DB32T 3489-2018 玉米粗縮病人工接種鑒定技術(shù)與抗性評(píng)價(jià)規(guī)程

省地DB32Technicalregulationforevaluatingmaizevarietiesresistancetomaizeroughdwarfdiseasebyartificial江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布本標(biāo)準(zhǔn)起草人：周彤、杜琳琳、周益軍、程兆榜、蘭瑩1玉米粗縮病人工接種鑒定技術(shù)與抗性評(píng)價(jià)規(guī)程N(yùn)Y/T2955-2016水稻品種試驗(yàn)水稻黑條矮縮病抗性鑒定與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程4接種用灰飛虱的準(zhǔn)備4.1灰飛虱的來(lái)源4.2飼養(yǎng)灰飛虱的基本條件可調(diào)控溫、光的養(yǎng)蟲(chóng)室（光照每天12h，溫度控制在25℃±2℃范圍內(nèi)）、玻璃杯、尼龍紗布（網(wǎng)眼規(guī)格1mm）、養(yǎng)蟲(chóng)架、適宜灰飛虱繁殖的水稻種子；4.3灰飛虱群體的飼養(yǎng)選取飼喂灰飛虱的水稻種子（宜選用武育粳3號(hào)）用水浸種24h后，6d~7d后，待苗長(zhǎng)至一葉一心期時(shí)，將待產(chǎn)的單頭灰飛虱畢將成蟲(chóng)移出，7d~10d后開(kāi)始孵化出1齡4.4飼毒方法2RT-PCR鑒定為攜帶水稻黑條矮縮病毒的小麥、水稻或玉米病株法按照NY/T2955-2016附錄B執(zhí)行），土面覆蓋濾紙，將4.3繁育的適量1齡~2齡灰飛虱移入其中,并用機(jī)取出100頭以上灰飛虱，按照NY/T2955-2016附錄A的要求檢測(cè)灰飛虱群體帶毒情況，計(jì)算灰飛虱群5.2接蟲(chóng)數(shù)量選取處于3齡～5齡的獲毒灰飛虱群體，按公式(1)計(jì)算接種IVSNPVS………………（1）式中:IVS—單株有效接種蟲(chóng)量，單位為頭每株（N—單株接種灰飛虱數(shù)量，單位為頭每株（頭/株5.3接種條件于玉米苗二葉一心期選擇長(zhǎng)勢(shì)一致的30株苗用于接種（去除其它苗）。接種時(shí)溫度25℃±2℃,每天上午和下午各趕蟲(chóng)一次，使灰飛虱分布均勻。接種后趕出灰飛虱并噴施殺蟲(chóng)劑，保證玉米苗上的灰飛虱全部撲殺，噴藥后1d再將接種過(guò)的玉米苗移栽，15℃~30℃條件下培育。參照公式(2)方法計(jì)算發(fā)病率。若出現(xiàn)感病對(duì)照品種的發(fā)病率小于50則應(yīng)分析原因，并重新進(jìn)RininRi式中:根據(jù)發(fā)病率進(jìn)行抗性評(píng)價(jià)，各級(jí)別評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)遵照附錄B（參照NY/T1209-20