醫(yī)學(xué)教材 病原腸道桿菌課件

腸道桿菌

1學(xué)習(xí)要求1）掌握：致病性大腸埃希菌及其所致疾病；志賀菌屬的致病性；沙門菌屬的致病性與免疫性；腸道桿菌與微生物學(xué)分離鑒定有關(guān)的生物學(xué)特性。2）熟悉：腸桿菌科的共同特性；埃希菌屬、志賀菌屬和沙門菌屬的微生物學(xué)檢查步驟；肥達(dá)試驗(yàn)。3）了解大腸埃希菌的微生物學(xué)檢查及防治原則；志賀菌和沙門菌的防治原則；沙門菌分類；其他腸道細(xì)菌。2編輯版ppt腸道桿菌是一大群寄居在人類和動(dòng)物腸道內(nèi)，生物學(xué)性狀相似的G-桿菌。腸道桿菌種類很多，其中與醫(yī)學(xué)關(guān)系密切的有埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬、變形桿菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬等；

大多數(shù)為腸道正常菌群,可成為條件致病菌，引起腸道外感染；少數(shù)為致病菌，導(dǎo)致腸道傳染病。概述3編輯版ppt乳糖發(fā)酵試驗(yàn)共同特性(了解)1、相似的形態(tài)染色—多數(shù)有鞭毛，G-桿菌2、簡單的培養(yǎng)條件：普通培養(yǎng)基中即可生長

3、活潑的生化反應(yīng)重要試驗(yàn)（掌握）初步鑒別腸道致病菌和腸道非致病菌腸道致病菌腸道非致病菌多數(shù)不發(fā)酵乳糖

多數(shù)發(fā)酵乳糖4編輯版pptEMB（伊紅——美蘭培養(yǎng)基），乳糖、伊紅、美蘭選擇作用（弱選）大腸埃希菌（非致病菌）乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸伊紅結(jié)合美蘭形成紫黑色金屬光澤化合物有色的乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門菌等（致病菌）乳糖不發(fā)酵伊紅美蘭不能結(jié)合無色的乳糖不發(fā)酵菌落5編輯版pptEMB平板上的E.coli6編輯版pptSS培養(yǎng)基（沙門志賀培養(yǎng)基）乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌綠等抑制劑選擇抑制作用（強(qiáng)選）大腸埃希菌產(chǎn)酸桃紅色乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門菌無色乳糖不發(fā)酵菌落膽鹽、煌綠：抑制大腸埃希菌及G+菌，提高腸道致病菌檢出率乳糖發(fā)酵中性紅呈紅色乳糖不發(fā)酵7編輯版ppt8編輯版ppt

4、抗原構(gòu)造復(fù)雜

鞭毛抗原（H）H-O變異菌體抗原（O）LPS的特異性多糖，S-R變異K或Vi抗原侵襲力9編輯版ppt5、抵抗力不強(qiáng)，60℃30min死亡，對(duì)一般消毒劑敏感6、易變異溶源性轉(zhuǎn)換（前噬菌體）生化反應(yīng)性變異通過引起

耐藥性變異毒力性變異轉(zhuǎn)導(dǎo)（溫和噬菌體）接合(性菌毛）10編輯版ppt第一節(jié)埃希氏菌屬

Escherichia代表株：大腸埃希菌（大腸桿菌，E.coli）1.腸道中正常菌群，出生后數(shù)小時(shí)就進(jìn)入腸道，并終生伴。2.可成為條件致病菌，致腸道外感染3.某些血清型有致病性，導(dǎo)致感染性腹瀉4.環(huán)境衛(wèi)生和食品衛(wèi)生中，常用作糞便污染的檢測(cè)指標(biāo)。5.分子生物學(xué)和基因工程研究中重要的實(shí)驗(yàn)材料11編輯版ppt一、生物學(xué)性狀革蘭陰性桿菌，有周身鞭毛，菌毛。37℃24h—

