臨床免疫測(cè)定的質(zhì)量控制及結(jié)果的可比性

臨床免疫測(cè)定的質(zhì)量控制及結(jié)果的可比性《衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于醫(yī)療機(jī)構(gòu)間醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、醫(yī)學(xué)影像檢查互認(rèn)有關(guān)問(wèn)題的通知》（衛(wèi)辦醫(yī)發(fā)〔2006〕32號(hào)）對(duì)于參加國(guó)家級(jí)質(zhì)量控制和省級(jí)質(zhì)量控制的、穩(wěn)定性好、質(zhì)量比較容易控制和費(fèi)用較高的檢查項(xiàng)目，應(yīng)當(dāng)組織轄區(qū)內(nèi)有條件的醫(yī)院間逐步開(kāi)展檢查互認(rèn)工作。對(duì)于參加國(guó)家級(jí)質(zhì)量控制的檢查項(xiàng)目，有條件的省、自治區(qū)、直轄市之間可以探索開(kāi)展檢查互認(rèn)；參加省級(jí)質(zhì)量控制的檢查項(xiàng)目，可以在本省、自治區(qū)、直轄市范圍內(nèi)實(shí)行檢查互認(rèn)。

國(guó)家醫(yī)療衛(wèi)生體制改革年中共中央、國(guó)務(wù)院提出關(guān)于深化醫(yī)藥衛(wèi)生體制改革的意見(jiàn)年4月，國(guó)務(wù)院發(fā)出醫(yī)藥衛(wèi)生體制五項(xiàng)重點(diǎn)改革年度主要工作安排，在“推進(jìn)公立醫(yī)院改革試點(diǎn)”重點(diǎn)改革中指出的具體工作目標(biāo)之一“實(shí)行同級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)檢查結(jié)果互認(rèn)”。衛(wèi)生部隨后發(fā)出的通知指出，根據(jù)實(shí)際情況，合理確定開(kāi)展檢查互認(rèn)的項(xiàng)目，對(duì)于開(kāi)展檢查結(jié)果互認(rèn)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)或項(xiàng)目要有科學(xué)、合理的認(rèn)定依據(jù)。推進(jìn)公立醫(yī)院改革試點(diǎn)規(guī)范公立醫(yī)院臨床檢查、診斷、治療、使用藥物和植（介）入類(lèi)醫(yī)療器械行為，優(yōu)先使用基本藥物和適宜技術(shù)，實(shí)行同級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)檢查結(jié)果互認(rèn)。適當(dāng)提高醫(yī)療技術(shù)服務(wù)價(jià)格，降低藥品、醫(yī)用耗材和大型設(shè)備檢查價(jià)格。

臨床免疫檢驗(yàn)的類(lèi)型定量（腫瘤標(biāo)志物、激素、特定蛋白、治療藥物、部分傳染病血清學(xué)標(biāo)志物等）定性（傳染病血清學(xué)標(biāo)志物、自身抗體等）免疫檢驗(yàn)常用的方法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析時(shí)間分辨熒光免疫分析放射免疫試驗(yàn)（RIA）質(zhì)量控制（QualityControl）室內(nèi)質(zhì)量控制（Internalqualitycontrol,IQC）室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（Externalqualityassessment，EQA）實(shí)驗(yàn)室設(shè)施、儀器設(shè)備及管理濃度（NCU/ml)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（Externalqualityassessment，EQA）GBW(E)090040純化物,混合血清,提取物于載體蛋白緩沖溶液中7%可信限）的結(jié)果不多于3個(gè)。GBW(E)090045“鉤狀”效應(yīng)(Hookeffect)免疫測(cè)定,與一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)適用于免疫測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)品的一般要求對(duì)IQC應(yīng)定期進(jìn)行評(píng)價(jià)。ANA抗核抗體（顆粒型）室內(nèi)質(zhì)控物的質(zhì)檢(確認(rèn))已知結(jié)構(gòu)的多肽(激素和腫瘤標(biāo)志物)室內(nèi)質(zhì)控物的質(zhì)檢(確認(rèn))概念的理解室內(nèi)質(zhì)控就是作質(zhì)控圖嗎？實(shí)驗(yàn)室空間和工作流程的設(shè)計(jì)；儀器設(shè)備的正確使用、維護(hù)和校準(zhǔn)；試劑方法的性能驗(yàn)證及質(zhì)檢；SOP的編寫(xiě)；人員培訓(xùn)等。概念的理解有了試劑盒的陰性和陽(yáng)性對(duì)照還需要每次試劑檢測(cè)質(zhì)控品嗎？陰性和陽(yáng)性對(duì)照的功能？外加質(zhì)控品的功能？實(shí)驗(yàn)室設(shè)施、儀器設(shè)備及管理實(shí)驗(yàn)室空間及工作流程的設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件的控制：溫濕度控制設(shè)備、穩(wěn)壓或不間斷電源儀器設(shè)備及管理：酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、全自動(dòng)免疫分析儀、加樣器等應(yīng)建立技術(shù)檔案，并定期維護(hù)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件的控制和監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室溫度和濕度的記錄及其意義溫度和濕度計(jì)的放置試劑冰箱標(biāo)本保存冰箱標(biāo)本處理（生物安全柜、離心機(jī)）標(biāo)本接收洗手池實(shí)驗(yàn)臺(tái)（儀器設(shè)備）實(shí)驗(yàn)臺(tái)（儀器設(shè)備）圖1-2.血液篩檢血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室具體設(shè)置示意圖實(shí)驗(yàn)廢棄物報(bào)告及記錄儀器設(shè)備的校準(zhǔn)周期理想的試劑：試劑的性能驗(yàn)證重復(fù)性和準(zhǔn)確性（定量和定性）測(cè)定下限(Detectionlimit)（定性）線性范圍和可測(cè)定范圍（定量）ELISA批內(nèi)變異(<10%)和批間變異(<15-25%)

