2024-2025學(xué)年高中生物專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)學(xué)案新人教版選修1

PAGE15-課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計數(shù)學(xué)問點(diǎn)一菌株的篩選與選擇培育基1．篩選菌株(1)原理：人為供應(yīng)有利于目的菌株生長的條件(包括養(yǎng)分、溫度、pH等)，同時抑制或阻擋其他微生物生長。(2)實例：從熱泉中篩選出Taq細(xì)菌。熱泉70～80℃的高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物，而使耐熱的Taq細(xì)菌脫穎而出。(3)方法：利用選擇培育基分別。歸納總結(jié)：選擇培育微生物的方法通常有兩種：(1)可利用該分別對象對某一養(yǎng)分物質(zhì)有“嗜好”的原理，特地在培育基中加入該養(yǎng)分物質(zhì)，從而使它成為一種加富培育基；(2)可利用該分別對象對某種抑菌物質(zhì)的抗性，在混合培育物中加入該抑菌物質(zhì)，經(jīng)培育后，其他微生物生長受抑制，而分別對象卻可乘機(jī)大大繁殖，在數(shù)量上占優(yōu)勢。2．選擇培育基(1)概念：選擇培育基指允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻擋其他種類微生物生長的培育基。(2)選擇培育基的制備原理：依據(jù)不同微生物的特殊養(yǎng)分要求或其對某一化學(xué)、物理因素的抗性不同而制備培育基。(3)選擇培育基的制備方法：在培育基中加入某種允許特定種類微生物生長，抑制或阻擋其他種類微生物生長的化學(xué)成分。(4)選擇培育基的用途：使混合菌株中的目的菌變成優(yōu)勢菌，提高該菌的篩選率。(5)實例：在培育基中以尿素為唯一的氮源可得到能利用尿素的微生物；在培育基中加入青霉素可分別得到酵母菌和霉菌。土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計數(shù)所需培育基配方培育基組成供應(yīng)的養(yǎng)分或作用KH2PO41.4g、Na2HPO42.1g、MgSO4·7H2O0.2g無機(jī)鹽葡萄糖10.0g碳源尿素1.0g氮源、碳源瓊脂15.0g凝固劑用蒸餾水定容至1000mL氫元素、氧元素本培育基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素為氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，會因缺乏氮源而不能生長繁殖，所以，用該培育基能夠篩選出可分解尿素的微生物。【典題精練1】應(yīng)用選擇培育基的主要原理是()A．使微生物大量增殖B．顯現(xiàn)某微生物的特征，以區(qū)分于其他微生物C．抑制不須要的微生物的生長D．相宜野生型微生物的生長【答案】C【解析】同學(xué)們可從選擇培育基的作用原理來區(qū)分各個選項。選擇培育基是在培育基中加入某一化學(xué)物質(zhì)或變更某一理化性質(zhì)，使某一微生物正常生長，而其他微生物則被殺滅或生長受到抑制，從而選出所須要的微生物。解題歸納依據(jù)選擇培育的菌種的生理代謝特點(diǎn)，加入某種物質(zhì)或不加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。常見微生物的分別舉例如下。①酵母菌、霉菌等真菌：用含青霉素的培育基分別；②金黃色葡萄球菌：用含高濃度食鹽水的培育基分別；③固氮微生物：用缺乏氮源的培育基分別；④自養(yǎng)型微生物：用含無機(jī)碳源的培育基分別；⑤厭氧型和兼性厭氧型微生物：用一般培育基在無氧條件下分別?！镜漕}精練2】甲、乙、丙是三種微生物，表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培育微生物的三種培育基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是()ⅠⅡⅢ粉狀硫10g＋＋＋K2HPO44g＋＋＋FeSO40.5g＋＋＋蔗糖10g＋－＋(NH4)2SO40.4g－＋＋H2O100mL＋＋＋MgSO49.25g＋＋＋CaCl20.5g＋＋＋注：“＋”表示培育基中加入了這種物質(zhì)，“－”表示培育基中沒有加入這種物質(zhì)。A．甲、乙、丙都是異養(yǎng)型微生物B．甲、乙都是自養(yǎng)型微生物，丙是異養(yǎng)型微生物C．甲是異養(yǎng)型微生物，乙是固氮微生物，丙是自養(yǎng)型微生物D．甲是固氮微生物，乙是自養(yǎng)型微生物，丙是異養(yǎng)型微生物【答案】D【解析】Ⅰ培育基缺少氮源，Ⅱ培育基缺少碳源，Ⅲ培育基養(yǎng)分全面。氮元素是微生物生長的必需元素，每一種微生物正常生長都須要氮元素，但自己能夠固氮的微生物可以生活在無氮培育基上。甲能在Ⅰ上正常生長繁殖，而乙、丙都不能，說明甲是能夠固氮的微生物；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，而甲、丙不能，說明乙不須要培育基為它的正常生命活動供應(yīng)碳源，乙確定為自養(yǎng)型微生物；丙只能在Ⅲ上正常生長繁殖，為異養(yǎng)型微生物。學(xué)問點(diǎn)二統(tǒng)計菌落數(shù)目1．