn)行，將終止該項(xiàng)檢醫(yī)療技術(shù)規(guī)范進(jìn)行操作，盡最大努力減少上述風(fēng)險(xiǎn)我理解根據(jù)我個(gè)人的妊娠情況，除上述風(fēng)險(xiǎn)以外，還可能出現(xiàn)其他特殊并發(fā)癥檢查方法并且解答了孕婦關(guān)于此次檢查的相聯(lián)系電話：聯(lián)系地址：