“鉤狀”效應(yīng)(Hookeffect)變異體的檢測(cè)能力(HBsAg)臨床敏感性和特異性抗干擾能力理想的操作方法操作中影響測(cè)定結(jié)果的關(guān)鍵環(huán)節(jié)寫(xiě)出具有可操作性的SOPSOP等于試劑盒說(shuō)明書(shū)嗎？怎樣編寫(xiě)SOP？XXX單位XXX實(shí)驗(yàn)室XXX標(biāo)準(zhǔn)操作程序編號(hào)：?jiǎn)⒂萌掌冢喊姹荆?/p>

一目的：適用范圍：職責(zé)或責(zé)任人：（方法原理）（檢測(cè)設(shè)備和試劑）（所需的環(huán)境條件）操作步驟：

1．

2．

3．

五、本操作程序變動(dòng)程序：六、相關(guān)的文件七、相關(guān)的記錄表格和報(bào)告編寫(xiě)人審核人批準(zhǔn)人SOP（5W和1H）誰(shuí)來(lái)做(Who)：

責(zé)任人做什么(What)：適用范圍何時(shí)（When）：適用范圍何地（Where）：適用范圍為什么做（Why）：目的如何做（How）：操作步驟人員培訓(xùn)

方法原理檢測(cè)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)儀器設(shè)備使用、維護(hù)和校準(zhǔn)結(jié)果的分析、報(bào)告及進(jìn)一步處理質(zhì)控的分析知其然又知其所以然。何時(shí)（When）：適用范圍03/062(1stIRpanel)為什么做（Why）：目的化學(xué)純（>99%）WHOanti-RNP自身抗體國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（二）在檢測(cè)血液標(biāo)本的同時(shí)，檢測(cè)一定數(shù)量（與臨床樣本的數(shù)量相適應(yīng)）的已知弱陽(yáng)性（與試劑宣稱(chēng)的測(cè)定下限相適應(yīng)）和陰性的質(zhì)控樣本Standard:文字GBW(E)090040部分純化或未純化提取物或體液血液篩檢血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室具體設(shè)置示意圖結(jié)果的分析、報(bào)告及進(jìn)一步處理儀器設(shè)備的正確使用、維護(hù)和校準(zhǔn)；低分子量化合物（類(lèi)固醇、甲狀腺素）03/062(1stIRpanel)室內(nèi)質(zhì)控方法非統(tǒng)計(jì)學(xué)方法統(tǒng)計(jì)質(zhì)控方法定性測(cè)定質(zhì)控非統(tǒng)計(jì)學(xué)方法在檢測(cè)血液標(biāo)本的同時(shí)，檢測(cè)一定數(shù)量（與臨床樣本的數(shù)量相適應(yīng)）的已知弱陽(yáng)性（與試劑宣稱(chēng)的測(cè)定下限相適應(yīng)）和陰性的質(zhì)控樣本檢測(cè)有效的質(zhì)控判斷方法：陽(yáng)性檢測(cè)為陽(yáng)性（反應(yīng)性），陰性檢測(cè)為陰性（非反應(yīng)性）。統(tǒng)計(jì)質(zhì)控方法定性免疫測(cè)定質(zhì)控物濃度的選擇室內(nèi)質(zhì)控物的質(zhì)檢(確認(rèn))質(zhì)控物的數(shù)量質(zhì)控規(guī)則Levey-Jennings質(zhì)控圖方法“即刻法”質(zhì)控方法“假陽(yáng)性”的統(tǒng)計(jì)質(zhì)控方法Levey-Jennings質(zhì)控圖方法也稱(chēng)Shewhart質(zhì)控圖，是由的Shewhart于1924年首先提出，并用于工業(yè)產(chǎn)品的質(zhì)量控制。二十世紀(jì)五十年代初，Levey-Jennings將其引入臨床檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。經(jīng)Henry和Segalove的改良，即為目前常用的Levey-Jennings質(zhì)控圖。Levey-Jennings質(zhì)控圖Levey-Jennings質(zhì)控圖