圓形凸起灰白色S型菌落發(fā)酵多種糖類，發(fā)酵乳糖

產(chǎn)酸產(chǎn)氣，IMViC試驗(yàn)為++--12編輯版ppt※EMB平板—

紫黑色有金屬光澤※SS平板—

紅色菌落大腸桿菌血清型以O(shè)：K：H表示抵抗力：膽鹽、煌綠有抑制作用對(duì)氯霉素、慶大霉素敏感13編輯版ppt

二、致病性（一）致病因素1、黏附素（定植因子）：菌毛

1個(gè)A亞單位（ATP→cAMP↑)LT2、※腸毒素：5個(gè)B亞單位(結(jié)合單位）

ST（cGMP↑)3、Vero毒素：志賀樣毒素，分ⅠⅡ4、溶血素5、LPS、K抗原14編輯版ppt1、條件致病——化膿性炎癥某些帶有致病基因的血清型，引起腸道感染，表現(xiàn)為急性腹瀉，包括產(chǎn)毒性﹑侵襲性﹑致病性﹑出血性﹑集聚性大腸桿菌細(xì)菌居住部位改變引起的腸外感染：尿路感染最常見，腹膜炎、敗血癥、腦膜炎2、致病菌株——胃腸炎（二）所致疾?。ㄕ莆眨?5編輯版ppt菌株作用部位所致疾病致病機(jī)理

ETEC

小腸

旅行者和嬰幼兒腹瀉

ST、LT

EPEC

小腸

嬰兒腹瀉

粘附和破壞上皮細(xì)胞

EIEC

大腸

痢疾樣腹瀉

侵襲和破壞結(jié)腸粘膜

EHEC

大腸

出血性結(jié)腸炎

Vero毒素(O157:H7)

致病性大腸桿菌引起的腹瀉（掌握）EAEC小腸嬰兒腹瀉集聚性粘附上皮細(xì)胞阻止液體吸收16編輯版ppt腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌

(enterotoxigenicE.coli，ETEC)

嬰幼兒和旅游者腹瀉致病物質(zhì)腸毒素enterotoxinheatlabileenterotoxin(LT)heatstableenterotoxin(ST)定植因子(菌毛）17編輯版ppt腸侵襲型大腸埃希菌

(enteroinvasiveE.coli，EIEC)似菌痢樣，有膿血便，有里急后重致病機(jī)理侵襲結(jié)腸粘膜上皮并繁殖細(xì)菌死亡后釋放內(nèi)毒素，引起炎癥18編輯版ppt腸致病型大腸埃希菌

(enteropathogenicE.coli，EPEC)

嬰幼兒腹瀉致病機(jī)理粘附和破壞腸粘膜微絨毛上皮細(xì)胞排列紊亂，功能受損，導(dǎo)致腹瀉19編輯版ppt※腸出血型大腸埃希菌

(enterohemorrhagicE.coli，EHEC)亦稱為Vero毒素大腸埃希菌血清型為O157:H7臨床表現(xiàn)輕重不一（水便~伴劇烈腹痛的鮮血樣便）10%小于十歲患兒，有嚴(yán)重并發(fā)癥（急性腎衰、溶血性尿毒綜合癥、血小板減少性紫癜），死亡率高致病因子菌毛毒素Vero毒素內(nèi)毒素與溶血素20編輯版pptThe“l(fā)ifecycle”ofE.coliO157:H7

5-10%prevalenceinanimals40%prevalenceinfarms21編輯版ppt腸黏附性大腸埃希菌(集聚型）

(enteroadherentE.coli，enteroaggregativeE.coli,EAEC)嬰兒持續(xù)性腹瀉2W以上，脫水，偶有血便致病因子腸集聚耐熱毒素（EAST）菌毛α溶血素22編輯版ppt三.微生物檢查

1.臨床標(biāo)本的檢查

腸道外感染取---尿﹑血﹑膿﹑腦脊液，生化鑒定腸道內(nèi)腹瀉取----糞便

可疑菌落

涂片染色:形、色、排列---初診生化反應(yīng)（IMViC試驗(yàn)為++--）血清分型或測(cè)定腸毒素-確診

37℃18-24h尿路感染：每毫升尿含菌量≥1×10523編輯版ppt在環(huán)境和食品衛(wèi)生學(xué)上，常被用作糞便污染的檢測(cè)指標(biāo)≤3個(gè)大腸菌群數(shù)/1L飲水≤100個(gè)細(xì)菌總數(shù)/1ml飲水衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)大腸菌群指數(shù)每1000ml水中大腸菌群數(shù)我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌總數(shù)每1ml或1g樣品中細(xì)菌總數(shù)≤5個(gè)大腸菌群/100ml瓶裝汽水、果汁24編輯版ppt預(yù)防