顯微鏡干脆計數(shù)法(總菌計數(shù)法)(1)原理：此法利用特定細(xì)菌計數(shù)板或血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算確定容積的樣品中微生物的數(shù)量。(2)方法：用計數(shù)板計數(shù)。計數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個特定的面積為1mm2和高為0.1mm的計數(shù)室，在1mm2的面積里又被劃分成25個(或16個)中格，每個中格進(jìn)一步劃分成16個(或25個)小格，但計數(shù)室都是由400個小格組成的。如下圖所示。(3)計算公式：每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)＝每小格平均細(xì)菌數(shù)×400×10000×稀釋倍數(shù)(4)缺點(diǎn)：不能區(qū)分細(xì)菌的死活。歸納總結(jié)：顯微鏡干脆計數(shù)的操作步驟1．取清潔無油的血球計數(shù)板，在計數(shù)室上面加蓋蓋玻片。2．取菌液，搖勻，用滴管吸取菌液在蓋玻片邊緣滴一小滴，使菌液自行滲入，計數(shù)室內(nèi)不得有氣泡。3．用顯微鏡10×物鏡視察并將計數(shù)室移至視野中心。4．在10×物鏡下計數(shù)：計數(shù)5個(或4個)中格的總菌數(shù)，然后求得每個中格的菌數(shù)的平均值，再乘以16(或25)就得出計數(shù)區(qū)的總菌數(shù)，最終再換算出每毫升菌液中的含菌數(shù)。5．留意事項：計上不計下，計左不計右。2．間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)(1)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培育基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推想出樣品中大約含有多少活菌。(2)計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M。其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。(3)統(tǒng)計方法：統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計3個平板，計算出平板上菌落數(shù)的平均值，然后按公式進(jìn)行計算。特殊提示：1.為了保證結(jié)果精確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)。2．要設(shè)置比照試驗，且確定要涂布至少3個平板作為重復(fù)組，才能增加試驗的勸服力與精確性。3．用此種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目低。這是因為當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時，平板上視察到的只是一個菌落。因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來表示。3．設(shè)置比照教材所給實例中，A同學(xué)與其他同學(xué)的試驗結(jié)果相差很大的緣由分析及進(jìn)一步通過比照試驗驗證如下：可能緣由試驗驗證結(jié)論所取土樣不同其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)行試驗若結(jié)果與A同學(xué)的一樣，則說明A同學(xué)的試驗操作沒問題；若結(jié)果與A同學(xué)的不一樣，則說明A同學(xué)操作失誤或培育基配制有問題培育基污染或操作失誤將A同學(xué)配制的培育基在不加土樣的狀況下進(jìn)行培育，作空白比照若有菌落出現(xiàn)，則說明培育基被污染；若無菌落出現(xiàn)，則說明培育基未被污染留意：①牛肉膏蛋白胨培育基和選擇培育基應(yīng)各設(shè)一個空白比照，即不涂布菌液，目的是驗證培育基中是否含雜菌；②樣品稀釋度將干脆影響平板上生長的菌落數(shù)目?！镜漕}精練3】在做“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計數(shù)”試驗時，甲組試驗用氮源只含尿素的培育基，乙組試驗用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培育基，其他成分都相同，在相同條件下操作，培育與視察，則乙組試驗屬于()A．空白比照 B．標(biāo)準(zhǔn)比照C．相互比照 D．條件比照【答案】D【解析】上述試驗中，甲組是試驗組，乙組是比照組，給甲組某種處理，給乙組另一種條件的處理，則乙組應(yīng)當(dāng)是條件比照。解題歸納做該題首先要明確：土壤取樣要求在富含有機(jī)質(zhì)、pH接近中性且潮濕的土壤中實行。分別細(xì)菌時須要設(shè)置試驗組和比照組，比照組能解除試驗組中非測試因素對試驗結(jié)果的影響，提高試驗結(jié)果的可信度?！镜漕}精練4】自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在探討微生物時一般要將它們分別提純，然后進(jìn)行數(shù)量測定。