生物自我小測基因工程的基本操作程序

學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精自我小測1下列有關(guān)基因工程操作的順序組合中正確的是(）①目的基因的檢測和鑒定②基因表達(dá)載體的構(gòu)建③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞④目的基因的獲取A．①②③④B．④③②①C．④②③①D．③④②①2下列哪項不是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法()A．基因槍法B．顯微注射法C．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D．花粉管通道法3基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計施工的,在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對的步驟是（）A．人工合成基因B．制備重組DNA分子C．將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞D．目的基因的檢測和表達(dá)4目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，只有通過鑒定和檢測才能知道。下列屬于目的基因檢測和鑒定的是（)①檢測受體細(xì)胞是否含有目的基因②檢測受體細(xì)胞是否含有致病基因③檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄mRNA④檢測目的基因是否翻譯蛋白質(zhì)A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④5在基因工程技術(shù)中，需要用氯化鈣處理的環(huán)節(jié)是（）A．目的基因的提取和導(dǎo)入B．目的基因與運(yùn)載體結(jié)合C．將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞D．目的基因的檢測與表達(dá)6(2009浙江高考理綜,3）下列關(guān)于基因工程的敘述，錯誤的是（)A．目的基因和受體細(xì)胞均可來自動、植物或微生物B．限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無生物活性D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)7(2009山西太原測評，28)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán):95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合）→72℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈）。下列有關(guān)PCR過程的敘述中不正確的是（)A．變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵，也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn)B．復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成C．延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸D．PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高8(2009江蘇南通月考，1）下列有關(guān)PCR技術(shù)的敘述正確的是（)A．作為模板的DNA序列必須不斷地加進(jìn)每一次的擴(kuò)增當(dāng)中B．作為引物的脫氧核苷酸序列必須不斷地加進(jìn)每一次的擴(kuò)增當(dāng)中C．反應(yīng)需要的DNA聚合酶必須不斷地加進(jìn)反應(yīng)當(dāng)中D．反應(yīng)需要的DNA連接酶必須不斷地加進(jìn)反應(yīng)當(dāng)中9（2009山東濱州期末聯(lián)考，3）質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載工具，某質(zhì)粒上有兩種抗藥基因可作為標(biāo)記基因,a、b、c為三個可能出現(xiàn)的目的基因插入點(diǎn)，如下圖所示。如果用一種限制酶將目的基因和質(zhì)粒處理后,再合成重組質(zhì)粒.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入某高等植物受體細(xì)胞后,用含有藥物的培養(yǎng)基篩選受體細(xì)胞，預(yù)計結(jié)果如下。下列選項正確的是()含有青霉素的培養(yǎng)基含有四環(huán)素的培養(yǎng)基①能生長能生長②不能生長能生長③能生長不能生長A．如果出現(xiàn)①結(jié)果，說明兩個抗藥基因都沒有被破壞，轉(zhuǎn)基因?qū)嶒灚@得成功B．如果出現(xiàn)①結(jié)果，說明限制酶的切點(diǎn)在c點(diǎn),目的基因接在c點(diǎn)的斷口處C．如果出現(xiàn)①或③結(jié)果，說明轉(zhuǎn)基因?qū)嶒炇．轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中的a、b基因的遺傳遵循孟德爾遺傳規(guī)律10(2009山西太原測評，27）下表關(guān)于基因工程中有關(guān)基因操作的名詞及對應(yīng)的內(nèi)容,正確的組合是（）供體剪刀針線載體受體A質(zhì)粒限制性內(nèi)切酶DNA連接酶提供目的基因的生物大腸桿菌等B提供目的基因的生物DNA連接酶限制性內(nèi)切酶質(zhì)粒大腸桿菌等C提供目的基因的生物限制性內(nèi)切酶DNA連接酶質(zhì)粒大腸桿菌等D大腸桿菌等DNA連接酶限制性內(nèi)切酶提供目的基因的生物質(zhì)粒11(2009江蘇蘇北四市調(diào)研,25)（多選)在判斷抗蟲基因是否成功轉(zhuǎn)入棉花基因組的方法中，屬于分子檢測的是(）A．通過觀察害蟲吃棉葉是否死亡B．檢測目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶C．檢測目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶D．檢測目的基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)能否與特定抗體形成雜交帶12下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖，請據(jù)圖作答.(真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)與原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)有所不同,直接從真核細(xì)胞獲取的基因無法在原核細(xì)胞內(nèi)表達(dá))（1）能否利用人的皮膚細(xì)胞來完成①過程?________(能、不能)，為什么?________________________________________________________________________。（2）過程②必需的酶是________，過程③一般用________方法使氫鍵斷裂，也可以用________酶處理。（3）在利用A、B獲得C的過程中，必須用________切割A(yù)和B，使它們產(chǎn)生________，再加入DNA連接酶,才可形成C.(4)為使過程⑧更易進(jìn)行，可用________(藥劑）處理D。13下圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過程，據(jù)圖回答：(1）在基因工程中，A表示________，B表示________。（2）B→C為轉(zhuǎn)基因綿羊的培育過程,此過程中，②常用的導(dǎo)入方法是________；③常用的導(dǎo)入方法是________。