基本的統(tǒng)計(jì)學(xué)含義穩(wěn)定條件下，在20個(gè)IQC結(jié)果中不應(yīng)有多于1個(gè)結(jié)果超過(guò)2SD（95.5%可信限）限度；在1000個(gè)測(cè)定結(jié)果中超過(guò)3SD（99.7%可信限）的結(jié)果不多于3個(gè)。如以±3s為失控限，假失控的概率為0.3%。理想的試劑：試劑的性能驗(yàn)證適當(dāng)提高醫(yī)療技術(shù)服務(wù)價(jià)格，降低藥品、醫(yī)用耗材和大型設(shè)備檢查價(jià)格。如何做（How）：操作步驟實(shí)驗(yàn)室空間和工作流程的設(shè)計(jì)；不能單獨(dú)使用物理化學(xué)方法定值國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品(IS)中作為第一級(jí)標(biāo)準(zhǔn),二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)可用來(lái)維持校準(zhǔn).年中共中央、國(guó)務(wù)院提出關(guān)于深化醫(yī)藥衛(wèi)生體制改革的意見(jiàn)一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)可用來(lái)校準(zhǔn)第二和第三級(jí)標(biāo)準(zhǔn).Standards:物質(zhì)對(duì)用于不同類(lèi)型免疫測(cè)定的一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的特殊要求GBW(E)090040免疫測(cè)定,與二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)已知結(jié)構(gòu)的多肽(激素和腫瘤標(biāo)志物)在1000個(gè)測(cè)定結(jié)果中超過(guò)3SD（99.室內(nèi)質(zhì)控物的質(zhì)檢(確認(rèn))“假陽(yáng)性”的統(tǒng)計(jì)學(xué)室內(nèi)質(zhì)控方法基于日常檢驗(yàn)的陽(yáng)性率比值(呈正態(tài)分布)直接概率計(jì)算方法室內(nèi)質(zhì)量控制的評(píng)價(jià)IQC是一個(gè)集體活動(dòng)，不光是對(duì)實(shí)驗(yàn)室一次測(cè)定的有效性的判斷，也反應(yīng)了實(shí)驗(yàn)室測(cè)定趨勢(shì)的變化。IQC的失控不能做為處罰的依據(jù)，應(yīng)建設(shè)性的找出失控的原因，針對(duì)其采取措施加以改進(jìn)。對(duì)IQC應(yīng)定期進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果的可比性標(biāo)準(zhǔn)化(standardization)的概念Standard:文字Standards:物質(zhì)Standardization:

通過(guò)對(duì)測(cè)定方法和檢測(cè)程序的規(guī)范化，使測(cè)定結(jié)果的量值可溯源至同一標(biāo)準(zhǔn)，從而使測(cè)定結(jié)果在不同的實(shí)驗(yàn)間及不同試劑間具有可比性。量值溯源生物活性物質(zhì)的特點(diǎn)具有復(fù)雜的分子結(jié)構(gòu)不能單獨(dú)使用物理化學(xué)方法定值用于疾病的診療和預(yù)防測(cè)定方法工作程序標(biāo)準(zhǔn)化標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可比的結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分類(lèi)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分級(jí):可分為第一,第二和第三等三個(gè)等級(jí).一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)數(shù)量有限,可使用10-20年,是凍干品,內(nèi)含載體蛋白.一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)可用來(lái)校準(zhǔn)第二和第三級(jí)標(biāo)準(zhǔn).國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品(IS)中作為第一級(jí)標(biāo)準(zhǔn),二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)可用來(lái)維持校準(zhǔn).國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分級(jí)：一級(jí)和二級(jí)。適用于免疫測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)品的一般要求

要求

一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

三級(jí)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)源

單一

多個(gè)

多個(gè)使用時(shí)間10-20年1-5年1-數(shù)年制備純化物于載體蛋白緩沖溶液中純化物,混合血清,提取物于載體蛋白緩沖溶液中血清或血漿,人工蛋白為基礎(chǔ)的緩沖液定值方法多中心合作研究免疫測(cè)定,與一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)免疫測(cè)定,與二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)貯存方式

凍干-70℃下凍存冰凍或于穩(wěn)定溶液中,可能的話凍干對(duì)用于不同類(lèi)型免疫測(cè)定的一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的特殊要求