尿道插管和膀胱鏡檢查嚴(yán)格無菌操作

加強(qiáng)食品和水的衛(wèi)生管理

有些牛腸道中存在EHEC，預(yù)防出血性結(jié)腸炎，應(yīng)避免食用未煮

熟的牛肉、生牛奶、蔬菜

菌毛疫苗防治新生畜崽腹瀉治療

※耐藥普遍，依據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇

針對(duì)腹瀉及時(shí)糾正水和電解質(zhì)平衡五、防治原則25編輯版ppt

在分子生物學(xué)和基因工程實(shí)驗(yàn)中六、重要的實(shí)驗(yàn)材料和研究對(duì)象大腸桿菌也是重要的實(shí)驗(yàn)材料和研究對(duì)象26編輯版ppt病例15歲男孩在隨母親旅游中，進(jìn)食小店賣的水果沙拉，回家2d后，出現(xiàn)嚴(yán)重腹部疼痛，大便次數(shù)不斷增加，且多次便血，伴發(fā)熱、嘔吐，到醫(yī)院急診，檢查有溶血性貧血及血小板減少等溶血性尿毒綜合征。思考題：1．最可能的病原菌是什么？2．應(yīng)做哪些微生物學(xué)檢查？27編輯版ppt病例1提示1.該患兒有進(jìn)食水果沙拉病史，2天后出現(xiàn)嚴(yán)重腹痛，大便次數(shù)不斷增加，且多次便血，伴發(fā)熱、嘔吐，檢查有溶血性貧血及血小板減少等溶血性尿毒綜合征。以上癥狀提示最可能的病原體是大腸埃希菌O157：H7（腸出血型大腸埃希菌

EHEC）2.針對(duì)該可以病例應(yīng)及時(shí)對(duì)腸道內(nèi)大腸埃希菌感染進(jìn)行常規(guī)微生物學(xué)檢查，并快速進(jìn)行毒力和血清學(xué)等特征鑒定，以確定防治措施。28編輯版ppt這種疾病離我們遠(yuǎn)嗎？2011年5月—6月

29編輯版ppt30編輯版ppt病例2患者男23歲，急性腹痛2d，每天膿血便10次左右，有明顯里急后重感，腸鳴音亢進(jìn)，體溫38℃，血壓正常，白細(xì)胞數(shù)17×109/L。取粘液便鏡檢紅細(xì)胞3個(gè)，白細(xì)胞8個(gè)，未見阿米巴原蟲。思考題：1．可初步診斷為哪種疾?。?．采用哪種方法能進(jìn)行快速診斷？31編輯版pptSS選擇培養(yǎng)基上無色半透明菌落多數(shù)不分解乳糖（除宋內(nèi)志賀菌）第二節(jié)志賀菌屬（Shigella）是人類細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌無鞭毛、莢膜、無芽胞，有菌毛。生化反應(yīng)形態(tài)一、生物學(xué)性狀32編輯版ppt動(dòng)力試驗(yàn)（+）（-）乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)痢疾桿菌大腸桿菌（-）（+）痢疾桿菌大腸桿菌33編輯版ppt抗原構(gòu)造抗原主要有O、K兩種，O抗原是分類依據(jù)，分群特異性抗原和型特異性抗原，痢疾桿菌分4群39個(gè)血清型。1、A群（痢疾志賀菌）：致病力最強(qiáng)。2、B群（福氏志賀菌）：我國最多見，易轉(zhuǎn)慢。3、C群（鮑氏志賀菌）：致病力次于A群。4、D群（宋內(nèi)志賀菌）：有兩個(gè)變異相。

Ⅰ相：S型菌落，有致病力。受控于質(zhì)粒。

Ⅱ相：R型菌落，無致病力。34編輯版ppt（一）致病物質(zhì)1、侵襲力：菌毛—有利于菌粘附至腸粘膜2、毒素：內(nèi)毒素*作用于腸壁通透性↑吸收↑發(fā)熱、神志障礙、中毒性休克*破壞腸粘膜→炎癥、潰瘍→膿血粘液便*腸壁植物神經(jīng)→腸蠕動(dòng)失調(diào)、痙攣→腹痛、里急后重外毒素——志賀毒素與內(nèi)毒素協(xié)同作用，加重局部和全身癥狀35編輯版ppt2.所致疾病：細(xì)菌性痢疾病人帶菌者糞-口細(xì)菌性痢疾急性菌痢慢性菌痢36編輯版ppt