下面是對某水樣中大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測定的試驗，請回答有關(guān)問題。步驟：①制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液；②用稀釋涂布平板法接種樣品；③在相宜溫度下培育。結(jié)果分析：(1)一位同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培育基上測得平板上菌落數(shù)的平均值為43.4，那么每毫升樣品中的菌株數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL)________。(2)用這種方法測定微生物數(shù)量時，實際的活菌數(shù)往往要比統(tǒng)計的菌落數(shù)________，因為_____________________________________。(3)某同學(xué)在測定大腸桿菌的密度時發(fā)覺，在培育基上還有其他雜菌的菌落，________(填“能”或“不能”)確定大腸桿菌的品系被污染了。緣由是_________________________________________________________________________________________________________?！敬鸢浮?1)2.17×108(2)多當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上視察到的只是一個菌落(3)不能不能確定雜菌的來源【解析】(1)每毫升樣品中的菌株數(shù)為43.4÷0.2×106＝2.17×108。(2)因為肉眼可見的菌落可能由兩個或多個細(xì)胞連在一起生長而成，所以實際的活菌數(shù)往往要比統(tǒng)計的菌落數(shù)多。(3)雜菌的出現(xiàn)可能是由于培育基滅菌不徹底或在培育過程中感染了雜菌。學(xué)問點(diǎn)三細(xì)菌分別與計數(shù)的試驗設(shè)計與結(jié)果評價1．試驗設(shè)計(1)基本思路：明確試驗?zāi)康摹逶囼灥脑砑跋嚓P(guān)的學(xué)問點(diǎn)→確立完成試驗的關(guān)鍵條件→考慮每一個材料用具可能的作用→設(shè)計試驗方案。(2)試驗流程2．結(jié)果分析與評價內(nèi)容結(jié)論分析是否有雜菌污染①比照組培育基上無菌落生長→未被雜菌污染；②試驗組培育基上菌落數(shù)偏高→被雜菌污染；③試驗組培育基上菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高→培育基上可能混入其他氮源選擇培育基是否能篩選出菌落牛肉膏蛋白胨培育基上的菌落數(shù)目明顯多于選擇培育基上的菌落數(shù)目→選擇培育基具有篩選作用樣品的稀釋操作假如得到了2個或2個以上菌落數(shù)在30～300的平板→操作勝利重復(fù)組的結(jié)果若選取的是同一種土樣，統(tǒng)計的結(jié)果應(yīng)當(dāng)接近1．分別分解尿素的細(xì)菌的試驗設(shè)計原則(1)設(shè)立重復(fù)組：統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)時，要至少涂布3個平板，以增加試驗結(jié)果的勸服力與精確性。(2)比照原則①推斷培育基中是否有雜菌污染，要將未接種的培育基同時進(jìn)行培育。②推斷選擇培育基是否具有篩選作用，要另外設(shè)置牛肉膏蛋白胨培育基進(jìn)行接種后培育，視察兩種培育基上的菌落數(shù)目，進(jìn)行比較得出結(jié)論。2．分解尿素的細(xì)菌的進(jìn)一步鑒定(1)原理：CO(NH2)2＋H2Oeq\o(→,\s\up17(脲酶))CO2＋2NH3。細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，使培育基堿性增加，pH上升，因此，可通過檢測pH的變更來推斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。(2)方法：在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑，培育某種細(xì)菌，若指示劑變紅，則pH上升，說明該種菌能分解尿素?！镜漕}精練5】如圖所示是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶的細(xì)菌的過程。(1)圖中選擇培育基應(yīng)以________為唯一氮源；鑒別培育基還需添加________作指示劑，產(chǎn)脲酶的細(xì)菌在該培育基上生長一段時間后，其菌落四周的指示劑將變成________色。(2)在5個細(xì)菌培育基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1mL，培育一段時間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程實行的接種方法是________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為________；與血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)法相比，此計數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較________。