要求已知結(jié)構(gòu)的多肽(激素和腫瘤標(biāo)志物)未知結(jié)構(gòu)的蛋白（抗體確定的腫瘤標(biāo)志物）

血清蛋白

低分子量化合物（類(lèi)固醇、甲狀腺素）

純度

最純的蛋白部分純化或未純化提取物或體液混合血清

化學(xué)純（>99%）定值方法氨基酸分析（物質(zhì)濃度）；稱(chēng)重（質(zhì)量濃度）；比對(duì)較早的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行免疫測(cè)定（IU）；（生物測(cè)定，IU）國(guó)際組織的一致性結(jié)果；研制者指定的單位。國(guó)際組織的一致性結(jié)果；比對(duì)純蛋白進(jìn)行免疫測(cè)定（質(zhì)量濃度）

稱(chēng)重（物質(zhì)和質(zhì)量濃度）；光電比色測(cè)定。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的單位IU/mL

ANA#11（2310）測(cè)定下限(Detectionlimit)（定性）重復(fù)性和準(zhǔn)確性（定量和定性）7%可信限）的結(jié)果不多于3個(gè)。濃度（NCU/ml)人血清免疫球蛋白G，A和M(IgG,IgAandIgM)檢測(cè)有效的質(zhì)控判斷方法：陽(yáng)性檢測(cè)為陽(yáng)性（反應(yīng)性），陰性檢測(cè)為陰性（非反應(yīng)性）。已知結(jié)構(gòu)的多肽(激素和腫瘤標(biāo)志物)冰凍或于穩(wěn)定溶液中,可能的話凍干標(biāo)準(zhǔn)化(standardization)的概念HBsAg（液體系列）自身抗體國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（二）WHOanti-RNP免疫測(cè)定,與二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)比對(duì)二十世紀(jì)五十年代初，Levey-Jennings將其引入臨床檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。Foot最初是一個(gè)成人的腳長(zhǎng)？德國(guó)人異議：因人而異16個(gè)男子左腳長(zhǎng)度的均值抗原、抗體國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)項(xiàng)目研制者發(fā)布年編號(hào)濃度（IU/瓶）HBsAgNIBSC1985(ad)1stIS100（IU/ml)NIBSC2003(adw2,genetypeA)00/588(2stIS)33

NIBSC200303/062(1stIRpanel)抗HBsSanquin1977w104250

HIV-1P24NIBSC199290/6361000

抗-HAVSanquin1998w104149抗-HEVNIBSC199095/58450抗梅毒血清NIBSC1958HS49抗弓形體IgGNIBSC200301/60020抗風(fēng)疹抗體NIBSC1996RUBI-1-941600定量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)項(xiàng)目編號(hào)研制者人血清補(bǔ)體C1q,C4,C5,B因子，和總功能補(bǔ)體CH50W1032Sanquin人血清免疫球蛋白G，A和M(IgG,IgAandIgM)67/086NIBSC人血清免疫球蛋白E75/502NIBSC甲胎蛋白（AFP）NIBSC前列腺特異抗原（PSA）（90：10）前列腺特異抗原（PSA），游離96/668NIBSC癌胚抗原（CEA）73/601NIBSC絨毛膜促性腺激素75/589NIBSC人胰島素66/304NIBSC自身抗體國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（一）項(xiàng)目編號(hào)濃度（IU/瓶）研制者ANA（均質(zhì)型）WHO66/233100CLB抗dsDNA抗體WHOWo/80200CLBRFWHO-64/1100CLBAPFWHO-64/1100CLBFITC抗HuIgWHO480010100CLB抗RNP抗體WHOanti-RNPCLB抗甲狀腺球蛋白抗體WHO65/0931000NIBSC抗胰島細(xì)胞抗體97/550200NIBSC抗谷氨酸脫羧酶抗體97/550100NIBSC自身抗體國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（二）項(xiàng)目編號(hào)濃度（IU/瓶）研制者抗酪氨酸磷酸酶抗體97/550100NIBSC抗心磷脂抗體93/7680.85NIBSC狼瘡抗凝物96/522NIBSCANA（均質(zhì)型、核周型）抗dsDNA抗體ANA#1（IS2072）AF-CDCANA（顆粒型）抗SSB/La抗體ANA#2（IS2073）AF-CDCANA抗核抗體（顆粒型）ANA#3（IS2074）AF-CDC抗U1-RNP抗體ANA#4（IS2075）AF-CDC抗Sm抗體ANA#5（IS2076）AF-CDC自身抗體國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（三）項(xiàng)目編號(hào)濃度（IU/瓶）研制者抗核抗體（核仁型）抗fibrillarin抗體（U3-RNP）ANA#6（IS2100）AF-CDC抗SSA\Ro抗體ANA#7（2105）AF-CDC抗核抗體（著絲點(diǎn)型）