（二）所致疾病細(xì)菌性痢疾急性細(xì)菌性痢疾典型：發(fā)熱、腹痛、膿血粘液便非典型：低熱或不發(fā)熱，稀便，偶含膿血中毒性：中毒癥狀慢性細(xì)菌性痢疾：病程遷延二月以上37編輯版ppt病例2患者男23歲，急性腹痛2d，每天膿血便10次左右，有明顯里急后重感，腸鳴音亢進(jìn)，體溫38℃，血壓正常，白細(xì)胞數(shù)17×109/L。取粘液便鏡檢紅細(xì)胞3個(gè)，白細(xì)胞8個(gè)，未見阿米巴原蟲。思考題：1．可初步診斷為哪種疾病？2．采用哪種方法能進(jìn)行快速診斷？38編輯版ppt病例2提示1.患者急性腹痛2d，每天膿血便10次左右，有明顯里急后重感，腸鳴音亢進(jìn)，低熱等臨床癥狀，初步診斷為急性細(xì)菌性痢疾。39編輯版ppt3.免疫性感染局限于腸粘膜層，不入血，故免疫主要是消化道粘膜表面的分泌型IgA;維持時(shí)間短。40編輯版ppt三、微生物學(xué)檢查及時(shí)送檢/暫用30%甘油緩沖水保存SS平板（無色透明小菌落）血清學(xué)反應(yīng)（玻片凝集）明確診斷分離培養(yǎng)新鮮膿血便/肛拭雙糖培養(yǎng)基（生化反應(yīng)）快速診斷熒光菌球試驗(yàn)協(xié)同凝集試驗(yàn)乳膠凝集試驗(yàn)分子生物學(xué)方法41編輯版ppt四、防治原則現(xiàn)致力于活菌苗的研究。如鏈霉素依賴株（Sd）?？诜螅a(chǎn)生SIgA。同時(shí)，血清中的IgM、IgG特異抗體也增多。Sd活疫苗的免疫保護(hù)具有特異性。藥物治療：應(yīng)注意耐藥菌株。42編輯版ppt43編輯版ppt小結(jié)痢疾桿菌的形態(tài)特點(diǎn)？培養(yǎng)特點(diǎn)？致病物質(zhì)有哪些？引起什么疾病？所引起疾病在臨床上的分類？何為鏈霉素依賴株（Sd）？44編輯版ppt其中許多為人畜共患病第三節(jié)沙門菌屬一大群人與動(dòng)物腸道中的寄生菌菌群菌型甚多，僅少數(shù)對(duì)人致病對(duì)人致病的有傷寒沙門氏菌，甲﹑乙﹑丙型副傷寒沙門氏菌，鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌和腸炎沙門菌等。45編輯版ppt一、生物學(xué)性狀

大小0.6-1×2-3um。周身鞭毛、一般無莢膜，少數(shù)有微莢膜。（一）形態(tài)與染色（二）培養(yǎng)特性普通瓊脂平板形成中等大小、無色半透明的S型菌落。46編輯版ppt硫化氫試驗(yàn)（+）（-）乳糖發(fā)酵試驗(yàn)傷寒桿菌大腸桿菌（三）生化反應(yīng)：常用于細(xì)菌種與亞種間的鑒別（-）（+）大腸桿菌乙型副傷寒47編輯版ppt（四）抗原構(gòu)造主要有O、H兩種抗原，少數(shù)菌還有一種表面包膜抗原，因其與細(xì)菌毒力有關(guān)，而稱之為毒力相關(guān)抗原（Vi抗原）。

Vi48編輯版ppt二、致病性(掌握)致病物質(zhì)侵襲力：細(xì)菌的粘附、穿透力及擴(kuò)散力；內(nèi)毒素：發(fā)熱、白細(xì)胞數(shù)下降等；腸毒素：類似ETEC產(chǎn)生的腸毒素。細(xì)菌粘附在小腸粘膜上皮細(xì)胞并穿入到上皮下層繁殖