在試驗中，探討者每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止________________________________________。為了推斷選擇培育基是否起到了選擇作用，應(yīng)當(dāng)增設(shè)________________作為比照。(3)通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的________等特征對細(xì)菌進(jìn)行初步鑒定?！敬鸢浮?1)尿素酚紅紅(2)稀釋涂布平板法1.75×108少因培育時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目接種了的牛肉膏蛋白胨培育基(3)形態(tài)、大小(答案合理即可)【解析】(1)脲酶能夠催化尿素分解為氨，故圖中選擇培育基應(yīng)以尿素為唯一氮源，鑒別培育基中還需添加酚紅作指示劑，由于尿素被脲酶分解成氨，氨會使培育基的堿性增加，pH上升，從而使酚紅指示劑變紅。(2)常用于計數(shù)細(xì)菌菌落數(shù)的方法是稀釋涂布平板法，為了保證結(jié)果精確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計數(shù)，故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計數(shù)。每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為(156＋178＋191)÷3÷0.1×105＝1.75×108。用稀釋涂布平板法統(tǒng)計細(xì)菌數(shù)量時，當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，往往統(tǒng)計的是一個菌落，所以用此計數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較少。(3)對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色等特征對細(xì)菌進(jìn)行初步鑒定。解題歸納一般土壤取樣為10g，稀釋液為1mL，梯度稀釋為10mL，因而形成梯度稀釋度差。涂布時用量為0.1mL，因此在計算菌落數(shù)目時，公式為：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M。其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)?！镜漕}精練6】依據(jù)我國生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，接種1mL水樣到牛肉膏蛋白胨培育基上，在37℃下培育24h后，所生長出的菌落總數(shù)不得大于100。某愛好小組對某蓄水池進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)測定，以了解池水是否符合飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。回答下列問題：(1)用無菌三角瓶取水樣前，取樣器(玻璃制品)可運(yùn)用________法或________法滅菌。取水前的這種無菌操作的目的是___________________________________________________。(2)該小組通過濾膜法測定細(xì)菌總數(shù)，將10mL水樣進(jìn)行過濾后，將濾膜放在牛肉膏蛋白胨培育基上培育，培育時應(yīng)將平板倒置，其緣由是_____________________________________________________(至少寫出兩點(diǎn))。(3)分別取10mL水樣，用(2)中方法在37℃下培育24h后，結(jié)果如表所示：平板平板1平板2平板3菌落數(shù)275300280據(jù)表中結(jié)果推斷，所取水樣測定結(jié)果________(填“符合”或“不符合”)飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。(4)該小組若想檢測水樣中大腸桿菌的數(shù)目，可將濾膜放在含________的培育基上，計算培育基上________(顏色)菌落的數(shù)目?！敬鸢浮?1)高壓蒸汽滅菌干熱滅菌(兩空答案依次可以顛倒)防止外來雜菌污染(2)防止冷凝水滴落，污染培育基，也可避開培育基中水分過快揮發(fā)(答案合理即可)(3)符合(4)伊紅美藍(lán)黑色【解析】(1)用無菌三角瓶取水樣前，取樣器(玻璃制品)需運(yùn)用高壓蒸汽滅菌(或干熱滅菌)法滅菌。取水前的無菌操作的目的是防止外來雜菌污染。(2)平板倒置既可避開培育基表面的水分過快揮發(fā)，又可防止冷凝水滴落在培育基上，造成污染，影響試驗結(jié)果。(3)表格中3個平板的平均菌落數(shù)為285，則每毫升水樣對應(yīng)菌落數(shù)為28.5，低于國家規(guī)定的飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，因此所取水樣符合飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。