（3）要確定目的基因（抗蟲基因）導(dǎo)入受體細(xì)胞后,是否能穩(wěn)定遺傳并表達(dá),需進(jìn)行檢測和鑒定工作，請寫出在個體水平上的鑒定過程：_______________________________________。14(2009江蘇南通月考，26)根據(jù)模擬制作重組DNA分子的活動，甲DNA分子、乙DNA分子被EcoRⅠ酶切后，即可獲得所需的目的基因和質(zhì)粒，回答以下問題：(1）綠色硬紙板（甲DNA分子)的堿基序列為：……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC…………TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG……紅色硬紙板（乙DNA分子）的堿基序列為：……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC…………AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG……其中,________DNA分子含有“目的基因”,________DNA分子是“質(zhì)粒"。(2)用剪刀代表進(jìn)行切割，酶切位點(diǎn)在________（a處還是b處)，此化學(xué)鍵稱為________。請用“｜|"在甲、乙兩DNA分子上標(biāo)出EcoRⅠ的作用位點(diǎn).(3）你模擬插入的DNA片段能稱得上一個基因嗎?________.EcoRⅠ屬于________酶。(4)從基因文庫中獲取目的基因是常用方法，基因文庫實(shí)際上就是指導(dǎo)入了某種生物不同基因的許多DNA片段的________的群體.按照其中所含基因的量又可分為________文庫、________文庫。15（2009江蘇高考,34）蘇云金桿菌（Bt）能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因）,據(jù)圖回答下列問題.(1）將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反應(yīng)管中有________種DNA片段.（2)圖中②表示HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程,此過程可獲得________種重組質(zhì)粒;如果換用BstⅠ與BamHⅠ酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得________種重組質(zhì)粒。(3)目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的________。(4）圖中③的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白,可以協(xié)助帶有目的基因的TDNA導(dǎo)入植物細(xì)胞，并防止植物細(xì)胞中________對TDNA的降解.（5）已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體,使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風(fēng)險相對較小,原因是人類腸上皮細(xì)胞________.(6）生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的________基因頻率的增長速率。參考答案1答案：C2答案：B3解析：人工合成目的基因有兩條途徑:mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成DNA;或者由蛋白質(zhì)序列推測DNA核苷酸序列,然后化學(xué)合成，這兩個過程都涉及堿基互補(bǔ)配對。制備重組DNA涉及黏性末端的互補(bǔ)配對.檢測目的基因是否存在于受體細(xì)胞，以及目的基因是否轉(zhuǎn)錄形成mRNA的時候，都要用DNA探針進(jìn)行檢測，其原理就是堿基互補(bǔ)配對的原則。答案：C4解析：目的基因的檢測包括檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是用DNA探針，使DNA探針與基因組DNA雜交。檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是用基因探針與mRNA雜交.最后檢測目的基因是否翻譯了蛋白質(zhì)，方法是進(jìn)行抗原-抗體雜交。答案:C5解析:用人工的方法將體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。例如,如果運(yùn)載體是質(zhì)粒，受體細(xì)胞是細(xì)菌，一般是將細(xì)菌用氯化鈣處理，以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性,使含有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞，目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,就可以隨著受體細(xì)胞的復(fù)制而復(fù)制.答案：C6解析：人胰島素原基因中有內(nèi)含子存在,因此在大腸桿菌中表達(dá)后無生物活性。載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞，但由于它和目的基因是相互獨(dú)立的，并不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。答案：D7答案：C8答案：B9解析：如果出現(xiàn)①結(jié)果,也可能是目的基因沒有與質(zhì)粒重組，也可能是目的基因接在c點(diǎn)的斷口處。如果出現(xiàn)了③結(jié)果，說明目的基因連接到了b點(diǎn)的斷口處.孟德爾遺傳規(guī)律研究的是細(xì)胞核內(nèi)基因遺傳的規(guī)律，由于a、b基因位于質(zhì)粒上，位于細(xì)胞質(zhì)中，所以不遵循孟德爾遺傳規(guī)律。答案：B10解析:供體在基因工程里面是提供目的基因的個體，受體是指接受目的基因或者重組表達(dá)載體的個體。答案：C11解析：通過觀察害蟲吃棉葉是否死亡屬于個體水平的檢測，檢測目的基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)能否與特定抗體形成雜交帶屬于分子水平檢測。答案：BCD12答案:(1)不能皮膚細(xì)胞中的胰島素基因未表達(dá)(或未轉(zhuǎn)錄),不能形成胰島素mRNA(2)逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶高溫解旋(3)限制性內(nèi)切酶相同的黏性末端(4）Ca2＋(答CaCl2也可以)13解析：根據(jù)過程圖,可知導(dǎo)入到受體細(xì)胞內(nèi)的是B，則B應(yīng)該是重組的表達(dá)載體(例如重組質(zhì)粒等)，那么A就應(yīng)該表示為目的基因,目的基因可以是人的某個基因或者細(xì)菌的某個基因，根據(jù)需要獲得。答案：(1）目的基因重組DNA（重組基因表達(dá)載體)(2）顯微注射農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（3)讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基棉花的葉子，觀察害蟲的存活情況，以確定其是否具有抗蟲性狀14答案:（1）乙甲(2)a處磷酸二酯鍵綠色硬紙板（DNA分子甲）的堿基序列為：……ATAGCATGCTATCCATG｜｜AATTCGGCATAC…………TATCGTACGATAGGTACTTAA｜|GCCGTATG……紅色硬紙紙（DNA分子乙)的堿基序列為：……TCCTAG||AATTCTCGGTATG|｜AATTCCATAC…………AGGATCTTAA||GAGCCATACTTAA||GGTATG……(3）不能限制性核酸內(nèi)切（4)受體菌基因組部分基因15解析：(1）用HindⅡ、BamHⅠ完全酶切后，應(yīng)有4種DNA片段.（2）用HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連