粘膜固有層的吞噬細(xì)胞吞噬49編輯版ppt膽囊-----腸道-------糞排菌皮膚----血栓出血--玫瑰疹腎-----尿肝脾-----腫大骨髓------受抑制1.傷寒和副傷寒(腸熱癥)傷寒和甲型副傷寒沙門菌小腸上部粘膜腸系膜淋巴結(jié)

固有層淋巴結(jié)進(jìn)入血液再次進(jìn)入血液第一次菌血癥第二次菌血癥50編輯版ppt腸熱癥攝入的細(xì)菌腸系膜淋巴結(jié)胸導(dǎo)管全身疼痛、不適發(fā)熱（前驅(qū)期第1周）菌血癥肝、脾、腎及膽囊等，細(xì)菌被吞噬細(xì)胞吞噬膽囊腎臟持續(xù)高熱、肝脾腫大、全身中毒、玫瑰疹、相對(duì)緩脈（第2-3周）菌血癥進(jìn)入腸壁淋巴組織糞便尿并發(fā)癥：腸穿孔、血栓性靜脈炎、膽囊炎典型病例病程為3-4W孤立和集合淋巴結(jié)壞死潰瘍淋巴管51編輯版ppt2、胃腸炎（食物中毒）：最常見鼠傷寒沙門菌豬霍亂沙門菌腸炎沙門菌大于108食物中毒（發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、水樣瀉）3、敗血癥：希氏沙門菌鼠傷寒沙門菌豬霍亂沙門菌腸炎沙門菌血敗血癥（高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血）腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、心內(nèi)膜炎52編輯版ppt4、無癥狀帶菌者約1-5%傷寒或副傷寒患者，癥狀消失1年后，糞便仍可排菌，這些菌主要留在膽囊中，有傳染性。53編輯版ppt三、免疫性本菌為胞內(nèi)寄生菌，故特異性免疫以細(xì)胞免疫為主，傷寒或副傷寒后獲得牢固免疫性。54編輯版ppt傷寒和副傷寒

食物中毒

敗血癥第1周取靜脈血 可疑食物 血第1-3周取骨髓液 嘔吐物 第2周起取糞、尿 糞 三、微生物學(xué)檢查標(biāo)本SS平板生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定雙糖發(fā)酵等玻片凝集試驗(yàn)（一）細(xì)菌學(xué)檢查55編輯版ppt陽性率（%）發(fā)病后周數(shù)1234567880706050403020100傷寒病人不同病期血、糞、尿中病原菌的檢出陽性率血糞尿56編輯版ppt（二）血清學(xué)診斷——肥達(dá)試驗(yàn)1、定義：用已知的傷寒沙門菌O、H抗原和甲型副傷寒沙門菌H抗原與不同稀釋度的待檢血清作定量凝聚試驗(yàn)，根據(jù)抗體的含量和動(dòng)態(tài)變化以輔助臨床診斷傷寒病原菌的一種血清學(xué)試驗(yàn)。三、微生物學(xué)檢查57編輯版ppt傷寒沙門菌O、H抗原甲型副傷寒沙門菌H抗原肖氏沙門菌H抗原希氏沙門菌H抗原+待檢血清（不同稀釋度）定量凝聚試驗(yàn)抗體的效價(jià)58編輯版ppt1.考慮正常人群抗體水平：O≥1:80,H≥1:1602.動(dòng)態(tài)觀察：恢復(fù)期效價(jià)增加≥4倍3.O-AbIgM,出現(xiàn)早，維持時(shí)間短

H-AbIgG,出現(xiàn)遲，維持時(shí)間長,易受非特異性刺激而重現(xiàn)，如預(yù)防接種或非特異性回憶反應(yīng)O高H高腸熱癥可能性大O低H低排除O高H低早期或有交叉反應(yīng)的其它沙門菌感染O低H高預(yù)防接種或曾患過傷寒肥達(dá)試驗(yàn)的結(jié)果判斷59編輯版ppt

4.其他：少數(shù)病例，在整個(gè)病程中，肥達(dá)反應(yīng)始終正常，原因可能為早期使用大量抗