(4)測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目的方法：將已知體積的水過濾后，將濾膜放在伊紅美藍(lán)培育基上培育。在該培育基上大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，可依據(jù)培育基上黑色菌落的數(shù)目，估算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。一、選擇題1．用來推斷選擇培育基是否起到了選擇作用，須要設(shè)置的比照是(C)A．未接種的選擇培育基B．未接種的牛肉膏蛋白胨培育基C．接種了的牛肉膏蛋白胨培育基D．接種了的選擇培育基解析：將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培育基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培育基上的菌落數(shù)目，因此，應(yīng)選擇牛肉膏蛋白胨培育基作為比照。比照遵循的原則是單一變量原則。2．在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時又能抑制或者阻擋其他種類微生物生長的培育基稱作(C)A．鑒別培育基 B．加富培育基C．選擇培育基 D．基礎(chǔ)培育基解析：基礎(chǔ)培育基是含有一般微生物生長繁殖所需基本養(yǎng)分物質(zhì)的培育基，例如牛肉膏蛋白胨培育基；加富培育基一般用來培育養(yǎng)分要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物；鑒別培育基是在培育基中加入某種特殊的化學(xué)物質(zhì)，微生物的代謝產(chǎn)物能與該物質(zhì)產(chǎn)生特定的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變更，如出現(xiàn)某種特定顏色等，從而鑒別出微生物種類；選擇培育基是在培育基中加入某種物質(zhì)，促進(jìn)須要的微生物生長、抑制不須要的微生物生長，從而選擇出某種微生物。3．關(guān)于微生物的培育，敘述錯誤的是(D)A．霉菌一般在25～28℃的溫度下培育3～4dB．不同種類的微生物，一般來說培育溫度和培育時間不相同C．一般來說，在相同的培育基、溫度及培育時間等條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征D．一個菌落就是單個微生物在固體培育基上快速生長繁殖，并以此母細(xì)胞為中心形成的子細(xì)胞集團(tuán)解析：不同種類的微生物，培育溫度和時間一般不相同，霉菌一般在25～28℃下培育3～4d，細(xì)菌一般在30～37℃下培育1～2d，放線菌一般在25～28℃下培育5～7d。菌落形成后，母細(xì)胞因分裂產(chǎn)生了子細(xì)胞群體而不復(fù)存在了。4．下列關(guān)于測定土壤中微生物數(shù)量的敘述，正確的是(B)A．一般選用103～107倍的稀釋液分別涂布B．測定放線菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋C．測定真菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋D．當(dāng)?shù)谝淮螠y量某種細(xì)菌的數(shù)量時，可以將101～107倍的稀釋液分別涂布到平板上培育解析：由于土壤中各類微生物的數(shù)量不同，在進(jìn)行分別與計數(shù)時，就須要依據(jù)不同的稀釋度分別進(jìn)行涂布。測定細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104、105、106倍稀釋；測定真菌的數(shù)量，一般選用102、103、104倍稀釋；測定放線菌的數(shù)量，一般選用103、104和105倍稀釋，而首次做試驗時，可將范圍放寬點(diǎn)，可以將103～107倍的稀釋液分別涂布到平板上培育。5．下列有關(guān)微生物的利用的敘述，正確的是(B)A．用于制果酒、果醋的微生物都含有線粒體B．分別能分解尿素的細(xì)菌，尿素應(yīng)作為培育基中唯一的氮源C．可采納干熱滅菌法對微生物培育基進(jìn)行滅菌D．平板計數(shù)法是測量微生物數(shù)量唯一且精確的方法解析：果醋發(fā)酵利用的是醋酸菌，為原核生物，無線粒體；培育基滅菌通常用的是高壓蒸汽滅菌法，而干熱滅菌法通常適用玻璃器皿、金屬用具等耐高溫且不適合其他方法的物品；平板計數(shù)法計數(shù)的是活菌數(shù)，而且有確定的誤差。分別能分解尿素的細(xì)菌，用的選擇培育基里尿素是唯一的氮源，這樣才能分別出分解尿素的細(xì)菌。6．為了推斷培育基是否被雜菌污染和選擇培育基是否起到了選擇作用，須要設(shè)置的比照組的培育基分別是(B)A．未接種的選擇培育基，未接種的牛肉膏蛋白胨培育基B．未接種的培育基，接種了的牛肉膏蛋白胨培育基C．接種了的選擇培育基，接種了的牛肉膏蛋白胨培育基D．接種了的培育基，未接種的牛肉膏蛋白胨培育基解析：若要推斷培育基是否被雜菌污染，可將未接種的培育基放在恒溫箱中培育，一段時間后若有菌落產(chǎn)生，說明培育基被污染，若無菌落產(chǎn)生，說明培育基沒有被污染。