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DB22DB22/T3052—2019腦膜炎奈瑟菌檢測實時熒光PCR法DetectionofNeisseria-meningitidisinreal-timefluorescentpolymerasechainreactionmethod吉林省市場監(jiān)督管理廳發(fā)布I1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了腦膜炎奈瑟菌實時熒光PCR法的試劑和材料、儀器設(shè)備、試驗步驟和數(shù)據(jù)處理技本標(biāo)準(zhǔn)適用于在生物安全二級實驗室或以上防護級別的實驗室中進行流行性腦脊髓膜炎疑似病人WS/T230臨床診斷中聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)根據(jù)腦膜炎奈瑟菌莢膜轉(zhuǎn)運基因（CtrA）的保守序列，設(shè)計TaqMan熒光探針和引物。PCR擴增4.3FastTaqManMixture(2F:5'-GGTATATCGTGTGAATATGGCT5.1.4冰箱（2℃~8℃和-20℃)。對于上述標(biāo)本，在Ⅱ級生物安全柜（5.1）取0.1mL（5.6）加rpm/min離心5min，可吸取上清液作為DNA模板。也可使用細菌基因組DNA3探針0.2μL，參比熒光Rox0.4μL，DNA模板2μ值，判定為腦膜炎奈瑟菌陰性；待測樣本的Ct值大于35，小于40時，應(yīng)重新檢測；重新檢測結(jié)
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