要推斷選擇培育基是否起到了選擇作用，接種了的選擇培育基是試驗組，將等量的稀釋相同倍數(shù)的菌液接種到牛肉膏蛋白胨培育基上，作為比照組，在相同的條件下進(jìn)行培育，視察比較比照組和試驗組中的菌落數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培育基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培育基上的菌落數(shù)目，綜上所述，B正確，A、C、D錯誤。7．下列有關(guān)微生物分別、培育和計數(shù)的敘述，正確的是(D)A．分別土壤中微生物時，須要先對土壤滅菌，再進(jìn)行培育B．測定土壤中細(xì)菌數(shù)量時，一般選用103～107倍的稀釋液C．測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用稀釋涂布平板法或平板劃線法進(jìn)行計數(shù)D．統(tǒng)計菌落數(shù)目時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，一個活菌會形成一個菌落解析：分別土壤中微生物時，須要對培育基滅菌，但不能對土壤樣品進(jìn)行滅菌，A錯誤；由于土壤中各類微生物的數(shù)量不同，在進(jìn)行分別和計數(shù)時，就須要依據(jù)不同的稀釋度分別進(jìn)行涂布，測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量一般選擇104、105、106倍的稀釋液，B錯誤；測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目常用稀釋涂布平板法，平板劃線法不能用于計數(shù)，C錯誤；統(tǒng)計菌落數(shù)目時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，一個活菌會形成一個菌落，D正確。二、非選擇題8．在探究培育液中酵母菌種群數(shù)量變更的試驗中，需利用計數(shù)板對微生物細(xì)胞進(jìn)行干脆計數(shù)。計數(shù)板是一個特制的可在顯微鏡下視察的玻片，樣品就滴在計數(shù)室內(nèi)。計數(shù)室由25×16＝400個小室組成，容納液體總體積為0.1mm3。某同學(xué)操作時將1mL酵母菌樣品加99mL無菌水稀釋，用無菌吸管吸取少許使其自行滲入計數(shù)室，蓋上蓋玻片并用濾紙吸去多余菌液，進(jìn)行視察計數(shù)。(1)在試驗中，某同學(xué)的部分試驗操作過程是這樣的：①從靜置試管中吸取酵母菌培育液加入計數(shù)板進(jìn)行計數(shù)，并記錄數(shù)據(jù)；②把酵母菌培育液放置在冰箱中；③第七天再取樣計數(shù)，記錄數(shù)據(jù)，統(tǒng)計分析繪成曲線。請訂正該同學(xué)試驗操作中的3處錯誤：①應(yīng)將試管輕輕振蕩幾次再吸取酵母菌培育液進(jìn)行計數(shù)；②應(yīng)將酵母菌培育液放置在相宜溫度下培育；③應(yīng)連續(xù)七天，每天視察、取樣計數(shù)并記錄數(shù)據(jù)。(2)在試驗前應(yīng)當(dāng)對計數(shù)板、吸管等器具進(jìn)行滅菌處理。(3)假如一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)實行的措施是適當(dāng)稀釋。(4)假如視察到如圖所示a、b、c、d、e5個大格共80個小室內(nèi)共有酵母菌48個，則上述1mL酵母菌樣品中約有酵母菌2.4×108個；要獲得較為精確的數(shù)值，削減誤差，你認(rèn)為該怎么做？多次計數(shù)，求平均值。解析：(1)在從試管中吸取酵母菌之前，應(yīng)將試管輕輕振蕩幾次，目的是使酵母菌在培育液中勻稱分布。酵母菌的培育液應(yīng)置于相宜條件下，并且每隔24小時就要統(tǒng)計一次菌落數(shù)目。(2)為了避開雜菌污染，試驗中所用吸管、計數(shù)板等器具需進(jìn)行滅菌處理。(3)(4)解答時要留意以下兩點(diǎn)：①統(tǒng)一單位；②留意體積的變更。400個小室共容納液體總體積為0.1mm3，則80個小格容納體積為：2×10－2mm3，含酵母菌48個，又因酵母菌培育液總體積為100mL，統(tǒng)一單位后即可求出酵母菌個數(shù)。9．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下試驗，并勝利篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培育基成分如下表所示，試驗步驟如下圖所示。請分析回答問題。(1)此培育基能否用于植物組織培育？不能，缺少植物激素(或缺少植物須要的各種養(yǎng)分)。(2)培育基中加入尿素的目的是篩選目的菌，這種培育基屬于選擇培育基。(3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培育基中的尿素和葡萄糖，試驗須要振蕩培育，緣由是為目的菌供應(yīng)氧氣。(4)轉(zhuǎn)為固體培育時，常采納稀釋涂布平板法(平板劃線法)(方法)接種，獲得單菌落后接著篩選。(5)下列材料或用具中：①培育細(xì)菌用的培育基與培育皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③試驗操作者的雙手。須要滅菌的是①②；須要消毒的是③。(填序號)(6)在進(jìn)行